全 文 ：收稿日期:2009-11-26; 修订日期:2010-05-28
作者简介:蒋 霞(1974-) ，女(汉族) ，广西柳州人，现任广西医科大学附
属第一医院主管药师，硕士学位，主要从事临床中药学及生药学研究工
作．
民族药朝天罐提取物抗炎作用及机理研究
蒋 霞1，黎 格1，杨 柯2，杨玉芳1，黄东萍3
(1．广西医科大学附属第一医院，广西 南宁 530021;
2．广西中医学院药学院，广西 南宁 530001; 3．广西医科大学，广西 南宁 530021)
摘要:目的 研究朝天罐提取物对不同炎症模型的抗炎作用及作用机理。方法 采用醋酸腹腔注射致小鼠腹腔毛细血管
通透性升高试验、二甲苯诱导小鼠耳廓肿胀模型、皮下埋植棉球诱导小鼠棉球肉芽肿模型观察朝天罐提取物的抗炎作
用;采用角叉菜胶致小鼠背部气囊急性滑膜炎模型，通过紫外分光光度法，测定朝天罐提取物不同剂量组中小鼠背部气
囊炎性的 渗出液 PGE2 的含量。结果 朝天罐高(20g /kg)、低(10g /kg)剂量组对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增
高、二甲苯诱导的小鼠耳廓肿胀和小鼠棉球肉芽肿有明显的抑制作用;可显著降低小鼠背部气囊炎性渗出液中 PGE2 的
含量(P ＜ 0． 05)。结论 朝天罐提取物具有抗炎作用;其抑制炎症组织中 PGE的产生可能为抗炎作用机理之一。
关键词:朝天罐; 抗炎; PGE2
DOI标识:doi:10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2010． 10． 126
中图分类号:R285． 5 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2010)10-2693-01
朝天罐 Osbeckia opipara C． Y． Wu et C． Chen为野牡丹科金
锦香属植物，又名张天刚、仰天罐、罐子草、七孔莲等。主产于贵
州、广西、广东、台湾及长江流域以南各省区，生于海拔 250 ～ 800
m的山坡、山谷、水边、路旁、疏林中或灌木丛中［1，2］，为广西少数
民族地区常用本草药材。主要以根入药，又名罐子草根，其味甘、
微苦，性平，归肾、大肠经，功能益肾、止血、解毒，主治腰膝酸软，
咯血，痢疾，咽喉痛等［3，4］;亦可全株入药，用于小儿风热、久咳、
咯血、胃痛、白带、月经不调、胎漏下血、痔疮出血及癌症等［5］。
目前尚未见朝天罐的相关药理作用报道。本文主要对朝天罐根
的抗炎作用进行研究，探讨其抗炎机理，旨在为今后药材的进一
步研究与开发利用提供资料与依据。
1 仪器与材料
1． 1 仪器与试剂 722 型分光光度计(上海精密科学仪器有限
公司产) ;BP211D万分之一克电子天平(德国赛多利斯) ;阳性对
照药地塞米松(广东三才医药集团有限公司，批号:20080859)。
朝天罐(药材采于广西金秀瑶族自治县，经广西壮族自治区药检
所鉴定) ;粗提取物棕褐色，每毫升浸膏相当于生药量 1 g。
1． 2 动物 KM小鼠(普通级) ，体质量 18 ～ 24g，雌雄各半，由广
西中医学院医学实验动物中心提供，实验动物生产许可证号:桂
医动字第 11004 号。
2 方法
2． 1 溶液制备 称取药材 1 000 g，加 10 倍量水浸泡 30 min，煮
沸，维持 1 h，纱布过滤，药渣再加入 5 倍量水，煮沸，维持 30 min，
纱布过滤，合并滤液，浓缩至 1 000 ml，冷却后，4℃冰箱放置备
用。
2． 2 对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性的影响［6］ 取小鼠 40
只，雌雄各半，随机分为 4 组，每组 10 只，分别为阳性对照组(地
塞米松，6 mg /kg) ，空白对照组(生理盐水) ，朝天罐高(20 g 生
药 / kg)、低(10 g生药 /kg)两个剂量组。每天灌胃给药 1 次，给药
容量 20 ml /kg，连续 5 d。末次给药后 60min 每鼠尾静脉注射 0．
5%伊文斯蓝，0． 1 ml /10 g，同时腹腔注射 0． 6%醋酸溶液，0． 1
ml /10 g。15 min后，脱颈椎处死小鼠，立即注入 6 ml生理盐水冲
洗腹腔，剪开腹腔，用漏斗滤出腹腔洗出液，2 000 r /min 离心 10
min，取上清液于 590 nm处测定 OD值。
2． 3 对二甲苯致小鼠耳廓肿胀度的影响［6］ 取小鼠 40 只，雌雄
各半，随机分为 4 组，每组 10 只，分别为阳性对照组(地塞米松，6
mg /kg) ，空白对照组(生理盐水) ，朝天罐高(20 g 生药 /kg) ，低
(10 g生药 /kg)两个剂量组。每天灌胃给药 1 次，给药容量 20
ml /kg，连续 5 d。末次给药后 60 min每只小鼠以 0． 02 ml二甲苯
滴于右耳致炎，15 min 后颈椎脱臼处死，沿耳廓基线剪下二耳。
用 6 mm直径打孔器分别在左、右耳同一部位打下圆耳片，称重，
以左右耳重量差作为肿胀度。
2． 4 对小鼠棉球肉芽肿的影响［6］ 取小鼠 40 只，随机分为空白
对照组(生理盐水) ，阳性对照组(地塞米松，4． 5 mg /kg) ，朝天罐
高(20 g生药 /kg)、低(10 g 生药 /kg)两个剂量组。在各鼠的左
右腋下部消毒，各切一小口，各埋入消毒棉球(10 mg)。次日各
组均灌胃给药，1 次 /d，给药容量为 20 ml /kg，共 14 d。末次药后
1 d，取出带肉芽组织的棉球于 80℃烘箱内烘 7h至干，称重，减去
棉球重，比较各组肉芽组织干重量。
2． 5 对小鼠背部气囊炎性渗出液中 PGE2 含量的影响
［7］ 取雄
性小鼠 50 只，随机分成 5 组，每组 10 只，分别为正常组(生理盐
水组)、模型组、阳性对照组(地塞米松，6 mg /kg)、朝天罐高(20 g
生药 /kg)、低(10 g生药 /kg)两个剂量组。各组小鼠背部皮下注
射空气 5 ml，第 3 天及第 6 天再次注入空气各 3 ml，维持气囊的
膨胀，于首次注入空气的第 3 天开始灌胃给药或生理盐水 20 ml /
kg，1 次 /天，连续 5 天，末次给药后 1 h囊内注射 2%甲醛 0． 2 ml /
只，6 h后处死动物，于气囊内注入冰生理盐水(含肝素 50 U /ml)
3 ml，轻轻按压，吸出 1 ml，3 000 r /min 离心 10 min。取上清液
0． 4 ml，加 0． 5 mol·L －1氢氧化钾 －甲醇液 2 ml，在 50℃水浴异
构化 20 min 后，用甲醇稀释至 5 ml，于紫外分光光度计波长 278
nm处测定其吸光度(OD)值，代表 PGE2 的生成量。
2． 6 统计学处理 应用统计软件 SPSS11． 0 对所得实验数据进
行 t检验。
3 结果
3． 1 对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性的影响 与空白对照组
比较，地塞米松阳性对照组及朝天罐提取物高、低剂量组对醋酸
所致小鼠腹腔毛细血管通透性有显著抑制作用(P ＜ 0． 01)。结
果见表 1。
表 1 对腹腔毛细血管通透性的影响(珋x ± s)
组别 剂量 C / g·kg －1 腹腔液 OD值 抑制率(%)
空白对照 － 1． 035 ± 0． 322 —
地塞米松阳性对照 0． 006 0． 681 ± 0． 276＊＊ 34． 20
朝天罐高剂量 20 0． 558 ± 0． 255＊＊ 46． 09
朝天罐低剂量 10 0． 574 ± 0． 295＊＊ 44． 54
与空白对照组比较，﹡ P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01;n = 10
3． 2 对二甲苯致小鼠耳廓肿胀度的影响 与空白对照组比较，
地塞米松阳性对照组及朝天罐提取物高、低剂量组对二甲苯所诱
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2010 VOL ． 21 NO． 10 时珍国医国药 2010 年第 21 卷第 10 期
导小鼠耳廓肿胀有明显抑制作用(P ＜ 0． 05)。结果见表 2。
表 2 对耳廓肿胀度的影响(珋x ± s)
组别 剂量 C / g·kg －1 耳廓肿胀度 m / g 抑制率(%)
空白对照 － 0． 001 9 ± 0． 001 5 －
地塞米松阳性对照 0． 006 0． 000 9 ± 0． 000 9* 52． 63
朝天罐高剂量 20 0． 000 7 ± 0． 001 1* 63． 16
朝天罐低剂量 10 0． 000 7 ± 0． 000 7* 63． 16
与空白对照组比较，﹡ P ＜ 0． 05，﹡﹡P ＜ 0． 01;n = 10
3． 3 对小鼠棉球肉芽肿的影响 与空白对照组比较，地塞米松
阳性对照组及朝天罐提取物高、低剂量组对小鼠棉球肉芽肿有明
显抑制作用(P ＜ 0． 01 或 P ＜ 0． 05)。结果见表 3。
表 3 对小鼠棉球肉芽肿的影响(珋x ± s)
组别 剂量 C / g·kg －1 棉球肉芽肿 m / g 抑制率(%)
空白对照 － 0． 053 4 ± 0． 038 1 －
地塞米松阳性对照 0． 004 5 0． 015 8 ± 0． 001 4＊＊ 70． 41
朝天罐高剂量 20 0． 028 9 ± 0． 005 9＊＊ 45． 88
朝天罐低剂量 10 0． 034 6 ± 0． 013 5* 35． 21
与空白对照组比较，﹡ P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01;n = 10
3． 4 对小鼠背部气囊炎性渗出液中 PGE2 含量的影响 与正常
组比较，模型组小鼠背部气囊炎性渗出液中 PGE2 的含量显著升
高(P ＜ 0． 01)。地塞米松阳性对照组及朝天罐提取物高、低剂量
组与模型组相比，小鼠背部气囊炎性渗出液中 PGE2 的含量明显
降低(P ＜ 0． 05 或 P ＜ 0． 01)。结果见表 4。
表 4 对小鼠背部气囊炎性渗出液中 PGE2 含量的影响(珋x ± s)
组别 剂量 C / g·kg －1 PGE2(OD278) 抑制率(%)
空白对照 — 0． 19 ± 0． 03＊＊ —
模型 — 0． 48 ± 0． 11 —
地塞米松阳性对照 0． 006 0． 35 ± 0． 07* 27． 08
朝天罐高剂量 20 0． 34 ± 0． 12* 29． 17
朝天罐低剂量 10 0． 28 ± 0． 09＊＊ 41． 67
与模型组比较，﹡ P ＜ 0． 05，＊＊ P ＜ 0． 01;n = 10
4 讨论
非特异性炎症反应通常分为 3 个时相，即以局部血管扩张、
毛细血管通透性增加为特征的急性时相;以白细胞、巨噬细胞浸
润为特征的亚急性时相;以组织变性和纤维化为特征的慢性增殖
相。本实验结果显示，朝天罐高(20 g /kg)、低(10 g /kg)剂量组
可显著降低醋酸所致小鼠毛细血管通透性增高，减轻二甲苯诱导
的小鼠耳肿胀，表明其对炎症的急性时相明显的抑制作用;同时
朝天罐提取物能显著抑制小鼠棉球肉芽肿，说明其对炎症的慢性
增殖相也有较好的抑制效果。
花生四烯酸(AA)代谢在炎症病理过程中起着主要作用，而
PGE2 是 AA 代谢过程中产生的一个重要炎症介质，在炎症过程
中可通过其强大的扩血管、协同趋化因子激活及吸引中性粒细
胞、增强血管壁通透性、引起发热及痛觉过敏等作用促进炎症反
应发生发展［8］。实验结果表明，朝天罐提取物高、低剂量组均能
明显抑制小鼠背部气囊炎症模型内 PGE2 的含量。该结果提示
朝天罐提取物抑制炎症组织中 PGE2 产生可能为其抗炎作用机
理之一。
参考文献:
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［3］ 广西壮族自治区中医药研究所． 广西药用植物名录［M］．南宁:广
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［4］ 吴其浚． 植物名实图考(修订本) ［M］． 上海:商务印书馆，1957:
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［6］ 陈 奇．中药药理研究方法学［M］． 北京:人民卫生出版社，1993:
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中国实验方剂学杂志，2001，7(5) :44．
收稿日期:2009-10-18; 修订日期:2010-05-30
作者简介:曾军秀(1975-) ，女(汉族) ，四川简阳人，现任四川省中医药科
学院助理研究员，学士学位，主要从事中药质量方面的研究工作．
六味地黄丸中 24 －乙酰泽泻醇 A含量的
高效液相色谱法测定
曾军秀，李青苗
(四川省中医药科学院，四川 成都 610041)
摘要:目的 建立六味地黄丸中 24 －乙酰泽泻醇 A的高效液相色谱(HPLC)法含量测定方法。方法 采用高效液相色谱
法;色谱柱:Kromasil 100 － 5C18色谱柱(250 mm ×4． 6 mm，5 μm) ，检测器:蒸发光散射检测器(ELSD) ;柱温:室温;流动
相:乙腈 －水(75∶ 25) ;流速:0． 8 ml·min －1，ELSD 气流速度:2． 00 L·min －1漂移管温度:82℃。结果 被测定峰与其他
组分可达到基线分离，24 －乙酰泽泻醇 A的线性范围为 0． 288 ～ 2． 304 μg(r = 0． 999 8) ，平均回收率为 100． 04%(RSD为
1． 05%，n = 9)。结论 该方法操作简便准确，重现性好，能有效控制六味地黄丸的质量。
关键词:六味地黄丸; 24 －乙酰泽泻醇 A; 高效液相色谱法
DOI标识:doi:10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2010． 10． 127
中图分类号:R284． 2 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2010)10-2694-02
六味地黄丸收载于《中国药典》2005 年版，由熟地黄、山茱萸
(制)、牡丹皮、山药、茯苓、泽泻 6 味药物组成，原标准含量测定
项中仅有丹皮酚和熊果酸的含量测定［1］，并无 24 －乙酰泽泻醇
A含量测定方法。众所周知，泽泻醇具有利尿、降血脂、抗脂肪肝
及保肝作用，为泽泻的主要活性成分。但是通过文献检索，未发
现有关六味地黄方中 24 －乙酰泽泻醇 A含量测定研究报道的文
献。本实验采用高效液相色谱法测定六味地黄丸中 24 －乙酰泽
泻醇 A的含量，本法操作简单，专属性强，稳定可靠［2 ～ 4］。
1 仪器与试药
Waters 2695 高效液相色谱仪;蒸发光散射检测器(ELSD) ;
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时珍国医国药 2010 年第 21 卷第 10 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2010 VOL． 21 NO． 10