免费文献传递   相关文献

白马骨的质量标准研究



全 文 :(总 )广西中医药 2014年 12月第 37卷第 6期
基金项目:广西壮族自治区食品药品监督管理局资助项目(MZY2012036)
*通信作者
白马骨的质量标准研究
杨丽施 广西中医药大学 530001 南宁市明秀东路 179号
刘华钢 广西壮族自治区食品药品监督管理局 530029
韦松基 * 戴忠华 罗统勇 广西中医药大学 530001
摘 要 目的:建立白马骨药材的质量控制标准。方法:采用显微鉴别和薄层色谱法对其进行鉴定,并测定
其水分、总灰分、酸不溶性灰分和浸出物的含量。结果:白马骨茎横切面栓内层可见石细胞散在,中柱外围有石
细胞组成的环带,韧皮部有的薄壁细胞内含草酸钙针晶束;粉末中含单粒或复粒淀粉粒,草酸钙针晶常见,草酸
钙方晶散在或存于薄壁细胞中。薄层鉴别结果表明,在供试品色谱中,与对照品齐墩果酸色谱相应的位置上,显
相同颜色的紫红色斑点。检查项结果显示,8批样品的水分含量均在 10.5%以下,总灰分均在 6.0%以下,酸不溶
性灰分均在 1.6%以下,热水浸出物含量最高,均在 16.5%以上。结论:显微特征较明显,可以作为白马骨的鉴别
依据,其薄层鉴别及检查项测定结果可为白马骨药材质量控制提供依据。
关键词 白马骨;质量标准;显微鉴别;薄层色谱法
中图分类号:R284.1 文献标识码:A 文章编号:1003-0719(2014)06-0073-04
白马骨为茜草科白马骨 Seris-
sa serissoides(DC.)Druce的全草,
别名“六月雪”、“路边荆”等[1]。白
马骨在广西瑶药中广泛使用,瑶药
称之为“急惊风”。《本草拾遗》中记
载白马骨“无毒”,《生草药性备要》
中记载其“味苦,性微寒”,具有祛
风利湿、清热解毒等功效,主治感
冒、黄疸型肝炎、肾盂肾炎、风湿性
关节炎、妇女闭经、白带等症[2];
在广东、广西两省,白马骨长期用
于急慢性肝炎的治疗,具有良好的
疗效。近年来有关白马骨的化学成
分和药理作用研究表明,该植物主
要含有糖类、酚性化合物、有机酸、
甾醇及三萜等成分,具有抗乙肝病
毒、保肝、抑制细菌生长、抗肿瘤、
抑制酪氨酸酶活性等作用[3-6]。为
了更好地开发利用该植物资源,本
课题组对白马骨进行显微特征和
薄层色谱鉴别,并测定水分、总灰
分、酸不溶性灰分和浸出物的含
量,为制订白马骨的质量控制标准
提供依据。
1 实验材料
1.1 药材与试剂 白马骨药材 8
批,分别采于广西靖西县湖润镇
(BMG-1)、德保县足荣镇(BMG-
2)、武鸣县伊岭岩(BMG-3)、武鸣
县腾翔(BMG-4)、武鸣县双桥镇
(BMG-5)、邕宁县吴圩镇(BMG-
6)、扶绥县山圩镇(BMG-7)、金秀
县金秀镇(BMG-8),由广西中医药
大学韦松基教授鉴定为茜草科白
马骨 Serissa serissoides(Dc.)Druce
的全草。齐墩果酸对照品由中国药
品生物制品检定所提供,批号:
110709-200304;甲醇、乙醇、氯仿、
硫酸等试剂均为分析纯。
1.2 仪器 Sartorius BS214D电子
分析天平(赛多利斯科学仪器有限
公司);DF-20 台式连续投料粉碎
机(温岭市林大机械有限公司);
HH-4数显恒温水浴锅(国华电器
有限公司);101A-3E 电热鼓风干
燥箱(上海试验仪器有限公司);
SX2箱式电阻炉(上海试验仪器有
限公司);SK2200LHC 超声波清洗
仪(上海科导超声仪器有限公司);
DM-2500M生物显微镜(上海徕卡
仪器有限公司)。
2 方法与结果
2.1 显微鉴别 取新鲜白马骨茎
直径约 3~10 mm的部位,用石蜡
切片法制片,经双重染色制成永久
切片。粉末制片取茎、叶样品晒干、
粉碎并过 60 目筛,用稀甘油制片,
用 DM-2500M 生物显微镜观察,
系统成像。
2.1.1 茎横切面 木栓层外侧为
数列木栓细胞组成的落皮层,易脱
落;木栓形成层和栓内层明显,栓
内层可见有石细胞散在;中柱外围
由成群石细胞组成环带,壁厚;韧
·中药方剂·
·73·473
(总 ) 广西中医药 2014年 12月第 37卷第 6期
皮部较窄,有的薄壁细胞内含草酸
钙针晶束;形成层不明显;木质部
宽广,年轮明显可见;导管多散在;
髓部为大型薄壁细胞,有的中央呈
空洞状。见图 1。
2.1.2 粉末特征 粉末黄绿色。淀
粉粒多为单粒,类圆形,直径 7~
20 μm,脐点点状;可见复粒淀粉
粒,由 2~5个单粒组成。草酸钙针
晶常见,多散在,长可达 200 μm。
草酸钙方晶散在或存于薄壁细胞
中,长 17~45 μm。韧皮纤维成束,
壁薄,胞腔大;木纤维常单个散在,
多一端梭型而另一端平截,壁厚,
沟纹明显。石细胞单个或数个相
连,长椭圆形、类圆形、方形等,长
40~180 μm,孔沟明显。导管主为
螺纹导管,亦可见具缘纹孔导管,
直径 20~65 μm。气孔平轴式,保卫
细胞弯月形,较窄。叶表皮细胞具
辐射状的角质层纹理。木薄壁细胞
近长方形,壁较厚,纹孔、沟纹明
显。见图 2。
2.2 薄层鉴别 称取白马骨粗粉
2 g,置锥形瓶中,加甲醇 20 ml,密
塞,超声提取 120 min,滤过,滤液
浓缩至干燥,用 2 ml甲醇溶解,取
上清液,作为供试品溶液。取对照
药材 2 g,同法制成对照药材溶液。
另取齐墩果酸对照品,加甲醇制成
每 1 ml含 1 mg的对照品溶液。吸
取上述溶液各 10 μl,分别于同一
层析薄层硅胶 G板点样,以环己
烷∶乙酸乙酯∶丙酮(4∶1∶2)为展开
剂,展开,取出,晾干,并喷以 10%
硫酸乙醇试液,105 ℃加热至斑点
显色清晰。结果表明,供试品色谱
中,在与对照药材色谱相应的位置
上显相同颜色的斑点。见图 3。
2.3 浸出物测定 根据 2010 版
《中华人民共和国药典》附录 XA
浸出物测定法[7]要求,取白马骨
药材粗粉 4 g,精密称定,置于锥形
瓶中,精密加水、50%乙醇或 95%
乙醇 100 ml,密塞,冷浸,前 6 h 内
时时振摇,再静置 18 h,用干燥滤
器迅速滤过,精密量取续滤液 20 ml,
置已干燥至恒重的蒸发皿中,在水
浴上蒸干后,于 105 ℃干燥 3 h,置
干燥器中冷却 30 min,迅速精密称
定重量。分别计算出冷水浸出物、
50%乙醇浸出物及 95%乙醇浸出
物的含量。结果见表 1。
1 木栓层 2 栓内层 3 石细胞环带
4 韧皮部 5 导管 6 木质部 7 髓部
图 1 白马骨茎横切面显微图
图 2 白马骨粉末显微图
1 BMG-1 2 BMG-2 3 BMG-3 4 BMG-4 5 BMG-5 6 BMG-6
7 BMG-7 8 BMG-8 9对照药材 10齐墩果酸
图 3 白马骨样品 TLC图(自然光)
·74· 474
(总 )广西中医药 2014年 12月第 37卷第 6期
取白马骨药材粗粉 4 g,精密
称定,置于锥形瓶中,精密加水
100 ml,密塞,称定重量,静置 1 h
后,连接回流冷凝管,加热至沸腾,
并保持微沸 1 h。放冷后,取下锥形
瓶,密塞,再称定重量,用水补足减
失的重量,摇匀,用干燥滤器滤过。
精密量取滤液 25 ml,置已干燥至
恒重的蒸发皿中,在水浴上蒸干后,
于 105 ℃干燥 3 h,置干燥器中冷却
30 min,迅速精密称定重量。计算出
热水浸出物的含量。结果见表 1。
表 1 白马骨浸出物的测定结果
样品 冷水浸出物含量(%) 热水浸出物含量(%) 50%乙醇浸出物含量(%) 95%乙醇浸出物含量(%)
BMG-1 16.26 18.27 11.09 13.11
BMG-2 17.85 26.09 15.75 16.49
BMG-3 14.40 16.73 10.96 12.64
BMG-4 21.50 27.59 17.71 19.07
BMG-5 17.42 21.24 14.77 14.31
BMG-6 22.49 29.23 18.69 20.38
BMG-7 20.49 26.11 16.53 18.84
BMG-8 17.69 25.20 15.21 16.19
平均值 18.51 23.81 15.09 16.38
由表 1结果可知,8批样品的
冷水浸出物含量均在 14.0 %以
上,平均值为 18.51%;热水浸出物
含量均在 16.5 %以上,平均值为
23.81%;50%乙醇浸出物含量均在
10.5%以上,平均值为 15.09%;95%
乙醇浸出物含量均在 12.5%以上,
平均值为 16.38%。其中以热水浸
出物含量最高。
2.4 水分测定 根据 2010 年版
《中华人民共和国药典》附录 IX H
水分测定法中第一法(烘干法)[7]
要求,取白马骨药材粗粉 4 g,平铺
于干燥至恒重的扁形称量瓶中,厚
度不超过 10 mm,精密称定,打开
瓶盖在 105 ℃干燥 5 h,将瓶盖盖
好,移至干燥器中,冷却 30 min,精
密称定,再在上述温度干燥 1 h,冷
却,称重,至连续两次称重的差异
不超过 5 mg为止。根据减失的重
量,计算样品中的含水量。结果见
表 2。
2.5 总灰分测定 根据 2010 版
《中华人民共和国药典》附录 X A
灰分测定法要求[7],将白马骨药材
粉碎,使能通过二号筛,混合均匀
后,取粗粉 3 g,置炽灼至恒重的坩
埚中,称定重量(精确至 0.01 g),缓
缓炽热,注意避免燃烧,至完全炭
化时,逐渐升高温度至 500~600 ℃,
使完全炭化并至恒重。根据残渣重
量,计算供试品中总灰分的含量。
结果见表 2。
2.6 酸不溶性灰分测定 取 2.5
项所得的灰分,在坩埚中小心加入
10%稀盐酸约 10 ml,用表面皿覆
盖坩埚,置水浴上加热 10 min,表
面皿用热水 5 ml冲洗,洗液并入
坩埚中,用无灰滤纸滤过,坩埚内
的残渣用水洗于滤纸上,并洗涤至
洗液不显氯化物反应为止。滤渣连
同滤纸移至同一坩埚中,干燥,炽
灼至恒重。根据残渣重量,计算供
试品中酸不溶性灰分的含量。结果
见表 2。
表 2 白马骨样品含水量及总灰分、酸不溶性灰分测定结果
项 目 BMG-1 BMG-2 BMG-3 BMG-4 BMG-5 BMG-6 BMG-7 BMG-8 平均值
水分含量(%) 9.49 9.94 9.84 10.06 9.56 9.44 9.37 9.32 9.63
总灰分含量(%) 4.20 5.18 5.69 5.78 5.44 3.93 4.22 4.57 4.88
酸不溶性灰分含量(%) 1.27 1.37 1.40 1.59 1.27 1.07 1.25 1.14 1.29
由表 2结果可知,8批样品的
水分含量均在 10.5%以下,平均值
为 9.63%;总灰分含量均在 6.0%以
下,平均值为 4.88%;酸不溶性灰
分含量均在 1.6%以下,平均值为
1.29%。
3 讨 论
3.1 显微特征显示,白马骨茎横
·75·475
(总 ) 广西中医药 2014年 12月第 37卷第 6期
切面栓内层明显,可见石细胞散
在。中柱外围有石细胞组成的环
带,韧皮部有的薄壁细胞内含草酸
钙针晶束。粉末含单粒或复粒淀粉
粒,草酸钙针晶常见,草酸钙方晶
散在或存于薄壁细胞中。以上特征
可作为白马骨的鉴别依据。
3.2 检查项结果表明,白马骨药材
的水分含量、总灰分含量、酸不溶性
灰分含量、水溶性浸出物及醇溶性
浸出物含量等检查项结果均符合
2010年版《中华人民共和国药典》
相关测定法的要求。从 8批白马骨
药材的测定结果得出,干燥白马骨
药材的水分含量不超过 10.5%;总
灰分的含量不超过 6.0%;酸不溶
性灰分含量不超过 1.6%;冷水浸
出物含量不低于 14.0%;热水浸出
物含量不低于 16.5%;50%乙醇溶
性浸出物含量不低于 10.5%;95%
乙醇浸出物含量不低于 12.5%;以
热水浸出物含量最高。
3.3 薄层鉴别实验结果表明,白
马骨药材供试品色谱中,在与对照
品齐墩果酸色谱相应的位置上,显
相同颜色的紫红色斑点,专属性
良好。
参考文献
[1]中国科学院中国植物志编辑委员会.
中国植物志:第 71 卷[M].北京:科
学技术出版社,1999:160.
[2]江苏新医学院. 中药大辞典[M].上
海:上海人民出版社,1977:697-698.
[3]苏洁寒. 复方六月雪对急性化学性
肝损伤的保护作用[J].广西医科大
学学报,2003,20(4):497-499.
[4]刘敏,邓兆群,屈雪莉,等. 六月雪的
抑菌作用 [J]. 武汉大学学报,
2002,23(2):167-168.
[5]韦金育,李延,韦涛,等. 50 种广西常
用中草药、壮药抗肿瘤作用的筛选
研究 [J]. 广西中医学院学报,
2003,6(4):3-7.
[6]雷铁池,朱文元,夏明玉,等. 中药对
黑素影响的研究Ⅰ. 82味中药乙醇
提取物对酪氨酸酶活性的抑制作用
[J].中草药,1999,30(5):336-339.
[7]国家药典委员会. 中华人民共和国
药典[S].一部. 北京: 化学工业出版
社,2010: 附录 52-53,62.
(2014-10-23 收稿/编辑 陈明伟)
2014年 11月 21日,第五次广西中西医结合活血化瘀研究、心血管病研究学术大会暨全国名老中医传承工
作室继续教育专题研讨会在广西南宁市召开。会议旨在交流广西中西医结合心血管病和活血化瘀研究学术成
果及经验,促进学术繁荣发展,进一步传承和发扬全国名老中医的学术思想和经验。会议由广西中西医结合学
会活血化瘀专业委员会、心血管病专业委员会主办,广西中医药大学附属瑞康医院、广西中医药大学第一附属
医院、《广西中医药》编辑部承办。
广西中医药大学附属瑞康医院院长梁健教授、广西中西医结合学会原秘书长李方教授、《广西中医药》编辑
部主任蓝毓营教授莅临大会,参会代表共 120多名。大会上,首先由广西中西医结合学会心血管病专业委员会
主任委员、全国名老中医方显明教授代表上届心血管病专业委员会进行工作总结;其次,参会代表进行了学术
论文交流,内容涉及活血化瘀法在临床各科的应用、心血管疾病基础和临床研究、活血化瘀方药使用指南的解
读、急性心肌梗死中西医结合诊疗专家共识的解读、慢性心衰中医诊疗专家共识的解读等;此外,大会还对全国
名老中医方显明教授、蒙定水教授治疗心血管疾病的学术经验进行了专题报道;最后,广西中西医结合学会进
行了第二届心血管病专业委员会换届选举,方显明教授再次当选为主任委员,他表示,一定会与新一届委员会
成员为促进广西中西医结合心血管病研究的学术繁荣而共同努力。
(广西中医药大学附属瑞康医院 王强、杨夏巍报道)
第五次广西中西医结合活血化瘀研究、
心血管病研究学术大会暨全国名老中医
传承工作室继续教育专题研讨会在南宁召开
·76· 476