全 文 :(总 ) 广西中医药 2012年 6月第 35卷第 3期
基金项目:广西壮族自治区食品药品监督管理局面上项目(编号:MZY2010005);广西自然科学基金创新研究团队项目
(2011GXNSFF018006);广西科学研究与技术开发计划项目(桂科能10100027-1)
*通讯作者
网络出版时间:2012-06-08 网络出版地址:http://www.cnki.net/kcms/detail/45.1123.R.20120608.1601.004.html
肾蕨为真蕨目骨碎补科肾蕨
Nephrolepis cordifolia(L.)Presl.的
地下块茎,又称马骝卵、石黄皮、圆
羊齿等,为一种极具壮族特色的植
物药[1],其味甘、淡、微涩,性凉,具
有通气道水道、清热毒、除湿毒的
功效,临床用于治疗黄疸、淋浊、小
便痛、痢疾、疝气、乳痈、瘰疬、烫
伤、蛇虫咬伤等病症[2]。近年来,
有文献报道了肾蕨的显微鉴别[3]、
化学成分及药理作用[4-8],但关于
其质量标准的研究未见报道。为进
一步完善其质量标准,本实验对其
进行化学成分预试验、薄层色谱鉴
别研究及水分、总灰分、酸不溶性
灰分、浸出物测定,为其质量标准
初步建立提供实验依据。
1 材料与仪器
1.1 药材 肾蕨采自广西各地,
经广西中医药大学中药鉴定教研
室蔡毅教授鉴定为真蕨目骨碎补
科肾蕨 Nephrolepis cordifolia(L.)
Presl.的地下块茎。药材基源详见
表1。
1.2 试剂 薄层层析硅胶G(化学
纯,青岛海洋化工有限公司);其余
·中药方剂·
壮药肾蕨质量标准初步研究
朱 华 马雯芳 邓慧连 蔡 毅 * 余 娇 颜萍花 李海良
广西中医药大学 530001 南宁市明秀东路179号
摘 要 目的:对肾蕨质量标准进行初步研究。方法:对肾蕨进行化学成分预试验和薄层色谱鉴别研究,并
按2010年版《中华人民共和国药典》附录方法对肾蕨的水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物进行测定。结果:明
确了肾蕨化学成分类型和建立薄层色谱鉴别方法,并确定了肾蕨药材水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物的限
量。结论:所建立的方法可为肾蕨药材质量标准的制定提供实验基础。
关键词 肾蕨;质量标准;预试验;薄层色谱鉴别
中图分类号:R284.1 文献标识码:A 文章编号:1003-0719(2012)03-0052-03
Preliminary Study on Quality Standards of Zhuang Medicine
Nephrolepis cordifolia(L.)Presl.
Zhu Hua Ma Wenfang Deng Huilian, et al
(Guangxi University of Chinese medicine, 530001, 179 Mingxiudong Rd, Nanning, China)
Abstract Objective: To study quality standards for Nephrolepis cordifolia (L.)Presl. Methods: Determination of
moisture, total ash, acid insoluble ash, and extractives in Nephrolepis cordifolia (L.)Presl. was studied based on
appendix of Chinese Pharmacopoeia, published in 2010, besides, preliminary tests and TLC identification were
performed. Results: Limit of moisture, total ash, acid insoluble ash, and extractives in Nephrolepis cordifolia(L.)
Presl. was determined, as well as chemical constituents. What’s more, TLC identification for it was established.
Conclusion: Methods established provide Nephrolepis cordifolia(L.)Presl. with experimental evidence for setting of
quality standards.
Key words Nephrolepis cordifolia(L.)Presl.; quality standard; preliminary test; TLC identification
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试剂均为分析纯,水为纯净水。
1.3 仪器 上皿电子天平(上海
精科天平);台式电热恒温干燥箱
(上海跃进医疗器械厂);箱式电阻
炉(上海实验仪器厂有限公司);数
显恒温水浴锅(金坛市医疗仪器
厂);三用紫外分析仪(上海顾村电
光仪器厂)。
2 方法与结果
2.1 化学成分预试验
2.1.1 水提取液的制备 取本品
粗粉10 g,置具塞锥形瓶中,加入
蒸馏水100 ml,冷浸24 h,滤取10 ml
滤液即得冷水提取液。药渣在60 ℃
水浴上加热30 min,滤过,即得热
水提取液。
2.1.2 乙醇提取液、酸水提取液的
制备 取肾蕨粗粉10 g,加入10倍
量的95%乙醇,加热回流1 h,放冷,
滤过,即得。取1/2为乙醇提取液,
剩余1/2乙醇提取液浓缩成膏状
(至无醇味),加入5%盐酸溶液使
溶解,摇匀,滤过,即得酸水提取
液。
2.1.3 石油醚提取液的制备 取
本品粗粉1 g,加入石油醚(60~90℃)
5 ml,浸泡2~3 h,滤过,即得。
2.1.4 化学成分预试验 冷水提
取液作氨基酸、多肽、蛋白质检查;
热水提取液作糖、多糖、苷类、皂
苷、酚类和鞣质、有机酸检查;乙醇
提取液作黄酮、蒽醌、香豆素、内
酯、强心苷、植物甾醇、三萜等检
查,酸水提取液作生物碱检查;石
油醚提取液作挥发油、油脂检查。
结果表明,肾蕨中可能含有糖、多
糖、苷类、酚类和鞣质、有机酸、香
豆素、内酯等化学成分。
2.2 薄层色谱鉴别[9] 取本品粉
末1 g,加乙醇20 ml,加热回流1 h,
放冷,滤过,滤液蒸干,加乙醇2 ml
使溶解,作为供试品溶液。另取肾
蕨对照药材(以2010年10月于南宁
市采集的1号药材作为对照药材)
1 g,同法制成对照药材溶液。照薄
层色谱法(《中华人民共和国药典》
2010年版一部附录Ⅵ B)试验,吸
取供试品溶液和对照药材溶液各
10~15 μl,点于同一以羧甲基纤维
素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上,
以石油醚-氯仿-丙酮 (10∶5∶1)为
展开剂,展开,取出,晾干,喷以
10%磷钼酸乙醇溶液,在105 ℃加
热至斑点显色清晰。供试品色谱
中,在与对照药材色谱相应的位置
上,显相同颜色的斑点。色谱图见
图1~图2。
2.3 检查[9] 按《中华人民共和
国药典》2010年版一部附录 IX H
(第一法)、附录IX K、附录XA(冷
浸法)对14批肾蕨水分、总灰分、酸
不溶性灰分和浸出物进行测定,结
果见表2。结果显示:水分测定结果
为 7.49%~12.84%,总灰分测定结
果为 5.81%~11.07%,酸不溶性灰
分测定结果为 0.07%~2.76%,浸出
物测定结果为 37.13%~55.01%。
3 讨 论
3.1 实验中曾比较了肾蕨水溶性
浸出物和醇溶性浸出物的含量,结
果水溶性浸出物的含量高于醇溶
性浸出物,且临床使用传统采用水
煎煮,故提取溶剂采用水为溶剂。
又因冷浸法浸出物含量高于热浸
法,且操作简便,故选用冷浸法进
行测定。
3.2 通过对氯仿-丙酮(8∶1)、氯
仿-甲醇-乙酸(5∶4∶0.25)、石油醚-
氯仿-丙酮(10∶5∶1)等展开系统的
摸索,发现后者所得的斑点信息量
较多,且斑点清晰,分离度较好,故
选用石油醚-氯仿-丙酮 (10∶5∶1)
为展开剂。
3.3 根据14批药材的测定结果,
初步拟定肾蕨药材水分不得超过
表1 肾蕨药材基源
编号 产 地 采集时间
1 南宁市 2010年10月
2 南宁市九塘镇 2011年1月
3 柳州市融安县 2011年2月
4 河池市 2011年2月
5 河池市 2011年2月
6 百色市 2011年2月
7 南宁市 2011年2月
8 柳州市融安县 2011年4月
9 南宁市 2011年5月
10 武鸣县腾翔乡 2011年5月
11 百色市靖西县 2011年6月
12 南宁市马山县 2011年6月
13 南宁市 2011年7月
14 河池市 2011年8月
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图 2 肾蕨药材薄层色谱图Ⅱ
1 对照药材
2~8 编号为2~8的供试药材
1 对照药材
9~14 编号为9~14的供试药材
图 1 肾蕨药材薄层色谱图Ⅰ
研究仍处于初级阶段,更完善的质
量控制方法尚有待进一步研究。
参考文献
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典:一部[S].北京:中国医药科技出
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[10]广西壮族自治区食品药品监督管理
局. 广西壮族自治区壮药质量标准
[S]. 南宁: 广西科学技术出版社,
2011:12.
(2012-02-23 收稿/编辑陈明伟)
表2 肾蕨水分、总灰分、酸不溶性灰分和浸出物测定结果
(n=3,RSD均<3.0%)
编号 水分(%) 总灰分(%) 酸不溶性灰分(%) 水溶性浸出物(%)
1 8.20 7.50 0.25 52.06
2 11.92 11.07 2.76 43.08
3 11.61 6.10 0.94 54.81
4 10.79 9.41 0.76 42.93
5 11.04 7.23 0.07 55.01
6 10.38 5.97 0.46 52.03
7 12.84 7.87 0.32 48.73
8 11.68 5.81 0.14 53.24
9 12.08 10.68 1.37 38.60
10 10.97 8.13 0.33 42.35
11 8.28 9.08 0.65 37.13
12 11.09 8.63 0.29 37.53
13 9.12 8.26 0.74 46.12
14 7.49 6.08 0.62 39.74
14.0%,总灰分不得超过 12.0%,酸
不溶性灰分不得超过3.0%,水溶性
浸出物不得少于35.0%。
3.4 上述薄层色谱鉴别及检查项
目为肾蕨质量标准的建立提供了
实验依据,目前已收入《广西壮族
自治区壮药质量标准》2011年版
(第二册)[10]。然而,目前对肾蕨的
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