全 文 ：2009年 7月　第 11卷　第 7期 中国现代中药 ModernChineseMedicine Jul.2009　Vol.11　No.7
栽培规范
■ [基金项目 ] 　“十一五” 国家科技支撑计划项目(2006BAI21B07)
[通讯作者 ] 　＊闫永亮 , E-mail:yqx08-peter@sohu.com
人工种植白花丹参最佳采收期的初步研究■
闫永亮 1＊ , 毛淑敏1 , 王峰祥 1 , 李奉举2 , 魏凯效 2
(1.莱芜职业技术学院 , 山东　莱芜　271100;
2.莱芜岳圣天然药物研究开发中心 , 山东　莱芜　271100)
[摘要 ] 　目的:确定白花丹参的最佳采收期。 方法:每半月采挖白花丹参 15株 , 除去根部泥土杂质 , 自然
晒干后计算根单株干重平均值。 采用 Wondasil-C
18
色谱柱(150mm×4.6mm, 5μm), 乙腈-水(74∶26)和甲醇-乙腈-
甲酸-水(30∶10∶1∶59)分别作为丹参酮Ⅱ A和丹酚酸 B分离的流动相 , 流速均为 1.0mL·min-1 , 用高效液相色谱法在
270nm和 286nm处分别测定丹参酮Ⅱ A和丹酚酸 B的含量。结果:白花丹参 10月底采收干重最大 , 丹参酮Ⅱ A含量
在 10月底采收时最高 , 丹酚酸 B含量在 8月底采收时最高。结论:白花丹参最佳采收期以 10月底为最佳。
[关键词 ] 　白花丹参;丹参酮Ⅱ A;丹酚酸 B;采收期
白花丹参 SalviamiltiorhizaBge.F.alba是唇形
科植物丹参 SalviamiltiorrhizaBge.的白花变型 , 主
要分布于山东的莱芜及其周边地区 , 为山东特产 ,
属珍稀濒危药用植物 [ 1] 。白花丹参通常以根部入
药 , 味苦 , 性微寒 , 具有活血化瘀 、通经镇痛 , 清
热安神的功效 , 除具有丹参的生物活性和用途外 ,
对治疗闭塞性脉管炎具有独特的疗效 [ 2] 。目前 , 我
国入药丹参主要是紫花丹参 , 紫花丹参的采收期研
究已有相关报道 [ 3-4] , 而白花丹参在山东只有少量种
植 , 其中以莱芜种植量最大 , 不同时期采收的白花
丹参其质量 、产量差异较大 , 所以确定一个适宜的
采收期 , 对提高白花丹参的质量和产量十分重要。
为了顺应当前中药发展研究思路 , 从保护和扩大野
生濒危药用资源的角度出发 , 本实验对不同采收期
的白花丹参中丹参酮 ⅡA和丹酚酸 B的含量进行了
测定 , 并结合白花丹参根干重的变化趋势 , 确定了
最佳采收期 , 为生产中确定合理采收时间提供依据 。
1　材料
1.1仪器与试剂
日本岛津高效液相色谱仪(LC-10AT泵 , SPD-
10Avp紫外检测器 , 浙江大学智达 N-2000色谱工作
站)。甲醇 、乙腈均为色谱纯 , 水为三蒸水(自制),
甲酸为化学纯。丹参酮ⅡA对照品(批号 110766-200518,
中国药品生物制品检定所);丹酚酸 B对照品(批号
111562-200807, 中国药品生物制品检定所)。
1.2样品来源
白花丹参采自莱芜苗山白花丹参种植基地 , 经
山东中医药大学周凤琴教授鉴定为唇形科植物白花
丹参 SalviamiltiorhizaBge.F.alba。
2　方法与结果
2.1样品采集与干重测定
于 2007年 8月 26日 ～ 11月 30日在莱芜苗山白
花丹参种植基地 , 每隔半个月随机采挖 15株留样 ,
除去根部的泥土杂质 , 自然晒干后测定根部干重 ,
计算单株干重平均值作白花丹参根干重变化趋势图 ,
结果见图 1。
图 1　白花丹参根干重变化
2.2丹参酮 ⅡA和丹酚酸 B含量测定
2.2.1色谱条件与系统适用性试验　色谱柱 WondaSil-
C18(150mm×4.6mm, 5μm);检测波长:丹参酮ⅡA为
270nm, 丹酚酸 B为 286nm;流动相:丹参酮ⅡA测定
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DOI :10.13313/j.issn.1673-4890.2009.07.001
2009年 7月　第 11卷　第 7期 中国现代中药 ModernChineseMedicine Jul.2009　Vol.11　No.7
采用乙腈-水(74∶26), 丹酚酸 B采用甲醇 -乙腈-甲酸-
水(30∶10∶1∶59);流速为 1mL·min-1 , 柱温为室温 ,
理论塔板数按丹参酮ⅡA和丹酚酸 B计不低于 2 000,
采用上述色谱条件 , 样品中丹参酮ⅡA和丹酚酸 B与
相邻峰分离度不低于 1.5。HPLC图见图 2和图 3。
2.2.2对照品溶液制备
2.2.2.1丹参酮ⅡA对照品溶液制备　精密称取丹参
酮 ⅡA对照品 11mg, 置 50mL棕色容量瓶中加入甲
醇至刻度 , 摇匀得丹参酮 ⅡA母液;精密量取 3 mL
母液 , 置 25 mL棕色容量瓶 , 加入甲醇至刻度 , 摇
匀 , 即得丹参酮 ⅡA对照品溶液。
2.2.2.2丹酚酸 B对照品溶液制备　精密称取丹酚
酸 B对照品 15mg, 置 50mL棕色容量瓶中加入 75%
甲醇至刻度 , 摇匀即得丹酚酸 B对照品溶液 。
2.2.3供试品溶液制备　按 2005年版 《中国药典 》
(一部)项下分别进行丹参酮 ⅡA和丹酚酸 B供试品
溶液的制备 。
2.2.4标准曲线的建立
2.2.4.1丹参酮ⅡA标准曲线的建立　精密吸取丹参
酮 ⅡA对照品溶液 , 按上述色谱条件分别进样 4, 8,
12 , 16, 20μL, 测定峰面积 , 以峰面积为纵坐标
(Y), 进样量(μg)为横坐标(X)测得回归方程为Y=
2.35×106X-1.40×104 , r=0.999 3, 结果表明丹
参酮ⅡA在 0.105 6 ～ 0.52 8μg线性关系良好 。
2.2.4.2丹酚酸 B标准曲线的建立　精密吸取丹酚
酸 B对照品溶液 , 按上述色谱条件依次进样 4, 6,
8, 12, 14, 16μL, 测定峰面积 , 以峰面积为纵坐
标(Y), 进样量(μg)为横坐标(X)测得回归方程为
Y=4.72×105X-6.22×104 , r=0.999 1, 结果表明
丹酚酸 B在 1.2 ～ 4.8μg线性关系良好。
2.2.5加样回收率试验
2.2.5.1丹参酮ⅡA加样回收率试验　取 3号供试品
6份 , 每份约 0.11g, 精密称量 , 置于 100mL具塞
锥形瓶中 , 精密移取丹参酮 ⅡA母液 2.5mL于 50mL
棕色容量瓶中 , 加甲醇至刻度 , 按 2.2.3项下方法
制备丹参酮 ⅡA供试液 , 测得丹参酮 ⅡA平均回收率
为 96.8%, RSD=2.30%。结果见表 1。
表 1　丹参酮Ⅱ A加样回收率试验
样品含量
/mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均回收率
/%
RSD
/%
0.434 0.968 97.1 96.8 2.30
0.465 1.006 98.4
0.449 0.990 98.4
0.401 0.910 92.5
0.435 0.967 96.7
0.438 0.976 97.8
注:丹参酮Ⅱ A对照品加入量均为 0.55mg
2.2.5.2丹酚酸 B加样回收率试验　取 2号供试品 6
份 , 每份约 0.05g, 精密称量 , 置于 100mL具塞锥
形瓶中 , 精密移取丹酚酸 B对照品溶液 15mL于
50mL棕色容量瓶中 , 加甲醇至刻度 , 按 2.2.3项下
方法制备丹酚酸 B供试液 , 测得丹酚酸 B平均回收
率为 96.1%, RSD=1.20%。结果见表 2。
表 2　丹酚酸 B加样回收率试验
样品含量
/mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均回收率
/%
RSD
/%
4.584 8.953 97.1 96.1 1.20
4.247 8.549 95.6
4.324 8.569 94.3
4.812 9.201 97.5
4.562 8.893 96.2
4.544 8.850 95.7
注:丹酚酸 B对照品加入量均为 4.50mg
2.2.6精密度试验　精密吸取 4号丹参酮ⅡA和丹酚酸
B供试品溶液 10μL, 分别连续进样 5次 , 测定丹参
酮ⅡA和丹酚酸 B峰面积 , 结果丹参酮ⅡA的 RSD=
0.94%;丹酚酸 B的 RSD=0.86%。
2.2.7稳定性试验　精密吸取 2号丹参酮 ⅡA和丹酚
酸 B供试品溶液 10μL, 分别在 0, 2, 4, 6, 8h和
0, 1, 2, 3, 4, 5h测定丹参酮 ⅡA和丹酚酸 B, 结
果丹参酮ⅡA的 RSD=0.77%, 说明丹参酮 ⅡA至少
在 8h内稳定;丹酚酸 B的 RSD=0.45%, 说明丹酚
酸 B至少在 5h内稳定。
2.2.8重复性试验　取 2号供试品 , 按 2.2.3项下
分别制备丹参酮 ⅡA和丹酚酸 B供试液各 5份 , 分别
测定峰面积 , 结果丹参酮 ⅡA的 RSD=1.50%, 丹酚
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酸 B的 RSD=1.21%。
2.2.9样品含量的测定　分别取不同月份的样品 ,
按 2.2.3项下分别制备丹参酮 ⅡA和丹酚酸 B的供
试品溶液 , 经 0.45μm微孔滤膜滤过后 , 取 10μL进
样 , 测定峰面积 , 以外标法计算各样品中丹参酮 ⅡA
与丹酚酸 B的含量 , 结果见表 2。
表 2　不同采收期白花丹参根中参酮ⅡA与丹酚酸 B的含量
/mg·g-1
样品编号 采收时间 丹参酮Ⅱ A 丹酚酸 B
1 2007- 8-26 5.02 117.25
2 2007- 9-15 5.22 89.00
3 2007- 9-30 4.00 72.25
4 2007-10-15 5.75 77.25
5 2007-10-31 7.71 68.25
6 2007-11-15 4.48 85.00
7 2007-11-30 5.21 58.50
注:n=3
3　讨论白花丹参为山东特产 , 仅在山东有少量种植 ,
2002年版 《山东省中药材标准 》 规定了其脂溶性成
分丹参酮 ⅡA的测定方法 [ 5] , 但因其是丹参的变种
而未被 《中国药典 》 收载 , 本实验中曾经采用了
2005年版 《中国药典 》 (一部)中丹参项下丹参酮
ⅡA测定的色谱条件 [ 6] , 但丹参酮 ⅡA分离度差 , 分
析时间长 , 经试验改用乙腈-水(74∶26)为流动相 ,
结果色谱峰分离度好 , 分析时间合适 。
由白花丹参根干重变化趋势可以看出 , 白花丹
参地下部分生物量在 9月 15日左右有一个低点 , 随
后根部干重开始迅速增加 , 10月 31日左右达到最
高 , 然后又开始下降 , 这可能是由于 9月 15日之前
主要是地上部分生物量的积累 , 在这之后地上部分
所累积的有机物开始大量向根部运输 , 使根部重量
迅速增加 , 到 10月 31日左右达到最高 , 这与文
献 [ 4]报道的丹参根干重变化趋势相一致。
白花丹参根中丹参酮ⅡA与丹酚酸 B的含量处于一
个动态的变化过程中 , 丹参酮ⅡA在 10月 31日左右含
量达到最高 , 而丹酚酸 B的含量在 8月 26日时最高 ,
在白花丹参根干重最高时仅为 6.83%, 这与文献 [ 4]报
道的的结果有较大差异 , 这些差异的原因是否因为白
花丹参是丹参的变种 , 还有待于进一步的研究。
综合白花丹参根部干重及其中丹参酮 ⅡA与丹
酚酸 B含量的变化 , 建议将莱芜苗山白花丹参种植
基地的白花丹参采收期定为 10月底 。
参考文献
[ 1] 周凤琴 , 李建秀 ,张照荣.山东珍稀濒危野生药用植物的
调查研究 [ J] .中草药 , 1998, 29(1):46.
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药学学报 , 1991, 2(3):209.
[ 3] 冉荣 , 周凤琴 ,王婷 , 等.山东产丹参的丹参酮Ⅱ A含量比
较 [ J] .中药材 , 2008, 31(3):331.
[ 4] 姜卫卫 , 张永清 , 李佳 .丹参最佳采收期初讨 [ J] .现代
中药研究与实践 , 2008, 22(1):12.
[ 5] 山东省药品监督管理局.山东省中药材标准 [ S] .山东:
山东友谊出版社 , 2002:66.
[ 6] 国家药典委员会.中国药典(一部)[ S] .北京:化学工业
出版社 , 2005:52.
(收稿日期　2009-01-22)
StudyontheOptimalHarvestingTimeofSalviaMiltiorrhizaBge.F.alba
YanYongliang1 , MaoShuming1 , WangFengxiang1 , LiFengju2 , WeiKaixiao2
(1.LaiwuVocationalandTechnicalColege, LaiwuShandong271100, China;
2.Yuest.LaiwuNatrualMedicineResearchandDevelopmentCenters, LaiwuShandong271100 , China)
[ Abstract] 　Objective:ToresearchtheoptimalharvestingtimeofSalviamiltiorhizaBge.F.alba.Methods:15
SalviamiltiorrhizaBge.F.albawereexcavatedperhalfmonthwithsoilandimpuritiesremoved.Averagedryweightper
plantwascalculatedafterrootnaturalydried.TheHPLCwascariedouttodeterminethecontentsoftanshinoneⅡAand
salvianolicacidBbyWondasil-C18column(150mm×4.6mm, 5μm)withwavelengthdetectionoftanshinoneⅡAfor270
nm, salvianolicacidBfor286nm.Themobilephasewas74%acetonitrileinseperatingtanshinoneⅡA, methanol-acetoni-
trile-formicacid-water(30∶10∶1∶59)inseperatingsalvianolicacidB.Theflowratewas1.0mL·min-1.Results:There-
sultsshowedthattherewasthegreatestdryweightofSalviamiltiorhizaBge.F.albawhichwascolectedbytheendof
October, thecontentsoftanshinoneⅡAwasthehighestbytheendofOctober, whilethesalvianolicacidBcontentsin
thehighestbytheendofAugust.Conclusion:ItwassuitableforharvestingtimeofSalviamiltiorrhizaBge.F.albaby
theendofOctober.
[ Keywords] 　SalviamiltiorrhizaBge.F.alba;TanshinoneⅡA;SalvianolicacidB;Harvesttime
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