全 文 ：图 2 浙江雪胆供试品图谱
取雪胆甲素对照品液 1 0 尽 L , 连续进样 6次 , 求得雪胆 甲素对照品
峰面积积分值的R S D为 1 . 36 % 。
2
.
4 样品测定
取浙江雪胆粗粉(过 2号筛)约 1 9 , 称量一定要精密 。 放在50 m L具
塞锥形瓶中 , 加人 5 0m L甲醇 , 称重 , 超声3 0m in 提取 , 冷却后把甲醇
减失的重量补足 , 摇匀 , 即得样品溶液 。 将各样品液经微孔滤器过
滤 , 分别进样 1 0 尽 L , 测定其峰面积 , 由回归方程计算出样品中雪胆
甲素的含量 。
2
.
5 重复性试验
取浙江雪胆粗粉 5份 , 每份约 1 . 09 , 精密称定 , 按照 2 . 4项的方法
制备供试品液 , 进样 , 测得其平均含量为2 . 19 2m g /g , R S D为 2 . 67 % 。
2
.
6 回收率实验
取 6份 已知雪胆甲素含量 的浙江雪胆粉末 , 每份约 1 9 , 精密称
定 , 每份样品中精密加人 l m L雪胆甲素对照品液 , 按 2 . 4项下方法制备
· 实验研究 · 7 7
供试品液 , 按上述色谱条件测定含量 , 得平均回收率98 . 6 1% , R S D为
1
.
8 9 6%
。
2
.
7 样品测定结果
根据上述色谱条件 , 对 4个样 品进行测定 , 每个样品测定3次 ,
见表 1。
表 1 浙江雪胆中雪胆甲素含量测定结果 ( n一 3 )
编号 雪胆 甲素含量 (m g /g ) (m g /g )
浙江雪胆样 1 1 . 7 2 8 1 . 93 7
浙江雪胆样 2 2 . 15 7
浙江雪胆样 3 2 . 0 34
浙江雪胆样 4 1 . 83
3 讨 论
3
.
1 选择提取方法
考察了实验对样品的处理方法 。 对加热回流提取法 、 超声提取
法 、 冷浸法三种方法实验进行了考察 , 结果表明提取效率相当的是超
声提取法和加热回流法 , 冷浸法提取效率更低 。 而超声提取法和加热
回流法相 比较 , 超声提取法具有操作简便快捷的特点 , 故本实验选用
超声提取法处理样品 。
3
.
2 流动相的考察
作者试验过 甲醇一水和乙睛一水两种流动相 , 结果发现以乙睛一水作
为流动相 , 杂峰和干扰峰更少 , 选用乙睛一水作为流动相 。 后又考察了
乙睛 : 水 (20 : 80) 、 乙睛 : 水 (30 : 70) 、 乙睛 : 水 ( 40 : 60) 及
乙睛 : 水 (35 : 65) 作为流动相 , 最后选定了乙睛 : 水 ( 35 : 65) 作
为样品测定的流动相 。
参考文献
【l] 胡绍庆,丁炳扬 , 陈征海 .浙江省珍稀频危植物物种多样性保护的
关键区域 [J] .生物多样性 , 2 002 , 3 0( :l) 5 一23 .
2[] 施亚琴 ,杨培全 ,聂瑞麟 ,等 .长果雪胆化学成分的研究【J] .中草
药 , 19 9 1 ,2 2 ( 3 ): 1 10 2 一 110 5 .
3[] 施亚琴 ,杨培全 ,台云梅 .反相高效液相色谱法测定不同采收期长
果雷胆中雪胆甲素的含量「月.中国中药杂志 , 19 9 6 , 21 (:5) 27 6 一27 7 .
4[] 王贤英 .高效液相色谱法测定长果雪胆中雪胆甲素的含量「月.重庆
中草药研究 , 2 0 0 7 , 5 5 ( l ): 1 1一1 3 .
5[] 何效毛杨琼苏王贤英 ,等 .高效液相色谱法测定雪胆中雪胆甲素
的含量 [J ]川北医学院学报 , 2 0 0 7 , 2 2 (3 ) : 2 6 4 一2 6 6 .
黄模抗炎活性部位的初探
谭银丰
( 1 海南医学院药学院 , 海南 海 口
李志锋 2 张彩云 , 魏 娜` 毛彩霓 ` 张小坡` *
57 1 10 1
;
2 江西中医学院中药固体制剂制造技术国家工程研究中心 , 江西 南昌 33 00 06
3 海南华益泰康药业有限公司 , 海南 海 口 5 70 00 0)
【摘要】目的 研 究黄桂杭炎活性部位 。 方法 采用 70 % 乙醇提取药材 , 提取物用 乙酸 乙醋 、 正丁醇革取 , 利用二甲苯致小 鼠耳肿胀和 醋酸
致小鼠毛细血管通透性模型 , 观察黄桂提取物及其革取物的杭炎活性 。 结果 黄桂 70 % 乙醇提取物及 乙酸乙 醋革取物对二 甲苯所致小 鼠耳
肿胀 、 醋酸致小 鼠毛细血管通透性增加均具有显著抑制作用 , 与空 白组比有显著差异 (凡 0 . 0 5 ) , 而 正丁醇革取物与生理盐水组对比没有
显著差异 (羚 0 . 0 5 ) 。 结论 黄桂提取物具有显著杭炎作用 , 并初 步确定有效部位为乙酸 乙醋革取物 。
【关键词】黄桂 ; 杭炎 ; 活性部位
中图分类号 : R9 6 5 文献标识码 : A 文章编号 : 1 6 7 1一 8 1 9 4 ( 2 0 1 2 ) 2 7一 0 0 7 7一 0 2
黄模 ( H i b i s e u s t i li s e e u s L n n . )为锦葵科 ( M a l v a e e a e ) 木模属
基金项 目 : 海南省教育厅 高校科研资助项 目 (川k J Z 。! !一 3 4 )
, 通讯作者 :
( H ib is cu
S
) 半红树植物 , 又名黄木模 、 披黄 、 铜麻 、 山加半 、 港
麻 、 海麻 (海南 ) , 分布于中国 、 越南 、 柬埔寨 、 缅甸 、 印度 、 印度
尼西亚 、 马来西亚 、 菲律宾及老挝等热带地区 , 国内主产于台湾 、 广
DOI : 10. 15912 /j . cnki . gocm. 2012. 27. 065
7 :
. 实验研究 ·
东 、 福建等省[ l]。 海南地区也有分布 , 主要生长在沿海岸的平地上 ,
港湾或潮水能到达的河 、 岸上及栽植于各地村庄 2[] 。 据 《全国中草药
汇编》 记载黄模具有清热止咳、 解毒消肿等功效3[] 。 现代药理学研究
表明黄模具有抗炎4[ ’ ]、 抗氧化 6[] 、 细胞毒等活性 7[] 。 然而 , 其抗炎活
性部位尚未明确 。 为进一步开发利用该黎药资源 , 本研究开展了针对
黄模抗炎活性部位的筛选作用的研究 , 并初步确定其部位为乙酸乙酚
萃取部位。
1 实验材料与仪器
黄模药材采自海南省万宁市石梅湾 , 经中国医学科学院药用植物
研究所海南分所陈伟平研究员鉴定为锦葵科木模属植物黄模 , 样品
保存在海南医学院药学院标本馆 , 标本号为 : H -T 2 0 10 0 7 1 2 。 阿司匹
林肠溶片由阿司匹林肠溶片由拜耳医药保健有限公司生产 , 批号 :
BTA 6 0 41
。 伊文思蓝 (中国医药集团上海试剂公司 , 批号2 0 0 3 0 71 4 , 其
他试剂均为分析纯 。
实验用昆明种小鼠由长沙市开福区东创实验动物科技服务部提
供 , 清洁级 , 体质量 18一229 , 雌雄各半 。 电子天平 , J A s c o v- 6 50 紫
外一可见分光光光度计。
2 方 法
2
.
1 试验样品制备方法
将黄模 (3 . 6gK ) 阴干 、 粉碎 , 70 % 乙醇回流提取 2次 , 每次h2 ,
趁热过滤 , 减压浓缩至无醇味后得到提取液 。
黄模醇提物 : 提取液经水浴浓缩得黄模乙醇提取物浸膏 , 称重后
配制成一定浓度水溶液 。
乙酸乙酚萃取物 : 取 5 0 m L提取液经乙酸乙酚萃取 5次 , 取乙酸乙
酚层减压浓缩得乙酸乙酚萃取物浸膏 , 称重后加吐温一80 助溶配制成一
定浓度混悬液 。
正丁醇萃取物 : 取 5 0 m L提取液经乙酸乙酚萃取5次后 , 取水层用
水饱和正丁醇萃取 5次 , 取正丁醇层减压浓缩得正丁醇萃取物浸膏 ,
称重后加吐温一80 助溶配制成一定浓度混悬液 。
2 2 二 甲苯致炎实验
取雌雄各半昆明种小 鼠 , 随机分成 5组 , 每组 10 只 , 各组小 鼠分
别灌胃给予阿司匹林 0 . 39 k/ g 、 黄模醇提物 0 . 59 /k g 、 乙酸乙酚萃取物
0
.
5 9 k/ g
、 正丁醇萃取物0 . 5 9般 g , 空白组给予等体积 5% 吐温 一80 。 连续
给药 10 d , 末次给药后 hl , 将20 o L二 甲苯均匀涂于小鼠右耳廓均匀致
炎 , 左耳作为对照 , 致炎后 30 m in 处死小鼠 , 剪下小鼠双耳 , 用直径
4m m 的打孔器取同样大小耳片称重 , 以左右耳重量差作为肿胀度 , 计
算肿胀抑制百分率 , 比较各组数据差异 , 进行脸验分析 。
抑制率 (% ) = 右耳质量
一 左耳质量
右耳质量 火 1 0 0马
2 3 醋酸致毛细血管通透性增加实验
取雌雄各半昆明种小鼠60 只 , 分组同 “ 2 . 2二甲苯致炎实验 ” ,
连续给药 1d0 。 于末次给药后 30 m in , 尾静脉注射 0 . 5% 伊文思蓝生
理盐水溶液 , 0 . l m L/ 109 , 立即腹腔注射 0 . 6%醋酸生理盐水溶液 ,
2 0 m in 脱颈椎后处死动物 , 腹腔注人生理盐水 s m L并轻柔腹部 l m in
后 , 剖开腹腔 , 吸取 4m L洗涤液 , 30 0 0r /m in 离心 10m in , 取上清液于
6 1 0 n m 处比色测定吸光度值 , 计算抑制率 , 比较各组数据差异 , 进
行 t检验分析 。
抑制率 ( % ) = 空白组吸光度值
一 给药组吸光度值
右耳质空白组吸光度值 拭 1 0 0叹
3 结 果
二 甲苯致炎实验与醋酸致毛细血管通透性增加实验结果见下表
l
、 表2 0
表1 黄幸到甸权物及革取物对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响 ([ 灭士 s) , =IT 10]
组别 剂量 ( g服 g ) 耳廓肿胀度 (m g ) 抑制率 (% )
空白组 一 1 . 8 士 0 . 83 一
黄模醇提物 让5 让9 士 住 42 , , 25 3
乙酸乙酚萃取物 让 5 让 8 0士 让 4护 2 . 2
正丁醇萃取物 让 5 2 . 56 士 1 . 54 10 . 9
阿司匹林组 让3 让 7士 住 32 * * 30 . 4
叔 黄模提耳侧敏毛莽耳侧尔寸酉普酉妙为J、鼠夕红凌血管通透性嘈加的影响 ([灭士 s) , 1月侧
组别 剂量 (目吨 ) 吸光度 抑制率 (% )
空白组 一 0 . 5 1 士 0 . 1 4 6 5 . 0
黄模醇提物 让5 让 38 士 0 . 1 3* 28 . 2
乙酸乙酚萃取物 让5 住 40 士 0 . 1 * 26 . 3
正丁醇萃取物 让5 住 45 士 0 . 18 79 . 3
阿司匹林组 让3 让 35 士 0 . 1 2* * 25 . 2
注 : 与空白组比较 , * *凡住 01 , *凡位05
结果表明 , 黄模提取物及乙酸乙酚萃取物能显著抑制二甲苯诱发小
鼠耳廓肿胀及醋酸导致的小鼠腹腔毛细血管通透性增加 , 与生理盐水
组比较有显著差异 (凡0 . 05 ) 。 而正丁醇萃取物未见显著抗炎活性 , 且
乙酸乙酚抗炎作用优于黄模提取物 , 初步确定其为抗炎有效部位。
4 结 论
实验结果证实黄模提取物具有显著抗炎作用 , 这一结果与 《全国
中草药汇编》 记载及文献报道的黄模具有抗炎作用一致 。 通过我们进
一步的研究 , 从萃取部位抗炎实验结果分析 , 发现乙酸乙酚提取物活
性优于醇提取 , 而正丁醇萃取物活性差 , 初步确定乙酸乙酚萃取物为
其有效部位 , 这一结论为黄模开发奠定了基础 。
通过对该有效部位化学成分组成进行系统的研究后 , 课题组从中
分离得到14 个化合物 8[] , 并利用波谱学手段鉴定了它们的结构 。 通过
检索 cS if n de r 、 C N K I 、 万方等数据库对所分成分的抗炎活性进行总
结 , 发现含量较高的木栓酮抗炎作用确切 9[] , 揭示其可能是有效部位
中主要抗炎活性成分之一 。 另外 , 针对分离得到的倍半砧醒类化合物
进行体外抑制一氧化氮生成实验后 , 发现其中一个化合物抑制N o 生
成活性显著优于阳性对照药氨基肌 , 揭示结构新颖的倍半砧醒类成分
也为有效部位中潜在活性成分。
参考文献
【l] 中国科学院中国植物志编辑委员会 .中国植物志 .第49 ( 2) 卷【M ] .北
京:科学出版社 , 19 84 :6 .
2[] 陈焕墉 .海南植物志「M ] . 2卷 .北京:科学出版社 , 1 9 6 5 : 10 .
3[] 全国中草药汇编编写组 .全国中草药汇编下册【M 」. 2版 .北京 :人民
卫生出版社 , 19 9 :6 75 7 .
4[] 张小坡 ,裴月湖 ,张俊清等 .黄模化学成分和药理活性研究进展 [J] .
现代药物与临床 , 2 0 1 1, 2 6 ( 6 ) :4 3 4 一 4 3 8 .
5[] N are nd er K S
,
uK m ar D A ntl no ic ce P
t l 、℃ a 们 ( l a n t 一n am m ato ry 二Vtl lty of
H i玩scu s it liace u s le vae s田I nt J Pha rn la e笔 n Ph到。 c h e 们I eR 民20 0只l (l ): 15一17
6[ ] K
u m a r S
,
K u m a r D
,
P r a k a s h O
.
E v a l u a t i o n o f a n t i o x i d a n t
P o t e n t ia l
,
P h e n o l ie a n d fl va
o n o i d e o n t e n t s o f H i b i s e u s t i li a e e u s
f lo w e r s [J ]
.
E JE A FC h e
,
2 0 0 8
,
7 (4 )
: 2 8 6 3
一
2 8 7 1
.
7[ ] 戴好富 ,梅文莉,洪葵,等.海南 16 种红树植物的肿瘤细胞毒活性筛
选 [J ] .中国海洋药物 , 2 0 0 5 , 2 4 ( 6 ) :4 4 一 4 6 .
8[ ] 张小坡 ,张俊清 ,裴月湖 ,等 .黄模化学成分的研究 [J] .中草药 , 2 01 2 ,
4 3 (3 )
: 4 4 0
一
4 4 3
.
9[ ] 何兰 ,岳祥军 , 陈耀祖 ,等 .木栓酮化学结构修饰及其抗炎活性【月 .
应用化学 , 1 9 9 6 , 5 ( 13 ): 6 7 一6 9 .