全 文 :广防风基原与鉴别
刘文啟1,严华1,董亚娟2,魏锋1,马双成1
第一作者 Tel:(010)67095451;E ~ mail:liuwqi@ sina. com
(1.中国食品药品检定研究院中药民族药检定所,北京 100050;2.甘肃省定西市药品检验检测中心,定西 743000)
摘要 目的:建立广防风形态学及理化鉴别方法,完善质量标准。方法:考证广防风文献,应用植物分类学、药材鉴定学及薄
层色谱的方法对广防风生药学鉴别特征观察记述,对不同产地广防风根及地上部位化学特征比对研究。结果:广防风本草考
证表明古今广防风为唇形科植物广防风 Epimeredi indica(L.)Rothm. 干燥全草。本文提供广防风植物形态,根和茎叶性状特
征,提供其组织横切面及粉末的特征,同时提供广防风地上与地下部位成分定性分析结果。结论:研究结果可为广防风的鉴
别、质量标准制订及合理开发利用提供依据。
关键词:广防风;植物分类;药材鉴定;性状显微;原植物图;组织切片图;薄层色谱图;中药质量标准
中图分类号:R 917 文献标识码:A 文章编号:0254 - 1793(2015)02 - 0370 - 07
Origin and authentication of Epimeredi indica
LIU Wen - qi1,YAN Hua1,DONG YA - juan2,WEI Feng1,MA Shuang - cheng1
(1. National Institutes for Food and Drug Control,Beijing 100050,China;2. Gansu Province Dingxi
Institute and Testing Center for Drug Control,Dingxi 743000,China)
Abstract Objective:To establish a convenient and effective identification method for morphology analysis and
chemical identification of Epimeredi indica,so as to provide the basis for quality standard improvement. Methods:
The origin of Epimeredi indica was clarified by literature research. The pharmacognostic characteristics of Epimere-
di indica were studied by means of plant morphology,plant taxonomy and phytochemical TLC. The chemical char-
acteristics of Epimeredi indica’s root from the different growing regions and the plant of Epimeredi indica above
ground were observed and compared. Results:Researches on materia medica showed that the so called Guang-
fangfeng in ancient and modern times in China was the dry herb belonging to the family Labiatae,whose Latin
name was Epimeredi indica(L.)Rothm. This paper illustrated the characteristics of Epimeredi indica (including
its plant morphology,characteristics of root,stem and leaf)and its qualitative analysis of components under and a-
bove ground based on the characteristics of transverse tissue section and powder. Conclusion:The research re-
sults can provide the basis for identification,quality standard,rational development and utilization of Epimeredi in-
dica.
Keywords:Epimeredi indica;plant taxonomy;identification of Chinese medicine;characteristics and microscopic
features;original plant graph;tissue section graph;phytochemical TLC;TCM quality standards
广防风为唇形科植物广防风 Epimeredi indica
(L.)Rothm.干燥全草,分布于江西、湖南南部及广
东、广西、四川等地。民间用于治疗感冒身热、筋
骨疼痛、去毒疗疮等症。由于广防风不作为常用
中药而未被重视研究与利用,目前对其研究还很
有限,但含广防风根的国家级新药广防风胶囊正
在研制中。经查询,目前尚未见到系统的广防风
生药学研究和鉴别报道。《广西中药材标准》只在
附录一项下,“本标准正文未收载的药材名”中记
述”广防风 Epimeredi indica(L.)Rothm. 干燥地上
部分”[1]。为了探寻该药材的鉴别特征,保障药材
质量,故对广防风植物形态,根、茎叶性状,组织横
切面及粉末的形态特征观察研究记述,同时应用
薄层色谱的方法对广防风地上与地下部位成分进
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行定性分析,以期合理地开发利用并为该生药鉴
定及深入研究提供参考,为药材质量标准的制订
提供实验依据。
1 仪器、样品来源与试剂
1. 1 仪器
生物显微镜 OLYMPUS BX51;DP70 数码照相系
统;CAMAG LINOMAT5 半自动点样仪;CAMAG RE-
PROSTAR3 薄层照像系统;青岛海洋化工厂分厂薄
层预制板,批号 20111008。
1. 2 样品来源
文献记载广东、广西、湖南等地亦有广防风,同
时也在广东梅州、福建古田、湖南汝城等地找到个别
样品。经查,目前江西广防风分布广,资源多。本文
所用实验样品为笔者与上海药港生物技术有限公司
黄寰研究员采自江西赣州市南部南康区、西部湖边
镇、东部赣县的野生广防风,经本文作者鉴定为唇形
科植物广防风 Epimeredi indica(L.)Rothm. 干燥
全草。
1. 3 试剂
水合氯醛、甘油均为分析纯。
2 方法
进行本草考证及文献考证,原植物鉴定,样品观
察,记述生药特征,薄层色谱鉴别。根、茎、叶横切,
水合氯醛试液(按 2010 年版中国药典一部附录ⅩⅤ
B中的方法配制)透化,稀甘油(按 2010 年版中国药
典一部附录ⅩⅤ B 中的方法配制)装片,置显微镜
下观察。药材分部位粉碎,过 80 目或 100 目筛,取
适量,同法装片,观察,目镜测微尺测量、照相。不同
产地样品粉碎装袋编号,分别为广防风全草地上部
分(南康)(GQC - NK - 01)、广防风全草地下部分
(南康) (G QC - NK -02) ;广防风全草地上部分(赣
县) (GQC - GX -01) ,广防风全草地下部分(赣县)
(GQC - GX - 02),广防风全草地上部分(涌泉)
(GQC - YQ - 01) ,广防风全草地下部分(涌泉)
(GQC - YQ -02)。
3 结果
3. 1 本草及文献考证
广防风为一路边杂草,称为“臭秽草”、“臭
草”,以全草入药[2]。臭草之名始见于清·何克谏
的《生草药性备要》,曰:“味苦、臭,性寒。消百毒
肿,疗大疮,理蛇伤”。《新华本草纲要》[3]载广防
风属植物广防风功效为“全草味辛、苦,有祛风除
湿、解毒的功能”,与《生草药性备要》所记相同,拉
丁名为 Epimeredi indica(L.),以全草入药。《中药
大辞典》[4]述防风草功用主治为“祛风,除湿,解
毒,腹痛,筋骨疼痛,疮疡,痔疮”,功效与《生草药
性备要》所记同,其拉丁名为 Anisomeles india(L.)
O. Ktze.(应为 Epimeredi indica(L.)Rothm,与前者
为异名关系),以全草入药。二部专著所记该药功
效同,基原同,并与《生草药性备要》中的臭草功效
同,又中国植物志 65 卷第 2 分册记述广防风“约
7 ~ 8 种,我国 1 种”。故《生草药性备用》之“臭
草”与现广防风基原同,民间使用的广防风植物
亦同。
3. 2 原植物形态鉴别
广防风为草本,上部多具分枝,茎直立,高
0. 8 ~ 1. 5 m,茎四棱形,粗壮,嫩时密被白色短柔
毛,成熟时毛稀疏,具浅槽。叶呈阔卵圆形,长 4 ~
7 cm,宽 3 ~ 6. 5 cm,边缘具不规则齿,先端短渐尖
或急尖,基本阔楔形;叶上表面及脉被疏而短伏
毛,下表面被短柔毛,有极密白色短绒毛,脉上的
较长。苞叶叶状,柄短或近无柄,超出轮伞花序。
主茎及侧枝茎端着生轮伞花序排列呈穗状花序,
苞片线形,长约 3 mm,花萼钟形,长约 5 mm,外被
长硬毛,期间杂有黄色小腺点:花冠淡紫色,外面
无毛,内面在冠筒中部有小疏柔毛毛环,冠檐二唇
形,边缘微波状,每侧片小,卵圆形。雄蕊伸出。
子房无毛。小坚果黑色,具光泽,近圆球形,直径
约 1. 5 mm。见图 1。
3. 3 药材特征
全株长 60 ~ 120 cm,分枝多,枝条稍曲折,茎
钝方形,横径长 0. 5 ~ 1. 0 cm,中心具髓,枝梗被柔
毛,外表暗绿色或黄褐色,节间长 4 ~ 12 cm。叶对
生,皱缩成团于枝条上部,叶片灰绿色,或棕褐色,
两面均被白色毛,上表面毛疏而长,下表面短而
密。叶柄短,细长,2 ~ 5 mm,亦具毛,叶片皱缩,湿
润,叶展平呈卵圆形或椭圆形,长 4 ~ 8 cm,宽 3 ~ 7
cm,先端短圆或钝尖,基本楔形或钝圆。茎上部侧
枝茎亦对生,枝端着生花序,疏离,花萼钟状,先端
5 齿裂,花冠多数存在,黄棕色。略具秽气。根头
部呈不规则的瘤状团块,长径长 4 ~ 7 cm,短径长 3
~ 5 cm,根头部着生多数须根和粗根。粗根长圆
锥形,弯曲,略扭曲,呈念珠状凸起,长 5 ~ 25 cm,
直径 0. 8 ~ 2. 5 cm,表面棕褐色至棕黄色,表面具
纵皱纹或空洞,纵皱纹亦扭曲,具须根痕,外皮脱
落处显网状纹理。须根纤细,有的与粗根等长。
质较硬,不易折断,断面不平坦,类白色,纹理放射
状。气微、味淡。见图 2。
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图 1 广防风原植物
Fig. 1 Original fresh plant of Epimeredi indica
1.原植物(plant of Epimeredi indica) 1 - 1.花序(inflorescence) 1 - 2.花(flower) 1 - 3.种子(seed) 1 - 4.叶序(phyllotaxy) 1 - 5.叶脉(pinnate venation with
hair) 1 - 6.茎(herbaceous stem with hair) 1 - 7.根(root)
图 2 广防风药材
Fig. 2 Features of crude drug of Epimeredi indica
1.根(root) 1 - 1,1 - 2.广防风根表面特征(surface feature of root of Epimeredi indica) 2.地上部分(dry overground part of the plant) 2 - 1.花序(dry spike) 2 -
2.叶片(dry leaf) 2 - 3.茎[叶或侧生枝对生(herbaceous stem(opposite of phyllotaxy)]
3. 4 显微特征
3. 4. 1 根横切面(直径约 6 mm) 木栓层 4 ~ 6 列
细胞,有时可见落皮组织,皮层窄,维管束外韧型,略
呈环状排列。韧皮部宽,呈半圆形,由韧皮薄壁细
胞、韧皮纤维、韧皮射线组成,韧皮射线宽,由 6 ~ 18
列整齐细胞组成。薄壁细胞中含石细胞,石细胞长
11 ~ 40 μm,宽 5 ~ 15 μm,壁厚,纹孔及孔沟明显。
形成层细胞皱缩,壁不清晰,紧靠木质部形成棕黄色
环带。木质部由导管、木射线、木纤维、木薄壁细胞
组成,导管类圆形,直径 20 ~ 60 μm,多单个或 2 个,
散在,有的导管附近有纤维群,木质束 10 余束,呈放
射状排列,被射线细胞分隔,射线细胞 8 ~ 10 余列或
多列。木薄壁细胞含淀粉粒。见图 3。
3. 4. 2 茎(直径约 5 mm) 切面呈四方形,表皮细
胞 1 列,外被角质层,外具非腺毛,四角有明显的棱
脊,向内有多列厚角细胞。内缘为数列薄壁细胞,细
胞间隙大。皮层由薄壁细胞组成,纤维单个散在或
数个相聚,横切面类圆形,径长 5 ~ 8 μm。维管束于
四角处发达,两角相邻间具小维管束。束间区细胞
呈方形或类方形排列整齐。韧皮部窄,木质部发达,
由导管、木质部薄壁细胞及木纤维组成。内皮层 1
列。髓部细胞为薄壁细胞。见图 4。
—273— 药物分析杂志 Chin J Pharm Anal 2015,35(2)
图 3 广防风根显微特征横切图
Fig. 3 Microscopic features of transverse section of roots of Epimeredi indica
1.皮层(cortex) 2.石细胞(stone cell) 3.韧皮部(phloem) 4.形成层(cambium) 5.木射线(xylary ray) 6.导管(vesse)
1 - 1.皮层(含石细胞)、韧皮部及形成层(cortex with stone cell,phloem and cambium) 1 - 2.木质部(xylem)
图 4 广防风茎横切
Fig. 4 Microscopicfeatures of transverse section of stems of Epimeredi indica
1.茎横切(transverse section of stems) 1 - 1.茎表皮及皮层(含纤维) (epidermis of stem,cortex with fiber) 1 - 2.木质部(xylem) 1 - 3.束间区特征(features of are-
a between vascular bundle) 1 - 4.小维管束(little vascular bundle between vascular bundle) 1 - 5.髓(pith)
3. 4. 3 叶表面观 ①表皮细胞垂周壁波状弯曲,上
表面气孔少见,下表皮具气孔,气孔直轴式,长径
6 ~ 8 μm,短径 5 ~ 6 μm;②腺鳞头部扁球形,直径
45 ~ 55 μm;③非腺毛由 1 ~ 5 细胞组成,长 50 ~
1 200 μm,超过 450 μm 的非腺毛多为单细胞非腺
毛。细胞略弯曲,壁平滑或具壁疣。见图 5。
3. 4. 4 叶主脉横切 叶横切上表皮细胞长方形,下
表皮细胞细小扁平,被角质层,有气孔,下表皮凹陷
处有腺鳞。栅栏组织通常为 1 列细胞,叶中脉两侧
栅栏组织不愈合,占叶横断面 1 /2 或多于 1 /2。海
绵组织为 4 ~ 5 列细胞。主脉上下表皮内有厚角组
织及薄壁细胞。主脉维管束外韧型,木质部导管常
2 ~ 5 个排列成行,韧皮部细胞细小,薄壁细胞含棕
黄或棕褐色颗粒状物。见图 6。
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图 5 广防风叶表面观
Fig. 5 Microscopic features of epidermis of leaves of Epimeredi indica
1 -1,1 -2.下表皮(腺鳞顶面观,示气孔) (cells of down epidermis with stoma and glandular scale from top surface) 1 -3.上表皮细胞(cells of up epidermis) 1 -4.单细
胞非腺毛、腺毛、鳞片状毛(nonglandular hair with single cell and glandular hair) 1 -5,1 -6.多细胞非腺毛(示壁疣)(nonglandular hair with cells and with wall warts)
图 6 叶主脉横切
Fig. 6 Microscopic features of transverse section of median vein of leaf of Epimeredi indica
1.非腺毛(nonglandular hair) 2.上表皮细胞(upside of epidermis of cell leaf) 3.厚角组织(collenchyma) 4.栅栏组织(palisade tissue) 5.木质部(xylem) 6.韧
皮部(phloem) 7.下表皮(downside of epidermis of cell leaf)
1 - 1.上表皮细胞腺毛及非腺毛(cells of up epidemis with glandular hair and nonglandular hair) 1 - 2.维管束(vascular bundle) 1 - 3.叶脉横切(栅栏组织、海绵组
织)[transverse section of median vein of leaf(palisade and spongy) ]1 - 4.叶薄壁细胞(叶肉)含颗粒状物[mesophyll(dark brown granule) ]
3. 4. 5 生药粉末 茎粉末暗绿色或灰绿色。茎表
皮细胞类长方形,可见非腺毛脱落痕。非腺毛多
破碎,亦有完整的呈圆锥形或长圆锥形,长 60 ~
120 μm,单细胞非腺毛纤细。花萼表皮细胞类方
形或类多边形,细胞壁略呈念珠状增厚;纤维长条
状,壁弯曲。花粉粒[5]近球形,外壁在两极部分较
厚,表面具网状雕纹,网眼中具少数颗粒,径长 48
~ 55 μm。导管为具缘纹孔导管,亦可见环纹导
管。木纤维梭形,具纹孔。厚壁细胞中含草酸钙
方晶。淀粉粒少见。
根粉末黄白色。木栓细胞长方形,排列整齐。
木薄壁细胞中含淀粉粒,淀粉粒具偏光。导管主要
为具缘纹孔导管。韧皮纤维为长条形,两头尖,单个
或成束,细胞壁较厚,孔沟明显,长径长 50 ~ 170
μm,横径长 12 ~ 45 μm,有的纤维腔中含草酸钙方
晶。石细胞三角形、类方形或不规则形,壁厚,纹孔
或壁孔清晰,长径长 30 ~ 50 μm,横径长 20 ~
45 μm。见图 7。
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图 7 生药粉末特征
Fig. 7 Microscopic features of powder of Epimeredi indica
1 ~ 3.非腺毛[nonglandular hair(three or four cells)]4.花萼纤维(fiber of calyx ) 5,6.淀粉粒(starch grain) 7.花冠表皮细胞(cells of epidermis of corolla) 8.花粉粒
(pollen) 9.茎表皮细胞(cells of epidermis of stems) 10.根木栓细胞(cork cells) 11.具缘纹孔导管(bordered pit vessel) 12.茎木纤维(wood fiber of stems)
13 ~15.石细胞(stone cell) 16 ~19.韧皮纤维(phloem fiber) 16.胞腔中含草酸钙方晶(calcium oxalate crystal in cell) 20.单细胞非腺毛[nonglandular hair(single cell)]
3. 5 薄层色谱鉴别
3. 5. 1 供试品溶液的制备 取本品粉末(过 3号筛)
12 g,加水 100 mL 回流提取 2 次,每次 2 h,合并提取
液,浓缩至干,加甲醇30 mL使溶解,超声(功率300 W,
频率 50 kHz)处理 30 min,过滤,滤液过硅胶柱(100 ~
200目,3 g,柱内径 1. 5 cm),用甲醇 50 mL洗脱,合并
洗脱液并浓缩至 5 mL,作为供试品溶液。
3. 5. 2 对照品溶液制备 取广防风苷 A 对照品
(上海药港生物技术有限公司,纯度 98. 0%)适量,
加甲醇制成每 1 mL含 0. 2 mg的溶液,即得。
3. 5. 3 薄层色谱鉴别 取供试品溶液、对照品溶液
各 5 μL,分别点于同一硅胶 GF254薄层板上,以三氯
甲烷 -甲醇 -水(9 ∶ 2 ∶ 0. 3)为展开剂,展开,取出,
晾干,喷以 10%硫酸乙醇溶液,105 ℃加热至斑点显
色清晰。置紫外光灯(254 nm 、365 nm)下分别检
视。结果见图 8。
图 8 广防风全草地上部位与地下部位成分 TLC比较图
Fig. 8 TLC of comparison of overground and underground parts of Epimeredi indica
A.紫外光灯 254 nm下检视(viewed under UV 254 nm) B.紫外光灯 365 nm下检视(viewed under UV365)
1.南康地上部分 GQC - NK -01(overground part of plant of Epimeredi indica from Nankang county) 2.南康地下部分 GQC - NK -02(underground part of Epimeredi in-
dica from Nankang county) 3.广防风苷对照品(epimeredinoside A) 4.赣县地上部分 GQC - GX -01(overground part of Epimeredi indica from Gan county) 5.赣县
地下部分 GQC - GX -02(underground part of Epimeredi indica from Gan county) 6.涌泉地上部分 GQC - YQ -01(overground part of Epimeredi indica from Yongquan
county) 7.涌泉地下部分 GQC - YQ -02(underground part of Epimeredi indica from Yongquan county)
—573—药物分析杂志 Chin J Pharm Anal 2015,35(2)
4 讨论
4. 1 江西产广防风为道地药材
谢先生(谢宗万)论道地药材[6]曰:“道地药材
就是指在特定自然条件、生态环境的地域内所产的
药材,且生产较为集中,栽培技术、采收加工也都有
一定的讲究,以致较同种药材在其他地区所产者品
质佳、疗效好、为世所公认而久负盛名者称之”。根
据研究及资源调查,笔者认为江西老区所产广防风
具以上特征。理由是其广防风是在特定的“自然条
件,生态环境的地域内生长”;且“品质佳,疗效好”;
“栽培技术、采收加工也都有一定的讲究”。
4. 2 广防风花粉粒形态的确认
据《中国植物花粉粒形态》记载:广防风属,草
本,约 7 ~ 8 种,我国 1 种,产西南至台湾。花粉粒长
球形到近球形,外壁两侧约等厚,表面具清晰的网状
雕纹,网眼中具少数的颗粒。以上特征与实验中观
察到广防风花粉粒特征一致。
4. 3 薄层色谱结果分析
本次薄层鉴别结果显示:关于广防风苷 A 全草
成分,3 个产地广防风地上部位的成分基本一致,地
下部位的成分也基本一致,地上、地下部分的成分则
略有不同,但在与广防风苷 A 对照品色谱相应的位
置上均可检出相应的荧光淬灭斑点或荧光斑点,虽
然该成分以地下部分斑点略明显,但该成分存在于
植物全草。笔者认为广防风,如果从本草考证来看
即以全草入药,从广防风苷 A 指标成分来看,全草
均含,若仅以根入药而舍弃地上部分,不仅与本草习
用不同,而且也是药用资源的浪费。
致谢:本文实验样品采集得到上海药港生物技术有限公
司黄寰研究员帮助支持,特此表示感谢。
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(本文于 2014 年 7 月 24 日收到)
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