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地锦的组织培养及植株再生



全 文 :收稿 2003-05-09    修定 2003-07-21
资助 国家“ 863”项目(2001AA244031)。
 * 通讯作者(E-mail:sunzy@f orestry.ac.cn, Tel:010-62889626)。
地锦的组织培养及植株再生
李正红1  孙振元2 , * 李兴欣2(1中国林业科学研究院资源昆虫研究所 , 昆明 650216;2 中国林业科学研究院林业研
究所 , 北京 100091)
Tissue Culture and Plantlet Regeneration of Parthenocissus tricuspidata
LI Zheng-Hong1 , SUN Zhen-Yuan2 , * , LI Xing-Xin2(1 Research Institute of Economy Insects , Chinese Academy of Forestry ,
Kunming 650216;2 Research Institute of Forestry , Chinese Academy of Forestry , Beijing 100091)
1 植物名称  地锦(Parthenocissus tricuspidata),
俗称爬山虎。
2 材料类别 幼胚(juvenile embryo)。
3 培养条件 基本培养基:改良 B5 +3%蔗糖+0.
5%琼脂 , pH 5.8;愈伤组织诱导培养基:(1)基本培
养基+6-BA 2.0 mg·L-1(单位下同)+2 ,4-D 2.0;
愈伤组织继代培养基:(2)基本培养基+6-BA 2.0+
2 ,4-D 1.0;分化培养基:(3)基本培养基 ,(4)基本培
养基+6-BA 2.0 +NAA 0.1+LH(水解乳蛋白)
300.0 ,(5)基本培养基+6-BA 2.0+NAA 0.5+LH
100.0+5%活性炭。愈伤组织诱导及继代为暗培
养 ,分化培养中的光照度为 2 000 lx ,光照时间为 12
h·d-1 ,温度均为(25±2)℃。
4 生长与分化情况
4.1 愈伤组织诱导 采盛花期后 45 d 的幼果 ,依
次用自来水冲洗 30 min ,70%酒精浸泡 1 min ,蒸馏
水漂洗 3次 ,0.1%HgCl2浸泡 10 min ,蒸馏水漂洗 4
次 ,放于铺有灭菌滤纸的培养皿内吸干表面水分。
剥去果皮及种皮 ,取幼胚接种于培养基(1)上 。
接种后 5 d , 胚开始生长 ,但不发育为完整苗 ,
胚轴及子叶粗短且逐渐膨大 , 10 d后开始形成淡黄
色愈伤组织 ,出愈率 85%。
4.2 愈伤组织继代及分化 愈伤组织在培养基(2)
上继续长大 ,继代 2 ~ 3次后愈伤组织分化为两类:
10%为生长较慢的淡黄色胶状粘性愈伤组织 , 90%
为生长较快的灰白色无粘性 、质地稀软的愈伤组织。
去掉粘性愈伤组织 ,将无粘性愈伤组织在培养基(3)
~(5)上培养。1周后 ,愈伤组织表面或内部局部变
为黄绿色 ,并逐渐长大成黄绿色颗粒状松散的愈伤
组织(图 1),镜检为球形 、细胞质较浓的胚性愈伤组
织。培养基(3)、(4)中胚状体分化率为 33%,培养
基(5)中分化率仅为 13%(图 2),表明活性炭对地锦
幼胚愈伤组织的体细胞胚的分化无促进作用 。生根
率均为 100%,且根系粗壮。
4.3 炼苗与移栽 小苗长 8 ~ 10 cm 时 ,在温度
25℃、湿度 75%左右的玻璃温室中揭盖炼苗 3 d。
然后取出小苗 ,洗去培养基 ,移入经 121℃消毒 1.5
h的土壤中 ,于同样条件温室中培养 。第 1 周置于
阴凉处 ,而后置于向阳处 ,成活率 85%。
5 意义与进展 地锦为葡萄科地锦属植物。春夏
叶色翠绿 ,入秋转为鲜红或紫红 ,观赏效果极佳 。它
吸盘发达 ,攀援能力强 ,是城市垂直绿化的优良材
料 ,也是荒漠 、石质山地 、公路及铁路护坡植被恢复
的理想树种 ,但存在生长速度慢和抗旱 、抗寒能力较
差等不足 。本文结果可为采用体细胞杂交 、突变体
的诱变与筛选 、转基因技术进行地锦种质资源创新
与优良品种培育提供参考 。目前此属植物通过胚性
愈伤组织再生植株的报道尚未见到 。
图 1 地锦幼胚愈伤组织
图 2 地锦胚状体萌发
482 植物生理学通讯 第 39 卷 第 5 期 , 2003年 10 月
DOI :10.13592/j.cnki.ppj.2003.05.033