全 文 ：白丁香的器官克隆和快速繁殖
王兴安 (曲阜师范大学生命科学学院，山东 曲阜 273165）
摘要：以白丁香正在萌发的芽、当年生幼枝的茎尖和茎段为外植体，进行诱导、继代、生芽、生根培养，建立起组织培养体系；结果表明，
营养器官的组织培养中,正在萌发芽和当年生幼嫩枝条的顶芽是最理想的外植体。
关键词：白丁香；器官克隆；组织培养；愈伤组织
OrganclongingandrapidpropagationofSyzygiumoblateVar.AfinisLingelsh
WANGXing-an(ColegeofLifeScience,QufuNormalUniversity,Qufu273165,China)
Abstract:Inthestudy,thegerminatingbuds,theshootsandstemsofyoungbranchesweretreatedastheexplants.Throughfurtherinducing,
subculture,budscultureandrootingculture,asystemofefectivetissuecultureofSyzygiumoblatevar.afiniswasestablished.Theresults
showedthatgerminatingbudsandbudsofyoungbranchesweretheoptimalexplantsfortissueculture.
Keywords:Syzygiumoblatevar.afinis;organclone;tissueculture;calus
白丁香(Syzygiumoblata.Var.affinisLingelsh)木犀科，
落叶灌木；花序圆锥形，色洁白，有浓郁香味；产西宁、华东、华南
等地海拔1800~3500m处，具有重要的观赏价值和药用价值，市
场需求巨大。采用以组织培养为基础的器官克聋方法进行白丁
香苗的培育可获得巨大的经济效益。
1丁香快速繁殖的过程
材料为白丁香的幼嫩枝条（ 带有叶、顶芽和腋芽）。
基本培养基为MS培养基，愈伤组织诱导培养基为：MS+6-BA
0.5mgoL-1+NAA0.5mgoL-1+2,4-D1mgoL-1(单位下同)。增殖
培养基为：MS+6-BA0.4+NAA0.5+2,4-D1.5。分化培养基：
MS+6-BA1.0+NAA0.1（ 生芽）；MS+6-BA0.3+NAA0.2+IBA1.0
（ 生根）。培养基均加3.5%蔗糖和0.8%琼脂，pH为5.8，培养温
度26±2℃，光照强度2500lx，光照时间12h/d.
取无病虫害的幼嫩枝条，切取茎尖，带有腋芽的茎段（ 长
1cm），用清水冲洗10min，在超净工作台上用75%酒精浸泡15s，
再用0.1%HgCl2浸泡10min，无菌水冲洗5次，吸干水分，接种到
基本培养基上，
愈伤组织诱导。7d后顶芽和茎段普遍膨胀，无菌条件下将材
料切成0.5cm，转接至愈伤组织诱导培养基上，暗培养3d，以启
动愈伤组织形成。14d后有乳白色愈伤组织生成，诱导率可达
80%。
继代培养。上述愈伤组织用用解剖刀切成0.5cm大小转接
到继代培养基中培养，15d后，愈伤组织大量增殖，并形成大量
丛生芽。为获得大量的芽，可数次继代，扩大丛生芽的数量。
生芽培养。无菌条件下把上述的愈伤组织连同芽丛转接到
生芽分化培养基上，诱导分化形成幼芽。3周后可见绿色芽，分化
率可达86.5%。
生根培养。当幼芽长到1.5cm以上时，无菌条件下将幼芽从
愈伤组织上分离，转接到生根培养基上，暗培养3d，以启动根生
成，然后转入2500lx，12h/d光照下培养，诱导生根。两周后长出
粗而多的根，生根率为100%。
炼苗与移栽。当幼苗的根长至5cm时，将生有根的培养瓶移
入阳光充足的温棚中开瓶5d，取出生根苗，洗净附着的培养基，
移栽到盛有炼苗机质的营养袋中，覆以地膜进行炼苗。一周内是
苗能否成活的关键，在此期间要精心护理，每天浇水一次，并打
开地膜透气[1]。适当遮阴，待苗长出新的叶片时，可去掉地膜。至
苗高10cm时，可移植至大田中。
2 细胞的逆向发育
在植物个体发育中，从胚性细胞到各种组织器官的形成是
发育的结果，而从器官上分离的组织块进行离体培养后，组织块
又直接形成胚性细胞，则应该是细胞逆向发育的结果[2]。同时，外
植体在离体培养下形成胚性细胞是脱分化的结果，这样，外植体
形成胚性细胞包含了逆向发育和脱分化两个内容，也就是说细
胞的逆向发育与细胞脱分化是同时发生的。
3 生长素对组织培养快速繁殖的影响
生长素能促进细胞分裂和细胞生长，诱导受伤的组织表面
一层至数层细胞恢复分裂能力，形成愈伤组织；促进生根，在常
规的组织培养实验中都用于诱导根的形成；在某些植物诱导胚
状体的产生时生长素也非常重要[3]。
通常，生长素含量过高，培养物表现为发生旺盛生长的愈伤
组织，细胞团比较松散，回出现水浸状；生长素不足，组织块几乎
不能生长，颜色渐变暗淡，有的组织还会死亡。适宜的生长素条
件下的愈伤组织一般较紧密，表面多突起，花椰菜状或粗粒状。
4 微繁殖体系的建立
以幼嫩枝条上的顶芽和带有腋芽茎段为外植体培养，愈伤
组织生成，继代培养的愈伤组织分化形成的不定芽丛生，生出幼
芽，随着继代次数的增加，芽数量很快增加，以4周为一个周期
继代，一株白丁香母体一年内可获得100~500株苗，比常规繁殖
快几十倍。经过继代、生芽、生根培养，初步建立起微繁殖体系。
参考文献：
[1]刘华英,沈海龙.暴 马丁香下胚轴的离体培养和植株再生[J].植
物生理学通讯,2003,(4):351.
[2]陆文樑.植物器官的克隆[J].农业生物技术学报，2005，12(1)：1~9.
[3]谷瑞升,蒋湘宁,郭仲琛.植物离体培养中器官发生调控机制的研究
进展[J].植物学通报,1999,(3)，238~244。
作者简介：王兴安（ 1955~），男，山东省兖州市人，副教授，主要从事植物
生理方向研究。
(2006-07-06收稿 宿伯杰编辑)
国 土 与 自 然 资 源 研 究
· 96· TERRITORY&NATURALRESOURCESSTUDY 2006No.3
文章编号：1003-7853(2006)03-0096-01 中图分类号:S604.3 文献标识码：A
DOI:10.16202/j.cnki.tnrs.2006.03.050