全 文 ：2015年第 11期 吉林省教育学院学报 No. 11，2015
第 31 卷 JOUＲNAL OF EDUCATIONAL INSTITUTE OF JILIN PＲOVINCE Vol. 31
(总 407 期) Total No. 407
收稿日期:2015—09—15
作者简介:鲍 群(1981—)，女，江苏邳州人，江苏省徐州医药高等职业学校，讲师，研究方向:药物分析、化工分析。
大叶钩藤的药学实验分析
鲍 群
(江苏省徐州医药高等职业学校，江苏 徐州 221116)
摘要:［目的］对大叶钩藤进行药学实验分析研究。［方法］采集大叶钩藤药材标本，分别采用不同实验方法对叶片主脉及
叶肉组织结构、叶面气孔及表皮细胞形态、大叶钩藤中生物碱、大叶钩藤不同部位有效成分一一进行分析。［结果］大叶钩藤
叶形状鉴别以及显微特征分析中，发现均有明显的形态学规律，能够作为生物药学鉴定资料。大叶钩藤中钩藤碱与异钩藤碱
范围在 0． 02g ～ 5g时具有较好的线性关系。［结论］大叶钩藤的形态较为明显，具有进一步开发利用的价值。
关键词:大叶钩藤;药学;药学实验
DOI:10． 16083 / j． cnki． jeijp． 2015． 11． 044
中图分类号:Ｒ285 文献标识码:A 文章编号:1671—1580(2015)11—0094—02
中医认为，钩藤息风定惊，清热平肝，在中枢神
经等方面具有一定治疗价值。以往对钩藤的药物价
值主要看重其带钩茎枝，对钩藤藤茎、钩的研究较
多。近年来调查分析及化学研究发现其叶片也具有
入药价值，但关注度和开发利用均较低，缺乏系统的
药学研究，造成钩藤药用资源的浪费。本文主要通
过生化学实验对大叶钩藤的药学价值进行研究。
一、资料与方法
(一)材料与研究仪器
钩藤标本来自广东，经福州市药品检验所鉴定
为大叶钩藤。研究所采用仪器有:切片机、生物显微
镜、数码相机、超声波清洗仪、电子天平，以及旋转蒸
发仪、薄层色谱成像系统等。
(二)方法
对大叶钩藤药材标本加以采集，鉴别钩藤叶的
性状;在显微镜下观察大叶钩藤石蜡切片，重点观察
其叶片主脉以及叶肉组织结构;叶面气孔以及表皮
细胞形态则采用表面撕片法进行观察分析;应用生
物碱沉淀反应和硅胶薄层层析色谱等理化鉴别法，
分析和比较大叶钩藤中生物碱;通过用 HPLC 法对
大叶钩藤不同部位有效成分进行测定。
大叶钩藤生物碱含量测定步骤:采用美国戴安
公司的高效液相色谱仪;分别精密称取钩藤碱、异钩
藤碱对照品各 5． 00mg，于 10ml棕色容量瓶中，分别
用流动相溶解、定容，摇匀;分别精确称量大叶钩藤
带钩茎枝粗粉、叶粗粉各一份，并分别在将其浸润在
浓氨水中，加入 20 倍的无水乙醇，过夜后经 2 次超
声提取，过滤杂质并水浴蒸干，用乙醚多次萃取，直
到醚层没有颜色，将其水浴蒸干之后，用流动相溶解
定容于 10ml容量瓶中。分别吸取两溶液，注入色谱
仪，进行测定。
(三)统计学处理
本次研究数据统计学处理软件为 SPSS21． 0，检
验水准为 = 0． 05。
二、结果
(一)大叶钩藤叶相对其他钩藤叶面较大，叶片
表面呈皱缩样，隆起呈浅波状。大叶钩藤完整叶片
展开后为卵形或阔椭圆形，叶革质。叶片长 10 ～
16cm，宽 6 ～ 12cm，叶片由基部到顶端越来越尖。叶
片标本上、下表面分别呈现灰绿色与浅绿色，上表皮
相对较光滑，只是在脉上披黄褐色毛，下表面均披褐
色硬毛且脉上毛较密。气微，味微苦。
显微鉴别下大叶钩藤叶横切面上下表皮各为 1
列细胞，单细胞非腺毛有时可见。叶片上表皮细胞
比下表皮细胞厚，大约是其 2 倍，形状多为方形或扁
方形。其中单细胞非腺毛较多，有 2 － 3 列的栅栏组
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织细胞，第 1 列细胞长约 40mm、直径 5mm，排列紧
密整齐，第 2 － 3 列细胞长 20 ～ 23mm，相对稍短。
在海绵组织上，大叶钩藤具有薄而紧密的特点，通过
观察叶片可见其薄璧细胞中呈现出草酸钙簇晶。叶
片下表面稀疏分布着平轴式气孔，气孔横向长 12． 5
～ 17． 5mm、纵向长 20 ～ 27． 5mm。下表皮细胞在垂
周壁方面呈稍弯曲状，表皮上单细胞数量较多，非腺
毛平直细长，长 400 ～ 420μm，基部直径 15 ～ 20μm。
上表皮细胞整体呈方形，垂周壁将近平直。
(二)生物碱沉淀反应显示，与碘化铋钾试液、
碘化汞钾试液、硅钨酸试液混合试验时，不论是钩藤
对照药材还是大叶钩藤叶样本都能与这些溶液产生
沉淀，且在量上较多，沉淀过程中有明显的浑浊现
象。薄层层析色谱分析结果显示，对照钩藤药材出
现 5 个斑点，大叶钩藤有 2 个斑点与对照组药材的
比移值相同，这就说明与钩藤对照药材相比，大叶钩
藤具有相同的化学成分，且至少有两种。
(三)通过美国戴安公司的高效液相色谱仪测
定大叶钩藤生物碱含量。色谱条件:依利特 Hyper-
sil ODS C18 柱(4． 6 mm × 200mm，5μm);柱温:室
温;流动相:甲醇一水(含 0． 5%三乙胺，冰乙酸调
pH6． 3)= 63:37，流速:0． 8ml /min;检测波长:
245nm;进样量:5． 0μl。
吸取大叶钩藤(带钩茎枝)样品溶液以及大叶
钩藤(叶)样品溶液各 5． 0μl，并将其分别注入色谱
仪后钩藤碱、异钩藤碱与其相邻峰达到良好的分离。
(见图 1、图 2)
图 1 大叶钩藤叶 HPLC图谱
1．钩藤碱 2．异钩藤碱
图 2 大叶钩藤带钩茎枝 HPLC图谱
1．钩藤碱 2．异钩藤碱
大叶钩藤中的钩藤碱和异钩藤碱范围在 0． 02g
～ 5g时具有较好线性关系;其中大叶钩藤叶、大叶
钩藤带钩茎枝中钩藤碱含量分别 0． 016%、
0． 015%，大叶钩藤叶、大叶钩藤带钩茎枝中异钩藤
碱含量含量分别为 0． 006%、0． 004%;钩藤碱平均
回收率为 98． 5%，异钩藤碱平均回收率为 99． 1%。
三、讨论
钩藤作为一种中药入药时，带钩茎枝是其传统
药用部位，去叶是钩藤传统的采收加工方法，通常会
对带钩的枝茎进行修剪，长度大约 3cm，其他部位则
被认为是废料而丢弃。不过当前的研究均表明，大
叶钩藤的叶片在总生物碱含量方面接近带钩茎枝，
且在化学成分上大叶钩藤叶与钩相似。且钩藤带钩
茎枝在产量上较少，而钩藤叶的资源产量却远远高
出。作为一种药用资源，钩藤叶在来源上更加丰富，
在综合利用上具有较大潜力，所以对钩藤叶药用价
值的研究是十分必要的。
本实验通过对大叶钩藤药材性状、显微结构、理
化鉴别等观察和分析发现，与其他钩藤叶面面积相
比，大叶钩藤明显较大，且叶片中呈现出较多的单细
胞非腺毛。其中会有 2 ～ 3 列会出现栅栏组织细胞，
叶片薄璧细胞中能够明显发现草酸钙簇晶，气孔为
平轴式。在大叶钩藤中，存在多种生物碱，钩藤碱和
异钩藤碱是其中主要的有效成分。通过 HPLC 法对
大叶钩藤钩藤碱或异钩藤碱进行测定后发现，大叶
钩藤中的钩藤碱和异钩藤碱范围在 0． 02g ～ 5g 时具
有较好的线性关系;其中大叶钩藤叶、大叶钩藤带钩
茎枝中钩藤碱含量为 0． 016%、0． 015%，大叶钩藤
叶、大叶钩藤带钩茎枝中异钩藤碱含量分别为
0． 006%、0． 004%。
随着中药研究的越来越深入，人们对钩藤的药
学及药理学认识越来越多。从整个研究结果来看，
形态学规律在大叶钩藤性状及微特征方面比较明
显，具有进一步开发利用的价值，应当物尽其用。
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