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乌蕨挥发油成分分析及其抗菌活性



全 文 :云南大学学报 (自然科学版), 2006 , 28 (3):245 ~ 246 CN 53-1045/N ISSN 0258-7971
Journal of Yunnan University
乌蕨挥发油成分分析及其抗菌活性
陶 晨1 ,2 , 杨小生1 , 戎聚全2 , 陈 明2 , 邓先扩2 , 陈金秀2
(1.中国科学院 天然产物化学重点实验室 , 贵州 贵阳 550002;2.黔南民族医学专科学校 , 贵州 都匀 558000)
摘要:对植物乌蕨(Stenoloma chusanum(L)Ching)中的挥发油成分进行定性和定量分析并开展其抗菌试
验.采用水蒸汽蒸馏提取挥发油成分 , 用气相色谱-质谱(GC/MS)联用仪进行成分分析;采用纸片法扩散法开
展其抑菌试验.从乌蕨挥发油中分析出 36 种成分 ,鉴定了其中的 24 种 , 其主要成分是芳樟醇(24.76%), 松油
醇(7.24%)和香叶醇(6.06%).抗菌活性研究显示 ,乌蕨挥发油对枯草芽孢杆菌 、伤寒沙门氏菌有明显的抑制
作用 , 对铜绿假单胞菌大肠埃希氏菌 、金黄色葡萄球菌和藤黄微球菌抑制活性很低或没有活性.乌蕨挥发油成
分检出率为 72.0%,其中主要成分为单萜类化合物;挥发油具有一定的抗菌活性.
关键词:乌蕨;挥发油;化学成分;抗菌活性
中图分类号:R 282  文献标识码:A  文章编号:0258-7971(2006)03-0245-02
  乌蕨(Stenoloma chusanum(L)Ching)系鳞始
蕨科乌蕨属植物 ,性味苦 、寒 ,具有清热解毒和利尿
功效 ,主要用于治疗感冒发烧 ,咳嗽 ,扁桃体炎 ,腮
腺炎 ,农药中毒等 ,分布于我国长江以南各地[ 1 ,2] ,
民间长期用其治疗外伤感染.采集的乌蕨植物鲜品
有很浓的气味 ,经文献调研 ,该植物的成分研究报
道很少[ 3] ,其挥发油成分未见报道.为了阐明挥发
油在该药用植物中的功效 ,本文采用气相色谱/质
谱联用法 ,进行乌蕨挥发油成分分析 ,并开展了体
外抗菌活性试验 ,为乌蕨植物的开发利用提供了科
学依据.
1 实验部分
1.1 乌蕨原料来源及其挥发油的提取 乌蕨样品
采集于贵州都匀市马鞍山林场(2002年 5月),经
贵阳中医学院陈德媛教授鉴定为乌蕨(S .chu-
sanum(L)Ching)植物(标本保存于贵州省 、中国
科学院天然产物化学重点实验室).
鲜品 2.7 kg 切碎成末 ,用水蒸气提取 ,馏出物
用乙醚萃取 2次.乙醚层经无水硫酸镁干燥后 ,减
压回收溶剂得到总挥发油(300mg ,0.011%).
1.2 仪器与实验条件
仪器:HP 5890/HP 5973 GC/MS 联用仪(美
国惠普公司);
气相色谱条件:色谱柱为 HP -5MS , 5%
Pheny l ,Methy.SiloXane ,30 m×Υ0.25 mm ×0.25
μm 弹性石英毛细柱 ,柱温 50 ℃(保持 1 min),以
10 ℃/min升温至300 ℃(保持1 min),汽化室温度
250 ℃;载气为高纯 He(Υ1 =99.999%);柱高压
52.43 kPa载气流量 1.0 mL/min ,进样量 l pL(用
乙醚将乌蕨挥发油稀释 100倍的溶液);分流比 40
∶1.质谱条件:离子源为 T2L源;离子源温度为 230
℃,四极杆温度为 150 ℃,电子能量 70 eV;发射电
子流 34.6μA;倍增器电压:388 V ,接口温度 280
℃,溶剂延迟 4 min;质量范围 10 ~ 550 amu.
1.3 实验步骤
1.3.1 定性分析 取乌蕨挥发油 1μL(乙醚溶
液),用 GC/MS 联用仪分析鉴定 ,共检出 36 个峰
及对应的质谱峰 ,通过 HP.MSD 化学工作检索
Nist 98标准质谱库和 Wiley 质谱图库 ,并结合有
关人工谱图解析 ,鉴定出其中的 24个化合物.
1.3.2 峰面积相对质量分数分析  通过 HP.
收稿日期:2005-10-10
 基金项目:贵州省科技资助项目((2001)3013).
 作者简介:陶 晨(1966- ),男 ,贵州人 ,讲师 ,主要从事植物化学方面的研究.
 通讯作者:杨小生 ,研究员 ,博士 ,主要从事天然产物方面的研究.Email:yang xiaosheng@yahoo.com.
MSD化学工作站数据处理系统 ,按峰面积归一化
法进行计算求得各化学成分在挥发油中的相对质
量分数.
1.4 体外抗菌活性测试
1.4.1 原理 采用 KB纸片扩散法 ,通过观察样
品是否产生抑菌圈及抑菌圈的大小 ,半定量地对该
样品的抗菌活性作出评估.
1.4.2 操作步骤 ①将新鲜培养的菌株配制成
大约每毫升 60 万个细菌的菌液;②将 200 μL 配
好的菌液均匀地涂抹在直径为 90mm 、M-H 培养
基为 15mL 的培养器上 ,贴纸片(直径为 6mm),再
将样品 5μL 加在纸片上;③在37 ℃培养箱中培养
48 h;④观察记录结果(注:试验同时设有阳性对
照).
2 结果与讨论
2.1 结果
2.1.1 成分检测结果 所鉴定的乌蕨挥发油中的
24种成分及其在挥分油中的相对质量分数列于表
1.
表 1 乌蕨挥发油的化学成分
Tab.1 The Constituents of Volatile O il from S .chusanum(L)Ching
编号 化合物    w/ % 编号 化合物    w/ %
1 苯甲醛 0.39 13 香叶醇(Geraniol) 6.06
2 己酸 5.13 14 3-对甲氧基苯乙酮 0.65
3 (E)-3-己烯酸 1.62 15 肉桂冠醚 3.86
4 (E)-2-丁烯二酸 0.74 16 d-橙花叔醇 3.70
5 苯乙醛 3.75 17 十四烷酸甲酯 0.42
6 顺式-氧化芳樟醇 1.02 18 十六烷酸甲酯 1.01
7 芳樟醇 24.76 19 Oxacycloheptadan-2-one 0.66
8 苯乙醇 1.14 20 十六烷酸 3.06
9 冰片(龙脑) 0.62 21 9 , 12-十八碳二烯酸甲酯 0.59
10 松油醇 7.24 22 9 , 12 , 15-十八碳三烯酸甲酯 0.76
11 Berbenone 0.56 23 植醇 1.79
12 反式香叶醇 1.74 24 二十五(碳)烷 0.77
  表 1中显示 ,经气相色谱-质谱分析对该植物
的挥发油进行分析 ,共鉴定出了 24种成分 ,检出率
为 72.0%,单萜类化合物为主要成分 ,其中含量较
高的有芳樟醇(24.76%),松油醇(7.24%)和香叶
醇(6.06%).
2.1.2 体外抗菌活性测试 该挥发油(6 mg/mL)
对枯草芽孢杆菌的抑菌圈为 12mm ,对伤寒沙门氏
菌的抑菌圈为 10 mm ,对铜绿假单胞菌大肠埃希氏
菌 、金黄色葡萄球菌和藤黄微球菌抑制活性很低或
没有活性(阳性对照品庆大霉素 1 mg/mL 对枯草
芽孢杆菌和伤寒沙门氏菌的抑菌圈分别为 36.5
mm 和 34.4 mm).
2.2 讨论
(1)该植物挥发油中含有的主要成分芳樟醇
具有防腐抗菌(细菌和真菌)和抗病毒作用;松油醇
具有消毒杀菌功效;香叶醇具有抗菌 、防腐和驱虫
作用[ 4] .与该挥发油具有对枯草芽孢杆菌 、伤寒沙
门氏菌有明显抑制作用的结果是相吻合的.
(2)通过本研究的结果 ,可以认为挥发油对该
植物的药用价值有一定的贡献 ,为其使用和开发提
供了一定的依据.
参考文献:
[ 1]  《全国中草药汇编》编写组.全国中草药汇编(上册)
[ M] .2 版.北京:人民卫生出版社 , 1996.
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民出版社 , 1977.
[ 3]  上野明 , 小粟倡彦 , 堀绍代子 , 等.Chemical componer-
its in leaves of Sphenomeris chusana copel and cyathea
fauriei copel[ J] .药学杂志(日), 1963 , 83:420.
(下转第 250 页)
246 云南大学学报(自然科学版)                第 28 卷
S tudies on chemical constituents of Croton cascarilloides
CHEN Wei1 , LI Zi-yan2 , YANG Xiao-dong1 , ZHAO Jing-feng1 , YANG Jing-hua1 , LI Liang1
(1.School of Pharmacy , Center for Advanced Studies of Medicinal and O rganic Chemistry ,
Yunnan University , Kunming 650091 , China;
2.School of Environmental Science and Engineering , Kunming University of Science and Technology , Kunming 650093 , China)
Abstract:The chemical constituents of Croton cascaril loides were studied and eight compounds w ere iso-
lated.The st ructure of these compounds were elucidated as ent-8 ,9-7α-hydroxy-11β-aceto xykaura-8
(14),16-dien-9 ,15-dione(1);ent -8 , 9-seco-7α-hydroxykaura -8(14), 16-dien-9 , 15-dione
(2);ent-8 ,9-seco-8 ,14-epoxy-7α-hydro xy-11β-acetoxy -16-kauren-9 ,15-dione(3);luteolin
-7-O-α-L -rhamnoside(4);vanillin(5);anisic acid(6);β -sitosterol(7)and β -daucosterol(8)by
spectral analy sis.
Key words:cro ton;Croton Cascarilloids;chemical constituents
** * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * *
(上接第 246 页)
[ 4]  孙文基 ,绳金房.天然活性成分简明手册[ M] .北京: 中国医药科技出版社 , 1996.
Analysis of chemical constituents of the volatile oils from
S tenoloma chusanum(L .)Chingand their antibacterial activity
TAO Chen
1 , 2 , YANG Xiao-sheng1 , RONG Ju-quan2 ,
CHEN Ming2 , DENG Xian-kuo2 , CHEN Jin-xiu2
(1.The Key Laboratory of Chemistry fo r Natural Products o f Guizhou Province and
Chinese Academy of Sciences , Guiyang 550002 , China;
2.Qiannan Medical Colleg e for Nationalities , Duyun 558000 , China)
Abstract:The chemical constituents of volatile oils f rom the Stenoloma chusanum(L.)Ching were ana-
lyzed and test was for their antibacterial act ivity.The volatile oils w ere obtained by steam distillation , i ts chem-
ical components w ere determined by GC/MS analy sis , and its antibacterial activi ty w as carried out w ith paper
scrip method.36 components w ere checked out and 24 compounds were identif ied , in which the main ingredi-
ents were L-linalool(24.76%), α-terpineol(7.24%)and geraniol (6.06%).The test for the ant ibacterial
activi ty showed that volatile oils had obvious inhibi tion to Bacil lus subt ilis and Salmonel la typhi , and had lit-
tle inhibitory w hile almost no inhibition activity to Psedomonas aeruginose , Escherichia cdi , S taphylococcus
aureus and Sarcina lutea.The main constituents in the volatile oils of S tenoloma chusanum(L .)Ching were
monoterpene and 72.0 percent of them was ident if ied.It was presumed that volatile oils f rom this plant con-
tain some antibacterial constituents.
Key words:S tenoloma chusanum(L.)Ching;volatile oils;chemical constituents;antibacterial activity
250 云南大学学报(自然科学版)                第 28 卷