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〔2013-08-13 收稿 2013-09-23 修回〕
(编辑 袁左鸣)
冠盖藤的抗炎镇痛作用
秦莉花1 钟华美 陈晓阳2，3 吴艳飞 李 晟 黄 宽 (湖南中医药大学药学院，湖南 长沙 410208)
〔摘 要〕 目的 探讨冠盖藤的抗炎和镇痛作用。方法 采用二甲苯建立小鼠耳廓肿胀模型、角叉菜胶诱导大鼠足趾肿胀模型，研究其抗炎作
用;采用小鼠醋酸扭体法和热板法，观察其镇痛作用。结果 冠盖藤能明显减轻二甲苯致小鼠耳廓肿胀;冠盖藤高中低剂量能显著减少致炎后 2 h大
鼠足跖肿胀，高中剂量能显著减少致炎后 4 h大鼠足跖肿胀。冠盖藤组潜伏期明显延长、扭体次数明显降低、痛阈值升高。结论 冠盖藤有明显的抗
炎、镇痛作用。
〔关键词〕 冠盖藤;抗炎;镇痛
〔中图分类号〕 Ｒ26 〔文献标识码〕 A 〔文章编号〕 1005-9202(2014)02-0429-03;doi:10. 3969 / j. issn. 1005-9202. 2014. 02. 068
基金项目:湖南中医药管理局项目(No. 2009033) ;湖南中医药管理局重
点项目(No. 201232)
1 湖南中医药大学护理学院
2 中药现代代教育厅重点实验室
3 国家中药管理局药性与药效研究三级实验室
通讯作者:陈晓阳(1953-) ，女，教授、主任医师，硕士，硕士生导师，主要
从事中药药性理论基础与应用研究。
第一作者:秦莉花(1980-) ，女，副教授，博士，主要从事中医药防治疾病
的基础研究。
Anti-inflammatory and analgesic effects of Guangaiteng
QIN Li-Hua，ZHONG Hua-Mei，CHEN Xiao-Yang，et al.
Public Health College of Guangxi Medical University，Nanning 530021，Guangxi，China
【Abstract】 Objective To investigate the effect of Guangaiteng on anti-inflammatory and analgesia．Methods The anti-inflammatory
effect of Guangaiteng was studied by the mouse ear edema model induced by Xylene and carrageenan-induced rat paw edema model． The an-
algesic effect was observed by using mouse acetic acid writhing and hot plate method． Ｒesults Guangaiteng significantly reduced the xylene-
induced mouse ear edema，high-，middle-，low-dose of Guangaiteng significantly reduced inflammation after 2 h，high-，middle-dose
Guangaiteng significantly reduced inflammation after 4 h． Latency of Guangaiteng group was prolonged，writhing significantly was reduced
and pain threshold was increased． Conclusions Guangaiteng has significant anti-inflammatory and analgesic effect．
【Key words】 Guangaiteng;Anti-inflammatory;Aanalgesia
冠盖藤，又名青棉花藤、花藤、猴头藤，为虎耳草科植物〔1〕，
主要分布在长江以南各省区，野生于溪旁，山谷，林下，常以气
根攀附于谷沟湿润石崖或乔木上〔2〕。民间用于骨性关节炎
(OA)治疗，其疗效显著。本研究旨在通过建立炎症和疼痛模
型以探讨其抗炎镇痛作用。
1 材料与方法
1. 1 动物 健康 KM小鼠，清洁级，体重 18 ～ 22 g，雌雄皆用;
健康 SD大鼠，雄性，清洁级，体重 180 ～ 220 g，以上动物均由长
沙市开福区东创实验动物科技服务部代购，动物合格证号:scxk
(湘)2009-0012。
1. 2 药物 冠盖藤采于湖南省怀化市沅陵县，经湖南中医药
大学药学院中药鉴定教研室鉴定为柔毛冠盖藤，制备成水煎
液;复方阿司匹林片(大连美创药业有限公司，国药准字
H20024666) ;雷公藤多甙片(上海复旦复华药业有限公司，批
号 Z31020415)。以上药物用时均由生理盐水配成所需浓度。
1. 3 试剂与仪器 二甲苯(天津市大茂化学试剂厂，批号
20080921) ;角叉菜胶(Sigma 公司，批号 45F-0427) ;冰醋酸(潍
坊润洁化学有限公司) ;其他试剂均为市售分析纯。电子天平
(德国 Sartorius 公司产品，型号 BP211D) ;泰盟 PV-200 足趾容
积测量仪(成都泰盟科技有限公司) ;GJ28402 型热板测痛仪
(浙江宁海白石电子医药仪器)。
1. 4 冠盖藤对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响 50 只 KM 小
鼠，按体质量随机分成 5 组，每组 10 只，即模型组、阿司匹林
组、冠盖藤低、中、高剂量组(GGT 低、中、高剂量组)。GGT 低、
中、高剂量组生药分别按 2. 31、4. 62、9. 24 g /kg，阿司匹林组按
0. 20 g /kg，模型组予相应量生理盐水，均灌胃给药，连续 7 d。
参照文献〔3，4〕，于末次给药 30 min 后，立即在右耳前后两面均
匀涂抹二甲苯 0. 02 ml /只致炎，左耳不涂做对照。致炎后 30
min处死小鼠，用 7 mm 打孔器分别取两耳相同部位耳片。以
左右耳质量之差为其肿胀程度，计算各组耳肿胀度。炎症抑制
率(%)= (模型组肿胀度-给药组肿胀度)/模型组肿胀度)×
100%。
·924·秦莉花等 冠盖藤的抗炎镇痛作用 第 2 期
1. 5 冠盖藤对角叉菜胶诱导大鼠足趾肿胀的影响 SD 大鼠
50 只，按体重随机分成 5 组，即模型组、雷公藤组、GGT 低剂量
组、GGT中剂量组、GGT 高剂量组。GGT 低、中、高剂量组给药
同上(二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验) ;雷公藤组予雷公藤多甙片
混悬液 15. 44 mg /kg;模型组予相应量生理盐水;均灌胃给药，
连续 7 d。参照文献〔5 ～ 7〕，正式实验开始前按后足容积法测定
实验大鼠右后足容积，测 2 次，取平均值作为致炎前足趾容积。
末次给药后 1 h，分别在大鼠右后足跖皮下注射 1%角叉菜胶混
悬液 0． 1 ml /只致炎，测定 2、4、6 h右后足跖容积。
1. 6 冠盖藤对醋酸致小鼠扭体反应的影响 50 只 KM 小鼠，
按体质量随机分成 5 组，分组同上。GGT低、中、高剂量组给药
同上(二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验) ;阿司匹林组予阿司匹林
0. 20 g /kg;模型组予相应量生理盐水;均灌胃给药，连续 7 d。
参照文献〔8，9〕，与末次给药 30 min 后，小鼠腹腔注射 0. 6% 冰
醋酸 0. 1 ml /10 g，记录小鼠扭体潜伏期及 15 min 内各组小鼠
出现扭体反应的次数。
1. 7 冠盖藤对小鼠热板致痛实验的影响 参照文献〔10，11〕，KM
小鼠，置于(55±0. 5)℃热板上，记录小鼠自热板上至出现舔后
足反应所需时间，即为痛阈值，凡＜5 s或＞30 s及跳跃的小鼠均
淘汰，合格小鼠再测 1 次痛阔值，取两次平均值。取合格小鼠
50 只，按照痛阈值随机分为 5 组，分组同上。GGT 低、中、高剂
量组给药同上(二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验) ;阿司匹林组予阿
司匹林 0. 20 g /kg;模型组予相应量生理盐水;均灌胃给药，连
续 7 d。于末次给药 30 min后测定痛阈值，并计算痛阈提高百
分率，痛阈提高百分率=(给药后平均痛阈值－给药前平均痛阈
值)/给药前平均痛阈值×100%。
1. 8 统计学方法 数据以 x±s表示，采用 SPSS16. 0 软件进行。
方差分析比较各组间差异的显著性。
2 结 果
2. 1 冠盖藤对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响 与模型组比
较，各药物组均能减轻二甲苯所致小鼠耳廓肿胀，GGT 高剂量
效果接近阿司匹林组。见表 1。
表 1 冠盖藤对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响(x±s，n=10)
组别 肿胀度(mg) 抑制率(%)
模型组 13. 53±1. 62 －
阿司匹林组 5. 13±1. 452) 62. 08
GGT高剂量组 7. 64±1. 322)3) 43. 53
GGT中剂量组 9. 52±1. 632)3) 29. 63
GGT低剂量组 11. 87±2. 071)3) 12. 26
与模型组比较:1)P＜0. 05，2)P＜0. 01;与阿司匹林组比较:3)P＜0. 01
2. 2 冠盖藤对角叉菜胶致大鼠足趾肿胀的影响 致炎后 2 h，
与模型组比较，各药物组能显著减少角叉菜胶所致大鼠足跖肿
胀;与雷公藤组比较，GGT 高、中、低剂量组均无差异(P ＞
0. 05)。致炎后 4 h，与模型组比较，GGT高、中剂量组和雷公藤
组能显著减少角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀;与雷公藤组比较，
GGT高、中、低剂量组均无统计学意义。致炎后 6 h，与模型组
比较，雷公藤组能显著减少角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀;与雷公
藤组比较，GGT中、低剂量组有显著性差异(P＜0. 05)。见表 2。
表 2 冠盖藤对角叉菜胶致大鼠足跖
肿胀的影响(x±s，n=10)
组别
给药前容积
(ml)
致炎后肿胀足容积(ml)
2 h 4 h 6 h
模型组 1. 34±0. 12 1. 89±0. 13 1. 73±0. 10 1. 67±0. 09
雷公藤组 1. 36±0. 13 1. 66±0. 152) 1. 59±0. 162) 1. 53±0. 132)
GGT高剂量 1. 35±0. 08 1. 59±0. 122) 1. 60±0. 041) 1. 58±0. 06
GGT中剂量 1. 38±0. 10 1. 70±0. 152) 1. 62±0. 101) 1. 63±0. 083)
GGT低剂量 1. 36±0. 09 1. 73±0. 141) 1. 69±0. 13 1. 65±0. 103)
与模型组比较:1)P＜0. 05，2)P＜0. 01;与雷公藤组比较:3)P＜0. 01
2. 3 冠盖藤对醋酸致小鼠扭体反应的影响 潜伏期方面，与
模型组比较，各药物组的潜伏期明显延长，有显著性差异;与阿
司匹林组比较，GGT低剂量组有显著性差异。扭体次数方面，
与模型组比较，各药物组扭体次数明显降低，有显著性差异;与
阿司匹林组比较，GGT低剂量组有显著性差异。见表 3。
表 3 冠盖藤对小鼠醋酸扭体反应的影响(x±s，n=10)
组别 潜伏期(s) 扭体次数(次)
模型组 278. 16±21. 23 34. 90±5. 88
阿司匹林组 363. 40±15. 292) 15. 30±5. 522)
GGT高剂量组 342. 50±20. 232) 18. 60±5. 832)
GGT中剂量组 339. 90±21. 352) 22. 80±6. 652)
GGT低剂量组 302. 70±43. 091)3) 29. 00±4. 611)3)
与模型组比较:1)P ＜ 0. 05，2)P ＜ 0. 01;与阿司匹林组比较:3)P ＜
0. 01，下表同
2. 4 冠盖藤对小鼠热板致痛实验的影响 与模型组比较，各
药物组给药后痛阈值均升高，与阿司匹林组比较，GGT 低剂量
组有显著性差异(P＜0. 05)。见表 4。
表 4 冠盖藤对小鼠热板致痛实验的影响(x±s，n=10)
组别
痛阈值(s)
给药前 给药后
痛阈提高
百分率(%)
模型组 14. 82±2. 11 15. 11±3. 05 1. 96
阿司匹林组 13. 96±2. 09 20. 40±2. 672) 46. 13
GGT高剂量组 14. 54±2. 17 19. 72±2. 522) 35. 62
GGT中剂量组 14. 62±3. 38 19. 23±2. 312) 31. 53
GGT低剂量组 13. 99±2. 08 16. 32±2. 463) 1. 67
3 讨 论
OA是从关节软骨起病，影响整个关节结构，包括软骨下
骨、韧带、滑膜、关节囊及关节外肌肉，最终因关节软骨全部脱
失而导致关节畸形和功能丧失的一种疾病〔12〕。现代研究表明
OA的症状体征主要表现为:疼痛、局部性晨僵、肿胀、畸形。本
病随其病情发展，严重影响到中老年人生活质量。
本研究采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀和角叉菜胶致大鼠足
趾肿胀两种非特异性炎症模型评价冠盖藤对早期急性炎症的
影响;以醋酸致小鼠扭体和热板法两种用于镇痛药粗筛的经典
常用方法评价冠盖藤的镇痛作用。本实验结果提示冠盖藤水
·034· 中国老年学杂志 2014 年 1 月第 34 卷
提取物有明显的镇痛作用。
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〔2012-02-21 收稿 2012-04-12 修回〕
(编辑 赵慧玲)
老年大鼠脊髓腰骶段 NADPH-d阳性体的表达及睾酮对其影响
徐彦楠 周晨明1 张国梁2 车 静2 石葛明2 (河北医科大学细胞生物教研室，河北 石家庄 050017)
〔摘 要〕 目的 探讨老年大鼠脊髓腰骶段还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷磷酸黄递酶(NADPH-d)阳性体的表达并观察睾酮对其的影响。方
法 健康雄性Wistar大鼠 6 月龄组、21 月龄组和 21 月龄滴鼻组各 5 只;应用 NADPH-d组织化学法检测大鼠脊髓腰骶段 NADPH-d阳性体的表达，并
观察老年大鼠鼻腔吸入睾酮后 NADPH-d阳性体的影响。检测各月龄组大鼠切片后角浅层(SDH)、利绍尔束(LT)、中间外侧核(ILN)、骶髓后连合
核(DCN)和中央管(CC)NADPH-d阳性体的数目。结果 6 月龄组未出现 NADPH-d阳性体，21 月龄滴鼻组 NADPH-d 阳性体的表达明显少于 21 月
龄组。结论 老年大鼠鼻腔给予睾酮可以减少脊髓腰骶段 NADPH-d阳性体表达。
〔关键词〕 睾酮;脊髓;还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷磷酸黄递酶
〔中图分类号〕 Ｒ322. 81 〔文献标识码〕 A 〔文章编号〕 1005-9202(2014)02-0431-03;doi:10. 3969 / j. issn. 1005-9202. 2014. 02. 069
1 河北医科大学电镜实验中心 2 河北医科大学神经生物研究室
第一作者:徐彦楠(1984-)，女，助理实验师，主要从事单胺转运体研究。
脊髓腰骶段主要控制大肠、盆底肌和生殖器官的功能〔1〕。
在衰老的过程中，脊髓腰骶段呈现与年龄相关的衰老性变化，
同时也出现肠、膀胱和生殖器官等盆腔脏器的器质性和功能性
改变。一氧化氮(NO)是一种重要的神经信息物质，在外周和
中枢神经系统中起着重要的信号转导作用〔2〕。有研究显示盆
腔脏器的功能或器质异常可能与老年脊髓腰骶段的 NO 表达
改变有关〔3〕。在衰老的过程中脊髓腰骶段的出现 NO 表达变
化，特别是还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷磷酸黄递
酶(NADPH-d)阳性体的表达改变〔3〕。机体衰老体内性激素减
少，NO特别是 NADPH-d阳性体的表达变化是否与体内性激素
的减少有关目前尚无定论。本实验拟 NADPH-d 组织化学法，
观察老年大鼠脊髓腰骶段 NADPH-d阳性体的表达及鼻腔给予
睾酮后对其的影响。
1 材料与方法
1. 1 实验分组和动物模型 选取 6 月龄和 21 月龄健康雄性
Wistar大鼠 15 只，由河北医科大学动物实验中心提供。大鼠分
为 6 月龄组、21 月龄组和 21 月龄滴鼻组，每月龄组 5 只。6 月
龄组和 21 月龄组鼻腔给予芝麻油(2 mg /kg)，21 月龄滴鼻组鼻
腔给予睾酮(2 mg /kg)，连续给药 3 个月(6 月龄组从 3 月龄时
开始给药，21 月龄组和 21 月龄滴鼻组从 18 月龄开始给药)。
1. 2 灌注切片 所有大鼠经 10%水合氯醛(0. 3 ml /100 g)腹
腔注射麻醉后，经左心室灌注固定，取出脊髓后固定 4 h(4℃)。
取脊髓腰骶段(L6-S1)后置入 30%的蔗糖中过夜。在恒冷切片
机上进行连续切片，片厚 40 μm。
1. 3 染色 将切片在 0. 1 mol /L PB 缓冲液漂洗两次后。浸
入孵育液(孵育液组成:0. 3% Triton X-100，1. 0 mmol /L β-NAD-
PH，0. 2 mmol /L NBT)置于 37℃ 90 ～ 120 min，缓冲液终止反
应，裱片制片。在显微镜下观察计数 6 月龄组、21 月龄组和 21
月龄滴鼻组分布在后角浅层(SDH)、利绍尔束(LT)、中间外侧
核(ILN)、DCN和中央管(CC)NADPH-d阳性体的数目。
1. 4 统计学方法 所有数据以 x±s表示，采用 SPSS13. 0 统计
软件进行统计，经方差齐性检验后行两样本均数间的 T检验。
2 结 果
显微镜下，在 NADPH-d 染色的方法显色的脊髓腰骶段可
以看到被染成蓝色的 NOS神经元，细胞呈高尔基样，其胞体和
突起清晰可见。并且在 21 月龄组以及 21 月龄给滴鼻组均可
见高密度球形或不规则形的 NADPH-d 阳性体。见图 1。6 月
龄组雄性 Wistar 大鼠脊髓腰骶段未出现 NADPH-d 阳性体 21
月龄组老年大鼠脊髓腰骶段出现较多的 NADPH-d 阳性体，老
·134·徐彦楠等 老年大鼠脊髓腰骶段 NADPH-d阳性体的表达及睾酮对其影响 第 2 期