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小叶黄杨中环常绿黄杨碱一 D
的分离与鉴定
江苏省植物研究所 王立中 单文埃
: O心毛份今 O必办令 0
轰 落娜 心心 O母今 00心 O心村心奋 O心 .0心奋 O心一。心份 O。心心 0心口 O心 O心份 00的 0 .心勺的心的 O今 0 0心 O心 .心心一 O心心心心一心 O心 O心心心心令夺心今心七的心心勺心 t心林心今令夺七今今肠今心今夺碑
安徽省芜湖某部队卫生 队 于 9 9 6 1年 搜
集到一治疗冠心病的民间验方` 1 ], 方中有 六
味药 : 黄杨 、 丹参 、 川芍 、 射干 、 青木香 、细
辛 。 近 10 年中他们将六味药研制成 复方黄
杨片在南京 、 芜湖等地 区对一些冠心病患者
进行试验性的应用治疗 , 从 190 例患者的应
用情况表明对典型心绞痛 , 对缺血型 S一 T 及
T 段的改善 , 对血清中胆固醇的降低以及高
血压患者具有较好的治疗效果 , 患者的反应
评价较好 。
1 9 7 8 年江苏植物研究所植化室 从 小 叶
黄杨 ( B u x u s m i e r o p h y l l a s . e t 2 . v a r . 5 1-
in c a R
.
e t w
. , 即瓜子黄杨 , 庭园中常见 栽
培的一种绿篱植物 , 药用的也是这一种 ) 提
取到数个生物碱 , 将其中的一个强碱 (下称
黄杨碱 D 提供皖南医学院药理教研组 进 行
药理试验证明有下列生 理 活性 12 : ( 1) 减轻
或消除垂体后叶素对家兔诱发的心律 素乱 ,
使 Q一 T 间期在整个心动周期中的比率有 明
显 的延长 。 (2 ) 对兔注射垂体后叶素引起的
S一 T 段变化及 T 波变化均有明显减弱 , 并由
于受黄杨碱 I 的保护而不再出现急性心肌缺
血的体征 。 ( 3) 对小 白鼠耐缺氧能力有明显
增强 , 缺氧存活时间比对照 组 延 长 一 倍左
右 。 (4 ) 有不 同程度的降压作用 , 这一降压
作用不被阿托品所阻断 , 在降压期间也不受
肾上腺素 、 去甲肾上腺素升压作用的干扰 。
鉴于小叶黄杨中的生物碱一黄杨碱 I 具有上
述的生理活性 , 故决定对黄杨碱 I 的化学性
质及结构进行了研究 。
黄杨碱 I 在粗结晶时呈粉末状 , 易溶于
氯仿 、 乙醇 , 难溶于丙酮 , 以氯仿一丙酮重
结晶数次即得鳞片状结晶 ,熔点 2 14 一 21 6℃ ,
比旋光 〔a 」节+ 4 0。 ( C = 1 , 氯仿 ) , 与碘化秘
钾 、 碘化汞钾 、 硅钨酸试剂呈阳性反应 , 硅
胶薄层展开比移值 0 . 5一 0 . 6 (橙 色 ) 。 分析
C
Z 。
H
` 。
O N
: :
C 7 7
.
6 3 , 7 7
.
6 4 ; H l l
.
4 4 , 1 1
.
1 8 ,
N 6
.
8 9 , 7
.
0 8% (计算 : C 7 7 . 5 5 ; H l l . 5 2 ,
N 6
.
9 6% )
。 双高氯酸盐 2 4 8一 2 5 0℃ (分解 ) ,
双草酸 盐 2 47 一 2 50 ℃ (分 解 ) , 双 碘 甲 烷
2 65 一 2 70 ℃ (分解 ) , 三 乙 酞 衍 生 物 2 35 一
23 了℃ (分解 ) 。 黄杨碱 I 与三氯化铁溶液阴
性反应 , 表明无酚经基或烯醇结构 , 其紫外
光谱在 2 0 一 4 0 毫微米范围扫描无吸收峰 ,
但红外光谱在 6 . 12 微米处有弱 吸 收 峰 。 为
了确定有无双键乃将黄杨碱 I 溶于 乙 醇 中 ,
用 5% 把一碳酸钙为催化剂在常压下氢化 6
小时 , 将样品回收后测定熔 点 21 2一 2 15 ℃ ,
红外光谱图与氢化前完全一致 , 可知黄杨碱
I 不含双键 , 因此确定 6 . 12 微米的 吸 收 峰
是属于生物碱分子中 N 的乙N 一 H 吸收 。 另在
3
.
0 3 和 8 . 70 微米的吸收峰则应归于 V N 一 H 和
V C
一 N 吸收 , 表明黄杨碱 I 具有仲胺基 。 由于
在 6 . 9 5 微米有强吸收峰应归于 C H : 的乙C 一 H
吸收 , 并通过以上氢化试验 证 明也不 吸 收
氢 , 因此推定黄杨碱 I 是呈饱和的碳架结构 。
黄杨碱 I 又在 3 . 20 微米具有宽峰表 明是 属
于醇经基的分子内缔和 , 在 9 . 18 及 7 . 45 微
米的吸收峰则进一步证明此醇经基是属于仲
醇基的 V c 一。 吸收 。 红外光谱还指出黄杨碱 I
尚含有属于三元环的环丙基亚甲基
C H
Z
/ C一C
2 4 中 成 药 研 究
在 6 .8 5微米的 乙 H C :吸收峰 , 以及在 1 1 . 24
微米的骨架振动吸收峰 。 从以上的分析可知
黄杨碱 I 是饱和的碳架并含两个 N 一个氧和
一个环丙烷环的五环仲胺基生物碱 。
黄杨碱 I 的质谱测到分子峰 M 十 4 0 2 , 验
证了以上求出的分子 式 C 26 H 通. O N : 是 正 确
的 。 再结合以上的光谱分析证明黄杨碱 I 与
环常绿黄杨碱一D (C y c l o v i r o b u x i n e 一D )( I )
一致阁 。 质谱测出的各个碎片 峰 的质 量 m e/
3 8 7 ( 4 0 2一 15 ) ( I ) , 3 7 2 ( 3 8 7一 1 5 ) ( l ) 是
( I )的第 3位碳与第 20 位碳上 的 N 各 失去
一个 C H吉后的质 量 值 。 m / e 3 3 o ( 3 7 2一魂2 )
( F )是第 17 位碳与第 20 位碳 键 断裂 失去
C H 3 一 C H = N + 的 质 量 值 。 m / e 3 1 2 ( 3 3 0一
1 8 ) ( y )应为第 16 位碳上醇经基脱去一分子
水后的母核质量值 。 其余各碎片峰显示的质
量值与下列推定的各个碎片质量 一也相符合 。
核磁共振波谱 显 示 能 . 43 为一 个 含 六
个 H 的 峰 ( 6 H , Z N一 C H 3 ) , 另 在 5 0 . 7 2 ,
0
.
94
, 0
.
96
, l
.
n 各有一个含三个 H 的 峰 , 应
属于叔碳甲基 (>
c 一 c H 3
)
峰 , 又在 。 1 . 0 6
还有一个单 H 峰 , 根据峰积推算这个峰应属
于与甲基相连的仲碳 H
(>
C十 C H 3 )峰 ,
以上共测出七个甲基峰信号 , 与 ( I )的甲基
数 目一致 。 另在 乙0 . 28 , 0 . 52 各有一对分裂
为 2 的双峰 , 显然属于 A B 系统 , 应归于环
丙基亚 甲基 H 的信号 , J = 4 周 /秒 。 在 从 . n
尚有一组不明显分裂的七重 峰 , J 二 3 , 7 . 5 ,
10 周 /秒 , 则属于第 16 位仲醇基碳上的一个
H ( C H
:
·
C H O H
·
C H )
, 当用重水交换时 此
峰并未消失 , 而在相邻的 石4 . 6 0 一个宽波状
单峰变为尖峰 , 证明第 16 位碳上的这 个 H
由于与相邻的 H发生偶合而产生的不完全去
偶所造成 4I] 。 以上核磁共振波谱的数据与文
献 3I[ 上的环常绿黄杨碱一 D 也极为一致 。 综
合以上的理化性质和光谱数据故确定黄杨碱
I 与环常绿黄杨碱一 D 为同一物质 。 环常绿
黄杨碱一 D 最早从西姆黄杨 ( B u x u s s e m p e r
一 v i r e n s L )得到 l8J , 而现在从国产的小叶黄
杨得到并通过药理试验发现它是一个对心脏
有生理活性的街族生物碱 。
环常绿黄杨喊一 O 的数据比较
来 源
小 叶 黄 杨
( B u x u s m i e r o P h g l l a 5
.
e t 2
.
v a r
.
S i n i e a R
.
e t w
.
)
西 姆 黄 杨 〔3〕
( B
.
s e m P o r v i r e n s L
.
)
C : 。 H
山。
O N :
熔 点 ( ℃ )
双 高 氯 酸 盐
三 乙酞衍生 物
2 1 4一 2 1 6
2 4 8一 2 5 0
2 3 5一 2 3 7
2 2 1一 2 2 4
2理9一 2 5 2
2 3 7一 2 3 9
〔a 〕 C H C 13
D
+ 4 0 + 6 0
核 磁 共 振 谱 ` 。
·
2 。罗卜 4周 /秒
0
.
5 2
7 2
( )
C一 C H 3
0
.
9理
0
.
9 6
1
.
1 1
1
.
0 6 ( C H一 C H 3 )
2
.
4 3 ( N一 C H 3 )
4
.
1 1 ( C H Z
·
C H O H一 C H )
J = 3
,
7
.
5
,
10 周 /秒
丫 9 . 7 2 (各= 0 . 2 8 )
9
.
4 7 (乙= 0 . 5 3 )
9
.
2 7 (各= 0 . 7 3 )
9
.
0 5 (各= C . 9 5 )
9
.
0 4 ( b = 0
.
9 6 )
8
.
9 0 (石= 1 . 1 1 )
8
.
9 3 ( 6 = 1
.
0 7 )
7
.
5 8 (乙= 2 . 4 2 )
5
.
9 0 ( 色= 4 . 1 0 )
1 9 7 9 年 第 4 期
实 验
黄杨碱 (I 环常绿黄杨碱一 O ) 的提取分
离 : 取 1 . 5 公斤小叶黄杨木粉用醋酸酸化至
p H S 的药用酒精回流数次 , 回收酒精 , 剩余
物溶于 p H S 的醋酸水中 , 用氯仿振摇数次 ,
水层以稀氨水中和 , 再用氯仿振摇数次 , 水
层再以稀氨水碱化至 p H g 又用氯仿 振 摇 数
次 , 回收氯仿得结晶性沉淀 , 用氯仿一丙酮
重结晶 , 熔点 21 4一 21 6℃ , 硅胶薄层展开比
移值 0 . 5一 0 . 6 (橙色 ) 。
显色剂 : 碘化秘钾试剂 。
分析 : C 7 7 . 6 3 , 7 7 . 6 4 ; H l l . 3 7 , 1 1 . 1 8 ;
N 6
.
8 9 , 7
.
0 8%
计算 : C 2 6 H ` , O N : : C 7 7 . 5 5 ; H l l . 5 2 ,
N 6
.
9 6%
双高 抓 酸 盐 C Z。 H` : O 。 N : C 12 : 2 4 8一
2 5 0℃ (分解 )
分析 : C 5 1 . 1 4 , 5 1 . 0 8 ; H 7 . 9 4 , 7 . 8 8 ;
N 4
.
6 6 , 4
.
5 8%
计算 : C 5 1 . 7 4 ; H 7 . 9 6 ; N 4 . 6 4%
双草酸盐 C 3。 H S 。 0 。 N Z : 2 47一 2 5 0 oC (分
解 )
分析 : C 6 2 . 1 5 , 6 1 . 7 9 ; H 8 . 7 7 , 8 . 7 8 ;
N S
.
2 6 , 5
.
2 3 %
计算 : C 6 1 . 8 6 ; H 8 . 5 9 ; N 4 . 8 1%
双 碘 甲烷 C Z。 H 。 : O N : I: : 2 6 8一 2 7 0℃
(分解 )
分析 : C 4 9 . 2 0 , 4 9 . 0 3 ; H 7 . 2 4 , 7 . 2 8 ;
N 3
.
9 2 , 4
.
1 8%
计算 : C 4 8 . 9 6 ; H 7 . 5 8 ; N 4 . 0 8%
三乙酸衍生物 : 取黄杨碱 11 0 0 毫克 ,溶
于 5 毫升醋醉 , 加 1 毫升毗咤 , 在沸水浴上
回流 6 小时 , 反应物倾入冷水中搅拌 , 过滤 ,
用丙酮重结晶 , 23 5一 2 37 ℃ (分解 ) 。
黄杨碱 I 的氢化 : 取黄 杨 碱 14 0 0 毫 克
溶于 1 0 毫升乙醇 , 加入含 5% 把一碳酸钙
催化剂 。 . 5 克 , 室温常压通入氢气维持 6小
时 , 反应物过滤 , 回收乙醇得白色残渣 , 复以
氯仿溶解 , 过滤 , 蒸去氯仿将样品回收 , 熔点
2 6
2 12 一 2 15 ℃ , 红外光谱仍与黄杨碱 I 一致 。
红外光谱 : 6 . 12 微米 临 N ~ H ) , 3 . 03 微米
( V N
一 H )
,
8
.
7 0 微米 ( V C 一 N ) , 6 . 9 5微米 (各C 一 。 ) ,
3
.
2 0 微 米 (缔 合 O H ) , 9 . 1 8 , 7 . 4 5 微 米
, 仁H Z
( V C
一。 ) , 6
.
8 5微米 (乙C H : ) , 1 1 . 2 4 微术 t / \ _“
C一 C
骨架振动
)
。
质谱 : M + 4 0 2 , m / e 3 8了( l ) , 3 7 2 ( l ) ,
3 3 0 ( 万 ) , 3 12 ( V ) , 2 8 2 (班 ) , 2 5 4 ( 皿 ) 。
核磁共振波谱 : 仪器 60 兆周 , T M S 为
内标准 , C D C I: 为溶剂 。 各0 . 2 5 , 0 . 5 2 (环丙
基亚甲基 H , A B , J = 4 周 /秒 ) , 0 . 7 2 , 0 . 9 4 ,
。 · 9 6 , , · 1`
(
`
>
C一 C H 3
)
, ;
· 。 6 ` C H -
C H
3
)
, 4
.
1 1 (七 重 峰 , C H Z · C H O H · C H
J = 3
, 7
.
5 , 10 周 /秒 ) , 2 . 4 3 ( ZN一 C H 3 ) 。
氢化实验在南京药学院有机化学教研组廖清 江老师实
验室做 , 并蒙他热心对本工作进行有益的指导 , 又请上海有
机化学研究所测定质谱 , 请上海医药工业研究院仪器 分析
组测定核磁 , 又得到本所植化室顾生明同志对本文提出宝
贵意见 , 均致谢意 。
参 考 资 料
1[ 〕 1 . 中国人民解放军空军某部队卫生 队心
防组 中草药通讯 1 9 7 7 年第 4 期 40 页 。 2 . 黄杨
碱 I 临床协作会议 (安徽芜湖 ) 资料 1 9 7 9 年 2 月 。
口〕 皖南医学院药理教研组 : 黄杨碱 I 的药理
作用研究 黄杨碱 I 临床协作会议 (安徽芜湖 )资料
1 0 7 9年 2 月 。
仁3〕 K e i f h 5 . B r o w n , 5 . M o r r i s K u P e h a n
T e f r a h e d r o n L e f f e r s 2 8 9 5 ( 1 9 6 4 )
〔4] 梁晓天 核磁共振 高分辨氢谱的解析和
应用 第 39 页 科学出版社 1 9 7 6 年
中 成 药 研 究