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药用植物虎皮楠分泌细胞的观察



全 文 :文章编号:1001 - 4276 -(2011)01 - 0118 - 03
收稿日期:2011 - 10 - 25
基金项目:福建省农科院青年基金资助项目(2011QA-5)及福建省农业科学院双百资助项目(sbmn1246)。
作者简介:陈倩倩(1985 -) ,女,硕士。研究方向:药用植物次生代谢。E-mail:chenqqkib@ 163. com。* 通讯作者唐建阳
(1961 -) ,男,研究员,博士研究生。研究方向:植物营养、农业生态、土壤质量评价等。E-mail:tjy836@ 163. com。
药用植物虎皮楠分泌细胞的观察
陈倩倩,唐建阳*
(福建省农业科学院农业生物资源研究所,福建 福州 350003)
摘要:对虎皮楠幼茎分别作变性处理和不变性处理,通过石蜡切片观察分泌细胞。以杜仲产胶细胞作为对
照,结果显示虎皮楠幼茎变性处理和不变性处理均能观察到分泌细胞。
关键词:虎皮楠;分泌细胞;变性处理;石蜡切片
中图分类号:Q944. 68 文献标识码:A
Observation on the secretory cells of Daphniphyllum oldhami
CHEN Qian-Qian,TANG Jian-Yang
(Agricultural Bio-Resources Research Institute,Fujian Academy of Agricultural Sciences,Fuzhou,Fujian 350003,China)
Abstract:Daphniphyllum oldhami was treated with denaturalization or no-denaturalization technique and paraffin sec-
tion method,and Eucommia ulmoides was as control. Gutta-containing cell of E.ulmoides can be seen by denaturaliza-
tion treatment,while the secretory cell of twigs from D.oldhami could be seen by both denaturalization and no-denatu-
ralization treatment.
Key words:Daphniphyllum oldhami;secretory cell;denaturalization;paraffin section
自然界中能够分泌乳汁的植物极为普遍,植物中的各种分泌细胞、分泌道、分泌腺起着隔
离并贮存乳汁的作用。植物乳汁是植物的次生代谢产物,植物的次生代谢及其产物在植物与
环境互作和整个生命活动中行使着重要的功能。它们构成植物体系的一部分,参与植物的逆
境胁迫反应,在植物防御中起着重要作用[1]。植物乳汁作为植物次生代谢产物,具有抑菌抗
虫作用,许多植物的乳汁还具有重要的经济价值。
虎皮楠(Daphniphyllum oldhami)系金缕梅纲交让木属植物,能够分泌乳汁,含有生物碱、
黄酮和三萜等成分,主要化学成分是生物碱类[2]。目前从该科植物中分离到的生物碱已超过
120 种[3 - 6]。该科植物主要有愈合和消炎的作用,可以用来治疗哮喘、风湿、发热、流行性感
冒、肠胃炎、湿疹等,对肿瘤细胞增殖也具有明显的抑制作用[7 - 8]。杜仲(Eucommia ulmoides)
产生杜仲胶的分泌细胞称为含胶细胞,田兰馨等于 1990 年首次经过变性处理对杜仲含胶细胞
进行了观察[9]。但目前尚未有虎皮楠分泌细胞的相关研究报道。本实验以杜仲含胶细胞为
对照,对虎皮楠的分泌细胞分别作变性和不变性处理,观察细胞分布、形态等生物学特征,为虎
皮楠乳汁相关研究提供依据。
1 材料与方法
1.1 供试材料
选取生长健壮的虎皮楠和杜仲。
第 27 卷 武 夷 科 学 Vol. 27
2011 年 12 月 WUYI SCIENCE JORUNAL Dec. 2011
DOI:10.15914/j.cnki.wykx.2011.00.014
1.2 材料的固定
分别采集虎皮楠和杜仲的幼茎部位,用解剖刀切至约 0.5 cm × 0.5 cm 大小,投入 FAA 中
固定。之后用酒精梯度洗脱至无色,进行下步处理。
1.3 变性
脱水后组织在冰醋酸中浸泡后,放入变性剂(溴 -碘 -冰醋酸试剂)中室温处理 24 h。不
做变性处理的材料放置于乙醇中。
1.4 透明
先将材料置于酒精二甲苯混合液,逐渐过渡到纯二甲苯中,每次处理约 1 h。
1.5 制作石蜡切片
组织透蜡后进行包埋。包埋好的蜡块进行干燥处理。将蜡块修至大小、角度合适后,用
Leica RM2016 切片,切片的厚度为 7 - 10 μm。将明胶粘连剂涂于载玻片中央,蒸馏水展片。
1.6 染色
采用铁钒 -苏木精染色法染色。
2 结果与分析
显微观察显示,对照杜仲含胶细胞经过变性处理后呈红褐色(图 1A),说明试验方法是可行的。
经过变性处理的虎皮楠分泌细胞(图 1B)和未变性处理的分泌细胞都被染成紫红色(图 2A)。
A.杜仲;B.虎皮楠
图 1 经变性处理的茎部
Figure 1 Stem by denaturalization treatment
2.1 分泌细胞的形态学特征
虎皮楠幼茎分泌细胞的横断面多为圆形、椭圆形,少数为卵状三角形、三角形、半圆形或不
规则形(图 2A) ;纵切面多为不规则的圆柱形(图 2B) ,与周围细胞相比较,分泌细胞较长。
2.2 分泌细胞在组织中的分布情况
从图 2A可以看出,虎皮楠的分泌细胞分布于形成层与皮层之间的组织,形成层以内的韧皮
部没有发现分泌细胞,在皮层薄壁组织和靠近形成层的木质部部分,分泌细胞的密度比较大。
2.3 分泌细胞在组织中的密度
相同部位取材,放大 100 倍视野,在同样面积内(直径 0.5 μm) ,观察发现经过变性处理的
虎皮楠茎部的分泌细胞数目为 52;未变性处理的分泌细胞数量为 52.6。表明变性处理前后分
泌细胞的数目大致相同。
2.4 乳汁成分在细胞内的分布情况
从纵切图可以看出,虎皮楠分泌细胞内的乳汁呈颗粒状,聚集贴近细胞膜分布(图 2B) ;而
·911·第 27 卷 陈倩倩等:药用植物虎皮楠分泌细胞的观察
A.横切图;B.纵切图
图 2 未经变性处理的虎皮楠
Figure 2 D.oldhami by no-denaturalization treatment
杜仲分泌细胞中杜仲胶呈束状分布于细胞内部(图 1B)。虎皮楠乳汁的分布密度和紧实度远
小于杜仲胶。
3 结论
虎皮楠分泌细胞不需要经过变性处理就可观察到,细胞呈圆柱状,分布于木质部中,分泌
细胞内的乳汁成分呈颗粒状分布,与杜仲分泌细胞(杜仲胶)不同。推测是由于 2 种分泌细胞
分泌的乳汁成分不同。植物乳汁的成分复杂,构成乳汁的粗分散相的成分可分为 7 类[10],杜
仲胶是一种以反式异戊二烯聚合物为主的硬性橡胶,虎皮楠乳汁所含成分可能没有异戊二烯
聚合物,而是其它次生代谢产物。因此,用变性剂处理虎皮楠分泌细胞不会产生异戊二烯聚合
物所特有的硬化反应。虎皮楠的分泌细胞分布于茎部的皮层与形成层之间,这个部位也是虎
皮楠生物碱含量较为丰富的区域。研究人员已从虎皮楠科植物中分离鉴定出 13 种骨架类型
的生物碱 128 个[2,11],其中仅有少数生物碱对淋巴瘤细胞表现出强的抑制活性[8]。
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