全 文 :第 27卷第 5期 丽水学院学报 2005年 10月
Vol.27 No.5 JOURNAL OF LISHUI UN IVERSITY Oct.2005
槲蕨根茎黄酮类物质提取条件的优化
沈秋仙
(丽水学院 化学与生命科学学院 ,浙江 丽水 323000)
摘要:用乙醇提取法 ,研究了乙醇的浓度 、回流的时间 、提取的温度 、提取剂的用量 、提取次数和粉
碎程度对槲蕨根茎中黄酮类化合物提取率的影响 。试验结果表明:烘干粉碎的槲蕨根茎用 60%的乙
醇 、在 75℃恒温水浴锅上回流时间为 2h 提取效果最佳。
关键词:槲蕨根茎;黄酮类物质;提取;优化
中图分类号:O629.9 文献标识码:A 文章编号:1008-6749(2005)05-0064-03
Optimization of Extracting Condition of Flavonoids from Rhizoma of
Drynaria Rhizoma Drynariae
Shen Qiuxian
(College of Chemistry and Life Science , Lishui University , Lishui Zhejiang 323000 , China)
Abstract:In this paper we studied the affect factor of alcohol concentration ,distill time , temperature ,dosage of
solvent , times and size about alcohol ex t racting:The results indicate:optimization technics is that alcohol con-
centration is 60% and temperature is 75℃ and dist ill time is 2h 。
Key words:rhizoma of drynaria rhizoma drynariae;flavonoids;ex tracting;optimization
现代医学研究表明 ,黄酮类物质具有消炎 、消肿 、降低心肌耗氧 、抗心律 、软化血管 、降血糖 、降血脂 、抗氧化 、消除抗体
内自由基 、抗衰老等多种功能[ 1] 。槲蕨属水龙骨科植物又名骨碎补 , 其药用部分为槲蕨根茎 , 是《中国药典》收载骨碎补正
品之一 ,是骨碎补商品的主流品种 , 有补肾强骨 、续伤止痛等功效 , 用于肾虚腰痛 、耳鸣耳聋 、筋骨伤折等症的治疗 , 其活性
成分为以柚皮甙为主的二氢黄酮类化合物[ 2] 。有关文献报道了从凤凰竹叶 、蕨菜 、白刺种子等多种药用植物中提取黄酮类
物质[ 3 ~ 5] , 有关槲蕨根茎黄酮类物质提取方法迄今未见文献报道。本文对槲蕨根茎中黄酮类化合物的提取方法进行了研
究 ,为槲蕨根茎的质量评价及更深入地开发利用提供理论依据。
1 实验部分
1.1 药品和仪器
新鲜槲蕨根茎采自丽水万象山;亚硝酸钠 , 分析纯;无水氯化铝 ,分析纯;无水乙醇 ,分析纯。 722 分光光度计 , 上海精密
科学仪器有限公司;HHS 型恒温水浴锅 , 上海博迅实业有限公司医疗设备厂;BS 电子天平 , 北京赛多利斯天平有限公司。
收稿日期:2005-04-21
项目项目:丽水学院重点课题资助项目(KZ05008)
作者简介:沈秋仙(1964- ), 女 ,浙江兰溪人 , 副教授。
1.2 实验方法
将新鲜槲蕨根茎去杂处理 、清水漂洗并沥干水分 , 60℃±1℃鼓风烘干粉碎。称取 0.5g 的槲蕨根茎 ,加入乙醇溶液 ,在
恒温水浴锅上回流一定时间 ,趁热过滤 , 将提取液浓缩 ,用 60%的乙醇溶液定容至 25ml。 量取 1.0ml定容后的提取液置于
25ml容量瓶中 , 加入 1.0ml5%NaNO2 溶液 , 2.0ml1%AlCl3 溶液进行显色反应[ 6] , 用 60%乙醇溶液稀至刻度 , 10min 后在
420nm 波长测吸光度 A[ 7] 。
2 结果与分析
从槲蕨根茎中浸取黄酮类化合物的方法 ,目前主要有以下几种:(1)水提取法;(2)乙醇提取法;(3)其它有机溶剂提取
法(如甲醇 、丙酮)[ 1] 。水作为提取溶剂具有来源广 ,生产成本低 ,无环境污染等优点 ,但是采用水提取时 ,提取液杂质含量
较高 , 如无机盐 、蛋白质 、糖和淀粉等 , 给进一步分离带来许多困难。有机溶剂甲醇 、丙酮 , 由于它们毒性比较大 , 使用受到
了限制。本实验用乙醇提法 ,对影响提取率的主要因素如乙醇的浓度 、回流的时间 、提取的温度和提取剂的用量等进行研
究。
2.1 乙醇浓度对提取率的影响
称取 0.5g 烘干粉碎的槲蕨根茎置于 50 ml的烧瓶中 , 分别加入 25.0 ml 的 40%、50%、60%、70%、80%、90%的乙醇 ,
在 75℃恒温水浴锅上回流 2h , 提取液按 1.2 实验方法操作 ,结果如图 1。
试验结果表明:槲蕨根茎用浓度为 60%的乙醇回流时所测得的吸光度最高(即提取效果最好)。
2.2 提取的温度对提取率的影响
称取 0.5g 烘干粉碎的槲蕨根茎置于 50 ml的烧瓶中 , 分别加入 25.0 ml 60%乙醇 , 在 45℃、55℃、65℃、75℃、85℃、
95℃恒温水浴锅上回流 2.0h ,提取液按 1.2实验方法操作 ,结果如图 2。
试验结果表明:槲蕨根茎在 75℃恒温水浴锅上回流时所测得的吸光度最高(即提取效果最好), 往后随着温度的升高 ,
吸光度反而减少 ,这可能是高温破坏了某些黄酮类化合物。
2.3 回流时间对提取率的影响
称取 0.5g 烘干粉碎的槲蕨根茎置于 50 ml的烧瓶中 , 加入 25.0 ml 60%乙醇 , 在 75℃恒温水浴锅上分别回流 0.5h 、
1.0h 、1.5h 、2.0h 、2.5h、3.0h ,提取液按 1.2 实验方法操作 , 结果如图 3。
试验结果表明:回流时间为 2.0h 提取效果最好 ,往后随着时间的增加 ,吸光度反而减少 ,这可能是回流时间过长 , 部分
乙醇挥发溶液浓度变小 ,而导致沸点逐渐升高有些黄酮类化合物被破坏。
2.4 提取剂的用量对提取率的影响
称取 1.0g 烘干粉碎的槲蕨根茎置于 50 ml的烧瓶中 ,分别加入 60%乙醇 10.0 ml、15.0 ml 、20.0 ml、25 .0ml、30.0 ml 、
35.0 ml在 75℃恒温水浴锅上 2.0h , 提取液按 1.2 实验方法操作 ,结果如图 4。
试验结果表明:1.0g烘干粉碎的槲蕨根茎提取剂的用量为 25.0ml 、30.0 ml、35.0 ml时其提取效果相当 ,从经济的角度
考虑 ,提取剂的用量为 25.0ml最合适。
65第 5期 沈秋仙:槲蕨根茎黄酮类物质提取条件的优化
2.5 提取次数的影响
称取 3.0g 槲蕨根茎 ,分 3次加入 60%乙醇进行提取 ,依次为 30.00 ml、25.00ml、20.00 ml ,在 75℃恒温水浴锅上回流
2.0h ,提出液过滤 、定容 、测定总黄酮的含量。结果表明第 3 次提取的提出液中黄酮含量已较低。结合实际生产的成本 、时
间考虑 ,确定最佳提取次数为 2 次 , 在实际生产中 ,可将第 3次提取液套入下一批生产中。
2.6 槲蕨根茎粉碎程度对提取的影响
从浸取动力学来考虑 ,提取过程是固—液反应 , 属于多相反应的一种。多相反应的特点是仅发生在两相界面上 , 反应
速度随接触表面的增大而加快 ,减小颗粒粒度对提高反应是有利的。但并不是颗粒越细越好 , 如果颗粒过细 , 会增加液体
的粘度 ,对固液分离(过滤)以及将进行的富集过程带来困难。此外 ,从经济的角度看 , 过分磨细显然将增加生产成本。
3 结论
从以上实验结果可以看出:乙醇溶液作为提取剂提取槲蕨根茎中的黄酮类化合物 , 用 60%的乙醇 、在 75℃恒温水浴锅
上回流时间为 2h 提取效果最佳。提取剂的用量太多会造成浪费 , 1.0g 烘干粉碎的槲蕨根茎提取剂的用量为 25 .0ml最合
适。用乙醇提法工艺简单 ,条件容易控制 , 提取率高 ,提取液乙醇可回收再利用 ,所以可将此工艺应用于工业化生产。提取
液可浓缩成膏状物或制成药丸 ,大大提高其药用效果 ,具有良好应用前景。
参考文献
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