全 文 ：Blume, BL)的根 , 具有补肝肾 、强筋骨 、活血通经之功效 [ 12] 。此
外 , NRF还具有水溶性高 、毒副作用极低的特点 , 可有效地改善
损伤神经的功能 、促进周围神经再生 , 显示出该药具有潜在的开
发应用前景 , 为 NRF应用于临床治疗神经损伤 、防治神经退行性
变疾病提供了实验依据。
参考文献:
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收稿日期:2007-11-20;　修订日期:2008-04-03
基金项目:国家中医药管理局“西部 ”重点学科建设资助项目(No.200414)
作者简介:吴红梅(1981-),女(汉族),四川乐至人 ,现为贵阳中医学院在
读硕士研究生 , 学士学位 , 主要从事中药有效部位提取及新剂型研究
工作.
高效液相色谱法测定头花蓼中
没食子酸与槲皮苷的含量
吴红梅1 , 贺祝英 2 , 王祥森 3 , 何顺志1
(1.贵阳中医学院 ,贵州 贵阳　550002;
2.贵阳中医学院附属第一医院 ,贵州 贵阳　550001;
3.西藏墨脱县墨脱镇人民政府 ,西藏 墨脱　860016)
摘要:目的 同时测定头花蓼中没食子酸与槲皮苷的含量。方法 采用高效液相色谱 [ RP-HPLC(DAD)]法 ,梯度洗脱 ,
测定头花蓼中没食子酸与槲皮苷的含量。结果 平均回收率分别为 98.92%, 97.16%(n=5), RSD分别为 2.85%, 1.07%
(n=5)。结论 该方法准确 、简捷 ,可为评价头花蓼质量提供参考。
关键词:头花蓼;　没食子酸;　槲皮苷;　高效液相色谱
中图分类号:R284.1　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2009)01-0018-02
DeterminationofGalicAcidandQuercitrininPolygonumcapitatumbyHPLC
WUHong-mei1 ,HEZhu-ying2 ,WANGXiang-sen3 ,HEShun-zhi1
(1.GuiyangColegeofTCM, Guiyang550002, China;2.TheFirstAfiliatedHospitalofGuiyangColegeof
TraditionalChineseMedicine, Guiyang550001, China;TibetanMotuoCountyMotuoTownGovernment, Motuo,
Tibet860016 , China)
Abstract:ObjectiveToestablishanHPLCmethodfordeterminationofgalicacidandquercitrininPolygonumcapitatum.
MethodsThegalicacidandquercitrininPolygonumcapitatumweredeterminedbyRP-HPLC(DAD)andthegradientelution
modewasappliedinchromatographicseparation.ResultsTheaveragerecoverieswererespectively98.92% and97.16%(n=
5), RSD2.85% andRSD1.07%(n=5)forgalicacidandquercitrin.ConclusionThemethodissimple, accurateandcanbe
usedforthequalitystudyofPolygonumcapitatum.
Keywords:Polygonumcapitatum;　Gallicacid;　Quercitrin;　HPLC
　　头花蓼为蓼科植物头花蓼PolygonumcapitatumBuch.-Han.
exD.Don的干燥全草或地上部分 , 主产于贵州 、云南 、四川 、西
藏 、广西等省区 ,为苗族用药 , 临床用于治疗泌尿系统感染 、血尿 、
湿疹 、肾盂肾炎 、膀胱炎 、尿路结石 、风湿痛 、跌打损伤 、痄腮 、疮
疡 、腹泻和痢疾等 [ 1] 。文献报道 [ 2 , 3]了紫外分光光度法测定不同
产地头花蓼中总黄酮及采用高效液相色谱法测定头花蓼中没食
子酸的含量 , 但同时测定头花蓼药材中槲皮苷和没食子酸含量的
方法尚未见报道。本实验采用高效液相色谱法同时测定头花蓼
药材中槲皮苷和没食子酸的含量 ,以期为头花蓼药材及其制剂的
质量控制提供参考。
1　仪器与材料
Agilent1100型高效液相色谱仪(自动进样品), 二极管阵列
检测器(DAD), TCX-250W超声波提取器 , AB104 -N电子
天平。
槲皮苷对照品(批号 111538-200301)、没食子酸(批号 0638
-9501)对照品均为中国药品生物制品检定所提供。乙腈为色
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时珍国医国药 2009年第 20卷第 1期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2009VOL.20NO.1　
谱纯 , 其它试剂均为分析纯 ,水为重蒸镏水。头花蓼药材:分别产
自贵州 、云南 、西藏等地 , 均由贵阳中医学院王祥培副教授鉴定。
2　方法与结果
2.1　色谱条件 采用依利特 HypersilODS色谱柱(4.6 mm×150
mm, 5 μm),乙腈 -0.2%磷酸二元梯度洗脱 , 体积流量:0.8 ml/
min,检测波长 310nm, 柱温 25℃。
2.2　流动相条件 0 ～ 5 min:乙腈 0% ～ 5%、0.2%磷酸 100% ～
95%;5 ～ 55 min:乙腈 5% ～ 25%、0.2%磷酸 95% ～ 75%。在上
述色谱条件下 , 对照品和样品的色谱见图 1。
2.3　线性关系的考察 精密称取槲皮苷对照品 12.36 mg, 没食
子酸对照品 7.456 mg,各加甲醇溶解定容至 100 ml, 作为贮存溶
液。精密吸取上述对照品溶液 1, 2, 4, 6, 8, 10 μl, 分别依次进样 ,
以进样量(μg)为横坐标 ,色谱峰面积为纵坐标进行回归分析 ,得
回归方程为槲皮苷:Y=2 895.3X-20.58, r=0.999 7,线性范围
0.123 6 ～ 1.236 μg;没食子酸:Y=683.04X+0.691 8, r=
0.999 5, 线性范围 0.074 56 ～ 0.745 6μg。
2.4　供试品溶液制备 取头花蓼细粉(3号筛)1 g,精密称定 ,置
圆底烧瓶中 , 分别加 50 ml80%甲醇 , 置水浴中加热回流 1 h, 滤
过 , 残渣加 50 ml80%甲醇回流提取 1 h, 滤过 ,合并滤液。滤液置
蒸发皿中挥干 , 残渣加 80%甲醇定容置 10 ml容量瓶中。用微孔
滤膜(0.45μm)滤过 , 取续滤液 ,即得。
2.5 　精密度实验 吸取对照品溶液 10 μl, 连续进样 5次 , 记录
色谱图 ,结果槲皮苷 、没食子酸峰面积的 RSD分别为 0.96%,
1.27%。
2.6　稳定性实验 取同一供试品溶液 , 分别在 0, 2, 6, 10, 14, 18
h进样 , 记录色谱图 ,结果槲皮苷 、没食子酸峰面积的 RSD分别为
1.45%, 1.26%。表明供试品溶液在 0 ～ 18 h内稳定性良好 。
2.7　重复性实验 取同批药材 5份 , 精密称定 , 按 “ 2.4”项下供
试品溶液制备方法制备并测定 , 槲皮苷平均含量为 0.26%, RSD
为 1.12%;没食子酸平均含量为 0.084%, RSD为 1.95%。
2.8　回收率实验 取已知含量头花蓼粉末 5份 , 每份约 0.5 g,
精密称定 , 分别精密加入一定量的没食子酸 、槲皮苷对照品溶液 ,
按 “ 2.4”项下供试品溶液制备方法制备并测定 , 计算 , 没食子酸 、
槲皮苷的平均回收率分别为 98.92%, 97.16%, 其 RSD分别为
2.85%, 1.07%, 表明该方法回收率较好。结果见表 1 ～ 2。
2.9　样品含量测定 精密吸取对照品溶液与头花蓼药材供试品
溶液各 10 μl, 按上述色谱条件测定 , 并计算槲皮苷 、没食子酸的
含量。结果见表 3。
表 1　没食子酸回收率实验结果
序号 称样量 m/g 样品中没食子酸含量 m/mg 加入没食子酸量 m/mg 测得没食子酸量 m/mg 回收率(%)平均回收率(%)RSD(%)
1 0.500 7 0.420 6 0.372 8 0.780 7 96.59
2 0.501 6 0.421 3 0.372 8 0.781 5 96.62
3 0.499 8 0.419 8 0.372 8 0.801 0 102.36 98.92 2.85
4 0.501 1 0.420 9 0.372 8 0.799 6 101.58
5 0.500 3 0.420 2 0.372 8 0.783 5 97.45
表 2　槲皮苷回收率实验结果
序号 称样量 m/g 样品中槲皮苷含量 m/mg 加入槲皮苷量 m/mg 测得槲皮苷量 m/mg 回收率(%)平均回收率(%)RSD(%)
1 0.500 7 1.301 8 1.236 2.487 7 95.95
2 0.501 6 1.304 2 1.236 2.512 6 97.77
3 0.499 8 1.299 5 1.236 2.505 4 97.56 97.16 1.07
4 0.501 1 1.302 9 1.236 2.491 5 96.17
5 0.500 3 1.300 8 1.236 2.516 2 98.33
表 3　头花蓼中槲皮苷与没食子酸的含量
序号 产地 采收时间 没食子酸含量(%)槲皮苷含量(%)
1 贵州安顺 2007-08 0.085 0.27
2 贵州施秉 2007-08 0.081 0.29
3 贵州盘县 2007-08 0.076 0.31
4 西藏墨脱 2007-08 0.089 0.33
5 云南昆明 2007-08 0.084 0.34
a-样品　b-对照品　1.没食子酸　 2.槲皮苷
图 1　头花蓼的 HPLC色谱图
3　讨论
根据实验的数据结果可知 , 本实验测得的没食子酸含量均低
于文献报道 [ 3]的含量 , 可能是头花蓼药材中没食子酸多与鞣质
结合的形式存在。
2003年版《贵州省中药材·民族药材质量标准》只规定了头
花蓼药材中槲皮素含量 , 本研究同时进行了槲皮苷与没食子酸的
含量测定 ,在上述色谱条件下 ,待测成分与相邻峰达到基线分离 ,
且回收率高 , 重复性好 ,为更好地控制头花蓼药材及其制剂的内
在质量提供了参考。
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