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4-松油醇型白千层芳香油树种优良单株的选择



全 文 :收稿日期:2014-02-13 接受日期:2014-07-03
基金项目:广西林科院基本科研业务费(200905);广西自然科学
基金(2013GXNSFBA019094)
* 通讯作者 Tel:86-771-2319863;E-mail:liangxl1990@ sina. com
天然产物研究与开发 Nat Prod Res Dev 2014,26:1977-1981,1991
文章编号:1001-6880(2014)12-1977-06
4-松油醇型白千层芳香油树种优良单株的选择
梁忠云1,2* ,李桂珍1,2,常新民1,陈海燕1,文彩琳1
1广西林业科学研究院;2 国家林业局中南速生材繁育实验室,南宁 530002
摘 要:根据植物选育的方法,白千层加工的特点和精油产品应用要求,开展了 4-松油醇型白千层优良单株筛
选工作。通过初选,扦插繁殖,苗期跟踪,测定不同生长阶段枝叶生物量、含油率及精油质量选出优良单株 7 株,
其一年生的单株含油量为 11. 30 g ~ 26. 59 g,精油中 4-松油醇含量为 38. 04% ~ 40. 27%,1,8-桉叶素含量为
1. 09% ~ 2. 21%,在精油年均产量和质量都优于国内选择的优良单株。
关键词:4-松油醇;白千层;优良单株;白千层油
中图分类号:TQ65;S789. 4 文献标识码:A
Selection of Superior Individual from Terpinen-4-ol Type Melaleuca
LIANG Zhong-yun1,2* ,LI Gui-zhen1,2,Chang Xin-min1,CHEN Hai-yan1,WEN Cai-lin1
1Guangxi Forestry Research Institute;2Key Laboratory of Central South Fast-growing
Timber Cultivation of Forestry Ministry of China,Guangxi Nanning 530002,China
Abstract:According to breeding methods,product processing and applied requirements,we made a research on superior
individuality selection of Melaleuca of terpinen-4-ol type. By primary selecting,cutting and seedling investigation,seven
superior individuals were selected based on plant weight,yield and quality in different growing stage. Among these,the
essential oil weight was between 11. 30 g and 26. 59 g,the content of terpinen-4-ol was from 38. 04% to 40. 27%,the
content of 1,8-cineole was from 1. 09% to 2. 21% in one year old. These results showed that the selected individuals
were superior to others of domestic species on annual output and quality of Melaleuca oil.
Key words:terpinen-4-ol;Melaleuca;superior individual;Melaleuca oil
白千层芳香油树是桃金娘科(Myrlaceaca)白千
层(Melaleuca)属常绿灌木至小乔木树种,原产于澳
大利亚东部的昆士兰州和新南威尔士的北部,在澳
洲白千层属植物多达 30 多种。20 世纪九十年代
初,由于认识到由澳洲白千层植物枝叶蒸馏而得的
茶树油具有广泛的应用价值和重要的开发前景,我
国开始引进试种并获得成功[1-3]。
白千层油是利用白千层叶子和枝条提取得到的
精油。目前提取白千层有的工艺有水蒸汽蒸馏法,
溶剂提取法和超临界提取法[4],而我国主要采用水
蒸汽蒸馏法,每年加工一次。研究发现白千层有多
种生化类型[5,6],其中 4-松油醇型白千层油(商业上
称茶树油)应用最为广泛,随着茶树油的研究日趋
活跃,对 4-松油醇型白千层油质量的要求也越来越
高。要想获得较大的经济效益,选择低含量的 1,8-
桉叶素和富含 4-松油醇的白千层油已经是迫在眉
睫。精油的品质与植株原料有关。广西林科院通过
对引进改良品种的研究发现个体植株精油差异较
大[5,7],只有通过筛选优良白千层树种进行繁殖栽
培才能确保茶树油的品质。吴丽君等人[8]筛选优
良单株以枝叶生物量,得油率,精油产品质量为指
标,但这些指标未与实际生产,产品应用要求联系起
来。本实验根据植物选育的方法,白千层加工的特
点和精油产品应用要求,开展了 4-松油醇型白千层
优良单株筛选工作,旨在为白千层的繁殖提供优质
的材料。
1 材料与方法
1. 1 初选单株
1. 1. 1 初选
通过对在钦州林科所种植的 4 年以上未经砍伐
的白千层进行目测,选取树冠较大,枝叶浓密的单
株。采集目测所选单株的叶子,用手揉搓后闻其味
道,选定无桉叶素特殊凉味的植株作标识;采集标记
DOI:10.16333/j.1001-6880.2014.12.016
植株的去除大于 1 cm的枝条及枯黄枝叶后的枝叶,
用塑料袋包装好,当天运回实验室,称重。
1. 1. 2 测定
1. 1. 2. 1 白千层含油率的测定
参照《中华人民共和国药典》2010 年版一部附
录 XD中挥发油测定法甲法[9]中的水蒸汽蒸馏法来
测定枝叶得油率。将采集的枝叶切成 1 ~ 2 cm的长
度,装入 2000 mL的圆底烧瓶,装上挥发油测定器和
冷凝管,蒸馏,到挥发油油层不再增加时,停止加热
后冷却至室温,分离出精油,称重。
1. 1. 2. 2 白千层油化学成分的定性定量分析
参照气-质联用的定性分析结果,并按照
ISO4730:2004 标准确定白千层油主要的化学成分;
用气相色谱法进行定量分析,确定各组分的含
量[10]。
GC定量分析条件:Agilent 7890A 气相色谱仪。
弹性石英毛细管柱 AT35(60 m × 0. 25 mm,0. 25
μm),载气为氮气,程序升温是 70 ℃保持 1 min,以
5 ℃ /min升至 150 ℃,再以 10 ℃ /min升至 220 ℃,
保持 5 min,进样口 250 ℃,汽化室 250 ℃,分流比
1:50,进样量 0. 3 μL。
1. 1. 3 选定初选优株
按上述方法测定,选取含油率大于 1. 0%,精油
中 1,8-桉叶素含量 < 3. 0%,4-松油醇含量 > 38. 0%
的植株为初选优株。
1. 2 繁殖与栽培
初选优株平茬处理,并进行抚育。待植株萌芽
条木质化时剪下,浸蘸 ABT生根粉溶液后扦插到已
浇透水的红心土基质中,定期管护扦插成活的幼苗,
移栽,一年施复合肥 2 次,每次每公顷施肥 1050 kg,
并进行抚育。
1. 3 测定
1. 3. 1 生物量的测定
测定移栽 6 个月,12 个月,16 个月树高,地径,
冠幅,称量移栽 6 个月,12 个月整株和去除大于 1
cm的枝条及枯黄枝叶后的枝叶质量。
1. 3. 2 含油率和成分测定
测定移栽 6 个月,12 个月,16 个月去除大于 1
cm的枝条及枯黄枝叶后的枝叶含油率和精油成分,
测定方法与 1. 1. 2 相同。
1. 4 确定优株
确定 1 年生去除大于 1 cm 的枝条及枯黄枝叶
后的枝叶含油大于 10 g,精油中 1,8-桉叶素含量 <
3. 0%,4-松油醇含量 > 38. 0%的植株为优良单株。
2 结果与讨论
2. 1 嗅辨法初步区分白千层的不同生化类型
在选取的白千层林,有桉叶素型、4-松油醇型、
桉叶素-松油醇型三种不同生化类型[5]。桉叶素有
特殊的凉味,用嗅辨法能初步将桉叶素型与 4-松油
醇型的植株区分开,从而减少测定的工作量。嗅辨
法成为筛选工作的重要环节。
2. 2 初选单株的测定
同一植物(如互叶白千层)精油主成分、出油
率、枝叶的生物量差异较大。通常影响茶树油产量
的基本因素是生物量和得油率,而茶树油的质量主
要由其所含的 4-松油醇和 1,8-桉叶油素的浓度决
定,前者是茶树油主要的活性成分,后者带有刺激性
气味,影响油的香气。随着茶树油的研究与应用,对
茶树油质量的要求越来越高,人们对 1,8-桉叶素的
含量做出了限定,制定的中国行业标准要求小于
5%,国际行业对互叶白千层油的化妆品要求为小于
3. 5%[11],甚至有学者提出 1,8-桉叶素在 2%左右
较好[12]。因此,选取优良的 4-松油醇型白千层树种
进行繁殖栽培才能确保茶树油的品质。从测定的
103 株 4-松油醇型白千层可以看出,白千层单株得
油率和成分差异较大,得油率在 1. 0% ~ 2. 2%之
间,精油中 4-松油醇含量在 33. 63% ~ 42. 70%之
间,1,8-桉叶素含量在 0. 44% ~9. 55%之间,质量达
到国际标准 ISO4730:2004 的要求,其中含油率 >
1. 0%,精油中 1,8-桉叶素含量 < 3. 0%,4-松油醇含
量 > 38. 0%的植株有 34 株(见表 1)。不同的种源
和单株会造成精油质量不一,个体差异成为选优的
基础,选择良好的繁殖材料是保证精油质量的关键。
表 1 初选优株得油率及其成分含量
Table 1 yield and chemical composition of essential oil of the
selected superior individual
样号
No.
得油率
Yield
(%)
4-松油醇
Terpinen-4-ol
(%)
1,8-桉叶素
1,8-Cineole
(%)
1 1. 38 40. 17 2. 14
3 1. 58 40. 13 1. 79
4 1. 39 41. 50 1. 63
7 1. 42 42. 50 1. 89
8 1. 65 40. 98 0. 47
21 1. 76 42. 37 1. 57
8791 天然产物研究与开发 Vol. 26
22 1. 23 39. 41 1. 51
28 1. 52 40. 49 1. 83
34 1. 19 39. 16 1. 06
35 1. 23 38. 97 1. 44
97 1. 73 41. 19 1. 65
98 1. 61 40. 81 0. 64
99 1. 66 41. 27 1. 10
100 1. 70 38. 72 2. 10
101 1. 60 39. 82 1. 39
102 1. 24 40. 49 0. 97
103 1. 44 40. 41 1. 62
104 1. 48 42. 64 1. 78
105 1. 67 40. 59 1. 03
106 1. 66 42. 29 0. 48
107 1. 76 40. 96 1. 42
108 1. 21 41. 87 0. 44
110 1. 07 42. 70 1. 28
111 1. 74 39. 89 1. 60
112 1. 35 40. 03 1. 00
113 1. 83 40. 16 2. 38
114 1. 69 42. 57 1. 80
115 1. 44 40. 31 2. 18
117 1. 27 39. 51 2. 94
141 1. 18 42. 26 2. 11
143 1. 07 42. 26 2. 05
149 1. 35 41. 00 2. 42
174 1. 45 42. 55 1. 47
180 1. 34 39. 21 2. 15
2. 3 初选优株扦插苗的测定
白千层种植 1 年就可以进行茶树油生产,通常
是一年提取精油 1 ~ 2 次,本实验从 6 个月开始跟踪
生长情况。从表 2、表 4 可以看出,初选优株扦插苗
移栽 6 个月和 16 个月后,得油率除了 102 #
(0. 95%)小于 1. 0% 以外,其他稳定在 1. 03% ~
1. 50%,4-松油醇含量稳定在 38. 02% ~ 43. 91%,1,
8-桉叶素含量稳定在 0. 40% ~ 2. 85%,得油率和精
油质量均达到选优标准(得油率大于 1. 0%,4-松油
醇含量大于 38%,1,8-桉叶素含量小于 3%),与初
选优株母株相比也较稳定,且移栽 16 个月后的精油
质量明显优于移栽 6 个月后的,这可能与植株种植
时间长短有关,种植至少一年后精油质量才相对稳
定;而从表 3 可以看出,初选优株扦插苗移栽 12 个
月后,得油率在 0. 81% ~ 1. 46%,4-松油醇含量在
36. 23% ~ 40. 27%,1,8-桉叶素含量在 0. 37% ~
2. 59%,得油率和精油质量均有部分植株低于选优
标准,与初选优株母株相比波动也较大,这可能与采
收季节有关[13],移栽 12 个月后正好是雨季,还是抽
芽时节,嫩枝叶含油率和成分都会相对偏低,同时也
说明植株抽芽时节不适合采收枝叶进行生产。
从表 2、表 3、表 4 测定的树高,地径、冠幅可以
看出,植株一直在生长,移栽 12 个月后植株重为
0. 51 kg ~ 2. 08 kg,可用枝叶量为 0. 38 kg ~ 1. 82 kg,
单株得油量为 4. 31 g ~ 26. 59 g。综合来看,28、34、
35、104、107、111、113 号更有优势,一年生单株得油
量大于 10 g,得油率大于 1. 0%,精油中 4-松油醇含
量大于 38. 0%,1,8-桉叶素小于 3. 0%,达到实验选
优标准,确定为优良单株,结果见表 5。
表 2 移栽 6 个月植株生物量及其成分
Table 2 Biomass and chemical composition of essential oil of superior individual transplanted for six months
样号
No.
树高
Height
(cm)
地径
Diameter
(cm)
冠幅
Crown breadth
(cm × cm)
植株重
Weight of tree
(kg)
得油率
Oil yield
(%)
4-松油醇
Terpinen-4-ol
(%)
1,8-桉叶素
1,8-Cineole
(%)
1 122 1. 28 45 × 46 0. 20 1. 37 39. 59 2. 45
22 114 1. 13 73 × 74 0. 35 1. 26 39. 46 1. 70
28 154 1. 80 77 × 77 0. 58 1. 34 39. 74 1. 85
34 187 1. 73 106 × 98 0. 59 1. 55 40. 39 1. 42
35 136 1. 29 72 × 67 0. 53 1. 27 40. 24 1. 62
99 130 1. 51 65 × 70 0. 48 1. 48 40. 31 1. 55
102 108 1. 87 72 × 71 0. 39 1. 17 38. 10 1. 21
104 153 1. 40 69 × 66 0. 51 1. 24 38. 57 2. 01
107 171 1. 93 69 × 69 0. 72 1. 23 38. 42 1. 47
9791Vol. 26 梁忠云等:4-松油醇型白千层芳香油树种优良单株的选择
108 131 1. 80 75 × 75 0. 42 1. 11 38. 34 0. 40
111 129 1. 81 78 × 72 0. 59 1. 59 38. 06 1. 95
113 157 1. 90 82 × 81 0. 66 1. 16 38. 20 2. 70
141 87 1. 30 65 × 67 0. 19 1. 53 39. 98 2. 57
143 138 1. 45 63 × 62 0. 50 1. 25 38. 02 2. 06
174 108 1. 36 56 × 52 0. 24 1. 52 38. 86 2. 00
表 3 移栽 12 个月植株生物量及其成分
Table 3 Biomass and chemical composition of essential oil of superior individual transplanted for twelve months
样号
No.
树高
Height
(cm)
地径
Diameter
(cm)
冠幅
Crown
breadth
(cm × cm)
植株重
Weight
of tree
(kg)
枝叶重
Weight
of leaves
(kg)
得油率
oil yield
(%)
得油量
oil weight
(g)
4-松油醇
Terpinen-
4-ol
(%)
1,8-桉叶素
1,8-Cineole
(%)
1 121 1. 21 60 × 54 0. 51 0. 38 1. 15 4. 31 38. 12 2. 59
22 135 2. 05 99 × 78 1. 08 0. 94 0. 97 9. 07 36. 23 1. 32
28 189 2. 83 92 × 81 1. 75 1. 12 1. 03 11. 54 38. 04 1. 67
34 257 3. 03 103 × 92 1. 98 1. 82 1. 46 26. 59 39. 78 1. 09
35 159 2. 08 79 × 67 1. 11 0. 93 1. 22 11. 30 39. 52 1. 25
99 180 2. 41 97 × 77 0. 83 0. 69 1. 22 8. 43 38. 65 1. 32
102 188 2. 83 104 × 91 1. 59 1. 30 0. 81 10. 48 38. 16 1. 06
104 192 2. 42 83 × 74 1. 38 1. 06 1. 32 13. 94 40. 27 1. 78
107 207 2. 54 79 × 68 1. 60 1. 15 1. 12 12. 83 38. 25 1. 73
108 186 2. 89 105 × 86 1. 48 1. 11 0. 87 9. 65 37. 58 0. 37
111 188 2. 52 101 × 80 1. 75 1. 44 1. 00 14. 33 38. 45 1. 69
113 211 2. 90 95 × 86 2. 08 1. 51 1. 14 17. 18 38. 25 2. 21
141 126 1. 76 81 × 71 0. 78 0. 68 1. 03 7. 00 36. 51 1. 71
143 172 2. 53 72 × 63 0. 88 0. 66 1. 09 7. 21 39. 66 1. 95
174 123 1. 89 70 × 62 0. 67 0. 56 1. 10 6. 17 37. 11 1. 72
表 4 移栽 16 个月植株生物量及其成分
Table 4 Biomass and chemical composition of essential oil of superior individual transplanted for sixteen months
样号
No.
树高
Height
(cm)
地径
Diameter
(cm)
冠幅
Crown breadth
(cm × cm)
得油率
Oil yield
(%)
4-松油醇
Terpinen-4-ol
(%)
1,8-桉叶素
1,8-Cineole
(%)
1 245 3. 11 91 × 84 1. 36 42. 10 2. 33
22 290 3. 24 125 × 145 1. 17 40. 97 1. 66
28 353 3. 57 102 × 83 1. 17 41. 98 1. 79
34 450 4. 81 128 × 117 1. 37 42. 61 1. 17
35 292 3. 69 106 × 103 1. 37 43. 24 1. 47
102 384 4. 82 119 × 123 0. 95 42. 15 1. 07
104 382 3. 88 111 × 111 1. 37 42. 61 1. 17
105 267 3. 22 93 × 108 1. 38 43. 91 1. 31
107 368 4. 45 109 × 110 1. 37 42. 61 1. 17
108 328 5. 07 142 × 124 1. 03 40. 91 0. 42
0891 天然产物研究与开发 Vol. 26
111 321 4. 91 132 × 98 1. 30 42. 69 1. 86
113 374 4. 23 110 × 105 1. 18 41. 83 2. 85
141 307 3. 28 110 × 93 1. 35 42. 13 2. 25
143 323 3. 76 137 × 107 1. 27 42. 72 2. 08
174 278 3. 27 112 × 102 1. 38 41. 78 1. 86
表 5 确认的优良单株指标
Table 5 Indicators of selected superior individual of Melaleuca
样号
No.
初选优株
Firstly selected
superior individual
12 个月生植株
Individual of twelve months
16 个月生植株
Individual of sixteen months
得油率
Oil yield
(%)
4-松油醇
Terpinen-
4-ol
(%)
1,8-桉叶素
1,8-Cineole
(%)
得油率
Oil yield
(%)
整株得油
Oil weight
(g)
4-松油醇
Terpinen-
4-ol
(%)
1,8-桉叶素
1,8-Cineol
(%)
得油率
Oil yield
(%)
4-松油醇
Terpinen-4-ol
(%)
1,8-桉叶素
1,8-Cineole
(%)
28 1. 52 40. 49 1. 83 1. 03 11. 54 38. 04 1. 67 1. 17 41. 98 1. 79
34 1. 19 39. 16 1. 06 1. 46 26. 59 39. 78 1. 09 1. 37 42. 61 1. 17
35 1. 23 38. 97 1. 44 1. 22 11. 30 39. 52 1. 25 1. 37 43. 24 1. 47
104 1. 48 42. 64 1. 78 1. 32 13. 94 40. 27 1. 78 1. 52 42. 61 1. 91
107 1. 76 40. 96 1. 42 1. 12 12. 83 38. 25 1. 73 1. 39 42. 61 1. 60
111 1. 74 39. 89 1. 60 1. 00 14. 33 38. 45 1. 69 1. 30 42. 69 1. 86
113 1. 83 40. 16 2. 38 1. 14 17. 18 38. 25 2. 21 1. 18 41. 83 2. 85
2. 4 确认的优良单株与目前研究的比较
根据文献[7]报导,推算出白千层单株得油
12. 39 g,而精油中 4-松油醇含量为 35% ~ 40%,1,
8-桉叶素含量为 3. 99%;文献[8]报导,单株年得油
为 2. 69 g ~ 3. 77 g(枝叶小于 0. 3 cm),精油中 4-松
油醇含量为 38% ~ 42%,1,8-桉叶素含量为 3. 76%
~4. 26%(大于 3%);本实验选择的单株年得油为
11. 30 g ~ 26. 58 g(枝叶小于 1. 0 cm),精油中 4-松
油醇含量为 38% ~ 40%,1,8-桉叶素含量为 1. 0%
~2. 2%(小于 3%),所选优良单株精油年均产量和
质量都优于国内的优良单株。
2. 5 香料植物的选优方法
香料植物的选优不能只考虑精油的质量,还应
考虑得油量。从表 1 和表 3 的测定结果看,初选的
1 号,99 号,143 号,174 号的精油质量高,但扦插繁
殖 12 个月的植株得油量均低于 10 g,只有将精油质
量和产量相结合才能选出优良单株。精油产量成为
香料植物选优的重要因素之一。
2. 6 香料植物的选优
香料植物选优是一个复杂而又漫长的过程,它
需要对选择的单株进行不断的跟踪验证。本实验选
择的单株只是初步的选择,是否会在实际生产中发
生变异,精油产品质量改变还有待进一步研究。
3 结论
根据植物选优的方法和白千层芳香油加工的特
点及茶树油应用要求,实验筛选出 4-松油醇型白千
层芳香油树优良单株 7 株,其一年生的单株含油量
为 11. 30 g ~ 26. 59 g,精油中 4-松油醇含量为
38. 04% ~ 40. 27%,1,8-桉叶素含量为 1. 09% ~
2. 21%,单株精油年均产量和质量都优于国内的优
良单株。植物中精油质量和产量是香料植物选优的
重要因素。
致谢:本实验在采样过程中得到了广西钦州林
科所蔡林和梁刚工程师的帮助,在此表示感谢。
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1891Vol. 26 梁忠云等:4-松油醇型白千层芳香油树种优良单株的选择
改变,同时得出无论是食用生鱼片还是熟鱼片均对
人体健康不构成危害,并且得出鱼片中的主成分元
素为 Ge、Se、As、V、Co 和 Mo 元素,可见蒸煮是一种
降低鱼肉中有毒元素的有效途径。
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