全 文 ：2015年第 3期（总第 184期）
猴耳环水提物为棕黑色膏状体，在广东民间较为常
用，其抗菌、抗炎作用在临床用药实践中已得到证实，
但目前研究对其作用机理尚未明确。据于猴耳环的众多
功效，本文拟通过建立小鼠免疫性肝损伤模型，观察猴
耳环水提物对小鼠免疫性肝损伤的血液生化指标的影响，
进一步探讨猴耳环水提物对免疫性肝损伤的作用机制。
1 材料与方法
1.1 试验动物 SPF 级昆明小鼠 50 只，体重 18-22g，
雄性，由广州中医药大学实验动物中心提供，生产许可
证编号：SCXK（粤） 2013-0020。使用许可证编号：
SYXK（粤） 2008-0001。
1.2 药品与试剂 中药猴耳环浸膏（批号：121105，含
没食子酸5.1%），由广州莱泰制药有限公司提供；环孢
菌素A软胶囊,由中美华东制药公司提供；P.acnes菌株,
由广东省微生物菌种保藏中心提供；各种生化试剂盒,均
由上海科华生物工程股份有限公司提供；细菌内毒素工
作标准品（批号：150601-201174） ,由中国食品药品检
定研究院提供。
1.3 主要仪器 电子天平(型号:AL204,梅特勒-托利多
仪器(上海)有限公司生产；台式高速冷冻离心机(型号:
MulitifugellR)；日立7060全自动血生化分析仪。
1.4 试验设计 将 KM 小鼠随机分为空白对照组、P.
acnes-LPS模型组、CsA组、猴耳环水提物高剂量组、猴
耳环水提物低剂量组共5组，每组10只。适应性喂养一
周后开始实验，试验第一天每只小鼠，尾静脉注射8mg·
kg-1热灭活P.acnes生理盐水溶液，试验第五天每只小鼠
尾静脉注射5ug/kgLPS-PBS溶液。 .acnes负荷前每天灌
胃1次连续7d，用猴耳环水提物水溶液灌胃，其中高剂
量给予5.82mg·kg-1，低剂量给予2.91mg·kg-1。末次给药
在LPS注射30min前，对照组给予等容量0.9%氯化钠注
射液。CsA 从 P.acnes 负荷后一天起灌胃给药，剂量为
5mg·kg-1。
1.5 检测指标与方法
1.5.1 血液生化指标检测 在试验结束时，采集各组小
鼠血样，使用离心机分离血样（3000r/min,10min），采用
全自动化生化分析仪检测丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天
冬氨酸氨基转移酶 （AST）、总蛋白 （（TP）、白蛋白
（ALB）、球蛋白（GLO）。
1.5.2 肝脏组织学检查 取小片肝组织于10%甲醛溶液
中固定，HE染色，光镜下观察。
1.6 统计学处理 实验数据以 STATA 13.0 统计软件包
处理实验数据，实验数据以X±s表示,采用方差分析进
行统计学分析。
2 结果
2.1 猴耳环水提物对免疫性肝损伤小鼠血液生化指标的
影响
表 1 的结果显示，模型组小鼠较正常组相比血清
ALT水平明显升高，不同剂量猴耳环水提物均可降低P.
acnes-LPS 负荷小鼠血清 ALT水平,且呈一定量效关系。
对照药CsA也同样显著抑制因 P.acnes-LPS 负荷而引起
的小鼠血清ALT活性的升高（P<0.05）。模型组小鼠血清
TP含量减少、ALB含量下降、GLO升高。猴耳环水提物
组小鼠血清中的ALB、TP有所下降，但与模型组比较无
统计学意义（p>0.05）。说明本猴耳环水提物对免疫性肝
损伤小鼠有一定的治疗效果。
2.2 猴耳环水提物对免疫性肝损伤小鼠肝脏组织病理学
变化的影响
光镜下正常小鼠肝组织结构清晰，肝细胞索围绕中
央静脉呈放射状排列。模型组小鼠肝细胞呈较广泛的嗜
猴耳环水提物对免疫性肝损伤小鼠血液生化指标的影响
谭滴清 1,4，潘卫松 1,2 ，肖 瑛 3 ，马景涛 3 ，孙永学 4，符路娣 1＇*
(1.广州中医药大学，广州510405；2.广州市药品检验所，广州510160；
3.暨南大学，广州510632；4.华南农业大学，广州510642)
摘 要：探讨猴耳环水提物对肝损伤小鼠血液生化指标的影响。方法：将50只昆明小鼠随机分为空白组、模型组、阳性组、猴
耳环水提物高、低剂量组。空白组、模型组分别灌胃等量的生理盐水，阳性组按5mg·kg-1灌胃环孢素溶液，猴耳环水提物高、
低剂量组分别按5.82mg·kg-1、2.91mg·kg-1灌胃，1次/d，连续给药7d。实验第一天以P.acnes染毒小鼠，末次给药前30min，空
白组尾静脉注射等量生理盐水，其余各组尾静脉注射5ug/kg脂多糖，末次给药后采集各组小鼠血液，采用全自动化生化分析
仪检测ALT、AST、 P、ALB、GLO含量。结果：与模型组比较不同剂量猴耳环水提物能显著降低血清中ALT水平（P<0.05）。猴
耳环水提物组小鼠血清中的AST、 P与模型组的比较无统计学意义（p>0.05）。结论：猴耳环水提物能较好的改善肝损伤小鼠
的血液生化指标，提高肝损伤小鼠的免疫功能。
关键词：肝损伤；猴耳环水提物；生化指标；影响
中图分类号：S853.7 文献标识码：B 文章编号：1003-8655 （2015） 03-0012-03
试
验
研
究
收稿日期： 2015-04-19
基金项目：广东省科技计划项目（2012B060300024）。
作者简介：谭滴清(1987-），女，本科，主要从事实验动物学工作。
*通讯作者。
12
2015年第 3期（总第 184期）
酸性坏死,肝组织镜下可见肝细胞肿胀较明显，胞浆疏松
透亮，部分呈气球样变少数出现广泛的肝细胞坏死,肝细
胞浊肿有点状坏死及小灶性坏死，可见散在的肉芽肿形
成,汇管区有大量炎性细胞浸润;CsA组小鼠肝组织切片
见肝细胞普遍水肿，胞浆疏松但较模型组轻，未见肝细
胞坏死、炎细胞浸润等改变；猴耳环水提物高剂量组见
肝细胞水肿改变较轻，未见肝细胞坏死、炎细胞浸润等
改变；猴耳环水提物低剂量组未见肝细胞水肿、坏死、
炎性细胞浸润等表现。其中猴耳环水提物低剂量的肝细
胞损伤程度最低。提示猴耳环水提物对 P.acnes-LPS 诱
导的免疫性肝损伤有一定的保护作用。
（图 1 各组小鼠光镜下病理变化图， 转见第 24 页下方）
3 讨论
猴耳环是一味较为名贵的中药，其在治疗上呼吸道
感染，咽炎，咽喉炎，急性扁桃体炎，急性胃肠炎，细
菌痢疾等方面具有良好的临床效果。其叶、果实、种子：
清热解毒，凉血消肿，并可外用于烧烫伤、疮疡痈疖肿。
全国中草药汇编记录其味功能微苦微涩，凉。清热解毒，
凉血消肿。外用于烧伤、烫伤、疮痈疖肿。宋玉乔等[1]证
实猴耳环中的槲皮苷能降低血压、保护心肌缺血再灌注
损伤，有抗氧化、清除氧自由基、增强免疫功能及抗癌、
抗菌、抗病毒和镇痛等作用。李药兰等[2]发现猴耳环中的
没食子酸甲酯成分具有较好的体外抗呼吸道合胞病毒
（RSV） 活性。吴蓉蓉等[3]研究发现，猴耳环水提取物或醇
提取物对流感病毒甲3型、副流感病毒1型、呼吸道合
胞病毒、单纯疱疹病毒1和2型（HSV-1，HSV-2）、肠
道病毒CoxB3、鼻病毒 （RV）、腮腺炎病毒均有抑制作
用，且有很强的抗氧化活性。
猴耳环水提物功效之多，使其成为为提高免疫性肝损
伤治疗效果药物的优选研究药物。而注射P.acnes和LPS
可诱导小鼠产生严重的免疫性肝损伤模型类似于人类肝炎
发生的病理生理过程，是筛选保肝药物较为理想的模型之
一[4]。方士英等[5]研究证明由于P.acnes-LPS诱发肝损伤可
以被CsA等免疫抑制剂所抑制，因此认为P.acnes-LPS肝
损伤模型近似自身免疫性肝炎的病理过程，其病变与慢性
肝炎非常接近。
血液生化指标能很好的地反映机体生理代谢状态，也
是机体新陈代谢机能的反映。因而临床诊断上血液生化指
标便成为优选诊断方式。大部分球蛋白具有免疫功能，免
疫球蛋白在人体血清中具有抗体活性，能够抗菌、抗病
毒、加强细胞的吞噬作用，是引发机体体液免疫的重要物
质[6]，GLO含量的高低在一定程度上反映了动物机体免疫
功能的好坏。ALT在肝脏中的含量最为丰富，只分布于细
胞浆中，ALT升高，就提示肝细胞发生了损伤，是医学
上肝功能检査的指标。AST在提示肝细胞损伤方面灵敏度
不如ALT，因为其主要存在于肝细胞的线粒体之屮，而
ALT主要存在线粒体之外。只有在严重的肝细胞损伤时，
线粒体膜才会受损，从而AST浓度才会升高。
本实验过程中P.acnes-LPS染毒小鼠可引起肝组织损
伤导致血清ALT活性升高，通过猴耳环水提物治疗后小
鼠血清ALT活性降低。对照药CsA也同样显著抑制因P.
acnes-LPS负荷而引起的小鼠血清ALT活性的升高（P<0.
05）。模型组小鼠血清TP含量减少、ALB含量下降、GLO
升高。猴耳环水提物组小鼠血清中的ALB、TP有所下降
但，各组TP、ALB、GLO含量差异不显著（P>0.1）。显示
猴耳环水提物不是直接影响机体对蛋白质的利用程度及对
血液渗透压，此次试验中ALB对组织的修补能力不显著。
肝脏组织学显示猴耳环水提物可一定程度的改善肝组织的
病理学变化。以上实验说明了本猴耳环水提物对 P.
acnes-LPS致小鼠免疫性肝损伤小鼠有一定的治疗效果。
参考文献：
[1] 宋玉乔,姚凌云,曹蔚,等.槲皮素的药理作用研究近
况[J].西北药学杂志,2002(01):40-42.
[2] 李药兰,李克明,苏妙贤,等.猴耳环抗病毒有效成分
研究[J].中国中药杂志,2006(05):397-400.
[3] 吴蓉蓉,黄杰昌,雷佳,等.猴耳环提取物的新用途:
2006-10-25
[4] NigamSK,MitraCR.Pithecolobiumdulce.IV.
Constituentsofflowers,heartwoodandrootbark.[J].
Planta Medica,1968,16(3):335-337.
[5] 方士英,徐茂红,叶良兵,等.冬虫夏草对免疫性肝损
伤小鼠模型的保护作用研究[J].中国免疫学杂志,
2011(10):891-894.
[6] AktasO,ZippF.RegulationofSelf-ReactiveTCellsby
HumanImmunoglobulins-ImplicationsforMultiple
SclerosisTherapy[J].CurrPharmDes,2003,9(3):245-256.
表 1 猴耳环水提物对肝损伤小鼠血液 ALT、AST、ALB、GLO、TP 水平的影响（X±s，n=10）
组别 ALT AST ALB GLO TP
（mmol·L-1） （mmol·L-1） （mmol·L-1） （mmol·L-1） （mmol·L-1）
空白组 27.00±6.42** 111.83±32.38 29.83±3.16 14.78±2 14 44.62±2 46
模型组 100.17±53.65 139.67±24 52 30.23±2.19 15.35±3 41 42.25±6 08
阳性组 23.83±11.05** 102.50± 6.48 31.77±1.41 13.97±0 84 40.70±13.36
高剂量组 43.33±20.72* 114.17±31.59 30.70±1.35 14.67±1 50 44.35±2 98
低剂量组 50.67±24.73 140.50±73 92 29.63±2.54 17.72±4 31 47.32±3 64
注：各组数据均与模型对照组比较（*P<0.05，**P<0.01）
试
验
研
究
13
2015年第 3期（总第 184期）
A为空白组 B为模型组 C为 CSA组 D为高剂量组 E为低剂量组
2013年9月8日，武威市黄羊镇广场村队
杨某家奶牛发病，前去动物医院求诊。主诉：
病牛出现恶寒、乳房肿胀，进食量和奶产量均
明显下降。病牛烦躁，站立不安，高热稽留，
体温40.5℃～42。70℃，全身颤抖，心跳加快，
眼结膜潮红，口唇淡红，舌苔黄腻而后，鼻镜
干燥，渴而不饮，病牛乳房肿胀发热、外观变
形、可触摸到坚硬的肿块、疼痛较明显，乳汁
分泌不畅，不时有清水般液体滴出，乳汁清内
含浑浊的絮状物。经检查诊断为急性乳房炎。
治疗时用黄芪60g.川芎30g，薏苡仁30g，蒲公
英18g，野菊花30g，桃仁18g，瓜蒌18g，生石
膏 60g，加水 2500ml，煎取药液 1200ml，每天
早晚各灌服1 次，连用3 天，同时采用上述外
敷药物外敷。到第二天，症状明显减轻，第三
天，除乳房肿块尚未完全消失外，其他症状已
消除：停止用药两天，继续灌服和外敷上述中
药，连用 3 天：9 月 14 日复疹时已完全康复。
经1月后回访，未再复发。
7 体会
7.1 西药治疗 能较快消除乳房炎症，但治愈
后易复发，且产奶量在短期内难以恢复，影响
奶牛生产性能。
7.2 中药治疗 虽然疗效较慢，但治愈后不
易复发，产奶量能快速恢复正常，且生产性
能稳定。
7.3 乳房炎对奶牛危害大，应以预防为主。
加强饲养管理，保持牛舍干燥，保持乳头洁净，
防止乳头外伤，挤奶应对乳头进行消毒。
参考文献：
[1] 陈长明等.奶牛乳房炎的发生及防治[J].农业科技，
2007,23（5）：101-102.
[2] 张开兰等.奶牛乳房炎的中西医治疗[J].中国牛业科
学，2007，11（03）：45.
[3] 朱玉涛，吴建华.奶牛乳房炎的免疫预防[J].安徽农业
科学，2007，15（31） 12-14.
[4] 李春生，几种药物对奶牛乳房炎的治疗效果分析[J].
中国奶牛，2007，22（11)101-102.
[5] 蒋春茂，周新民.奶牛乳房炎研究进展[J].中国畜牧兽
医.2004.5（8）：36
[6] 王魁，王学文.奶牛隐性乳房炎的发生及其综合防治
[J].中国奶牛，2007，2（11）：56-58.
[7] 张宗合，梁红军.西结合治疗奶牛乳房炎[J].中国牛业
科学.2007，23（03） 13-14.
[8] 岳文斌，张数方.牛病防控于治疗技术[J].北京：中国
农业出版社.2006,8（5） 45-48.
[9] 姜聪文.中兽医基础[M].北京：中国农业出版社.
2001，32（15）：121-124.
[10] 李玉冰.兽医临床诊疗技术[M].北京：中国农业出版
社.2006，12（15）：123-126.
临
床
金
鉴
图 1 各组小鼠光镜下病理变化图（X100倍）
A B C
D E
（接第 13页文）
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
24