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野西瓜苗不同溶剂萃取物对小菜蛾的杀虫活性



全 文 :湖 北 农 业 科 学 2008 年
第 47 卷第 11 期
2008年 11 月
湖北农业科学
Hubei Agricultural Sciences
Vol. 47 No.11
Nov.,2008
收稿日期:2008-07-23
基金项目:国家自然科学基金资助项目(20565003);宁夏自然科学基金资助项目(NZ0719)
作者简介:左玲霞(1978-),女,宁夏中宁人,硕士研究生,从事天然产物分析和农药化学研究(电话)13709507898
(电子信箱)zuolingxia2007@126.com;通讯作者,杨敏丽,教授,博士(电话)0951-2062861(电子信箱)yml@nxu.edu.cn。
野西瓜苗(Hibiscus trionum L.),又称小秋葵、
香铃草 [2]、山西瓜秧、野芝麻、打瓜花,锦葵科木槿
属,一年生草本植物,分布于全国大部分地区。 据宁
夏中药志记载,野西瓜苗“味甜,性甘”,具有清热解
毒,祛风除湿,止咳,利尿等功能,用于风湿痹病,感
冒咳嗽,腹泻痢疾,水火烫伤,疮毒等[3],有很好的生
理活性,但未见文献报道野西瓜苗具有杀虫生物活
性。 本文对野西瓜苗乙醇提取物和不同溶剂萃取物
的杀虫活性进行了初步研究。
1 材料与方法
1.1 材料和仪器
供试植物材料野西瓜苗采自宁夏大学周边农
田, 于 10 月份采集全草。 将所采集的野西瓜苗阴
干,用植物粉碎机粉碎并通过 40 目筛,得干粉,装
入塑料袋,在 4℃冰箱中保存备用。 供试昆虫小菜蛾
采用人工饲养,试验时选择健康、大小一致的 3 龄
幼虫进行试验。 仪器有:人工气候箱、电子天平、超
野西瓜苗不同溶剂萃取物对小菜蛾的杀虫活性
左玲霞 1,2,杨敏丽 2,谢晓鹏 3
(1.银川大学石油化工学院,银川 750105;2.宁夏大学能源化工重点实验室,银川 750021;3.宁夏育才中学,银川 750021)
摘要:采用乙醇超声提取法得到野西瓜苗乙醇提取物,测试提取物对小菜蛾的触杀活性,然后用 5 种不
同极性溶剂萃取乙醇提取物,得到各溶剂萃取物,测试各溶剂萃取物对小菜蛾的触杀活性,并计算不同
作用时间的校正死亡率。结果显示,野西瓜苗乙醇提取物对小菜蛾 3龄幼虫具有较强的触杀活性,LC50为
3.2 mg·mL-1;不同溶剂萃取物活性由高到低依次为氯仿>石油醚>乙酸乙酯>正丁醇>水,氯仿萃取物 72
h 对小菜蛾 3 龄幼虫触杀活性最高,校正死亡率达到 96.67%,这一结果也显示野西瓜苗的杀虫活性物
质为一类极性较弱的化合物。
关键词:野西瓜苗;小菜蛾;杀虫活性[1]
中图分类号:S567.9,S436.341.2+4 文献标识码:B 文章编号:0439-8114(2008)11-1286-02
Study on Insecticidal Activity of the Extract of Hibiscus trionum by Different Solvent
to Plutella xylostella
ZUO Ling-xia1,2,YANG Min-li2,XIE Xiao-peng3
(1.College of Oil and Chemistry Industry,Yinchuan University,Yinchuan 750105, Ningxia,China;
2. Key Laboratory of Energy Sources & Chemical Engineering, Ningxia University, Yinchuan 750021, China)
Abstract:Taking Hibiscus trionum L. as an investigating object,ethanol extracts from Hibiscus trionum L.were obtained
through alcohol-UW extracting .The activities of extracts to Plutella xylostella were tested to calculate the mortality rate and
the corrected mortality rate. The results showed that the ethanol-extracts from H.trionum had the stronger activity. LC50 was
3.2 mg·mL-1. The activities of each extract was in order as follows:chloroform> petroleum ether > ethyl acetate > butanol >
water. The extracts by chloroform for 72h had the highest contacting toxicity to the 3rd instar larva,with the corrected mor-
tality rate of 96.67% resp. The result also indicated the insecticidal active substances in H.trionum were a kind of puny po-
lar compounds .
Key words:Hibiscus trionum L; Plutella xylostella; insecticidal activity
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2008.11.006
第 11 期
表 1 野西瓜苗乙醇提取物对小菜蛾 3 龄幼虫触杀活性
测试结果
供试样品
mg·mL-1
50.0
25.0
12.5
6.25
3.125
24 h
96.7
93.3
83.3
56.7
33.3
48 h
96.7
93.3
86.7
60.0
40.0
72 h
96.7
93.3
86.7
66.7
46.7
24 h
96.7
93.3
83.3
56.7
33.3
48 h
96.7
93.3
86.7
60.0
40.0
72 h
96.7
93.3
86.7
66.7
46.7
死亡率/% 校正死亡率/%
表 2 不同溶剂萃取物对小菜蛾 3 龄幼虫触杀活性测试结果
供试样品
5 mg·mL-1
石油醚萃取物
氯仿萃取物
乙酸乙酯萃取物
正丁醇萃取物
剩余水层萃取物
萃取率
%
73.99
2.06
1.36
3.38
17.6
24 h
33.33
86.67
16.67
6.67
0
48 h
56.67
96.67
23.33
6.67
0
72 h
63.33
96.67
23.33
10.00
0
校正死亡率/%
声波清洗器、植物样品粉碎机、旋转蒸发仪、电热鼓
风干燥箱 。
1.2 方法
1.2.1 野西瓜苗乙醇提取物的制备 准确称取野
西瓜苗干粉 50 g,放入 1 000 mL 的锥形瓶中,加入
8倍量 95%乙醇溶液,浸泡 24 h,超声 30 min,抽滤,
残渣再用 8 倍量溶剂提取,重复 3 次。 合并 3 次抽
滤液,用旋转蒸发仪浓缩得浸膏。 将浓缩得到的浸
膏用 50%的丙酮配制成 50mg·mL-1、25mg·mL-1、12.5
mg·mL-1、6.25mg·mL-1、3.125mg·mL-1 5个浓度[4]。放
在 4℃冰箱中,备用。
1.2.2 野西瓜苗不同溶剂萃取物的制备 称取乙
醇提取物浸膏 6.180 6 g,用 30 mL 水悬浮,装入分
液漏斗中,采用液-液分配萃取法依次用石油醚、氯
仿、乙酸乙酯、正丁醇按照 1∶1 比例萃取,将得到的
不同极性萃取物及水层剩余物均浓缩称重,计算萃
取率。
1.2.3 杀虫活性测定 采用浸虫法: 挑选健康、虫
体大小一致的小菜蛾 3 龄幼虫,放入用纱网制成的
圆柱形容器,在溶液中浸 10 s,迅速取出,并用干净
吸水纸吸去多余药液,然后将浸药试虫用小毛笔转
入垫有保湿滤纸的培养皿中, 饲喂新鲜甘蓝叶片。
于处理后 24 h、48 h 和 72 h 分别记录试虫的死亡情
况。每处理 10头,重复 6次。对照浸渍 50%丙酮。计
算死亡率和校正死亡率。 计算方法如下:
死亡率= 死亡虫数
供试总虫数
×100%
校正死亡率= 处理组死亡率-对照组死亡率
1-对照组死亡率
×
100%
2 结果与分析
2.1 野西瓜苗乙醇提取物对小菜蛾的触杀活性
按照 1.2.3 方法测试以上不同浓度乙醇提取物
的杀虫活性,结果如表 1。 从表 1 可以看出,乙醇提
取物对小菜蛾具有较强的触杀活性,活性随浓度增
大而增强, 毒力回归方程为 y=4.171 0+1.629 7x,
相关系数 r=0.991 4,LC50=3.2 mg·mL-1 (LC50的 95%
置信区间为 1.77~5.89 mg·mL-1)。
2.2 不同溶剂萃取物对小菜蛾的触杀活性
将以上得到的各溶剂萃取物蒸干浓缩后用
50%丙酮配成浓度为 5 mg·mL-1的测试液, 以 50%
丙酮作对照, 按照 1.2.3 方法测试不同溶剂萃取物
的杀虫活性,结果如表 2。 从表 2 可以看出,不同溶
剂萃取物活性不同, 活性由高到低依次为氯仿>石
油醚>乙酸乙酯>正丁醇>水, 氯仿萃取物 72 h 对小
菜蛾 3 龄幼虫触杀活性最高 , 校正死亡率达到
96.67%,这一结果也显示野西瓜苗的杀虫活性物质
为一类极性较弱的化合物。
3 讨论
1)野西瓜苗具有广泛的生理活性,民间也是自
采自用[5]。本研究结果表明,野西瓜苗同时也具有较
强的杀虫活性,它对小菜蛾 3 龄幼虫具有很高的触
杀活性,可通过进一步研究,开发出一种新型的植
物源农药。
2)本试验通过不同极性溶剂萃取分离,初步推
断野西瓜苗杀虫活性物质为弱极性物质。 由于植物
次生物质种类多,结构复杂,所得氯仿萃取物仍是
一类混合物,还必须进一步采用柱层析分离和活性
跟踪的方法, 分离纯化得到杀虫活性单体物质 [6]。
参考文献:
[1] 赵 春,李水清.艾蒿提取物的生物活性研究[J].湖北农业科
学,2003(4),44-46.
[2] 中国科学院植物研究所. 中国高等植物图鉴 第一册 [M].北
京:科学出版社,1985. 818.
[3] 邢世瑞.宁夏中药志[M].银川:宁夏人民出版社,1990,上卷:
648.
[4] 李水清, 谢九皋.N-硝基三氯苯胺类化合物的杀虫活性研究
[J].湖北农业科学,2005(4):48-50.
[5] 王 妍.野西瓜苗中 Ca 及 6 种微量元素的含量分析[J].中国药
学杂志,2004,39(1):877-878.
[6] 丁建海,杨敏丽. 扁蓄对小菜蛾杀虫活性物质初选[J].安徽农
业科学,2007,35(36):11890-11893.
(责任编辑 万景辉)
左玲霞等:野西瓜苗不同溶剂萃取物对小菜蛾的杀虫活性 1287