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鸡矢藤口服液抗炎镇痛作用实验研究



全 文 :甘肃医药 2013年第 32卷第 9期 Gansu Medical Joumal,2013,Vol.32,No.9
Study on effects of extract of paederiae oral liquid on anti -inflammatory and analgesic in mice GAO Ke-li1,WANG Yong-
chang1,GUO Hong -yun2,ZHANG Yong -dong2 1.Laboratory Center of Chinese Herb Medicines Analyses,Gansu Province Medical
Science Institute,Lanzhou 730050,China;2.Department of Pharmacology and Toxicology,Gansu Province Medical Science Institute,
Lanzhou 730050,China
Corresponding allthor:WANG Yong-chang,E-mail:wyc1248@163.com
基金项目:甘肃省科技厅科研院所技术开发研究项目(GKS022-B05-07)
作者单位:730050 甘肃 兰州,甘肃省医学科学研究院药物分析实验中心(高克立、王永昌),药理毒理实验中心(郭红云、张永东)
通讯作者:王永昌,E-mail:wyc1248@163.com
鸡矢藤口服液抗炎镇痛作用实验研究
高克立 王永昌 郭红云 张永东
【摘要】 目的:研究鸡矢藤口服液(paederiae oral liquid,POL)对 4种小鼠炎症、疼痛模型的抗炎镇痛作用。方法:将动物随机分
为对照组、鸡矢藤口服液高(1.126g·kg-1)、低(0.563g·kg-1)剂量组和阳性对照组,考察鸡矢藤口服液灌胃给药对小鼠棉球肉芽肿炎症
和冰醋酸所致毛细血管通透性增加的影响;采用小鼠冰醋酸扭体法和热板法考察鸡矢藤口服液对疼痛模型的镇痛作用。结果:抗炎
实验结果显示,POL高、低剂量组均能明显抑制小鼠棉球肉芽肿的生成,抑制率分别为 58.77%、56.95%(P<0.05);降低冰醋酸所致毛
细血管的渗出,抑制率分别为 39.50%、37.02%(P<0.05~0.01)。镇痛实验结果显示,1.126g·kg-1POL可减少疼痛反应次数(P<0.05),延
迟扭体反应出现的时间,延长率为 59.34%(P<0.05),有效提高热板法致小鼠疼痛的痛阈值(P<0.05)。结论:鸡矢藤口服液对急慢性炎
症有显著的抗炎作用,对化学或物理刺激产生的疼痛有一定的镇痛作用。
【关键词】 鸡矢藤口服液;抗炎;镇痛
文献标识码:A 文章编号:1004-2725(2013)09-0649-05
标定压时维持 7~10秒后泄空球囊,不主张为追求影
像学的完美而二次扩张。撤出球囊后微导丝继续留置
5~10分钟,造影无异常时方可撤出导丝、导引导管,结
束手术。围手术期并发症主要有缺血性(血管闭塞或
栓塞)、出血性(远端分支穿透或狭窄部位破裂)、血管
痉挛、高灌注综合症、支架内血栓形成或闭塞等,国内
外报道发生率为 4.5%~7%,死亡率为 2.4%,中远期并
发症主要是再狭窄,报道为 20%~35%。该组患者手术
相关并发症发生率为 16.7%(2/12),无死亡病例。分析
原因,作者认为并发症发生的原因大多与手术操作和
围手术期管理不善有关,规范的操作和细致的围手术
期管理对于防止并发症发生具有重要意义[ 8 ]。再狭窄
是球囊扩张支架面临的最大问题,导致支架内再狭窄
的主要原因是支架置入对血管壁的损伤和金属支架
的异物性。本组患者在随访中有 3例出现再狭窄,发
生率为 25.0%,其中出现缺血性卒中复发 1例,复发率
为 8.3%。目前研发的药物洗脱支架有预防再狭窄的作
用,国内外已有报道可使再狭窄率降至 10%以下,优
于裸支架,但由于是小宗病例,疗效尚不明确。
总之,球囊扩张支架治疗颅内动脉狭窄已取得了
很大的成功,让很多患者摆脱了缺血性卒中所带来的
损害和痛苦,但由于缺乏循证医学方面的证据,尚难
作为一种标准治疗方案而被广泛推广,当前需要解决
的是有多中心、大规模、前瞻性随机对照试验为其提
供证据。相信随着相关基础研究的不断深入,治疗观
念的改进,技术的普及和材料的不断完善,其有可能
成为治疗 SMCAS最有效的方法。
参考文献
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DOI:10.15975/j.cnki.gsyy.2013.09.010
甘肃医药 2013年第 32卷第 9期 Gansu Medical Joumal,2013,Vol.32,No.9
【Abstract】Objective: To investigate anti -inflammatory and analgesic effect of extract of paederiae oral liquid (POL)to four
kinds of mice inflammation or pain model. Methods: 40 mice were randomly divided into four groups:POL high dose(1.126g·kg-1)、low
dose(0.563g·kg-1) the positive control group and negative control group,effect of POL studied on granulomatous tissue formation in mice
cotton implantation and intensify of capillary the intraperitioneal permeability by acetic acid were observed;analgesia effect was assessed by
the methods of hot-plate and writhing test method. Results: The results showed that POL had significantly anti-inflammatory effect in high-
dose and low-dose groups,which inhibited cotton granuloma formation remarkably and had high inhibition rate were 58.77%,56.95%(P<0.05)
respectively;POL reduced intensify of capillary to the intraperitioneal permeability by acetic acid in mice,which had high the inhibition rate
of 39.50%,37.02%(P<0.05~0.01)respectively. In the writhing test,1.126 g·kg-1 POL,latency of writhing were delayed more than 59.34%
and the number of writhing were decreased obviously(P<0.05). 1.126g·kg-1 POL effectively increased the pain threshold value in hot plate
test of mice(P <0.05). Conclusion: Extracts of Paederiae oral liquid had significant anti -inflammatory effect for acute and chronic
inflammation model,and had analgesic effect on chemical or physical stimuli pain model.
【Key words】 paederiae oral liquid;anti-inflammatory;analgesic
鸡矢藤为茜草科鸡矢藤属植物鸡矢藤 Paederia
Scandens(lour.)Merr.或毛鸡矢藤的全草或根 [ 1 ],又名
鸡屎藤、臭藤。鸡矢藤作为传统的中草药,具有祛风活
血、止痛解毒、消食导滞、除湿消肿等功效。Kapadia[ 2 ]
等发现该植物的茎、叶及种子的甲醇提取物对肿瘤细
胞的生长具有明显抑制作用。其水煎液对小鼠有明显
的镇痛作用[ 3 ]。鸡矢藤在我国南方各省广泛分布,在
甘肃陇南、天水等地区分布较广。为充分地开发利用
我省这一植物资源,提取了鸡矢藤中挥发油和总环烯
醚萜苷类成分,并欲通过小鼠抗炎镇痛试验,研究以
鸡矢藤总环烯醚萜苷及其挥发油制成口服液的抗炎
镇痛效果,为进一步开发研究提供科学依据。
1 材料与设备
1.1 实验动物 昆明种小鼠,SPF级,体重 18~25g,由
甘肃中医学院提供,小鼠合格证号:医动字第 14-009
号,环境设施合格证号:医动字第 14-019号。实验室
环境:温度 20~22℃,相对湿度:45%~55%。
1.2 试剂 地塞米松磷酸钠注射液(Dexamethasone
Sodium Phosphate Injection DXM每 ml含 5mg),山西
银湖制药有限责任公司,批号:20060310;注射用氨苄
西林钠(氨苄青霉素)(每支装 0.5g),哈药集团制药总
厂,批号:A06014917;阿司匹林(Aspirin 每片含
220mg),西安利君制药有限责任公司,批号:0611438-
3;盐酸派替啶注射液(Meperidine hydrochloride 每支
含 100mg),湖北宜宾集团有限责任公司,批号:
011109;冰醋酸(CH3COOH),分析纯,北京化工厂,批
号:860520;伊文思兰(Evans Blue)上海新中化学厂,
批号:1-64-10-16C.I.NO.774。
1.3 主要仪器 6J-8402型热板测痛仪(浙江);SW-
CJ-1F型生物净化工作台(苏州泽化设备器厂);JA-
2003型千分之一电子天平(上海);202-2型电热干燥
箱(上海);TDL-5M型台式大容量冷冻离心机(长沙);
UV-240型分光光度计(岛津)。
1.4 鸡矢藤口服液及其他试剂配制
1.4.1 鸡矢藤口服液的配制(POL)。鸡矢藤药材粗粉
用水提取煎馏液后,水提取液适当浓缩后,分别用石油
醚、氯仿萃取,最后用正丁醇萃取水层,低温减压回收
正丁醇,并将正丁醇萃取物浓缩成稠浸膏(1.0g稠浸膏
相当于 45.33g 原药材)。取鸡矢藤正丁醇稠浸膏
5.63g,加适量鸡矢藤煎馏液,并用蒸馏水溶解至
100ml,摇匀,为高剂量;取高剂量 50ml加蒸馏水至
100ml,为低剂量,放置冰箱 4℃保存备用(高剂量组中
每 ml含总环烯醚萜苷 36mg)。
1.4.2 氨苄青霉素棉球的制备。称脱脂棉 15mg,搓紧
成球状,高压灭菌,在 80℃左右的干燥箱中烘干,于每
个棉球上滴氨苄青霉素 0.1ml(每 ml含 10μg),置 50℃
的恒温箱中烘干,备用。
1.4.3 伊文思兰标准曲线浓度的制备。取伊文思兰
0.3g,加生理盐水 30ml 溶解为 1%的伊文思兰溶液。
取 1%伊文思兰溶液 100μl,加 9.9ml生理盐水稀释,
为 100μg·ml- 1;取 100μg·ml- 1 溶液倍比稀释成浓度
为 50μg·ml- 1、25μg·ml- 1、12.5μg·ml- 1、6.25μg·ml- 1,
备用。
2 实验方法
2.1 小鼠棉球肉芽肿试验[ 4 ] 取体重 18~20g,昆明种
♂小鼠 36只,乙醚浅麻醉,经上腹部切口将氨苄青霉
素棉球分别植入小鼠两侧腋窝部皮下,缝合切口。动物
清醒后随机分为 4 组,即鸡矢藤口服液低剂量组
(0.563g·kg- 1)、鸡矢藤口服液高剂量组(1.126g·kg- 1)、
阳性对照组(地塞米松 0.5mg·kg- 1,ip0.1ml·10g- 1 体
重)及对照组,每组 9只。术后当天开始灌胃给药,容量
为 0.2ml·10g- 1 体重量,对照组灌胃等容量的蒸馏水,
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甘肃医药 2013年第 32卷第 9期 Gansu Medical Joumal,2013,Vol.32,No.9
每日 1次,连续 7d。第 8d脱颈,处死小鼠,剥取棉球肉
芽组织,置 60℃烘箱中烘烤至恒重,减去原棉球重量
即为肉芽肿重量。肉芽肿重量以(mg·10g- 1)体重量表
示。计算肉芽肿重量的抑制率。
肉芽肿抑制率%=〔(对照组平均肉芽重-样品组平
均肉芽重)/对照组平均肉芽重〕×100%
2.2 小鼠毛细血管通透性试验[ 5 ] 取体重 19~22g的
小鼠 40只,分组及给药方法同 2.1,阳性对照组为阿
司匹林(0.2g·kg- 1)。每日给药 1次,连续 7d,于末次给
药 1h后,每鼠尾静脉注射 1%伊文思兰溶液 0.1ml·
10g- 1 体重量,同时腹腔注射 0.7%冰醋酸 0.1ml·10g- 1
体重量。20min后处死小鼠,每只小鼠腹腔注射 5ml生
理盐水,并轻揉腹部 3min,吸取腹腔洗液 3ml,于
2500r·min- 1 离心 10min,在分光光度计 590nm波长处
比色,测定吸光度 A值。同时作伊文思兰标准曲线。换
算出伊文思兰的含量(μg·ml- 1)。计算毛细血管通透性
增加的抑制率。
抑制率(%)=〔(对照组平均伊文思兰量-样品组平
均伊文思兰量)/对照组平均伊文思兰量〕×100%
2.3 小鼠热板法镇痛试验[ 6 ] 取体重 17~18g昆明种
♀小鼠 60只,于试验前在(55±5)℃热板镇痛仪上测定
每鼠的痛阈值,以小鼠舔后足为疼痛反应指标,痛阈
值在 5~30s内为合格动物。将 40只合格小鼠随机分
组,分组方法和给药量同 2.1。阳性对照组为盐酸派替
啶(20mg·kg- 1,ip0.1ml·10g- 1 体重)。每日给药 1次,连
续给药 5d,末次给药后 1h、2h、3h、4h、5h分别测定各
组小鼠痛阈值,若 60s内仍无舔后足反应,则痛阈值按
60s计。计算各组小鼠平均痛阈值及痛阈提高百分率,
并以时间为横坐标,痛阈提高百分率为纵坐标,绘制
时间曲线图。
痛阈提高百分率(%)=〔(用药后平均痛阈值-用药
前平均痛阈值)/用药前平均痛阈值〕×100%
2.4 小鼠扭体法镇痛试验[ 6 ] 取体重 19~21g,♂小鼠
40只,分组及给药方法同 2.1,阳性对照组为阿司匹林
(0.2g·kg- 1)。每日给药 1次,连续给药 5d。于末次给药
1h后,各鼠腹腔注射 0.7%冰醋酸 0.1ml·10g- 1 体重
量。观察小鼠的扭体反应(伸展后肢,腹部收缩内凹,
臀部抬高),记录出现扭体反应的潜伏时间及 15min内
小鼠的扭体次数,计算扭体抑制率和潜伏时间延长率。
扭体抑制率(%)=〔(对照组平均扭体次数-样品组
平均扭体次数)/对照组平均扭体次数〕×100%
潜伏时间延长率(%)=〔(样品组平均潜伏时间-对
照组平均潜伏时间)/对照组平均潜伏时间〕×100%
2.5 数据处理 所有实验结果均以(x±s)表示,多组均
数比较应用SPSS10.0统计软件中的单因素方差进行统计。
3 结果
3.1 鸡矢藤口服液对小鼠棉球肉芽肿的影响 鸡矢
藤口服液高、低剂量组小鼠的肉芽肿重量分别为:
(12.12±6.31)mg·10- 1g- 1、(12.66±5.51)mg·10- 1g- 1,对
照组为(29.37±12.50)mg·10- 1g- 1。高、低剂量组对肉芽
肿抑制率分别可达 58.77%、56.95%,与对照组相比,差
异均有显著性(P<0.05)。阳性对照地塞米松组肉芽肿
抑制率为 63.56%(P<0.05)。高、低剂量组与阳性对照
地塞米松组相比,差异无显著性(P>0.05)。实验结果表
明鸡矢藤口服液高、低剂量组均可抑制小鼠棉球肉芽
肿的形成,对慢性炎症有显著的抗炎作用,且作用与
地塞米松相近。见表 1。
表 1 鸡矢藤口服液对小鼠棉球肉芽肿形成的抑制作用 (x±s,n=9)
Group Dose/g.kg-1 Granulomaweight /mg.10-1g-1 Inhibition rate/% Pa Pb
Control 29.37±12.50
POL 0.563 12.66±5.51ab 56.95 0.022 0.946
POL 1.126 12.12±6.31ab 58.77 0.018 0.993
DXM 0.005 10.71±3.46a 63.56 0.011 -
Pa=(0.022~0.011)<0.05 υs Control;Pb=(0.946~0.993)>0.05 υs DXM
3.2 鸡矢藤口服液对冰醋酸所致小鼠腹腔毛细血管
通透性增加的影响 鸡矢藤口服液高、低剂量组小鼠
腹腔 Evans Blue 渗出量分别为(21.9±3.3)μg·ml- 1、
(22.8±6.9)μg·ml- 1,对照组为(36.2±9.8)μg·ml- 1,高、
低剂量组对毛细血管通透性的抑制率分别为 39.50%、
37.02%,与对照组相比,差异均有显著性(P<0.05~0.01)。
阿司匹林的抑制率为 45.03%(P<0.01)。高、低剂量组
与阳性对照阿司匹林组相比,差异无显著性(P>0.05)。
结果显示鸡矢藤口服液可降低冰醋酸引起的毛细血
管通透性的增加,对急性炎症渗出有明显的抑制作
用,且作用与阿司匹林相近。见表 2。
3.3 鸡矢藤口服液对小鼠热板致痛的影响 在给予
高、低剂量的鸡矢藤口服液后 1h、2h、3h、4h、5h,均可
提高小鼠痛阈值,其痛阈值在 4h最高,分别为(21.2±9.4)、
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表 2 鸡矢藤口服液对冰醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增加的影响 (x±s n=10)
Group Dose/g.kg-1 Evans Blue/μg·mL-1 Inhibition rate/ % Pc Pd
Control 36.2±9.8
POL 0.563 22.8±6.9bd 37.02 0.017 0.825
POL 1.126 21.9±3.3cd 39.50 0.007 0.726
Aspirin 0.200 19.95±3.6c 45.03 0.003 -
Pc =(0.017~0.003)<(0.05~0.01)μs Control;Pd =(0.825~0.726)>0.05 υs Aspirin
(19.0±7.3);痛阈提高率分别为 58.80%、41.79%,与基
础痛阈值相比,高剂量组差异有显著性(P<0.05),但低
剂量组无统计学意义(P>0.05)。哌替啶在 1h作用最
强,痛阈提高率 95.68%(P<0.001)。实验结果表明鸡矢
藤口服液对物理刺激产生的疼痛具有一定的镇痛作
用。见表 3,表 4。
表 3 鸡矢藤口服液对热板法致小鼠足痛反应的影响(x±s,n=10)
Group Dose/g.kg-1 Pain threshold value/s
0h 1h 2h 3h 4h 5h
Control 13.4±3.7 13.5±3.5 13.6±3.2 14.1±4.5 13.8±2.9 14.3±3.4
POL 0.563 13.4±4.4 14.6±5.0 15.1±6.7 18.8±13.1 19.0±7.3 16.6±6.8
POL 1.126 13.3±3.3 13.8±4.4 14.0±6.2 19.2±7.9 21.2±9.4e 19.3±10.1
Meperidine 0.02 13.9±4.3 27.2±7.1c 25.2±5.3c 22.2±6.7c 20.4±5.0f 18.9±5.3
Pe<0.05,Pf<0.01 υs control
Group Dose/g.kg-1
表4 不同时点多组痛阈值均数方差分析 P值(x±s,n=10)
Group Dose/g.kg-1 1h 2h 3h 4h 5h
Control 0.925 0.901 0.640 0.779 0.554
POL 0.563 0.741 0.626 0.128 0.112 0.367
POL 1.126 0.891 0.843 0.077 0.020 0.074
Meperidine 0.02 0.000 0.000 0.002 0.014 0.055
表 5 鸡矢藤口服液对冰醋酸所致小鼠扭体反应的影响(x±s,n=10)
Group Dose/g.kg-1 writhes number/times Inhibition rate/% P
Control 41.7±12.3
POL 0.563 30.5±10.3b 26.86 0.038*
POL 1.126 26.0±9.4c 37.65 0.003**
Aspirin 0.200 24.4±5.9c 41.49 0.001**
*P<0.05,**P<0.01 υs control
3.4 鸡矢藤口服液对冰醋酸所致小鼠扭体反应的影
响 鸡矢藤口服液高、低剂量组的小鼠平均扭体反应
次数分别为 26.0±9.4和 30.5±10.3,较对照组 41.7±12.3
有明显减少,扭体抑制率分别为 37.65%(P<0.01)及
26.86%(P<0.05)。潜伏时间的观察结果:低剂量组的潜
伏时间延长率为 52.19%,高剂量组为 59.34%(P<0.05)。
实验表明:鸡矢藤口服液高、低剂量组均可减少冰醋
酸所致小鼠扭体次数,延迟扭体反应出现时间,对化
学刺激产生的疼痛具有明显的镇痛作用,见表 5。
4 讨论
研究报道[ 7 ],环烯醚萜苷类化合物有抗炎作用,其
对角叉菜聚糖诱导的 Wistar 大鼠呈水肿的抑制活性
较强,抑制率分别为 30%和 26%。本实验所用鸡矢藤
口服液的主要成分为环烯醚萜苷类化合物和挥发油。
通过小鼠肉芽肿试验与冰醋酸致小鼠毛细血管通透
性增加试验,结果显示:鸡矢藤口服液高、低剂量组对
小鼠肉芽肿抑制率分别可达 58.77%、56.95%(均 P<0.05)。
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3.0T MR MRCP application value in biliary variation MA En-tan1 ZHAO Guo-sheng1 WANG Xiao-qi LI De-juan1 MA Yu-mei
authors affiliation:1.MR Department,the People Hospital of Linxia,Gansu Province,Linxia 731100;2.Department of Radiology,the
Tumor Hospital of Gansu Province,Lanzhou 730050,China
高、低剂量组与阳性对照地塞米松组相比,差异无显
著性(P>0.05)。表明鸡矢藤口服液高、低剂量组均可抑
制小鼠棉球肉芽肿的形成,对慢性炎症有显著的抗炎
作用, 且作用与地塞米松相近。鸡矢藤口服液高、低
剂量组对毛细血管通透性的抑制率分别为 39.50%、
37.02%(P<0.05~0.01)。高、低剂量组与阳性对照阿司
匹林组相比,差异无显著性(P>0.05)。表明鸡矢藤口服
液可降低冰醋酸引起的毛细血管通透性的增加,对急
性炎症渗出有明显的抑制作用,且作用与阿司匹林相
近。
环烯醚萜苷类化合物有镇痛作用,其作用机制是
通过抗氧化,清除超氧化自由基而发挥作用,而超氧
化自由基正是疼痛介质之一[7]。本研究采用小鼠热板
法和冰醋酸扭体法进行镇痛试验,结果显示:在给予
高、低剂量的鸡矢藤口服液后 1h、2h、3h、4h、5h,均可
提高小鼠痛阈值,4h 最高,痛阈提高率分别为
58.80%、41.79%(P<0.05)。表明鸡矢藤口服液对物理
刺激产生的疼痛具有一定的镇痛作用。鸡矢藤口服液
高、低剂量组对冰醋酸所致小鼠扭体反应次数分别为
26.0±9.4和 30.5±10.3,较对照组 41.7±12.3有明显减
少,扭体抑制率分别为 37.65%(P<0.01)、26.86%
(P <0.05);潜伏时间延长率为分别为 59.34%和
52.19%。表明鸡矢藤口服液可减少冰醋酸所致小鼠扭
体次数,延迟扭体反应出现的时间,对化学刺激产生
的疼痛也具有较好的镇痛作用。上述鸡矢藤口服液镇
痛作用机制是否与清除超氧化自由基有关,有待于进
一步探讨。
鸡矢藤已开发为注射液,主要用于临床治疗癌症
疼痛及术后镇痛[ 8 ],也有文献报道用于治疗糖尿病周
围神经病变疼痛[ 9 ],鸡矢藤在中药处方中还具有降压、
抑菌、镇静、消食、活血功效[ 10 ]。本实验表明鸡矢藤口
服液口服给药的抗炎镇痛作用明显,提示鸡矢藤总环
烯醚萜苷和其挥发油制成的剂型有很好的抗炎镇痛
作用,可用于治疗临床炎性疼痛。其他抗炎镇痛成分
及其作用及机制,还有待继续深入研究探讨。
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作者单位:731100 甘肃 临夏,临夏州人民医院磁共振室(马恩潭、赵国胜、李德娟、马玉梅);730050 甘肃 兰州,甘肃省肿瘤医院放射科(王小琦)
通讯作者:王小琦,E-mail:Wangxiaoqi633@163.com
3.0T MR胰胆管成像对胆管变异的应用价值
马恩潭 赵国胜 王小琦 李德娟 马玉梅
【摘要】 目的:探讨 3.0T MR胰胆管成像(MRCP)评价胆管变异的准确性及其临床应用价值。方法:回顾性分析 120例行外科胆
囊切除术的患者,分析术前 MRCP资料,并与术中胆道造影(IOC)结果对照,进行胆道分型。结果:120例胆囊切除术患者,IOC发现胆
道结构正常者 69例(57.5%),胆道结构变异者 51例(42.5%);与 IOC相对比,MRCP对胆道结构分型的总准确率为 96.7%(116/120),
对胆道变异的诊断敏感度为:86.3%(44/51),特异度为:100%(69/69),阳性预测值为 100%(44/44),阴性预测值为 90.8%(69/76)。结
论:MRCP能准确评估患者的肝内外胆管结构,有助于各种胆道疾患术前手术方案的制定。
【关键词】 3.0T MR;胰胆管成像(MRCP);胆管变异
文献标识码:A 文章编号:1004-2725(2013)09-0653-04
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