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山芝麻的抗炎镇痛作用研究



全 文 :山芝麻的抗炎镇痛作用研究
高玉桥,胡 莹,张文霞
(广州中医药大学附属中山中医院,广东 中山 528400)
摘要:目的 研究山芝麻的抗炎镇痛作用。方法 山芝麻高剂量 31. 2 g生药 /kg、中剂量 15. 6 g生药 /kg、低剂量 7. 8 g生药 /kg,连续灌
胃 7 d抗炎实验采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型和醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高模型,镇痛实验采用热板法和扭体法。结果
山芝麻能显著抑制二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀,抑制醋酸引起的小鼠腹腔毛细血管通透性增高,并降低小鼠热板痛阈值,减少醋酸引
起的扭体次数。结论 山芝麻具有抗炎镇痛作用。
关键词:山芝麻;抗炎;镇痛
中图分类号:R285 文献标志码:A 文章编号:1673 - 4610(2012)05 - 0267 - 03
基金项目:广东省中山市科技计划项目(编号:20102A108)
作者简介:高玉桥,副主任中药师,Tel:0760 - 88815106,E-mail:aqiaosky@ 163. com
Experimental Study on Anti-inflammatory and Analgesic Effects of Helicteris
GAO Yu-qiao,HU Ying,ZHANG Wen-xia
(Zhongshan Hospital,Guangzhou University of TCM,Zhongshan,Guangdong 528400,China)
Abst rac t:Objec t ive To study the inflammatory and analgesic effects of Helicteris. Met hods The ear edema model
induced by xylene and the peritoneal capillary inflammation model induced by acetic acid were used to observe the anti-
innammatory effect of Helicteris. The hot plate method and the mouse writhing model induced by acetic acid were used to
investigate the analgesic effect of Helicteris. Resul t s The ear edema of mice induced by xylene and the peritoneal
capillary permeability of mice increased by acetic acid could be inhibited by Helicteris. The pain threshold was elevated.
The writhing frequency of mice induced by acetic acid was reduced by Helicteris. Conc lut ion Helicteris has good anti-
inflammatory and analgesic effects.
Key w ords:Helicteris,anti-inflammation,analgesia
中药山芝麻(Radix Helicteris) ,为梧桐科植物山芝
麻的干燥根,其味苦、性寒,归肺、大肠经,可解表清热,
解毒消肿,用于感冒发热、痄腮、乳娥、麻疹、咳嗽、泄泻
痢疾、痈肿[1]。山芝麻始载于《生草药性备要》,是民间
常用的中草药,《增订岭南采药录》谓:“山芝麻根为凉
茶主要原料,亦治骨鲠口喉。”笔者对山芝麻的抗炎镇
痛作用进行了研究,现报道如下:
1 实验材料
1. 1 实验动物
SPF级昆明种小鼠,体重 18 ~ 22 g,广东省医学实
验动物中心提供[许可证号:SCXK(粤)2008 - 0020]。
实验环境为广州中医药大学附属中山市中医院屏障级
动物实验室[许可证号:SYXK(粤)2010 - 0109],环境
温度为 18 ~ 22 ℃,相对湿度 50% ~ 70%,动物购进后
适应性饲养 1 周。
1. 2 药品与试剂
山芝麻药材由广东致信药材有限公司提供(经中
山市中医院药检室曾聪彦主任中药师鉴定为梧桐科植
物山芝麻 Helicteres angustifolia L.的干燥根)。制法:取
山芝麻 1. 0 kg,加适量水煎煮 2 次,每次煎煮 1 h,合并
滤液,静置过滤,浓缩至适量,保存于冰箱,临用前配成
所需浓度。吲哚美辛肠溶片(消炎痛,江苏亚邦爱普森
药业有限公司,批号:1003002) ;冰醋酸(分析纯,汕头
市西陇化工厂有限公司,批号为 090606 - 7) ;伊文思蓝
(西德 serva 进口分装,批号为 871225) ;二甲苯(分析
纯,广州化学试剂厂,批号为 970302)。
1. 3 主要仪器
UV-2550 型紫外可见分光光度计(日本岛津) ,GL-
20G-Ⅱ型高速冷冻离心机(上海安亭科学仪器厂) ,
BS224S电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司) ,
YLS-Q4 型耳肿打孔器(山东省医学科学院设备站) ,
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·2012 年 05 月第 22 卷第 5 期· 今日药学
WKY Ⅳ型微量可调移液器(上海求精生化试剂仪器有
限公司) ,恒温水浴箱(上海衡平仪器仪表厂) ,天福牌
电子秒表(深圳市惠波工贸有限公司) ,灌胃针、注射
器、量筒。
1. 4 统计学处理方法
采用 SPSS13. 0 for Windows 软件处理,数据用 珋x ± s
表示,采用单因素方差分析,进行 Dunnet-t检验。
2 实验方法与结果
2. 1 急性毒性实验[2]
取健康昆明种小鼠 60 只,体重 20 ~ 22 g,雌雄各
半,给药前禁食 6 h,给药后继续禁食 4 h(均不禁水)。
实验时随机分为 5 组,每组 10 只,分别按以下剂量(组
间比值为 1∶ 0. 9)灌胃给药后,观察小鼠 7 d,逐日记录
动物的毒性反应情况和死亡动物的分布,并及时对死
亡小鼠进行解剖,结果见表 1。
2. 2 山芝麻的抗炎作用
2. 2. 1 对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高的影
响[3] 取(20 ± 2)g 昆明种雄性小鼠 50 只,随机分为 5
组,每组 10只。分别给予正常对照组蒸馏水 10 ml /kg、
山芝麻高剂量 31. 2 g 生药 /kg、中剂量 15. 6 g 生药 /kg、
低剂量7. 8 g生药 /kg,连续灌胃7 d;吲哚美辛0. 02 g /kg
当日给药 1 次。末次给药后 1 h,鼠尾静脉注射 0. 5%
伊文思蓝生理盐水溶液 10 ml /kg,随即腹腔注射 0. 7%
冰醋酸生理盐水溶液 10 ml /kg,20 min 后脱颈椎处
死,剪开腹部皮肤,用生理盐水冲洗并定容至 10 ml,
以 3 000 r /min 转速离心处理 15 min,取上清液,于
590 nm波长处比色测定吸光度。计算给药组与正常对
照组的差异显著性,结果见表 2。
表 1 山芝麻急性毒性实验情况
组别 鼠数(n) 剂量(d) (g生药 /kg) Lgd (x) 死亡数(n) 死亡率(p) P2
1 10 468. 2 2. 670 4(d1,xm) 7 0. 7 0. 49
2 10 421. 3 2. 624 6(d2) 8 0. 8 0. 64
3 10 379. 2 2. 578 9(d3) 5 0. 5 0. 25
4 10 341. 3 2. 533 1(d4) 5 0. 5 0. 25
5 10 307. 2 2. 487 4(d5) 3 0. 3 0. 09
6 10 276. 5 2. 441 7(d6) 0 0 0
∑P = 2. 8 ∑P2 = 1. 72
注:山芝麻水提物小鼠灌胃的半数致死量(LD50)= 367. 4 g 生药 /kg;LD50的 95%可信限 = 342. 0 ~ 394. 7 g 生药 /kg;LD50的平均可信
限 =(367. 4 ± 26. 4)g生药 /kg
实验结果表明,吲哚美辛组、山芝麻的中剂量组及
高剂量组的吸光度均比正常对照组的吸光度低(P <
0. 05) ,认为山芝麻能抑制醋酸引起的小鼠腹腔毛细血
管通透性增高。
2. 2. 2 对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响[3] 取(20 ±
2)g昆明种雄性小鼠 50 只,随机分为 5 组,每组 10 只。
分别给予正常对照组蒸馏水 10 ml /kg、山芝麻高剂量
31. 2 g生药 /kg、中剂量 15. 6 g 生药 /kg、低剂量 7. 8 g
生药 /kg,连续灌胃 7 d;吲哚美辛 0. 02 g /kg当日给药 1
次。末次给药后 l h,用微量可调移液器精确吸取
100%二甲苯 50 μl,涂于各组小鼠左耳正反两面,右耳
作空白对照,致炎 20 min 后颈椎脱臼处死小鼠。沿耳
廓基线剪下两耳,用 8 mm直径打孔器分别在同一位置
打下圆片,用电子天平称重,计算小鼠耳廓的肿胀度和
肿胀制率。肿胀度 =左耳片重 -右耳片重;肿胀抑制
率(%)=(对照组平均肿胀率 -给药组平均肿胀率)÷
对照组平均肿胀率 × 100%。结果见表 3。
表2 山芝麻对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高的影响(珔x ± s)
组别 动物数(n) 剂量(g /kg) 吸光度(A)
正常对照组 10 10 ml /kg 0. 601 ± 0. 354
山芝麻低剂量组 10 7. 8 0. 428 ± 0. 290
山芝麻中剂量组 10 15. 6 0. 332 ± 0. 184*
山芝麻高剂量组 10 31. 2 0. 336 ± 0. 192*
吲哚美辛组 10 0. 02 0. 260 ± 0. 171*
注:与正常对照组比较,* P < 0. 05
表 3 山芝麻对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响(珔x ± s)
组别 动物数(n) 剂量(g /kg) 肿胀总度(g) 肿胀抑制率(%)
正常对照组 10 10 ml /kg 0. 057 ± 0. 007
山芝麻低剂量组 10 7. 8 0. 019 ± 0. 010* 80. 7
山芝麻中剂量组 10 15. 6 0. 022 ± 0. 008* 80. 4
山芝麻高剂量组 10 31. 2 0. 018 ± 0. 006* 87. 7
吲哚美辛组 10 0. 02 0. 018 ± 0. 006* 81. 7
注:与正常对照组比较,* P < 0. 05
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Pharmacy Today ·2012 05 Vol. 22 No. 5·
实验结果表明,吲哚美辛组、山芝麻低剂量组、中剂
量组及高剂量组的肿胀总度均比正常对照组低(P <
0. 05) ,而且山芝麻高剂量组的肿胀抑制率达到了
87. 7%,认为山芝麻能抑制二甲苯引致的小鼠耳廓肿胀。
2. 3 山芝麻的镇痛作用
2. 3. 1 对醋酸致痛的镇痛作用[3] 取(20 ± 2)g 昆明
种雄性小鼠 50只,随机分为 5组,每组 10 只。分别给予
正常对照组蒸馏水 10 ml /kg、山芝麻高剂量 31. 2 g 生
药 /kg、中剂量 15. 6 g生药 /kg、低剂量 7. 8 g生药 /kg,连
续灌胃 7 d;吲哚美辛 0. 02 g /kg 当日给药 1 次。末次给
药后 1 h,腹腔注射 0. 7%冰醋酸生理盐水溶液 10 ml /kg,
随即计算 20 min内小鼠的扭体次数。结果见表 4。
表 4 山芝麻对醋酸致痛的镇痛作用(珔x ± s)
组别 动物数(n) 剂量(g /kg) 扭体次数
正常对照组 10 10 ml /kg 49. 4 ± 15. 7
山芝麻低剂量组 10 7. 8 25. 2 ± 20. 7*
山芝麻中剂量组 10 15. 6 37. 2 ± 12. 4
山芝麻高剂量组 10 31. 2 22. 6 ± 12. 1*
吲哚美辛组 10 0. 02 17. 2 ± 17. 4*
注:与正常对照组比较,* P < 0. 05
实验结果表明,吲哚美辛组、山芝麻低剂量组、高
剂量组的扭体次数均比正常对照少(P < 0. 05) ,认为山
芝麻能抑制醋酸引起的扭体疼痛。
2. 3. 2 对热板致痛的镇痛作用[3] 选用(20 ± 2)g 的
昆明种雌性小鼠。用秒表记录小鼠自投入热板至出现
舔足的时间(s)做为该小鼠的痛阈值。凡 < 5 s 出现或
> 30 s(一般为 10 ~ 25 s)不出现舔后足或跳跃的小鼠,
弃之不用。依次测定各小鼠的痛阈值,取预选合格雌
性小鼠 50 只,间隔 5 min再重新测定痛阈值 1 次,将 2
次痛阈值的平均值作为该鼠的给药前痛阈值(痛阈值
超过 60 s即停止测试,按 60 s 记)。随机分为 5 组,每
组 10 只。分别给予正常对照组蒸馏水 10 ml /kg、山芝
麻高剂量 31. 2 g生药 /kg、中剂量 15. 6 g生药 /kg、低剂
量 7. 8 g生药 /kg,连续灌胃 7 d;吲哚美辛 0. 02 g /kg当
日给药 1 次。末次给药后测其 30、60、90、120 和 150
min的痛阈值。结果见表 5。
实验结果表明,吲哚美辛组在给药后 30、60 min 痛
阈值比正常对照组的高(P < 0. 05) ,而山芝麻中剂量
组、高剂量组在 60、90 min 痛阈值比正常对照组的高
(P < 0. 05) ,山芝麻高剂量组在 120 min 的痛阈值比正
常对照组的高(P < 0. 05) ,认为山芝麻对热板所致的疼
痛有镇痛作用。
表 5 山芝麻对热板致痛的镇痛作用
组别
动物数
(n)
剂量
(g /kg)
基础阈值
给药后不同时间痛阈(s)
30 min 60 min 90 min 120 min 150 min
正常对照组 10 10 ml /kg 19. 7 ± 3. 5 14. 5 ± 3. 9 12. 2 ± 3. 3 12. 3 ± 3. 1 13. 0 ± 3. 4 20. 7 ± 12. 3
山芝麻低剂量组 10 7. 8 20. 1 ± 3. 7 13. 4 ± 5. 1 14. 1 ± 3. 8 16. 1 ± 10. 8 20. 9 ± 12. 9 16. 2 ± 6. 2
山芝麻中剂量组 10 15. 6 18. 0 ± 4. 7 11. 8 ± 3. 9 20. 9 ± 8. 0* 24. 1 ± 11. 9* 22. 4 ± 12. 3 32. 6 ± 14. 8
山芝麻高剂量组 10 31. 2 17. 2 ± 4. 5 18. 8 ± 6. 6 22. 5 ± 14. 8* 28. 3 ± 14. 8* 28. 3 ± 16. 3* 33. 1 ± 21. 2
吲哚美辛组 10 0. 02 22. 9 ± 3. 3 24. 4 ± 8. 1* 21. 3 ± 5. 3* 20. 8 ± 9. 2 22. 6 ± 6. 1 24. 2 ± 10. 3
注:与正常对照组比较,* P < 0. 05
3 讨论
山芝麻系广东地产药材,具有清热解毒作用,在感
冒发热、咽喉炎、非特异性结肠炎等方面疗效良好[4,5]。
在课题组广东地产药材清热解毒对比实验研究中
发现,给小鼠灌胃山芝麻水提物 16 g 生药 /kg 时,抗炎
镇痛效果良好[6,7]。本文研究了山芝麻的急性毒性作
用,并对其抗炎镇痛作用进行了药效剂量依赖性的研
究。山芝麻的急性毒性实验表明,其小鼠灌胃的 LD50
为(367. 4 ± 26. 4)g 生药 /kg,95%的可信限为 LD50 的
95%可信限 = 342. 0 ~ 394. 7 g 生药 /kg,相当于人的用
量 2. 8 kg /70 kg,是临床常用量(10 ~ 15 g)的 180 ~ 280
倍,由此初步认为,所用山芝麻药材的毒性较小,安全
范围较宽。抗炎镇痛实验研究表明,山芝麻能有效抑
制二甲苯所致的小鼠耳肿胀和醋酸引起的小鼠腹腔渗
透性增加,对热板和醋酸引起的疼痛都有良好抑制作
用,认为山芝麻的抗炎镇痛效果明显。
参考文献
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(收稿日期:2012 - 02 - 09)
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·2012 年 05 月第 22 卷第 5 期· 今日药学