全 文 ：的水分水平也逐渐提高;同样，随水分水平的提高，
出现滁菊第一水花干重最大值的氮肥水平也逐渐提
高。在滁菊水氮管理上，要注意水氮协调，低水分条
件下适宜低氮肥用量，高水分条件下适宜高氮肥用
量，但过量水氮施用，往往会造成滁菊减产。
水和氮不仅是作物生长发育的重要环境因子，
而且是作物产量形成的重要组成元素。本试验结果
表明，在滁菊产量方面，水、氮均表现出较好的相关
性，但在滁菊第一水花产量方面，水分因子的作用大
于氮肥因子;而在滁菊总产量方面，氮肥因子的作用
大于水分因子。滁菊现蕾期是其水分与养分需求的
关键时期，前期适宜的水分条件，利于作物根系发
育，扩大根土接触面积，增加养分吸收和矿质养分通
过质流及扩散在土壤中的运输，从而提高作物吸收
土壤矿质养分的强度和数量〔5〕。在第一水花形成
后，滁菊营养生长累积的养分消耗，此时，适宜的氮
肥供应强度对滁菊后期产量的形成起到关键作用，
从而影响到菊花总产量。
参 考 文 献
［1］陈世勇，李英峰，史亚东，等 . 滁菊低产原因分析及对策
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收稿日期:2013-04-10
基金项目:广东省科技项目(2012B070300068)
作者简介:叶燕莹(1988-) ，女，在读硕士研究生，专业方向:中药资源研究;Tel:13570935956，E-mail:fsyeyy@ 163. com。
* 通讯作者:严寒静，Tel:13533539538，E-mail:yanhanjing1211@ 163. com。
铁包金种子休眠及其破除方法初探
叶燕莹，何梦玲，李东亮，熊 洋，严寒静*
(广东药学院中药学院，广东 广州 528200)
摘要 目的:探索铁包金种子休眠的原因及破除休眠的方法。方法:采用百粒法测定种子千粒重，TTC法测定
种子生活力，吸胀法测定种子硬实率，对果实各部位的提取液进行发芽抑制物的生物鉴定;分别采用浓硫酸、热水、
粗砂摩擦和赤霉素(GA3)处理来探究解除种子物理性和生理性休眠的最佳方法。结果:铁包金种子千粒重为
10. 82 g，硬实率高达 100%，生活力为 83%，其吸水速度和吸水率较低;浓硫酸处理 10 min可提高其发芽率达 85%，
且显著提高其发芽势达 41%;铁包金果实的不同部位均含发芽抑制物，其中种皮与种胚中发芽抑制物的抑制效果
最强，500 和 1 000 mg /L GA3 可显著提高种子的发芽势达 48%和 43%。结论:铁包金种子存在物理性和生理性休
眠，致使种子萌发困难，这是导致铁包金资源减少的原因之一。
关键词 铁包金种子;物理性休眠;生理性休眠;破除
中图分类号:Ｒ282． 2 /Q945 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2013)09-1385-05
Primary Study on Dormancy and Ｒelease Method for Berchemia lineata Seed
YE Yan-ying，HE Meng-ling，LI Dong-liang，XIONG Yang，YAN Han-jing
(College of Traditional Medicine，Guangdong Pharmaceutical University，Guangzhou 528200，China)
Abstract Objective:To explore the mechanism of the seed dormancy of Berchemia lineatea and the method of breaking the dor-
mancy. Methods:Hundred-seed method，TTC and imbibition method was used to measure thousand seeds weight，seed viability and hard
seed percentage，respectively. The germination inhibitor s biological characteristic was identified from the extract of every part in its
fructification. Four treatments were compared to explore the best way to break physical and biological dormancy such as 98% sulfuric
acid，hot water，grit friction and GA3 . Ｒesults:The thousand seeds weight was 10. 82 g，the percentage of hard seed was up to 100%，
viability was 83%，its water absorption speed and absorption rate were relatively low. Being treated with 98% sulfuric acid for 10 mi-
nutes，the seed improved its germination rate to 85%，and significantly improved its germination potentiality to 41%. Every part of the
fructification contained germination inhibitors. The strongest inhibitory effect was found in seed testa and embryo. 500 and 1 000 mg /
·5831·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 36 卷第 9 期 2013 年 9 月
DOI:10.13863/j.issn1001-4454.2013.09.009
L GA3 significantly improved seeds germination potentiality to 48% and 43%. Conclusion:Berchemia lineata seed is hard to germinate
because of its physical and biological dormancy，which is one reason for the resource reduction of Berchemia lineata.
Key words Berchemia lineata (L．)DC． seed;Physical dormancy;Biological dormancy;Ｒelease
铁包金 Berchemia lineata(L. )DC. 是鼠李科勾
儿茶属藤状灌木〔1〕，其干燥根可入药，药材名与植
物名同为铁包金。铁包金是广西壮族和西南少数民
族地区常用的一味重要的民族药〔2〕，其性平，味甘、
淡，有理肺止咳、祛瘀止痛、舒肝退黄、健胃消极之
功〔3〕。药理研究表明，铁包金有保肝降酶退黄、抗
肿瘤和抗菌、抗病毒等作用，用于复方中治疗肿瘤和
多种炎症性疾病有较好的疗效。铁包金分布于中
国、越南、巴基斯坦、印度、锡金、日本等国，在中国分
布于广东、福建、湖南、台湾等省区，主要分布于广
西〔3〕。近年来铁包金资源日益减少，市场上几乎无
铁包金销售，导致其同属别种植物和其他部位代替
铁包金根入药、临床用药混乱等现象〔2〕。因此，扩
大铁包金资源是亟待解决的问题。
目前铁包金以野生为主，未见有人工栽培，采用
人工种植成为扩大铁包金资源行之有效的方法。野
外调查表明，在自然种群中，铁包金植株生长良好，
果实多，但幼苗较少。本实验将种子作为其主要的
繁殖材料，通过对其种子休眠原因及其破除方法的
研究来探讨铁包金种子难以萌发的因素以及提高其
萌发率和发芽势等萌发指标，以期为进一步探讨该
物种资源匮乏的原因、扩大铁包金资源提供科学依
据。
1 材料与方法
1. 1 实验材料 铁包金果实于 2012 年 10 月至
2013 年 1 月采集于广东药学院药用植物园，晒干后
于 4 ℃下保存，实验前将果肉剥去，取出种子。经广
东药学院中药学院严寒静副教授鉴定为铁包金
Berchemia lineata (L. )DC. 的成熟果实。
1. 2 方法
1. 2. 1 种子千粒重测定:种子千粒重采用百粒
法〔4〕测定。随机取种子 100 粒称重，8 次重复，计算
平均值后乘以 10 即得。
1. 2. 2 种子生活力测定:取贮藏 5 个月的种子，采
用 TTC法测定种子的生活力〔5〕。种子于浓硫酸下
浸泡 4 min，清水清洗数次后，在 25 ℃左右的自来水
中浸泡 24 h，切开种皮取出种胚，用 1. 0% TTC 溶液
在 34 ℃下黑暗中染色 3 h，清水冲洗数次，根据胚的
主要构造和有关活营养组织的染色情况进行生活力
的判断。每组试验 25 粒种子，重复 3 次。胚腐烂、
空壳、胚残缺的种子视为无生活力。
1. 2. 3 种子硬实率测定:采用吸胀法〔6〕对种子进
行硬实率的测定，随机取种子 100 粒于 25 ℃去离子
水中浸种 24 h，观察吸胀与未吸胀种子比例，以此计
算种子硬实率，3 次重复。
1. 2. 4 种子吸水曲线测定:参考党海山等〔7〕的方
法。取未经处理和经浓硫酸处理 10 min 的种子各
30 粒，放入足量的去离子水中于 25 ℃下使其吸水，
第 1 天每隔 2 h取出种子，用纸手帕吸干表面水分，
称重，第 2 天起每隔 6 h测 1 次，直到吸水量不再增
加为止。试验重复 3 次，计算吸水率。
吸水率(%)=(浸种后重量 －浸种前重量)/浸种前重
量 × 100%
1. 2. 5 发芽抑制物的提取和生物鉴定:参考赵敏
等〔8〕的提取方法，铁包金果实的果肉、内果皮和种
皮与种胚分别置于 15 倍水中，25 ℃恒温条件下密
闭浸提 24 h，取上清液至萝卜发芽试验的培养皿中，
以清水为对照进行常规发芽试验。每个萌发处理
50 粒萝卜种子，重复 3 次，3 d 调查萝卜种子的发芽
和生长情况，包括发芽率、根长和苗高〔7〕。
1. 2. 6 浓硫酸腐蚀处理:种子于 98%浓硫酸中分
别处理 10、20、40 min，用自来水冲洗种子至中性，用
去离子水 25 ℃恒温中浸泡 24 h，以在恒温 25 ℃去
离子水中浸泡 24 h的种子为对照。
1. 2. 7 热水浸种处理:种子分别浸泡在盛有 150
mL 70、60、55、50 和 40 ℃热水的锥形瓶中，加盖后
自然冷却，浸泡至 24 h，以在恒温 25 ℃去离子水中
浸泡 24 h的种子为对照。
1. 2. 8 粗砂摩擦处理:将种子置于放有粗砂的研
钵中分别研磨 10、20、30、40 min，用去离子水 25 ℃
恒温中浸泡 24 h，以在恒温 25 ℃去离子水中浸泡
24 h的种子为对照。
1. 2. 9 赤霉素(GA3)处理:种子分别于 125、250、
500 和 1 000 mg /L GA3 水溶液中恒温 25 ℃浸泡 24
h，倾去浸泡液，反复冲洗种子至中性，以在恒温 25
℃去离子水中浸泡 24 h的种子为对照。
1. 3 发芽试验 将以上处理的种子摆在放有 2 层
滤纸的培养皿中，加入适量去离子水，置于 25 ℃人
工气候箱中进行发芽试验。实验设置每个处理 30
粒种子，3 次重复。按照《国际种子发芽规程》(胚根
突出种皮的长度为种子长度的一半即为发芽的种
子)规定第 15 天计算种子的发芽势，第 40 天计算种
·6831· Journal of Chinese Medicinal Materials 第 36 卷第 9 期 2013 年 9 月
子的发芽率、死亡率。
发芽率 =(全部正常发芽种子数 /供试种子数)× 100%
发芽势 =(规定时间内已发芽种子数 /供试种子数)×
100%
种子死亡率 =(死亡种子数 /供试种子数)× 100%
1. 4 统计分析 所有数据采用 SPSS 19. 0 处理，
处理间均值比较采用完全随机设计单因素方差分析
中的 LSP多重比较。
2 结果与分析
2. 1 种子千粒重 经测定铁包金种子的千粒重为
(10. 82 ± 0. 01)g。
2. 2 种子的生活力 经 TTC 法测定，有生活力的
种子为 83%，无生活力的种子为 12%，胚腐烂、空壳
和胚残缺的种子分别为 2%、1%和 2%。
2. 3 种子的硬实率 经测定，铁包金种子硬实率
为 100%，坚硬的种皮对胚根的伸出有一定的机械
阻力，这是导致种子萌发困难的原因之一，由此确定
铁包金种子具有物理性休眠。
2. 4 种子的吸水特性 从图 1 可知，经浓硫酸处
理的种子和未经浓硫酸处理的种子的吸水率曲线有
所区别，种子经过浓硫酸处理 10 min后，前 6 h吸水
迅速，6 h 后吸水率达到 39. 4%，之后吸水非常缓
慢，到 16 h后吸水率趋于稳定，吸水达到饱和;而未
经浓硫酸处理的种子在吸水 2 h 前，吸水迅速，吸水
率达 26. 28%，之后吸水缓慢，22 h 后吸水率趋于稳
定。种子中种皮或果皮对水分的透性是决定种子吸
胀程度的因素之一，种子经浓硫酸处理后吸水速度
明显增加，且吸水率普遍较高，即吸胀程度较高，这
是因为铁包金种子的内果皮木质化、十分坚硬和致
密，用浓硫酸处理 10 min 后，使得部分内果皮被腐
蚀，变得疏松，增加了内果皮的透水性。铁包金种子
内果皮透水性较弱，也是造成铁包金种子物理性休
眠的原因之一。
2. 5 发芽抑制物的生物鉴定 表 1 中结果表明，
果实各部位的提取液对萝卜种子萌发率的影响均达
到显著水平，说明铁包金果实中的果肉、内果皮和种
皮与种胚中均含有发芽抑制物，使得铁包金种子存在
一定程度的生理性休眠，导致铁包金种子萌发困难，而
3个部位发芽抑制物的抑制强度之间无显著性差异。
表 1 中结果显示，3 个部位提取液对萝卜苗长
高和根伸长的抑制作用均达到显著性水平，说明果
肉、内果皮和种皮与种胚中提取物除了抑制种子萌
发，还对苗的生长有抑制作用，而综合抑制作用最强
的是种皮与种胚的提取液，推测萌发抑制物主要存
在于种皮与种胚中。
图 1 铁包金种子的吸水进程
表 1 萝卜种子萌发试验对铁包金果实
各部位发芽抑制物质的鉴定结果
浸提液来源 发芽率 /% 根长 /cm 苗高 /cm
对照 99 ± 1aA 2. 36 ± 1. 15aA 1. 35 ± 0. 73aA
果肉 61 ± 6bB 0. 88 ± 0. 48bB 0. 91 ± 0. 78bB
内果皮 65 ± 9bB 1. 10 ± 0. 56cC 0. 47 ± 0. 32cC
种皮与种胚 64 ± 2bB 0. 79 ± 0. 33bB 0 ± 0dD
注:同列不同小写字母表示有显著性差异，P ＜ 0. 05;同列不同
大写字母表示有极显著差异，P ＜ 0. 01
2. 6 浓硫酸、热水和砂磨处理对解除种子物理性
休眠的影响 种子经浓硫酸、热水、砂磨处理后的萌
发情况见表 2，浓硫酸处理 10 min效果最好，发芽率
为 85%，发芽势显著高于对照组，达 41%，且种子死
亡率在浓硫酸处理组中最小，只有 1%。热水和砂
磨处理对解除种子硬实均无作用。
浓硫酸处理设 3 个处理时间，处理时间为 10
min时，种子发芽率为 85%，随着处理时间的增加，
发芽率下降，在处理 40 min时对发芽率的下降影响
已达到显著性水平，此时发芽率为 64%，而处理 10
和 20 min 对发芽率的影响均未达到显著性水平。
种子经浓硫酸处理 10、20 和 40 min 的发芽势与对
照组比较均达到显著性差异，发芽势分别为 41%、
50%和 56%，即发芽势随着处理时间的增加而增
加。死亡种子率也随着处理时间的增加而增加，处
理 20 和 40 min 死亡种子率高于 10%，且均达显著
性水平。综合以上指标，浓硫酸处理 10 min 可有效
打破种子休眠，且对种子伤害较小。
热水和砂磨处理的统计结果显示 40 ～ 70 ℃处
理温度和粗砂摩擦 10 ～ 40 min 对种子的发芽率和
发芽势的影响均未达到显著性水平，发芽率均在
65% ～78%之间，而发芽势均在 15% ～26%之间。
·7831·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 36 卷第 9 期 2013 年 9 月
表 2 不同硬实破除方法对铁包金种子发芽率、发芽势和死亡种子率的影响(珔x ± s)
处理技术 处理温度或时间 发芽率 /% 发芽势 /% 死亡种子率 /%
对照 78 ± 1abAB 21 ± 4cD －
浓硫酸 10 min 85 ± 14aA 41 ± 13bBC 1 ± 2aA
20 min 72 ± 5abcAB 50 ± 9abAB 11 ± 2bB
40 min 64 ± 8cB 56 ± 12aA 14 ± 5bB
热水 40 ℃ 70 ± 13abAB 15 ± 2cD －
50 ℃ 66 ± 11abB 17 ± 3cD －
55 ℃ 65 ± 11bcB 19 ± 1cD －
60 ℃ 73 ± 4abcAB 18 ± 1cD －
70 ℃ 76 ± 11abcAB 19 ± 4cD －
砂磨 10 min 67 ± 4bcAB 23 ± 7cD －
20 min 73 ± 6abcAB 15 ± 5cD －
30 min 78 ± 5abAB 22 ± 8cD －
40 min 65 ± 3bcB 26 ± 2cCD －
注:同列不同小写字母表示有显著性差异，P ＜ 0. 05;同列不同大写字母表示有极显著差异，P ＜ 0. 01
2. 7 赤霉素(GA3)解除种子生理性休眠的影响
从表 3 可知，种子经 4 个浓度 GA3 处理对发芽率的
影响均没达到显著性水平，而浓度为 500 和 1 000
mg /L时，对发芽势的影响达到了显著性水平，发芽
势分别是 48%和 43%。结果显示，GA3 浓度对种子
发芽率没有明显的相关性，而对发芽势有较明显的
相关性，即发芽势随着 GA3 浓度的升高而升高，浓
度为 500 和 1 000 mg /L 时，发芽势达到最高，故解
除种子生理休眠的 GA3 适宜浓度是 500 和 1 000
mg /L。
表 3 不同浓度 GA3 处理对铁包金
种子发芽率和发芽势的影响
处理技术 处理浓度/(mg /L)
发芽率
/%
发芽势
/%
对照 0 78 ± 1aA 21 ± 4bB
GA3 125 69 ± 9aA 25 ± 5bB
250 66 ± 13aA 28 ± 2bC
500 66 ± 10aA 48 ± 9aA
1000 70 ± 10aA 43 ± 6aAC
注:同列不同小写字母表示显著性差异，P ＜ 0． 05;同列不同大
写字母表示极显著差异，P ＜ 0． 01
3 讨论
铁包金种子硬实率高达 100%，内果皮透水性
较差，且果实中含有发芽抑制物，致使种子存在物理
性和生理性休眠，这是在自然条件下果实落地后种
子萌发率低的原因，同时也是导致铁包金野生资源
减少的原因之一。
硬实现象在植物界中相当普遍，虽然硬实种子
具有较长的寿命，有利于长时间储藏，但由于其硬实
所带来的物理性休眠而导致出苗率低和出苗不整
齐，不利于生产，故必须通过一些方法解除硬实种子
休眠，如物理、化学和生物方法。打破种子硬实方法
中浓硫酸处理法是最常用的化学方法。本实验利用
浓硫酸处理铁包金种子可显著提高其发芽势，这是
由于浓硫酸局部腐蚀种子内果皮，打破栅栏组织的
屏障使内果皮变薄，削弱内果皮对种胚的机械阻力
并增大其透水性，故有利于种子的萌发。但浓硫酸
处理时间过长会损害种子胚，导致较高的种子死亡
率。因此使用强酸来打破种子硬实应注意处理时
间，本实验中使用浓硫酸处理 10 min 效果最理想。
对于铁包金种子，粗砂摩擦和热水处理不能达到解
除物理性休眠的作用。
铁包金种子存在发芽抑制物质。现已查明脱落
酸(ABA)是普遍的发芽抑制物，GA3 与细胞分裂素
是与之相对的发芽促进物质〔9〕。本实验利用 500 和
1 000 mg /L GA3 处理铁包金种子，打破其因发芽抑
制物而带来的生理性休眠，使细胞分裂分化促进种
子发芽，显著地提高了种子发芽势。
本研究中，浓硫酸和 GA3 处理均对解除铁包金
种子休眠有较好效果，且操作简单方便，可同时对大
量种子进行处理，适用于人工栽培。
参 考 文 献
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白花丹参和紫花丹参对菘蓝化感效应比较研究
周 洁1，王 晓1* ，刘建华1，刘 伟1，李 佳2，邹 琳2
(1. 山东省分析测试中心 /山东省科学院，山东 济南 250014;2. 山东中医药大学，山东 济南 250355)
摘要 目的:比较白花丹参和紫花丹参对菘蓝的化感效应，为优化复合种植模式提供科学依据。方法:以紫花
丹参和白花丹参作为供体，菘蓝种子作为受体，研究不同浓度不同年限的紫花丹参和白花丹参根及根茎水浸液对
菘蓝种子萌发的化感效应。结果:紫花丹参和白花丹参根及根茎水浸液对菘蓝种子萌发和活力指数表现出相似的
化感效应，即低浓度促进而高浓度抑制;对菘蓝幼苗鲜重和苗高表现出相似的影响趋势，对其根长的抑制作用强
烈。1 年生紫花丹参对菘蓝种子萌发的化感指数绝对值小于白花丹参，而 2 年生紫花丹参对菘蓝种子萌发的化感
指数绝对值大于白花丹参。结论:白花丹参和紫花丹参对菘蓝种子萌发和幼苗生长均表现出低促高抑的双重效
应，且 1 年生白花丹参对菘蓝种子萌发的化感潜力大于紫花丹参，而 2 年生紫花丹参对菘蓝种子萌发的化感潜力
大于白花丹参。
关键词 白花丹参;紫花丹参;菘蓝;化感效应
中图分类号:Ｒ282. 2 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2013)09-1389-03
收稿日期:2012-07-17
基金项目:国家自然科学基金 (81102749) ;山东省科技发展计划(2011GSF11908，2012GGA12024) ;山东省科学院科技发展计划(科基合
字(2012)第 16 号)
作者简介:周洁(1981-) ，女，博士，助理研究员，研究方向:中药资源与药用植物栽培;Tel:15098711218，E-mail:zhoujie8761@ 163. com。
* 通讯作者:王晓，Tel:0531-82605304，E-mail:wxjn1998@ 126. com。
化感作用主要是指植物通过地上部分茎叶挥
发、茎叶淋溶、残体肢解、根系分泌等向环境中释放
一些化学物质，从而影响周围植物或微生物的生长
和发育〔1，2〕，是自然界中普遍存在的化学调控现象。
目前关于化感作用的研究越来越受到广泛关注，并
取得重要进展。和农作物相比，药用植物更容易产
生化感作用，直接影响药材产量和质量〔3〕。因此，
开展药用植物化感作用研究具有重要意义。
丹参来源于唇形科植物丹参 Salvia miltiorrhiza
Bge．的干燥根及根茎，是我国常用大宗中药材之一。
白花丹参是丹参的白花变型，主产于山东境内，对于
血栓闭塞性脉管炎有独特疗效，应用前景广阔。目
前大面积种植导致其化感作用突出，为此生产上多
将菘蓝 Isatis indigotica Fort． 等与其轮作与间作，但
是关于丹参对菘蓝的化感作用尚未见报道。本实验
研究比较白花丹参和紫花丹参根及根茎水浸液对菘
蓝种子萌发和幼苗生长的影响，探讨其对菘蓝的化
感效应，以期为科学种植模式的建立提供依据。
1 材料与方法
1. 1 丹参根及根茎水浸液制备 1 年生和 2 年生
白花丹参和紫花丹参根及根茎、菘蓝种子均采集于
山东莱芜紫光生态园有限公司丹参生产基地。白花
丹参和紫花丹参根及根茎室温干燥后粉碎，过 80 目
筛，精密称取适量至三角锥形瓶中，加 10 倍量的蒸
馏水，25 ℃下浸提 24 h，适时振荡。浸提液经纱布
过滤后再过微孔滤膜。浸提母液用蒸馏水稀释至浓
度为 0. 1、0. 5、1. 0、5. 0 g /L的处理液备用。
1. 2 菘蓝种子萌发 将籽粒饱满的菘蓝种子先置
于 0. 525 g /L 的次氯酸钠溶液中消毒 10 min，然后
用蒸馏水冲洗数次，滤干。将消毒后的菘蓝种子置
于铺有 2 层滤纸的培养皿中，每皿 25 粒，分别加入
5 mL处理液，对照加等量的蒸馏水，每处理 3 个重
复。将培养皿置于人工气候培养箱中培养，培养条
件:光强 260 ～ 270 mol /(m2·s) ，25 ℃昼 /20 ℃夜，
·9831·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 36 卷第 9 期 2013 年 9 月