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文章编号: 1003-4323 ( 1999) 04-0027-01
黑 心蕨 的 试 管 繁 殖
肖再云
(云南热带作物科学研究所　景洪　 666100)
　　摘要: 将黑心蕨孢子接种于 MS+ BA2mg /L+ N AA0. 5mg /L+ Sucrose3% ( w /
v ) + agar0. 6% ( w /v )中诱导愈伤组织 , 并将愈伤组织在培养基 MS+ BA2mg /L+
N AA0. 5mg /L+ A. C. 1%+ Sucrose3%+ agar0. 6%中增殖和分化 , 生根培养基用 1 /
2M S+ N AA 1mg /L+ A. C. 1%+ Sucrose2%+ aga r0. 6%。
　　关键词: 黑心蕨　试管繁殖
　　中图分类号: S682. 35　 Q813. 1　文献标识码: B
　　黑心蕨 ( Doryopteris concolo r)系中国蕨
科 ,黑心蕨属。广布于全球热带地区 [1 ] ,具一
定的耐荫性 , 叶形美观大方 , 较适合室内盆
栽。其愈伤组织是转基因试验较理想的材料。
因此 , 进行组织培养试验 , 具有一定的意义
和较好的经济效益。
1　材料与方法
1. 1　外植体: 取具孢子囊群的叶 , 用乙醇
( 75% ) —— 升汞 ( 0. 1% ) 法消毒。
　　培养基: ( 1) M S+ BA2mg /L+
N AA0. 5mg /L+ Sucrose3% ( w /v ) + a-
gar0. 6% ( w /v ) ; ( 2) M S+ BA2mg /L+
N AA0. 5mg /L + A. C. 1% ( w /v ) + su-
crose3%+ agar0. 6% ; ( 3 ) 1 /2M S+
N AA1mg /L + A. C. 1% + Sucrose2%+ a-
gar0. 6% 。 pH皆为 5. 8。
1. 2　培养方法　将外植体接种于培养基
( 1) , 30天左右能长出愈伤组织。愈伤组织继
代增殖及分化培养用培养基 ( 1)、 ( 2) ,每 30
天转接一次。芽诱根用培养基 ( 3) , 培养 15
天即可。
1. 3　培养条件　光照 10h /d,光强 800LuX,
温度 25± 2℃。
1. 4　炼苗　炼苗基质用河沙。将试管苗洗净
后 , 种植于其上 , 保持湿度在 90%以上 , 温
度在 30℃以下 , 以后逐渐降低温度 , 并同时
增加光照。 一月左右即可完成炼苗。
2　结果与讨论
　　愈伤组织在培养基 ( 1)中能够增殖 , 但
多数愈伤组织松软 , 颜色浅淡 , 没有芽形分
化 ; 极少部分逐渐形成绿色小颗粒状 , 并于
表面长出细毛 , 但 30天后会出现逐渐褐化、
软化 , 继续培养 , 则会出现死亡。而生长在
培养基 ( 2)中的愈伤组织 , 多数会长出颗粒
状绿色愈伤组织 ,并逐渐分化出大量丛芽。由
培养基 ( 2)较培养基 ( 1) , 仅多出附加物活
性炭 , 可见 , 活性炭是黑心蕨愈伤组织增殖
分化必不可少的物质。 出现这种情况的可能
原因是 ,黑心蕨愈伤组织在增殖分化过程中 ,
形成的次生代谢产物会抑制和毒害材料 , 而
加入活性炭后 , 一方面活性炭吸附了这些有
害物质 ; 另一方面 , 活性炭使材料出现了极
化。
参考文献
[ 1] 　中国科学院中国植物志编辑委员会 . 中国植
物志 3( 1) [M ] . 北京: 科学出版社 , 1990. 135
～ 137.
广西热作科技　 1999年第 4期 , 总第 73期 ; 27
Guangxi Science　&　 Technolog y　 o f　 Tropical　 Crops