全 文 ：＊基金项目：广西壮族自治区中医药民族医药自筹经费科研课题资助
项目（Ｎｏ．ＧＺＺＣ１０５４；Ｎｏ．ＧＺＺＣ１２３３）
△通信作者，Ｔｅｌ：０７７１－５３５６１５４，Ｅ－ｍａｉｌ：３２６１５９９７０＠ｑｑ．ｃｏｍ
１广西医科大学药学院
收稿日期：２０１５－０６－０４
朝天罐根抗炎活性部位及作用机制的研究＊
蒋　霞　邹小琴　王小洁１　李　梅△
（广西医科大学第一附属医院药学部　南宁　５３００２１）
摘要　目的：筛选出朝天罐根抗炎活性部位，并研究其作用机制。方法：利用系统溶剂法对朝天罐根醇提取物进行萃取分离得
到３个部分：乙酸乙酯部位、正丁醇部位及水液部位。采用二甲苯诱导小鼠耳廓肿胀、角叉菜胶致小鼠足趾肿胀实验综合评价
不同提取部位的抗炎活性。采用ＲＴ－ＰＣＲ法测定了乙酸乙酯部位对小鼠致炎耳组织表达的影响。结果：与空白对照组比较，
朝天罐乙酸乙酯部位和正丁醇部位可显著降低小鼠耳廓肿胀和足肿胀度（Ｐ＜０．０５）；乙酸乙酯部位可使致炎小鼠耳组织中
肿瘤坏死因子（ｔｕｍｏｒ　ｎｅｃｒｏｓｉｓ　ｆａｃｔｏｒ－α，ＴＮＦ－α）ｍＲＮＡ表达水平明显降低。结论：朝天罐乙酸乙酯部位和正丁醇部位为其抗
炎活性部位，其作用机制为有效降低ＴＮＦ－αｍＲＮＡ的表达。
关键词　朝天罐；抗炎；活性部位；ＴＮＦ－α；ｍＲＮＡ
中图分类号：Ｒ－３３　　　文献标志码：Ａ　　　文章编号：１００５－９３０Ｘ（２０１５）０４－０５４７－０４
ＳＴＵＤＹ　ＯＮ　ＴＨＥ　ＡＮＴＩ－ＩＮＦＬＡＭＭＡＴＯＲＹ　ＥＦＦＥＣＴＩＶＥ　ＦＲＡＣＴＩＯＮＳ　ＡＮＤ　ＭＥＣＨＡＮＩＳＭ　ＯＦ
ＲＡＤＩＸ　ＯＳＢＥＣＫＩＡ　ＯＰＩＰＡＲＡ
Ｊｉａｎｇ　Ｘｉａ，Ｚｏｕ　Ｘｉａｏｑｉｎ，Ｗａｎｇ　Ｘｉａｏｊｉｅ，Ｌｉ　Ｍｅｉ．（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｙ，ｔｈｅ　Ｆｉｒｓｔ　Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ
Ｇｕａｎｇｘｉ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｎｉｎｇ　５３００２１，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅ　ａｎｔｉ－ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ　ｆｒａｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｏｆ　Ｒａｄｉｘ　Ｏｓｂｅｃｋｉａ　ｏｐｉｐａ－
ｒａ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｔｈｒｅｅ　ｐｏｌａｒ　ｆｒａｃｔｉｏｎｓ（ｅｔｈｙｌ　ａｃｅｔａｔｅ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｆｒａｃｔｉｏｎ，ｎ－ｂｕｔｙｌ　ａｌｃｏｈｏｌ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｆｒａｃｔｉｏｎ　ａｎｄ
ｗａｔｅｒ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ　ｆｒａｃｔｉｏｎ）ｗｅｒｅ　ｐｒｅｐａｒｅｄ　ｂｙ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ｏｒｇａｎｉｃ　ｓｏｌｖｅｎｔｓ．Ｔｈｅ　ａｎｔｉ－ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ　ｅｆｆｅｃｔｓ
ｗｅｒｅ　ｅｖａｌｕａｔｅｄ　ｉｎ　ｍｉｃｅ　ｂｙ　ｕｓｉｎｇ　ｄｉｍｅｔｈｙｌ　ｂｅｎｚｅｎｅ　ｔｏ　ｉｎｄｕｃｅ　ａｕｒｉｃｌｅ　ｓｗｅｌｉｎｇ，ａｎｄ　ｃａｒｒａｇｅｅｎａｎ　ｔｏ　ｉｎｄｕｃｅ　ｆｏｏｔ
ｓｗｅｌｉｎｇ．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｍＲＮＡ　ｏｆ　ＴＮＦ－αｗａｓ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｂｙ　ＲＴ－ＰＣＲ　ｉｎ　ｅｔｈｙｌ　ａｃｅｔａｔｅ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｆｒａｃｔｉｏｎ．Ｒｅ－
ｓｕｌｔｓ：Ｅｔｈｙｌ　ａｃｅｔａｔｅ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｆｒａｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｎ－ｂｕｔｙｌ　ａｌｃｏｈｏｌ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｆｒａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｒａａｄｉｘ　Ｏｓｂｅｃｋｉａ　ｏｐｉｐａｒａ　ｓｉｇ－
ｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｒｅｄｕｃｅ　ｓｗｅｌｉｎｇ　ｏｆ　ａｕｒｉｃｌｅ　ａｎｄ　ｆｏｏｔ　ｉｎ　ｍｉｃｅ（Ｐ＜０．０５）ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ．Ｅｔｈｙｌ　ａｃｅ－
ｔａｔｅ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｆｒａｃｔｉｏｎ　ｒｅｄｕｃｅｄ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＴＮＦ－α．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅ　Ｅｔｈｙｌ　ａｃｅｔａｔｅ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｆｒａｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｎ－
ｂｕｔｙｌ　ａｌｃｏｈｏｌ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｆｒａｃｔｉｏｎ　ａｒｅ　ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ　ａｎｔｉ－ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ　ｆｒａｃｔｉｏｎｓ　ｏｆ　Ｒａｄｉｘ　Ｏｓｂｅｃｋｉａ　ｏｐｉｐａｒａ．Ｔｈｅ　ａｎ－
ｔｉ－ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｉｓ　ｔｏ　ｒｅｄｕｃｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＴＮＦ－α．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ　Ｒａｄｉｘ　Ｏｓｂｅｃｋｉａ　ｏｐｉｐａｒａ；ａｎｔｉ－ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ；ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ　ｆｒａｃｔｉｏｎ；ＴＮＦ－α；ｍＲＮＡ
　　朝天罐为野牡丹科金锦香属植物朝天罐Ｏｓｂｅｃｋｉａ　ｏｐｉｐ－
ａｒａ　Ｃ．Ｙ．Ｗｕ　ｅｔ　Ｃ．Ｃｈｅｎ的根，又名张天刚、仰天罐、罐子草、
七孔莲等。主产于贵州、广西、广东、台湾及长江流域以南各
省区，生于海拔２５０～８００ｍ的山坡、山谷、水边、路旁、疏林
中或灌木丛中［１，２］，为广西少数民族地区常用本草药材。常
以根入药，称罐子草根，其味甘、微苦，性平，归肾、大肠经，功
能益肾、止血、解毒，主治腰膝酸软，咯血，痢疾，咽喉痛
等［３，４］；亦可全株入药，用于小儿风热、久咳、咯血、胃痛、白
带、月经不调、胎漏下血、痔疮出血及癌症等［５］。课题组前期
研究表明，朝天罐根水提取物具有抗炎作用，其抑制炎症组
织中ＰＧＥ的产生可能为抗炎作用机制之一［６］。因此，本文
采用二甲苯诱导小鼠耳廓肿胀和角叉菜胶致小鼠足趾肿胀
模型，对朝天罐抗炎活性部位进行筛选，并研究了活性部位
对小鼠致炎耳组织中肿瘤坏死因子（ｔｕｍｏｒ　ｎｅｃｒｏｓｉｓ　ｆａｃｔｏｒ－α，
ＴＮＦ－α）ｍＲＮＡ表达的影响，旨在为朝天罐的深入研究提供
科学依据。
１　实验材料
１．１　材料与试剂：朝天罐药材采于广西金秀瑶族自治县，经
广西医科大学天然药物与生药学教研室焦爱军教授鉴定为
朝天罐根。阳性对照药地塞米松（广东华南药业集团有限公
·７４５·
广 西 医 科 大 学 学 报
ＪＯＵＲＮＡＬ　ＯＦ　ＧＵＡＮＧＸＩ　ＭＥＤＩＣＡＬ　ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ
　２０１５Ａｕｇ；３２（４）
DOI:10.16190/j.cnki.45-1211/r.2015.04.005
司，批号：１３０４２６）。Ｔｒｉｚｏｌ试剂（美国Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ公司）；
组织细胞裂解液（Ｔｈｅｒｍｏ　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ公司）；Ｆｉｒｓｔ　ｓｔｒａｎｄ　ｃＤ－
ＮＡ　ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｋｉｔ（Ｉｎｖｉｔｒｉｇｅｎ公司）；２×ＰＣＲ　ＴａｑＭｉｘ试剂盒
（Ｔａｋａｒａ公司）。氯仿、异丙醇、无水乙醇等（成都市科龙化工
试剂厂）。
１．２　仪器：ＲＥ－５２ＡＡ旋转蒸发器，ＳＨ２－亚型循环水真空泵
（上海亚荣生化仪器厂）；小型真空干燥箱（郑州长城科工贸
有限公司）；ＢＰ２１１Ｄ万分之一克电子天平（德国赛多利斯）；
实时荧光定量ＰＣＲ仪（德国Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ　Ｍａｓｔｅｒｃｙｃｌｅｒｅｐ　ｒｅａｌ－
ｐｌｅｘ）。
１．３　动物：ＳＰＦ级昆明种小鼠，体质量１８～２２ｇ，雌雄各半，
动物许可证号：ＳＣＸＫ（桂）２００９～０００２，由广西医科大学实验
动物中心提供。
２　方　法
２．１　溶液制备：药材１　０００ｇ于５０℃烘干，粉碎成粗颗粒，
用７５％乙醇回流提取２次，每次１ｈ，减压浓缩，回收乙醇至
稠膏，得到供试品粗提物；依次用乙酸乙酯、正丁醇萃取５
次，各萃取液减压回收溶剂，经低温干燥分别得乙酸乙酯提
取物４５．４４ｇ，正丁醇提取２２．２４ｇ和水部位５０．０２ｇ。各提
取部位密封置冰箱中冷藏，临用前用蒸馏水配制成所需的浓
度。
２．２　分组及给药：取小鼠１１０只，利用随机数字表法将动物
分成１１组，每组１０只，雌雄各半，设空白对照组（生理盐水）、
阳性对照组（地塞米松０．００６ｇ／ｋｇ）、朝天罐乙酸乙酯低剂量
组（５ｇ／ｋｇ）、朝天罐乙酸乙酯中剂量组（１０ｇ／ｋｇ）、朝天罐乙
酸乙酯高剂量组（２０ｇ／ｋｇ）、正丁醇及水部位高、中、低剂量
组，其中高、中、低剂量分别为２０ｇ／ｋｇ、１　０ｇ／ｋｇ、５ｇ／ｋｇ。
２．３　受试药物对小鼠耳廓肿胀度的影响：各组小鼠分别灌
胃给予相应药物，每日１次，连续７ｄ。第７天首次给药后３ｈ
后，进行第２次给药。第２次给药１ｈ后，对小鼠右外耳廓涂
抹二甲苯５０μＬ造成急性炎症模型。涂二甲苯１ｈ后，脱颈
椎处死，用打孔器在左右耳相同位置打下耳片，称重，计算小
鼠耳廓肿胀度及肿胀抑制率。小鼠耳廓肿胀度＝致炎后右
耳质量－未致炎左耳片质量，肿胀抑制率＝（空白对照组平
均肿胀度－用药组平均肿胀度）／空白对照组平均肿胀度×
１００％。
２．４　受试药物对小鼠足趾肿胀度的影响：各组小鼠分别灌
胃给予相应药物，每日１次，连续７ｄ。第７天首次给药１ｈ
后，对小鼠左足趾注射角叉菜胶（１％），每只５０μＬ。３ｈ后，
进行第２次给药。第２次给药１ｈ后，将小鼠左右足趾剪下，
称重，计算小鼠足趾肿胀度及肿胀抑制率。小鼠足趾肿胀度
＝致炎左腿足趾质量－未致炎右腿足趾质量，肿胀抑制率＝
（空白对照组平均肿胀度－用药组平均肿胀度）／空白对照组
平均肿胀度×１００％。
２．５　朝天罐乙酸乙酯提取物对小鼠致炎耳组织ＴＮＦ－αｍＲ－
ＮＡ表达的影响：在超低温环境中将小鼠耳组织研磨至匀浆，
采用Ｔｒｉｚｏｌ法提取致炎小鼠耳组织中总ＲＮＡ。经检测并鉴
定ＲＮＡ含量与纯度后，然后按照Ｆｉｒｓｔ　ｓｔｒａｎｄ　ｃＤＮＡ　ｓｙｎｔｈｅ－
ｓｉｓ　ｋｉｔ的说明合成目标ｃＤＮＡ，而ｃＤＮＡ 终体积为２５μＬ。
ＰＣＲ反应体系：ｃＤＮＡ模板１．５μＬ，１０μＭ 的上下游引物各
２μＬ，２×ＰＣＲ　Ｔａｑ　Ｍｉｘ　５．０μＬ，用双蒸水溶解体积置２５μＬ。
而ＰＣＲ反应扩增条件：预变性９３℃１０ｍｉｎ，９４℃变性３０ｓ，
退火温度６０℃退火３０ｓ，７２℃延伸１０ｓ，进行３５个循环。
采用凝胶成像分析系统收集光密度（ＯＤ）数据，以ＴＮＦ－α条
带与β－ａｃｔｉｎ条带ＯＤ比值作为目的基因 ｍＲＮＡ的相对表达
水平。引物设计合成表，见表１。
表１　引物设计合成表
目标基因 正义链引物 反义链引物 产物大小
ＴＮＦ－α ５’－ＴＧＡＡＣＴＴＣＧＧＧＧＴＧＡＴＣＧＧＣＴ－３’ ５’－ＡＧＣＣＴＴＧＴＣＣＣＴＴＧＡＡＧＡＧＡＡＣ－３’ ２９３ｂｐ
β－ａｃｔｉｎ　 ５’－ＡＴＧＴＣＡＧＡＴＣＣＣＣＡＡＣＧＧＡＴＡＣＡＴ－３’ ５’－ＡＣＴＣＣＣＣＴＡＡＧＡＴＴＧＴＣＡＧＣＡＡＴ－３’ ３０４ｂｐ
２．６　统计学方法：采用ＳＰＳＳ　１３．０统计软件分析数据，各组
计量资料均以均数±标准差（珚ｘ±ｓ）表示，多组间均数比较
采用方差分析，组间两两比较采用ＳＮＫ－ｑ检验；Ｐ＜０．０５为
差异有统计学意义。
３　结　果
３．１　受试药物对小鼠耳廓肿胀度的影响：二甲苯致炎后，地
塞米松组、朝天罐乙酸乙酯中剂量组和高剂量组、正丁醇中
剂量组和高剂量组耳廓肿胀度较空白对照组均显著减轻（Ｐ
＜０．０５），见表２。
３．２　受试药物对小鼠足趾肿胀度的影响：角叉菜胶致炎后，
地塞米松组、朝天罐乙酸乙酯部位中剂量组和高剂量组、正
丁醇高剂量组小鼠足趾肿胀度均较空白对照组减轻，差异有
统计学意义（Ｐ＜０．０５），见表３。
３．３　朝天罐乙酸乙酯提取物对小鼠致炎耳组织ＴＮＦ－αｍＲ－
ＮＡ表达的影响：ＰＴ－ＰＣＲ结果表明，二甲苯致炎小鼠耳组织
中ＴＮＦ－αｍＲＮＡ表达水平明显增加。经地塞米松和朝天罐
乙酸乙酯提取物干预后，致炎小鼠耳组织中 ＴＮＦ－αｍＲＮＡ
高表达水平被有效抑制，其表达含量明显下调，见图１。
·８４５· 广西医科大学学报　２０１５Ａｕｇ；３２（４）
表２　受试药物对小鼠耳廓肿胀度的影响（珚ｘ±ｓ，ｎ＝１０）
　组别
剂量
（ｇ／ｋｇ）
耳廓肿胀度
（ｍ／ｍｇ）
肿胀抑制
率（％）
空白对照组 ３．８７±２．０７
地塞米松组 ０．００６　 １．２８±０．８６＊ ６６．９
朝天罐乙酸乙酯低剂量组 ５　 １．９０±２．１１　 ５０．９
朝天罐乙酸乙酯中剂量组 １０　 １．４７±１．６７＊ ６２．０
朝天罐乙酸乙酯高剂量组 ２０　 １．３６±１．２４＊ ６４．９
正丁醇低剂量组 ５　 ２．１３±２．４０　 ４５．０
正丁醇中剂量组 １０　 １．５７±１．８９＊ ５９．４
正丁醇高剂量组 ２０　 １．６４±１．４２＊ ５７．６
水部位低剂量组 ５　 ２．４２±１．７７　 ３７．５
水部位中剂量组 １０　 １．６６±０．９６　 ５７．１
水部位高剂量组 ２０　 １．７６±１．９２　 ５４．５
　　　　　　　　　　　　　注：与空白对照组比较，＊Ｐ＜０．０５
表３　受试药物对小鼠足趾肿胀度的影响（珚ｘ±ｓ，ｎ＝１０）
　组别
剂量
（ｇ／ｋｇ）
足趾肿胀度
（ｍ／ｍｇ）
肿胀抑制
率（％）
空白对照组 ４６．４７±７．９１
地塞米松组 ０．００６　 ２０．３２±４．３０＊ ５６．３
朝天罐乙酸乙酯低剂量组 ５　 ３２．６４±５．１２　 ２９．８
朝天罐乙酸乙酯中剂量组 １０　 ２６．３１±４．１３＊ ４３．４
朝天罐乙酸乙酯高剂量组 ２０　 ２０．４９±３．１８＊ ５５．９
正丁醇低剂量组 ５　 ３６．８３±５．７８　 ２０．７
正丁醇中剂量组 １０　 ２８．７３±４．７２　 ３８．２
正丁醇高剂量组 ２０　 ２３．８８±３．５７＊ ４８．６
水部位低剂量组 ５　 ４０．１８±１２．３６　 １３．５
水部位中剂量组 １０　 ３５．８０±１４．７１　 ２３．０
水部位高剂量组 ２０　 ３２．４６±１０．７０　 ３０．１
　　　　　　　　　　　　　注：与空白对照组比较，＊Ｐ＜０．０５
图１　朝天罐乙酸乙酯提取物下调小鼠致炎耳组织 ＴＮＦ－α
ｍＲＮＡ的表达（珚ｘ±ｓ，ｎ＝１０）
　　注：与空白对照组比较，＊Ｐ＜０．０５，与地塞米松相比，
＃Ｐ＜０．０５
４　讨　论
　　本研究通过二甲苯致小鼠耳廓肿胀及角叉菜胶致小鼠
足趾肿胀实验对朝天罐活性部位进行筛选，结果发现，朝天
罐乙酸乙酯部位和正丁醇部位具有抗炎活性，与空白对照组
比较差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５），其中乙酸乙酯部位的抗
炎活性最强。该结果提示，朝天罐抗炎活性的部位可能由极
性较低的成分组成，如黄酮类化合物。故朝天罐乙酸乙酯部
位和正丁醇部位的化学成分研究将成为我们下一步研究工
作的内容。
　　炎症反应与人体多种疾病的发生发展密切相关，ＴＮＦ－α
是炎症反应中重要的前炎症细胞因子和启动因子，它与其他
前炎症细胞因子一起启动炎症级联反应。研究表明，静脉注
射内毒素后，ＴＮＦ－α是最先出现的细胞因子［７，８］。在内毒素
血症试验中，提前中和ＴＮＦ－α的活性可阻断其他细胞因子释
放［９］，亦表明ＴＮＦ－α是细胞因子瀑布效应的关键点。本研究
结果显示，朝天罐乙酸乙酯部位高、中剂量组可显著下调
ＴＮＦ－αｍＲＮＡ的表达。故可推测，ＴＮＦ－α可能为朝天罐抗
炎作用的靶点，具体作用机制有待进一步深入研究。
参考文献：
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ｌａｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　ｍｕｓｈｒｏｏｍ　Ｐｈｅｌｉｎｕｓ　ｌｉｎｔｅｕｓ
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ｃｏｍｂｉｎａｎｔ　ｄｉｍｅｒｉｃ　ＴＮＦ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ｏｎ　ｈｕｍａｎ　ｉｎｆｌａｍｍａｔｏ－
ｒｙ　ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ　ｆｏｌｏｗｉｎｇ　ｉｎｔｒａｖｅｎｏｕｓ　ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ　ａｄｍｉｎｉｓ－
ｔｒａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｊ　Ｉｍｍｕｎｏｌ，１９９５，１５５（１０）：５０３８．
广西医科大学学报　２０１５Ａｕｇ；３２（４）
＊基金项目：广西自然科学基金资助项目（Ｎｏ．２０１３ＧＸＮＳＦＡＡ０１９１６９）；
广西壮族自治区卫生和计划生育自筹科研课题资助项目（Ｎｏ．Ｚ２０１５５８２）
△通信作者，Ｅ－ｍａｉｌ：Ｙｕｎｈｕａｌｉａｏ１００８＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ
１广西医科大学第一附属医院肾内科
２广西壮族自治区南溪山医院肾内科　桂林　５４１００２
收稿日期：２０１５－０３－０５
阿奇霉素联合左氧氟沙星对大肠杆菌生物膜的干预＊
邹龙涛　伍巧源１　李艳林２　廖蕴华△１
（广西医科大学附属肿瘤医院重症学科　南宁　５３００２１）
摘要　目的：研究阿奇霉素（ＡＺＭ）联合左氧氟沙星（ＬＦＸ）对腹膜透析（ＰＤ）管大肠杆菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）生物膜（ＢＦ）的影响。方法：（１）
二倍稀释法分别测定ＡＺＭ、ＬＦＸ对临床分离Ｅ．ｃｏｌｉ最低抑菌浓度（ＭＩＣ）及最低杀菌浓度（ＭＢＣ）；（２）建模３ｄ后对各组分别进
行处理。Ａ组：空白对照组；Ｂ组：１／８ＡＺＭ　ＭＩＣ组；Ｃ组：１ＬＦＸ　ＭＢＣ组；Ｄ组：１／８ＡＺＭ　ＭＩＣ＋１ＬＦＸ　ＭＢＣ组。经药物作用
１２ｈ，各组分别以连续稀释法行ＢＦ内活菌计数，扫描电子显微镜观察ＰＤ管表面ＢＦ结构。结果：（１）Ｂ组与Ａ组比较差异无统
计学意义（Ｐ＞０．０５）；Ｃ组与Ａ组比较活菌数量减少，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０１）；Ｄ组与Ｃ组比较活菌数量减少，差异有
统计学意义（Ｐ＜０．０５）；（２）扫描电子显微镜观察可见Ｄ组Ｅ．ｃｏｌｉ　ＢＦ结构体积较Ａ组减少。结论：ＡＺＭ可增强ＬＦＸ对ＰＤ管
表面Ｅ．ｃｏｌｉ　ＢＦ内细菌抗菌效应。
关键词　大肠杆菌；生物膜；腹膜透析；阿奇霉素；左氧氟沙星
中图分类号：Ｒ－３３　　　文献标志码：Ａ　　　文章编号：１００５－９３０Ｘ（２０１５）０４－０５５０－０３
ＴＨＥ　ＩＮＴＥＲＶＥＮＴＩＯＮ　ＲＯＬＥ　ＯＦ　ＡＺＩＴＨＲＯＮＹＣ　ＩＮ　ＡＮＤ　ＬＥＶＯＦＬＯＸＡＣＩＮ　ＯＮ　Ｅ．ｃｏｌｉ　ＢＩＯ－
ＦＩＬＭ
Ｚｏｕ　Ｌｏｎｇｔａｏ，Ｗｕ　Ｑｉａｏｙｕａｎ，Ｌｉ　Ｙａｎｌｉｎ，Ｌｉａｏ　Ｙｕｎｈｕａ．（Ｔｈｅ　Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ　Ｔｕｍｏｒ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｇｕａｎｇｘｉ　Ｍｅｄｉｃａｌ
Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｎｉｎｇ　５３００２１，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅ　ｄｅｓｔｒｕｃｔｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　Ａｚｉｔｈｒｏｍｙｃｉｎ（ＡＺＭ）ａｎｄ　Ｌｅｖｏｆｌｏｘａｃｉｎ（ＬＦＸ）
ｔｏ　Ｅ．ｃｏｌｉ　ｂｉｏｆｉｌｍ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｄｉａｌｙｓｉｓ　ｃａｔｈｅｔｅｒ　ｔｕｂｅ，ａｎｄ　ｉｔｓ　ｂａｃｔｅｒｉｃｉｄａｌ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ＢＦ　ｗｉｔｈｉｎ　Ｅ．ｃｏｌｉ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：（１）
Ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｔｈｅ　Ｍｉｎｉｍｕｍ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（ＭＩＣ）ａｎｄ　Ｍｉｎｉｍｕｍ　ｂａｃｔｅｒｉｃｉｄａｌ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（ＭＢＣ）ｏｆ
ＡＺＭ　ａｎｄ　ＬＦＸ　ｏｎ　Ｅ．ｃｏｌｉ．（２）Ｄｉｖｉｄｅｄ　ｉｎｔｏ　ｆｏｕｒ　ｇｒｏｕｐｓ—Ｇｒｏｕｐ　Ａ（ｌａｎｋ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ），Ｇｒｏｕｐ　Ｂ（１／８ＭＩＣ
ＡＺＭ　ｇｒｏｕｐ），Ｇｒｏｕｐ　Ｃ（１ＭＢＣ　ＬＦＸ　ｇｒｏｕｐ），Ｇｒｏｕｐ　Ｄ（１／８ＭＩＣ　ＡＺＭ　ａｎｄ　１ＭＢＣ　ＬＦＸ　ｇｒｏｕｐ）．Ａｆｔｅｒ　１２－
ｈｏｕｒ　ｍｅｄｉｃａｔｉｏｎ，ＳＥＭ　ｏｂｓｅｒｖｅｄ　ｔｈｅ　ｓｕｒｆａｃｅ　ｏｆ　ｔｈｅ
ｄｉａｌｙｓｉｓ　ｃａｔｈｅｔｅｒ　ｔｕｂｅ’ｓ　ＢＦ，ａｎｄ　ｃｒｙｓｔａｌ　ｖｉｏｌｅｔ
ｓｔａｉｎｉｎｇ　ＢＦ　ｓｅｍｉ－ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ，ｕｓｉｎｇ　ｆｌａｔ－ｐａｎｅｌ　ｍｉ－
ｃｒｏ－ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｔｏ　ｃｏｕｎｔ　ｖｉａｂｌｅ　ｃｅｌｓ　ｏｎ　ｔｈｅ
ｓｕｒｆａｃｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｃａｒｒｉｅｒ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：（１）Ａｆｔｅｒ　１２－ｈｏｕｒ
ｍｅｄｉｃａｔｉｏｎ，ｗｅ　ｕｓｅｄ　ｆｌａｔ－ｐａｎｅｌ　ｍｉｃｒｏ－ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ
·０５５· 广西医科大学学报　２０１５Ａｕｇ；３２（４）
DOI:10.16190/j.cnki.45-1211/r.2015.04.006