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GC-MS法分析白花丹参不同部位挥发性成分



全 文 :China Pharmacy 2010 Vol. 21 No. 39 中国药房 2010年第21卷第39期
白花丹参(Salvia miltiorrhiza Bunge var. alba C.Y. wu et H.
W.Li)为唇形科植物丹参(原变种)(Salvia miltiorrhiza Bunge)
的白花变型,与原变型的不同在于花白色[1],主要分布于山东
境内,其他地区较为少见,属于珍稀濒危药用植物。白花丹参
的主要药用部位是根,除具有丹参的作用和用途外,对治疗血
栓闭塞性脉管炎具有独特疗效,临床应用前景十分广阔[2],有关
其茎叶药理作用的研究近年来也引起了人们的重视[3~5]。白花
丹参中化学成分比较复杂,其中对脂溶性丹参酮类、水溶性酚
酸类成分及微量元素的研究比较深入[6~10],挥发油成分的研究
鲜见报道[11,12],且主要为不同产地单一部位的差异性研究,尚
缺各部位挥发油类成分的比较研究。本试验采用水蒸气蒸馏
法提取白花丹参根、茎、叶和花中的挥发油,经气相色谱-质谱
(GC-MS)联用方法分析其主要成分,并用面积归一化法分别
计算了各成分的相对质量分数,以期为进一步开发白花丹参
的药用价值提供科学根据。
1 仪器与材料
GC-MS-QP2010型GC-MS联用仪(日本岛津公司)。
白花丹参全植株采自泰山医学院中药种植基地,经泰山
医学院药学院苏延友教授鉴定为 S. miltiorrhiza Bunge var.
alba C.Y.wu et H.W.L的多年生植株体;乙醚为优级纯,氦气体
积分数为99.999%,其它试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 挥发油的提取
采用常规水蒸气蒸馏法,取干燥白花丹参的根、茎、叶和
花,粉碎过20目筛,分别称取100 g,放入水蒸气蒸馏装置中蒸
馏 6 h,馏出液用少量乙醚萃取 3次,合并萃取液,经无水硫酸
钠干燥后,用移液枪吸出,自然挥发除去乙醚后得挥发油,冷
藏,备用。
2.2 GC-MS条件
2.2.1 GC条件 色谱柱:Restek RTx-1MS石英毛细管柱(30
m×0.25 mm×0.5 µm);进样口温度:280 ℃;柱箱温度:初温
50℃,以 5℃·min-1的速率上升至 150℃,再以 3℃·min-1的
速率上升至 240℃;载气:氦气;进样量:1 μL,分流比:10 ∶ 1;
柱流量:1.0 mL·min-1。
2.2.2 MS条件 离子源:EI;离子源温度:200℃;接口温度:
250 ℃;检测电压:0.8 kV;质量范围:30~400 amu;溶剂延迟
1.5 min。
Δ山东省科技发展计划项目(2007GG2NS02051)
*讲师,硕士。研究方向:药用植物有效成分分离与分析。电话:
0538-6222706。E-mail:fenglei1023422@163.com
#通讯作者:副教授,硕士。研究方向:药用植物分子生物学。电
话:0538-6236993。E-mail:sdaujm@163.com
GC-MS法分析白花丹参不同部位挥发性成分Δ
冯 蕾 1*,冀海伟 2,王德才 3,王健美 3 #,柳仁民 4(1.泰山医学院动脉粥样硬化研究所,泰安市 271016;2.泰山医
学院化学与化学工程学院,泰安市 271016;3.泰山医学院生物科学系,泰安市 271016;4.聊城大学化学化工
学院,聊城市 252059)
中图分类号 R284.1;R931.6 文献标识码 A 文章编号 1001-0408(2010)39-3706-04
摘 要 目的:研究白花丹参不同部位挥发油化学成分并进行比较。方法:采用水蒸气蒸馏法提取白花丹参根、茎、叶及花的挥发
油,应用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术对各部位挥发油进行分析,利用面积归一化法分别计算各成分的相对质量分数。结
果:从白花丹参根、茎、叶、花的挥发油中分别鉴定了39、33、21、28种成分。白花丹参根、茎、叶、花挥发油中主要化学成分差别很
大,除大根香叶烯D为共有,且在茎、叶、花中相对质量分数都较高外,其它主要成分均不同。结论:本试验结果可为白花丹参的进
一步开发利用提供依据。
关键词 白花丹参;挥发油;化学成分;气相色谱-质谱联用法
Analysis of Volatile Constituents from Different Parts of Salvia miltiorrhiza by GC-MS
FENG Lei(Institute of Atherosclerosis,Taishan Medical University,Taian 271016,China)
JI Hai-wei(College of Chemistry and Chemical Engineering,Taishan Medical University,Taian 271016,China)
WANG De-cai,WANG Jian-mei(Dept. of Bioscience,Taishan Medical University,Taian 271016,China)
LIU Ren-min(College of Chemistry and Chemical Engineering,Liaocheng University,Liaocheng 252059,China)
ABSTRACT OBJECTIVE:To study and compare the chemical components of the volatile constituents from different parts of Sal-
via miltiorrhiza. METHODS:The volatile oils were extracted from roots,stems,leaves and flower of S. miltiorrhiza by steam distil-
lation. GC-MS was used to analyze chemical components. The relative content of each component was calculated by area normaliza-
tion. RESULTS:39,33,21 and 28 kinds of chemical compositions were indentified in volatile oil from roots,stems,leaves and
flowers of S. miltiorrhiza respectively. The main chemical components from different parts of S. miltiorrhiza were different from
each other significantly. The main chemical components were quite different except the content of germacrene D in stems,leaves
and flowers took up big proportion. CONCLUSION:The study provides reference for the further development of S. miltiorrhiza.
KEY WORDS Salvia miltiorrhiza;Volatile oil;Chemical components;GC-MS
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中国药房 2010年第21卷第39期 China Pharmacy 2010 Vol. 21 No. 39
2.3 结果
按上述试验条件,白花丹参根、茎、叶、花挥发油GC图保
留时间均为50 min,其代表性总离子流图见图1。
通过数据库NIST05自动检索、人工解析和核对有关文献
资料,采用峰面积归一化法确定各组分在挥发油中的相对质量
分数,从中鉴定了86种成分。其中:根 39种,茎 33种,叶 21种,
花28种。所鉴定的化学成分和相对相对质量分数见表1。
3 讨论
由表1可见,白花丹参根中主要成分为蛇麻烷(27.64%)、
铁锈醇(26.13%)和[1R-[1α.(R*),4a,8aα]-α-乙烯基十氢-α,
5,5,8a-四甲基-2-亚甲基,1-萘丙醇(17.37%),这3种化合物
5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 min
图1 白花丹参花挥发油总离子流图
Fig 1 TIC of volatile oil from the flowers of S. miltiorrhiza
表1 白花丹参各部位挥发油化学成分分析结果
Tab 1 Chemical constituents of volatile oils from different parts of S. miltiorrhiza
峰号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
tR/min
6.61
6.65
6.94
7.54
7.63
8.75
8.78
9.02
9.20
9.53
9.85
10.01
10.13
10.70
10.86
10.95
11.58
12.21
12.86
13.01
13.19
13.55
13.73
14.46
15.60
16.08
16.16
16.26
16.66
16.78
16.89
18.04
18.87
19.03
19.19
19.29
19.41
19.54
20.33
20.35
20.48
20.59
20.74
化合物名称
松萜
安息香醛
莰烯
松茸醇
蒎烯
苯乙醛
2-甲基苯乙酮
侧柏烯
反式-β-罗勒烯
顺式-β-罗勒烯
γ-不旋松油精
β-萜品醇
2,3,5,8-四甲基葵烷
顺式-2-蒈烯
正壬醛
沉香醇
环己醇
马鞭草烯醇
L-龙脑
隐品酮
4-萜品醇
α-松油醇
桃金娘烯醇
香豆满
十四烷
焦可林
异龙脑
乙酸异龙脑酯
8-己基-十五烷
4-羟基-2-甲氧基苯乙烯
顺-3-甲基-环己烷
环己胺
反式-β-突厥酮
茉莉酮
古巴苯
紫罗兰酮
环丁烷并[1,2:3,4]二环戊烯
1-甲基-1-乙基-2,4-双-(1-甲基乙烯基)-环己烷
2,4a,5,6,7,8,9,9a-八氢-3,5,5-三甲基-9-亚甲基-1H-苯并环庚烯
石竹烯
鲸蜡烷
十五烷
2,6-二甲基-6-(4-甲基-3-戊烯基)-2-降蒎烯
分子式
C10H16
C7H6O
C10H16
C8H16O
C10H16
C8H8O
C9H10O
C10H16
C10H16
C10H16
C10H16
C10H18O
C14H30
C10H16
C9H19O
C10H18O
C10H18O
C10H16O
C10H18O
C9H14O
C10H18O
C10H18O
C10H16O
C8H8O
C14H30
C8H7N
C10H18O
C12H20O2
C18H38
C9H10O2
C7H14O
C15H24
C13H18O
C11H16O
C15H24
C13H22O
C15H24
C15H24
C15H24
C15H24
C20H42
C15H32
C15H24
相对质量分数/%

-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
0.1
-
0.04
-
0.12
0.08
0.31
-
0.08
-
-
-
-
0.05
-
-
0.31
-
0.04
0.10
-

-
0.30
-
0.30
-
1.88
-
-
-
-
-
-
-
-
0.23
1.65
0.24
0.35
-
0.27
0.53
0.93
0.24
-
0.32
0.35
-
2.22
0.64
-
-
0.57
-
-
0.45
-
0.89
1.65
-
10.09
-
-
0.36

-
0.14
-
-
-
0.70
-
0.59
-
-
-
-
-
-
-
0.18
-
-
-
-
-
0.15
-
0.15
-
-
-
-
-
1.40
-
-
0.09
0.16
0.18
-
-
0.08
-
-
-
-
-

1.89
-
0.79
-
2.07
-
1.57
5.30
0.25
0.28
0.30
0.25
0.21
0.09
0.35
1.83
-
-
0.42
-
0.66
0.53
-
-
-
-
-
2.81
-
-
-
-
-
-
0.70
-
1.99
1.95
-
21.21
-
-
-
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China Pharmacy 2010 Vol. 21 No. 39 中国药房 2010年第21卷第39期
峰号
44
45
46
47
48
49
50
51
52
53
54
55
56
57
44
58
59
60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
80
81
82
83
84
85
86
tR/min
20.94
21.15
21.17
21.23
21.63
21.71
21.83
21.94
22.02
22.39
22.50
23.08
23.39
23.85
20.94
24.07
24.67
25.98
26.26
26.80
27.48
27.68
35.06
35.31
35.92
36.28
36.63
37.03
37.51
38.07
38.81
39.17
39.52
40.35
40.53
41.15
42.45
42.58
42.71
43.12
44.10
44.69
45.83
46.90
化合物名称
(+)-环异酒剔烯
香叶基丙酮
异石竹烯
草萜
十七烷
十九烷
柏木烯醇
大根香叶烯D
β-倍半水芹烯
大香叶烯-B
2,4-二叔丁基苯酚
δ-杜松烯
异十三醇
异喇叭烯
(+)-环异酒剔烯
反式橙花叔醇
广藿香烷
α-柯巴烯-11-醇
视黄醛
草烷-1,6二烯-3-醇
顺式-α-檀香脑
穿心莲内酯
Naphthalene
四氢除虫菊酮
8-己基十五烷
γ-古芸烯酮氧化物
9,9′-双菲二十八烷
蛇麻烷
咔啉-羧(酸)酯
2-(7-十七醇)2H-四氢吡喃
脱氢松香胺
[1R-[1α.(R*),4a,8aα]-α-乙烯基十氢-α,5,5,8a-四甲基-2-亚甲基,1-萘丙醇
顺-八氢-2-(1H)萘酮
蛇麻烷
4,4二甲基-5-雄甾烯
二十一烷
α-视网醛
4a,7,7,10a-Tetramethyldodecahydrobenzo[f]chromen-3-ol
10,12,14-Nonacosatriynoic acid
穿心莲内酯
甘二烷
3-甲基-5(1,4,4-三甲基-2-己烯)-1-戊醇
4,4-二甲基雄甾-5,7二烯
铁锈醇
分子式
C15H24
C13H20
C15H24
C15H24
C21H44
C20H42
C15H24O
C15H24
C15H24
C15H24
C14H22O
C15H24
C13H25O
C15H24
C15H24
C15H26O
C15H26
C15H24O
C20H28O
C15H26O
C15H24O
C20H30O5
C20H32
C11H16O
C21H44
C15H24O
C28H46
C15H26O
C14H18O3
C22H40O2
C20H30
C20H30
C20H36O2
C15H26O
C21H34
C21H44
C20H28O
C17H30O2
C29H46O2
C30H44
C22H46
C15H28O
C21H34
C20H30O
相对质量分数/%

-
-
-
-
0.12
0.04
-
0.18
0.09
-
0.45
-
-
-
-
0.06
-
-
-
-
0.28
-
0.63
1.31
0.10
0.17
0.34
0.14
0.45
0.57
1.23
17.37
1.21
27.64
0.20
0.50
0.40
0.15
0.87
0.09
0.67
0.08
0.26
26.13

0.73
-
-
-
0.70
-
0.42
14.50
-
0.76
-
1.15
0.21
-
0.73
0.49
-
-
0.46
1.52
-
0.74
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
0.53
-
-
-
-
-
-
-
-

1.60
-
2.14
-
-
-
-
15.93
-
0.27
10.58
-
-
0.40
1.60
-
0.71
0.43
-
2.33
-
0.71
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-

1.04
3.11
-
6.93
-
-
-
15.85
-
0.93
-
0.59
-
-
1.04
0.32
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
续表1
的相对质量分数占总质量的71.14%。白花丹参茎中的主要化
学成分为大根香叶烯D(14.50%),相对质量分数较高的还有
石竹烯(10.09%)和乙酸异龙脑酯(2.22%)、苯乙醛(1.88%)、
沉香醇(1.65%)等。白花丹参叶中的主要化学成分为大根香
叶烯D(15.93%),相对质量分数较高的还有 2,4-二叔丁基苯
酚(10.58%)、 草烷-1,6二烯-3-醇(2.33%)和异石竹烯
(2.14%)等。白花丹参花中的主要化学成分为石竹烯
(21.21%),其他相对质量分数较高的是大根香叶烯 D
(15.85%)、 草萜(6.93%)、侧柏烯(5.30%)、香叶基丙酮
(3.11%)、乙酸异龙脑酯(2.81%)等。
通过以上分析发现,白花丹参根、茎、叶及花挥发油中主
要化学成分差别很大,在鉴别出的成分中,除大根香叶烯D为
白花丹参的根、茎、叶、花所共有,且在茎、叶、花中相对质量分
数都较高外,其它主要成分均不同。根中的3种主要组分蛇麻
烷、铁锈醇和[1R-[1α.(R*),4a,8aα]-α-乙烯基十氢-α,5,5,
8a-四甲基-2-亚甲基,1-萘丙醇在其茎、叶、花里都未发现;而
在茎和花中相对质量分数都较高的石竹烯在根和叶中则没有
检测到。
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葛根总黄酮的HPCE指纹图谱研究Δ
陈树和 1*,陈荔 2,巴 赛 3,刘焱文 2(1.湖北省中医院,武汉市 430061;2.湖北中医药大学中药资源与中药复
方省部共建教育部重点实验室,武汉市 430061;3.广东药学院,广州市 510006)
中图分类号 R284.1;R927.1 文献标识码 A 文章编号 1001-0408(2010)39-3709-03
摘 要 目的:建立葛根总黄酮的高效毛细管电泳(HPCE)指纹图谱。方法:运行缓冲液为30 mmol·L-1硼砂溶液,分离电压为13
kV,进样时间为5 s,检测波长为254 nm,柱温为25℃。结果:从葛根总黄酮HPCE指纹图谱中标定了14个共有峰,其总峰面积达
到93%以上。结论:所建立的指纹图谱准确、可靠,可用于评价和控制葛根总黄酮的质量。
关键词 葛根;总黄酮;高效毛细管电泳法;指纹图谱
Study on HPCE Fingerprints of Total Flavonoids from Pueraria lobata
CHEN Shu-he(Hubei Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine,Wuhan 430061,China)
CHEN Li-da,LIU Yan-wen(Key Laboratory of Traditional Chinese Medicine Resource and Compound Prescrip-
tion,Ministry of Education,Hubei University of TCM,Wuhan 430061,China)
BA Sai(Guangdong Pharmaceutical University,Guangzhou 510006,China)
ABSTRACT OBJECTIVE:To establish the HPCE fingerprints of total flavonoids from Pueraria lobata. METHODS:HPCE meth-
od was used with 30 mmol·L-1 borax as buffer. Separation voltage was 13 kV and sampling time was 5 second. The detection wave-
length was set at 254 nm,and the column temperature was maintained at 25 ℃. RESULTS:14 common peaks of total flavonoids
from P. lobata were successfully separated,and total areas of common peaks were above 93%. CONCLUSION:Established HPCE
fingerprint of total flavonoids from P. lobata is accurate and reliable. It can be used for the quality evaluation and control of total fla-
vonoids from P. lobata.
KEY WORDS Pueraria lobata;Total flavonoids;HPCE;Fingerprints
Δ武汉市科学技术计划项目(2002600513406)
*主任药师,硕士研究生导师。研究方向:中药及其制剂有效成
分。电话:027-88929176。E-mail:chenshuhe606@163.com
葛根始载于《神农本草经》,为豆科植物葛根 Pueraria
lobata(Willd.)Ohwi的干燥根,习称野葛,具有解肌退热、生
津、透疹、升阳止泻之功效[1]。葛根主要含葛根素、大豆苷、大
豆苷元等异黄酮类化合物[2]。现代药理研究表明,葛根黄酮和
葛根素具有调节血压、扩张冠脉血管、抗心律失常和抗心肌缺
血等作用[2],临床主要用于治疗高血压、心律失常、心肌梗死等
病症。本文采用大孔吸附树脂纯化工艺提取分离葛根总黄
酮,并采取高效毛细管电泳(HPCE)法建立了葛根总黄酮的指
纹图谱,旨在为葛根药材质量的评价和控制提供依据。
1 仪器与材料
1.1 仪器
P/A system 5000型毛细管电泳仪(美国Beckman公司)。
1.2 试药
葛根素对照品(中国药品生物制品检定所,批号:110752-
200209);D101型大孔树脂(天津市海光化工有限公司);甲醇
为色谱纯,水为高纯水,其它试剂均为分析纯;葛根药材经湖
北中医学院中药鉴定教研室鉴定为豆科植物葛根 P. lobata
(Willd.)Ohwi的干燥根。
2 方法与结果
2.1 葛根总黄酮的制备
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