全 文 ：下 ,是否也会引起化学成分含量的变化 ,有必要进行
主要成分的定量分析 。测定结果显示 ,黄芩苷转移
率在 90%以上 ,小檗碱转移率在 75%以上 ,说明本
品采用 80%乙醇提取时 ,黄芩 、黄连的共存并未产
生难溶性沉淀物 ,或许黄芩苷与小檗碱的结合物在
醇溶液中又分解为游离状态。
3.2　供试品溶液的制备选用 80%乙醇为溶剂 ,在
此条件下供试品全部溶解 ,避免了预处理过程的损
失 ,且方法学考察符合有关规定;黄芩 、黄连药材供
试品溶液参照中国药典方法制备;检测波长是根据
对照品的紫外光谱最大吸收而设定 ,保证了含量测
定的高灵敏度。
参考文献:
[ 1] 　邢东明 ,赵玉男 ,石　钺 , 等.解热药 YL2000中蛇床子素在正
常和发热大鼠体内药物代谢动力学比较 [ J] .中国实验方剂学
杂志 , 2004, 10(2):30.
[ 2] 　孙　虹 ,赵玉男 ,邢东明 ,等.感冒一小时胶囊中黄芩苷在正常
与发热大鼠体内动力学特点的比较 [ J] .中药药理与临床 ,
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初探 [ J] .中成药 , 1993, 15(1):18.
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的影响 [ J] .中国中药杂志 , 1991, 16(10):604.
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学成分的影响 [ J] .中国中药杂志 , 1994, 19(1):115.
白蔹痔疮栓质量标准研究
赵　斌 1, 2 , 　李　娜 3＊ , 　吴健明 2 , 　李健立4
(1.中山火炬职业技术学院 ,广东 中山 528436;2.成都中医药大学药学院 ,四川 成都 611731;3.西南交通
大学生命科学与工程学院 ,四川 成都 610031;4.四川中医研究院 ,四川 成都 610031)
收稿日期:2007-09-21
作者简介:赵　斌(1979-),男 ,博士研究生 ,研究方向:天然药物的成分分离及新药工艺 、质量标准 , E-mail:zhaobin3226794@ 163.com。
＊通讯作者:李　娜 ,电话:15928776686。
关键词:白蔹痔疮栓;质量标准;盐酸小檗碱;HPLC;TLC
摘要:目的:建立白蔹痔疮栓的质量标准 。方法:采用薄层色谱法对方中黄连 、五倍子 、乳香进行定性鉴别;采用高效液相
色谱法对盐酸小檗碱进行含量测定。结果:薄层鉴别均斑点清晰 ,阴性对照无干扰;含量测定中盐酸小檗碱在 0.252 μg
～ 2.520μg范围内 , 进样量与峰面积线性关系良好 , 相关系数 r=0.999 8, 平均回收率为 99.55%, RSD=1.19%(n=6)。
结论:所建立方法操作简单 、专属性和重现性良好 ,可作为该制剂的质量控制方法。
中图分类号:R927.2　　　　　文献标识码:A　　　　　文章编号:1001-1528(2008)10-1475-03
　　白蔹痔疮栓是在中医理论指导下研发的新中药
复方制剂 ,由黄连 、五倍子 、白蔹 、乳香等多味中药组
成 ,具有清热止血 、消炎止痛的功效 ,临床上可用于
治疗内痔 、混合痔发炎引起的大便出血 ,肛周分泌
物 ,肛门坠胀 、疼痛等症。为了有效控制该制剂的质
量 ,对黄连 、五倍子 、乳香进行了薄层鉴别研究 ,并采
用高效液相色谱法测定了本方君药黄连中盐酸小檗
碱的含量。
1　仪器与试药
1.1　仪器
　　岛津 LC-10ATVP型高效液相色谱仪;Sartouris
BS124S型电子天平;KQ-3200B型超声清洗波器。
1.2　试药
　　甲醇 、乙腈为色谱纯 ,水为重蒸馏水 ,其余试剂
均为分析纯。
1.3　对照品及对照药材
　　盐酸小檗碱 (批号:110713-200208,供含量测
定用);黄连对照药材(批号:120913-0301)、没食子
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酸对照品 (批号:110831-9501)、乳香对照药材 (批
号:120970-200403),均由中国药品生物制品检定所
提供。
2　薄层鉴别
2.1　黄连的鉴别
　　取本品 1粒 , 切碎 , 加石油醚 (60 ～ 90 ℃)
20 mL,超声处理 5 min,滤过 ,药渣挥尽溶剂 ,加甲
醇 20mL,超声处理 15 min,滤过 ,滤液作为供试品
溶液。另取黄连对照药材 50 mg,加甲醇 5mL,超声
处理 15min,滤过 ,滤液作为对照药材溶液 。再取盐
酸小檗碱对照品 ,加甲醇制成每 1 mL含 0.5 mg的
溶液 ,作为对照品溶液。再取缺黄连的阴性样品 2
g,同供试品液制法制成阴性对照溶液 。照薄层色谱
法(《中国药典》2005年版一部附录 Ⅵ B)试验 ,吸取
上述 4种溶液各 2 μL,分别点于同一以羧甲基纤维
素钠为黏合剂的硅胶 G薄层板上 ,以正丁醇 -冰醋
酸 -水(7∶1∶2)为展开剂 ,展开 ,取出 ,晾干 ,置紫外
光灯(365nm)下检视 。供试品色谱中 ,在与对照药
材色谱相应的位置上 ,显相同的黄色荧光斑点;在与
对照品色谱相应的位置上 ,显相同的一个黄色荧光
斑点 ,阴性无干扰 ,见图 1。
图 1　黄连薄层鉴别
1.盐酸小檗碱　2.黄连对照药材　 3.缺黄连阴性样品
4 ～ 6.3种中试样品
2.2　五倍子的鉴别
　　取本品 2粒 ,加水 40 mL,温热使溶解 ,冰浴中
冷却 ,滤过 ,滤液加盐酸调 pH值至 1 ～ 2,用乙醚提
取 2次 ,每次 20 mL,合并乙醚液 ,挥干 ,残渣加甲醇
1 mL使溶解 ,作为供试品溶液。另取没食子酸对照
品 ,加甲醇制成每 1mL含 1mg的溶液 ,作为对照品
溶液。再取不含五倍子的阴性样品 4g,同法制成阴
性对照溶液 。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版
一部附录Ⅵ B)试验 ,吸取上述 3种溶液各 4 μL,分
别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶 G
薄层板上 ,以三氯甲烷-醋酸乙酯-甲酸(6 ∶4 ∶1)为
展开剂 ,展开 ,取出 ,晾干 ,喷以 2%三氯化铁乙醇溶
液显色。供试品色谱中 ,在与对照品色谱相应的位
置上 ,显相同颜色的斑点 ,阴性无干扰 ,见图 2。
图 2　五倍子薄层鉴别
1.五倍子对照药材　 2.缺五倍子阴性样品　3 ～ 5.3批中试样品
2.3　乳香的鉴别
　　取本品 4粒 ,切碎 ,加石油醚(60 ～ 90 ℃)20
mL,超声处理 5min,滤过 ,药渣挥尽溶剂 ,加甲醇 40
mL,超声处理 30 min,滤过 ,滤液浓缩至 1 mL,作为
供试品溶液。取乳香对照药材 1 g,加甲醇 25 mL,
超声处理 30min,作为对照药材溶液 。再取不含乳
香的阴性样品 8 g,同法制成阴性对照溶液。照薄层
色谱法(《中国药典》2005年版一部附录 Ⅵ B)试验 ,
吸取上述 3种溶液各 5μL,分别点于同一硅胶 G薄
层板上 ,以石油醚(60 ～ 90 ℃)-乙醚 -甲苯 (14 ∶4∶
3)为展开剂 ,展开 ,取出 ,晾干 ,喷以 5%香草醛浓硫
酸溶液 ,于 105 ℃加热至斑点显色清晰 。供试品色
谱中 ,在与对照药材色谱相应的位置上 ,显相同颜色
的斑点 ,阴性无干扰 ,见图 3。
图 3　乳香薄层鉴别
1 ～ 3.3批中试样品　 4.乳香对照药材　5.缺乳香阴性样品
3　含量测定
3.1　对照品溶液的制备
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　　精密称取盐酸小檗碱对照品适量 ,加甲醇制成
每 1 mL中含 0.10 mg的溶液 ,即得。
3.2　供试品溶液的制备
　　取重量差异项下的本品 10粒 ,切碎 ,混匀 ,取约
1.0g,精密称定 ,置 150 mL量瓶中 ,加甲醇 -盐酸
(100 ∶1)混合溶液 130 mL, 于热水浴中温浸 30
min,超声处理(频率:40kHz,功率:400 W)1h,冷却
至室温 ,加甲醇-盐酸(100 ∶1)混合溶液稀释至刻
度 ,摇匀 ,于 -5 ℃冷藏 4 h,取出后迅速滤过 ,滤液
放至室温 ,再用微孔滤膜(0.45 μm)滤过 ,取续滤
液 ,即得。
3.3　缺黄连阴性溶液的制备
　　取缺黄连阴性样品 1g,同 3.2项供试品溶液制
备方法制备 。
3.4　测定波长的选择
　　将盐酸小檗碱对照品甲醇溶液在 200 ～ 400 nm
进行波长扫描 ,结果发现在 346 nm处有最大吸收 ,
故选择该波长作为测定波长 。
3.5　色谱条件
　　色谱柱:DiamonsilC18 (5 μm, 250 mm×4.6
mm);流动相:甲醇 -乙腈-水(50∶20∶30)(内含 0.05
mol/L的十二烷基硫酸钠 , 0.037 mol/L的酒石酸);
流速:1 mL/min;柱温:30 ℃;检测波长:346nm。理
论板数按盐酸小檗碱峰计算 ,应不低于 4 000。
3.6　系统适应性试验
　　在上述色谱条件下 ,同时取盐酸小檗碱对照品
溶液 、供试品溶液 、缺黄连阴性样品溶液进样 ,结果
发现 ,供试品溶液色谱图中 ,盐酸小檗碱峰形对称 ,
与其它组分可基线分离 ,分离度大于 1.5;理论塔板
数(N)按盐酸小檗碱峰计算为 4 000以上;阴性样品
色谱中 ,在与盐酸小檗碱对照色谱峰相同保留时间
位置处 ,无色谱峰出现。见图 4。
A B C
图 4　对照品 、样品 、空白溶液色谱图
A.盐酸小檗碱对照品 B.白蔹痔疮栓样品 C.缺黄连阴性样品
3.7　线性关系的考察
　　分别精密吸取盐酸小檗碱对照品溶液(浓度为
0.126 mg/mL)2, 5, 10, 15, 20μL,注入液相色谱仪 ,
以进样量(μg)为横坐标 ,峰面积为纵坐标作图 ,绘
制标准曲线 。得回归方程为:Y=2 939 429.69X-
25 919.46;r=0.999 8。试验结果表明:盐酸小檗碱
在 0.252 μg～ 2.520 μg范围内 ,进样量与峰面积有
良好的线性关系 。
3.8　精密度试验
　　精密吸取盐酸小檗碱对照品溶液 10 μL,连续
进样 6次 ,测定峰面积 ,其 RSD为 0.14%,仪器精密
度良好 。
3.9　稳定性试验
　　取盐酸小檗碱对照品溶液分别于 0, 6, 12, 24,
48 h进样 ,其峰面积 RSD=0.30%;取同一供试品溶
液 ,分别于 0, 4, 8, 12, 24 h进样 ,其峰面积 RSD为
0.70%。结果表明对照品溶液在 48h内 、供试品溶
液在 24h内基本稳定 。
3.10　重复性试验
　　取同一批号的样品 ,按 3.2项下供试品溶液制
备方法 ,平行制备 6份供试品溶液 。分别精密吸取
10 μL注入液相色谱仪 ,计算含量 。结果其平均含
量为 7.914 mg/g, RSD为 1.50%。结果表明 ,本方
法重复性良好 。
3.11　加样回收率试验
　　取已知含量(7.914 mg/g)的样品 6份 ,每份约
0.5 g,精密称定 ,分别置具塞锥形瓶中 ,各精密加入
盐酸小檗碱对照品溶液(2.208 mg/mL)1.8 mL,同
3.2项供试品溶液制备方法制备加样回收供试品溶
液。各精密进样 10 μL,测定 ,计算回收率 。盐酸小
檗碱的平均回收率为 99.55%, RSD为 1.19%,试验
结果见表 1。
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表 1　 加样回收率试验
取样量
/g
制剂中盐酸小檗
碱含量 /mg
加入盐酸小檗
碱量 /mg
测得盐酸小檗
碱的量 /mg
回收率
/%
平均回收
率 /%
RSD
/%
0.503 2 3.982 3 3.974 4 7.967 0 100.26
0.504 7 3.994 2 3.974 4 7.905 1 98.40
0.503 9 3.987 9 3.974 4 7.881 8 97.98
0.509 8 4.034 5 3.974 4 7.979 8 99.27
0.500 7 3.962 5 3.974 4 7.958 7 100.55
0.507 6 4.017 1 3.974 4 8.023 7 100.81
99.55 1.19
3.12　样品含量测定
　　取 3批中试样品 ,按拟定的含量测定方法 ,制备
供试品溶液 ,并进行含量测定。 3批样品含量测定结
果分别为 16.06 mg/粒 、15.35 mg/粒 、16.48mg/粒。
4　结果与讨论
4.1　黄连鉴别研究中曾选用苯-醋酸乙酯 -异丙醇-
甲醇-水(6∶3∶1.5∶1.5∶0.3)[ 1]为展开剂 ,展开缸
用氨蒸气饱和 ,试验中发现该条件受氨蒸汽质量 ,饱
和时间影响大 , Rf变化大 。本试验在收载的展开条
件正丁醇-冰乙酸 -水(7 ∶1∶2)[ 2]下 ,斑点集中 , Rf
变化小 。
4.2　供试品溶液制备中参照文献 [ 3]选择甲醇-盐酸
(100∶1)作为提取溶剂 ,并对提取方法及提取时间
进行试验 ,结果表明温浸法结合超声提取 1 h,提取
效率最高。
4.3　由于本栓剂的基质为半合成脂肪酸甘油酯 ,可
污染色谱柱 ,造成柱压上升 ,因此在样品提取时采用
-5 ℃冷藏 4 h,取出后迅速滤过 ,以除去大部份基
质 ,减少基质对色谱柱的损害 。
4.4　试验表明 , TLC法可定性检出方中黄连 、五倍
子 、乳香 ,方法简单 、稳定 ,可作为白蔹痔疮栓定性鉴
别法。HPLC法测定盐酸小檗碱的含量 ,方法简便 ,重
复性 、稳定性好 ,可作为白蔹痔疮栓含量控制方法。
参考文献:
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防己关节丸质量标准研究
张嵩安 , 　蔡亚玲 , 　阮金兰＊ , 　吴晓辉 , 　冯　超 , 　周璐敏 , 　饶又启 , 　周道年
(华中科技大学同济医学院药学院 ,湖北 武汉 430030)
收稿日期:2007-09-17
作者简介:张嵩安(1983-),男 ,硕士生 ,从事天然药物活性成分的研究 ,电话:13816389964, E-mail:zhangsongan@ yahoo.com.cn
＊通讯作者:阮金兰(1952-),男 ,教授 ,博士生导师 ,电话:027-83692892, E-mail:jinlan8152@ 163.com。
关键词:防己关节丸;防己诺林碱;粉防己碱;TLC;HPLC;质量标准
摘要:目的:建立防己关节丸的质量控制标准。方法:采用薄层色谱法鉴别防己关节丸中的白术 、党参 、肉桂 、甘草;采用
薄层色谱法进行防己关节丸乌头碱的限量测定;并采用高效液相色谱法测定该药中防己诺林碱和粉防己碱的含量。结
果:白术 、党参 、肉桂 、甘草的薄层色谱鉴别专属性强;乌头碱符合限量要求;防己诺林碱在 16.25 ～ 260 μg/mL范围内与
峰面积呈良好的线性关系 , r=0.999 9, 粉防己碱在 33.75 ～ 540 μg/mL范围内与峰面积能呈良好的线性关系 , r=
0.999 7;防己诺林碱和粉防己碱的平均回收率分别为 100.08%, 99.69%(RSD为 1.72%, 0.93%)。结论:本法操作简
便 、快速 、准确 , 可用来控制样品的质量。
中图分类号:R927.2　　　　　文献标识码:A　　　　　文章编号:1001-1528(2008)10-1478-04
　　防己关节丸由防己 、白术 、茯苓 、党参 、甘草等
中药制成 ,具有去湿散寒 ,健脾利水的功效 ,用于风
寒湿痹 ,关节疼痛 。该药原收载于部颁标准中药成
方制剂第八册 ,但原质量标准中只有简单的显微鉴
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第 30卷　第 10期
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