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猴耳环水提物对哮喘模型豚鼠外周血细胞的影响



全 文 :收稿日期:2015-07-01
基金项目:广东省科技计划项目(2012B060300024)
作者简介:谭滴清(1987-),女,硕士,主要从事实验动物研究工作;通信作者,符路娣。
第 36卷第 8期
2015 年 8月
湖北畜牧兽医
Hubei Journal of Animal and Veterinary Sciences
Vol. 36 No.8
August 2015
猴耳环水提物为棕黑色膏状体, 在广东民间较
为常用,其抗菌、抗炎作用在临床用药实践中已得到
证实,但目前研究对其作用机理尚未明确。据于猴耳
环的众多功效,本研究拟通过建立哮喘豚鼠模型,观
察猴耳环水提物对 OVA 致哮喘模型豚鼠外周血细
胞的影响。
1 材料与方法
1.1 试验动物
普通级豚鼠 50 只,雄性,体重 250~350 g,由广
州中医药大学实验动物中心提供;生产许可证编号:
SCXK (粤)2008-0020; 使用许可证号:SYXK (粤)
2008-0001。
1.2 药品与试剂
中药猴耳环水提物(批号:130903,含没食子酸
5.1%),由广州莱泰制药有限公司提供;地塞米松(批
号:41211251),由天津金耀集团湖北天药药业股份
有限公司生产;卵清蛋白,由美国 Sigma 公司生产;
生化试剂盒,由上海科华生物工程股份有限公司提供。
1.3 仪器与设备
梅特勒 AL204 电子分析天平;台式高速冷冻离
心机(型号:MulitifugellR);日立 7060 全自动血生化
分析仪。
1.4 试验设计
将 50只雄性豚鼠依体重按随机表分成 5 组:阴
性对照组,阳性对照组、猴耳环水提物高剂量组、猴
耳环水提物中剂量组、猴耳环水提物低剂量组,每组
10只。 试验第一天用 10%卵清蛋白生理盐水溶液腹
腔注射,每只 1 mL。OVA致敏的第 14天将致敏豚鼠
放置于密闭塑料箱内, 用雾化器喷入 0.05%OVA,
40 s/(次·只),连续 4 次;第 15 天,喷入 1%OVA 溶
液超声雾化激发 2 次,第一次 2 min/(次·只),4 h 后
5 min/(次·只)。各组分别于致敏后第七天给药。阴性
对照组给予生理盐水;阳性对照组给予地塞米松,剂
量为 0.1 mg/100 g;猴耳环水提物高剂量组采用原液
的 1/2浓度给药,剂量为 1 ml/kg;猴耳环水提物中剂
量组采用原液的 1/4 浓度给药,剂量为 1 ml/kg;猴耳
环水提物低剂量组采用原液的 1/8 浓度给药, 剂量
为 1 ml/kg;连续给药 7 d。 试验结束后,心脏采血,
3 000 r/min 离心10 min,分离血清,采用全自动生化
分析仪进行检测。
1.5 数据处理
数据采用 SPSS19.9 软件分析, 用平均数±标准
差来表示。
2 结果与分析
豚鼠受 OVA 致敏激发后,并给予猴耳环水提物
和地塞米松治疗, 于停药后 24h 检查外周血细胞数
量,其结果见表 1。 由表 1 可知,阳性对照组和猴环
耳水提物中剂量组红细胞数低于阴性组, 差异显著
(P<0.05); 猴环耳水提物高剂量组和低剂量组的红
细胞数低于阴性对照组,差异不显著(P>0.05);猴环
耳水提物中剂量组血红蛋白数与阴性对照组比较,
差异显著(P<0.05),其余各组与阴性对照差异不显
猴耳环水提物对哮喘模型豚鼠外周血细胞的影响
谭滴清 1,2,潘卫松 1,3,肖 瑛 4,孙永学 2,符路娣 1,2
(1.广州中医药大学,广州 510405;2.华南农业大学,广州 510642;
3.广州市药品检验所,广州 510160;4.暨南大学,广州 510632)
摘要:为了研究猴耳环水提物对卵清蛋白(OVA)所致的哮喘模型豚鼠外周血细胞的影响,将 50 只豚鼠
随机分为阴性对照组、阳性对照组、猴耳环水提物高、中、低剂量组,每组 10 只。 试验第一天给阴性对照
组和阳性对照组、猴耳环水提物高、中、低剂量组分别腹腔注射生理盐水和 10%OVA 致敏,第 14 天和第
15 天用 OVA 雾化激发诱发哮喘模型。 试验结束后心脏采血,生化分析仪检测观察各组豚鼠外周血细胞
数量的变化。 结果表明,阳性组嗜碱性粒细胞数及中性粒细胞数均低于阴性组,差异显著(P<0.05),其余
各组与阴性组比较均差异不显著; 各组的淋巴细胞数和单核细胞数分别与阴性组比差异不显著 (P>
0.05)。 适量的猴耳环水提物对白细胞总数含量变化有积极的作用。
关键词:猴耳环水提物;外周血细胞;影响
中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:1007-273X(2015)08-0010-02
DOI:10.16733/j.cnki.issn1007-273x.2015.08.005
第 8 期
著;各组豚鼠血小板计数与阴性比较均差异不显著;
阳性对照组和猴耳环水提物中剂量组白细胞计数低
于阴性对照组,差异显著 P<0.05);猴耳环水提物高
剂量组嗜酸性粒细胞数低于阴性对照组, 差异显著
(P<0.05); 阳性对照组嗜碱性粒细胞数低于阴性对
照组,差异显著(P<0.05),其余各组与阴性对照组相
比差异不显著; 阳性对照组中性粒细胞数低于阴性
组,差异显著(P<0.05),其余各组与阴性对照组比,
差异不显著; 各组豚鼠淋巴细胞数和单核细胞数分
别与阴性对照组比较均差异不显著(P>0.05)。
3 讨论
血细胞是存在于血液中的细胞,含红细胞、白细
胞、血小板等,通过观察统计各血细胞的数量变化可
以在一定程度上反应药物的毒副作用及对身体的影
响[1]。 外周血炎症免疫细胞在哮喘发生发展中起着
重要的作用,白细胞具有免疫防御功能,它是通过吞
噬有害物质以及淋巴细胞产生抗体来调节机体,其
中嗜碱性粒细胞和嗜酸性粒细胞是哮喘变应性炎症
中释放炎症的效应细胞; 嗜酸性粒细胞在哮喘病理
生理学上作为原发效应细胞, 与中性粒细胞一样可
进行呼吸暴发产生活性氧代谢产物, 后者能损伤气
管上皮细胞膜,引起上皮脱落,黏膜水肿,还可诱导
肥大细胞脱颗粒,炎性介质释放[2]。 单核细胞在哮喘
炎症中起主要早期效应细胞作用, 具有递呈抗炎信
息和促进分泌多种细胞因子和炎性介质前体; 中性
粒细胞在哮喘的发生与发展过程中呈增加趋势,有
研究表明其可提示变应性炎症与多形核白细胞有
关系; 血小板表面具有的亲和力的 IgE 受体亦可能
是哮喘的效应细胞之一[3]。
以嗜酸性粒细胞浸润为主的慢性气道炎症性疾
病哮喘可导致微血管渗漏增加,血蛋白渗出增多。本
试验结果显示, 阳性对照组与猴耳环水提物中剂量
组红细胞数较阴性对照组有所减少, 猴耳环水提物
中剂量组血红蛋白低于阴性对照组血红蛋白数,说
明阳性对照组、 猴耳环水提物中剂量组对微血管渗
漏的修复作用不显著, 而猴耳环水提物高剂量组与
阳性对照组嗜酸性粒细胞含量均显示显著低于低剂
量组, 表示糖皮质激素和猴耳环水提物高剂量组可
能有抑制嗜酸性粒细胞的趋化,这与文献[4]报道的
一致,从而减少血液炎症细胞。阳性对照组和猴耳环
水提物中剂量组白细胞计数低于阴性对照组, 表示
猴耳环中剂量和地塞米松具有减少白细胞总数的作
用,即可减少哮喘免疫炎性细胞的数量;阳性对照组
嗜碱性粒细胞数和中性粒细胞数均低于阴性对照
组, 说明地塞米松在治疗哮喘中可通过抑制嗜碱性
粒细胞和中性粒细胞的增多起作用。 而目前治疗哮
喘最有效的抗炎药物糖皮质激素的主要作用机制是
阻止炎症细胞,特别是嗜酸性粒细胞的趋化和激活、
抑制细胞因子的生成、干扰花生四烯酸代谢,抑制白
三烯和前列腺素的合成和释放降低气管高反应性,
减轻微血管的渗漏,减轻气管水肿,使呼吸道通畅,
修复气管炎性损伤的上皮的作用。 但长期或大量使
用可能引起一系列的副作用 [5]。 基于低毒副作用的
中药猴耳环众多功效, 本试验探讨哮喘豚鼠外周血
细胞结果显示; 猴耳环水提物可能含有某种免疫活
性物质,具有降血清嗜酸性粒细胞的作用,也显示猴
耳环水提物对哮喘的作用机制不同于糖皮质激素对
哮喘的作用机制。
参考文献:
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药杂志,2007(12):23-24.
组别
白细胞总数//109个/L
红细胞//1012个/L
血红蛋白//g/L
血小板//109个/L
嗜酸性粒细胞//109个/L
嗜碱性粒细胞//109个/L
中性粒细胞//109个/L
淋巴细胞//109个/L
单核细胞//109个/L
阴性对照组
12.63±5.70
5.55±0.34
136.40±8.79
376.4±99.34
0.05 ±0.01
0.15±0.05
5.29±1.60
5.64±3.08
1.50±1.10
阳性对照组
7.09±2.70*
5.033±0.41*
124.5±11.44
346.0±142.52
0.04±0.041
0.09±0.05*
3.31±2.22*
2.80±0.72
0.85±0.49
高剂量组
15.03±5.88
5.263±0.63
129.30±14.97
364.7±72.59
0.02 ±0.01*
0.14±0.07
8.42±6.80
5.19±3.09
1.25±0.30
中剂量组
13.36±2.82*
5.206±0.31*
122.60±7.23*
330.0±121.94
0.03±0.03
0.16 ± 0.09
6.69±2.22
5.10±1.99
1.38±0.23
低剂量组
9.01±3.86
5.250 ±0.42
126.70±15.88
302.0±157.64
0.080 ±0.056
0.12 ±0.02
2.61±1.364
3.41±0.579
0.66±0.17
表 1 各治疗组豚鼠外周血细胞数量的比较
注:“*”表示与阴性对照组相比,差异显著(P<0.05)。
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