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地锦和五叶地锦花粉生活力及其贮藏性研究



全 文 :第 1 2卷 第 1 期
26 0 0年 l 月
北 京 农 学 院 学 报
J O U R N A L O F B E IJ I N G A G R I C U L T U R A L C O L L E G E
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地锦和五叶地锦花粉生活力及其贮藏性研究
王进忠` , 云晓鹏 ` , 康荣芹` , 高润蕾` , 李树 臣` , 孙振元“ `
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. 北京农学院植物科学技术系 , 北京 1 02 2 0 6 ; 2 . 中国林业科学院林业研究所 , 北京 10 0 0 94)
摘 要 : 笔者对地锦 ( P a r ht e n o e i : s u s t r i c u s p i d a t a ) 和五叶地锦 ( P a rt h e n o e i s s u s q u i n q u e fo l泛a P la n e h ) 花粉生 活
力和贮藏性进行了研究 。 结果表明温度是影响地锦和五叶地锦花粉 生活力的主要因素 , 地锦和五叶地锦花粉生
活力随着贮藏天数的增加而明显的下降 , 贮藏的花粉短期内出现被迫休眠现象 。 以花粉生活力达 40 %为标准 ,
地锦和五叶地锦的新鲜花粉生活力均较高达 97 % 以上 。 在室温条件下 , 地锦花粉保存 10 d , 五叶地锦花粉可保
存 17 d ; 在 。一 5 ℃条件下干燥贮藏 , 地锦可保存 18 d , 五叶地锦花粉可保存 lZ d 。
关 键 词 : 地锦 ; 五叶地锦 ; 花粉 ; 生活力 ; 贮藏性
中图分类号 : 5 6 8 7 . 3 文献标识码 : A 文章编号 : 1 0 0 2一 3 1 8 6 ( 2 0 0 6 ) 0 1一 0 0 2 0一 0 4
A S t u d y o n t h e V i a b i l i t y a n d S t o r a g e T im e o f P a r th e n o e i s s u s
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A b s t ar e t
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( P a r t h e n o c i s s u s t r i c u s P i d a t a S i e b e t Z u e e a n d P a r t h e n o c i s s u s g u i n g u e fo l i
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o f s t o r e d a y s i n t h e r o o m t e m p e r a t u r e ( 2 7士 1 ) ℃ . S t o r e d p o l l e n i n a l i t t l e t im e e o u ld b e e o m p e l le d d o r m a n -
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4 0写 , v i t a l i t y o f t h e t w o s p e e i e s o f c r e e p e r w o o d b i n e p o l -
l e n w a s a b o v e 9 7%
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K e y w o dr s
:
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a ; p o l l e n ; v i a b i l i t y ; s t o r a g e
地锦 aP rt h e n o c i s s u s t r i e u s P i d a at S i e b e t Z u e。 和
五叶地锦 P a 此h e n o e i s s u : q u i n q u e fo l i a P la n e h 系葡萄
科 ( V i at e e a e )爬山虎属 ( P a rt h e n o c i s s u : )的两种重要藤
本植物 ,在城市垂直绿化 、 荒漠覆盖和道路保护等方
面有很好的应用前景 l[ 一 2习。 地锦俗称爬墙虎 ,原产于
中国 ,叶片呈三裂状吸盘发达 , 固着能力强 ,生长速率
慢 。 五叶地锦又称美国地锦 ,原产美国 ,叶片呈五裂 ,
吸盘不发达 , 固着力稍弱 ,生长速率相对较快川 。 近
年来各国十分重视对爬山虎属植物利用 ,并对爬山虎
属其他植物营养生长和花的结构和发育以及卷须发
育附着特性进行了大量研究〔“ 一 5〕 ,在比较发育学研究
方面提出了有价值的观点 。 但是在花粉生活力和贮
藏方面尚未见报道 , 自然条件下 , 地锦和五叶地锦的
结实率普遍较高 。 但后期落果严重 。 因此 , 了解花粉
的生活力和贮藏性 ,在地锦和五叶地锦杂交繁育过程
中 ,对选定优良杂交亲本实现人工授粉和种质资源的
收稿 日期 : 2 0 0 5一 0 3一 60 ; 修订 日期 : 2 0 0 5一0 9一 1 5
基金项 目 : 国家 “ 8 6 3 ” 资助项 目 (项 目编号 : 2 0 01 A A 2 4 40 3 1)
作者简介 : 王进忠 , 男 , 副教授 , 从事害虫综合防治和生物技术研究和教学 ; * 通讯作者
DOI : 10. 13473 /j . cnki . i ssn. 1002 -3186. 2006. 01. 003
20 0 6 年第1 期 王进忠 等 :地锦 和五 叶地锦花粉生活力及其贮藏性研究
保存具有重要意义 。
1 材料与方法
1
.
1 材 料 地锦和五叶地锦均采 自北京农学 院
校园内 , 于 7 月上旬地锦和五叶地锦盛花期采集 花
粉 ,用不同方法测其花粉的生活力 。
1
.
2 花粉活力测定方法 l( )醋酸洋红染色法 。 取
少许花粉置载玻片上 ,加 1一 2 滴醋酸洋红 , 盖上盖
玻片 ,置低倍显微镜下观察 ;如果花粉粒为红色 ,则
表示花粉有活力 ,能发芽 。 如无色或黄色 ,则表示已
失去活力 , 不能发芽 。 每隔 l d 测 1 次 ,直到花粉没
有活力为止 。 每次做 3 次重复 , 每个重复观察 3 个
视野 ,计算其染 色百分率` 6〕 。 ( 2) 复尔达考夫染 色
法 。 具有生活力的花粉含有活跃的过氧化物酶 。 此
酶能利用过氧化氢使各种多酚及芳香族胺发生氧化
而产生颜色 ,依据颜色可知花粉有无活性 。 30 OC 下
经 10 m in 后在显微镜下观察 , 如果花粉粒为红色 ,
则表示有过氧化物酶存在 , 花粉有活力 , 能发芽 ; 如
无色或黄色 ,则表示 已失去活力 ,不能发芽 。 每隔 1
d 测 1 次 , 直到花粉没有活力为止 。 每次做 3 次重
复 ,每个重复观察 3 个视野 , 计算其染色百分率困 。
(3 )花粉萌发法 。 花粉发芽试验 中 , 培养基成分 由
10 %蔗糖和 0 . 01 % 的硼酸配制 而成 , 在常温 ( 27 士
1) ℃ 下培养 。 每种地锦和五叶地锦花粉活力实验
每次做 3 次重复 , 每个重复观察 3 个视野 , 计算其染
色百分率和发芽率卜 `〕 。
1
.
3 贮藏性研究 将采集的地锦和五叶地锦花粉
分两部分 ,一部分置于纸袋内在实验室温度 ( 27 士 1 ) ` C
自然阴干 ; 另一部分装人纸袋 , 放人冰箱冷藏室内
(0 一 5 ℃ ) ,贮藏备用 。 将两种处理的花粉从贮藏第
2 天开始每隔 4 d , 用上述方法测定一次其花粉活
力 , 直到花粉活力降到 。 。 每次用解剖针取极少量
花粉 ,均匀地撒在载玻片培养基上 ,然后将载玻片放
人有湿润滤纸的培养皿内 ,并置于 28 OC 的电热恒温
培养箱中培养 。 3 ~ 4 h 后 , 由恒温培养箱 中取 出 ,
用显微镜观察计数 , 3 次重复 , 观察 3 个视野的花粉
总数以及发芽数 ,计算花粉发芽率和花粉活力百分
率 , 并进行统计分析 。 花粉活力下降率 ~ (始平均生
活率一末平均生活率 )/ 贮藏天数 。
2 结果与分析
2
.
1 地锦和五叶地锦新鲜花粉活力 地锦和五叶
地锦新鲜花粉生活力经测定 , 发现具有极强的生活
力 , 其染色率见表 1 。 在 27 OC 室温下存放 l d 经不
同测定方法染色率 的平 均值 , 新 鲜花粉生活力 达
98 %
,在 。一 5 ’ C 存放 Z d 其染色率的平均值可达
97 %
。 说明地锦和五叶地锦花粉生活力极高 , 也是
地锦和五叶地锦结实率较高的原因之一 。
表 1 地锦和五叶地锦新鲜花粉生活力
方 法
Z d 花粉染色率 / %
( 0一 5 ) ℃
l d 花粉染色率 /%
( 2 7士 l ) ℃
复尔考夫染色法
醋酸洋红染色法
花粉萌发法
9 7
9 8
9 8
9 9
2
.
2 室温 《27 士 l) ℃ 下地锦和五叶地锦花粉的生
活力变化 由表 2 可 以看出 ,在室温下 ,随着贮藏天
数的增加 , 由于花粉进行呼吸作用消耗体内贮藏物 ,
致使地锦和五叶地锦花粉生活力逐渐下降 , 三种花
粉活力测定法结果基本一致 。 地锦花粉平均可贮藏
8一 1 0 d , 在贮藏 s d 后 ,生活力急剧下降 。 到第 10
天生活力下降到 50 % 以下 ,在 10 ~ 16 d 又有一个比
较缓慢的下降 , 在室温下贮藏 15 d 地锦和五叶地锦
的花粉活力降到 24 % 。 到 18 d 以后又急剧下降直
到为 O 。 说明在室温下 , 地锦和五叶地锦花粉的生
活力可 以保持 16 一 18 d 。 花粉保存 10 d 后生活力
下降到 5 0% 以下 ,故其半衰期为 l0 d( 见表 2 ) 。
表 2 室温 《27 士 1 ) ` C 下地锦 、 五叶地锦花粉染色 、 发芽率
种类 方法 8 d I O d 1 2 d 1 4 d 1 6 d 1 8 d
q八é庄且月八 LO
比卜ó
地锦
复尔达考夫 / %
醋酸洋红 /%
花粉萌发 /%
平均值厂%
复尔达考夫 / %
醋酸洋红 /%
花粉萌发 /%
平均值 / %
9 8
9 9
9 7
9 8
五叶地锦
10 0
9 7
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打一475061
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从图 1 、表 3 可以看出 ,地锦和五叶地锦花粉生活 L T 随时间变化趋势基本相同 。 地锦和五叶地锦花粉
北 京 农 学 院 学 报 第 2 1卷
生活力下降过程分三个阶段 :第一阶段是 。一 s d, 花
粉生活力下降比较平缓 , 10 d 约下降 20 个百分点 。
第二个阶段是 8一 10 d , 花粉活力下 降最快 , Z d 下
降约 30 个百分点 。 第三个 阶段是 10 ~ 18 d , s d 内
花粉活力下降 50 个百分点 。 一般 自花授粉植物授
粉集中在开花后的几天之 内 , 之后柱头活性降低授
粉率也降低 。 而花粉高生活力也是集 中在开花后的
7 d 之内 , 符合花粉授粉的这种下降规律 ,但调查发
现 , 五叶地锦的开花时间比地锦的早 ,且花粉量 比地
锦的多 (见表 3 ) 。
表 3 室温 ( 27 士 l) ℃ 下地锦和五叶地锦各阶段
花粉生活 力的下降率
种类 0一 8 d 8一 1 0 d 10~ 1 8 d
叶地锦花粉生活力下降 ,但因贮藏温度的不 同 , 花粉
生活力下降的速度不 同 。 温度越高其生活力丧失得
越快 。 在 O~ 5 ’ C 的低温下 , 花粉呼吸作用减弱 , 出
现暂时休眠延长了其寿命 。 如室温 ( 27 士 1 ) 。 C下 ,
地锦和五叶地锦花粉 10 d 后生活力下降 50 %以下 ,
而在 O~ 5 ℃冷藏条件下 , 生活力可保存到 18 d 以
后才降到 5 0% 以下 ,花粉生活力下降速率也较 自然
条件下平缓 , 没 有急剧下 降 的情 况 。 一般 下降到
5 0%需要 16 ~ 18 d , 28 d 后花粉活力降到 。 。
120
1o
- 令 - - 地锦花粉生活力平均值
…… 五叶地锦花粉生活力平均值
5064套只琏州
0,`
地锦 /%
五叶地锦 /%
2
.
48
2
.
18
15
.
4 5
14
.
1 5
5
.
5 4
5
.
2 9
2
.
3 在 0 ~ 5 ℃ 下地锦和五叶地锦花粉生活力变化 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18
从表 4 可以看出 , 随着贮藏天数的增加 ,地锦和五 贮藏时间 ld图 1地锦和五叶地锦花粉生活力变化趋势
表 4 在 0~ 5 ℃ 下地锦 、 五叶地锦花粉染色 、 发芽率
种类 方法 2 d 4 d 6 d 8 d 1 0 d 1 2 d 1 4 d 1 6 d 18 d 20 d 2 2 d 2 4 d 2 6 d 2 8 d
地锦
复尔达考夫染色法
醋酸洋红染色法
培养基发芽法
平均值
复尔达考夫染色法
醋酸洋红染色法
培养基发芽法
平均值
9 7
9 8
9 5
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45
45
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7 7
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.
4 不同温度下贮藏地锦和五叶地锦花粉生活力
比较 贮藏时间是影响花粉活力的一大因素 ,但因贮
藏温度的不同 ,花粉生活力下降的速度也不同 。 对地
锦和五叶地锦花粉在室温 (2 7士 1) ℃与 。一 5 ℃温度
下第 10 天时 的生活力进 行比较 , 发现不同贮藏温
度 ,花粉生活力差异达极显著水平 (见表 5 ) ,说明贮
藏温度越高地锦和五叶地锦花粉生活力丧失得越
快 , 这是由于 7 月份的自然温度高花粉呼吸代谢快 ,
而低温下贮藏的花粉的呼吸作用受到抑制 , 活力下
降的慢 。
表 5 地锦和五叶地锦在不同温 度下贮藏 10 d 时
花粉生活 力比较
种类
地 锦
室温 (2 7土 l) ℃ 冷藏 。一 5 ℃ 差异显著性
五叶地锦
, , 表示差异极显著
4 7
5 l
7 7
8 8 : :
3 讨 论
徐进川等在干燥的条件下 , 一 20 ℃ 时贮藏马尾
松花粉 n 个月 ,花粉生活力降低 了 45 % 一 60 % , 下
降率仅为 。 . 12 % 一 0 . 18 % , 而常温下 , 其生活力降
低了 10 0% 。 这说明低温干燥是花粉保持活力的重
要因子 。 本实验结果表明 ,在干燥条件低温 。一 5 ℃下
贮藏地锦和五叶地锦花粉 ,其活力最长可保持 18 ~ 20
d
,花粉活力下降 比较缓慢 , 没有急剧下降期 。 而干
燥条件下 , 室温下贮藏的花粉最长可保持 8一 10 d ,
且第 8 ~ 10 天 花 粉 活力 下 降最 快 , 下 降率约 为
1 4
.
8%
,说明温度是影响地锦和五叶地锦花粉活力
的重要因素 。 陈品 良l0[ 〕等以 超冷低温 ( 一 19 6 ℃ )
贮藏杜仲和抨锤树的花粉时 , 降低花粉水分含量 ,认
为花粉低温储藏过程 中活力 能否保持 , 与花粉中水
分含量多少有关 。
2 0 0 6 年第 1期 王进忠 等 :地锦和五叶地锦花粉生活力及其贮藏性研究 3 1
通过对地锦和五叶地锦花粉活力三种不同方法
测定 , 可以看出染色法简便易行 ,以室温 ( 2 7 士 1 ) C
下地锦贮藏 10 d 的花粉为例 ,两种染色法没有显著
性差异 ,而醋酸洋红染色法与培养基发芽法 比较具
有极显著性差异 。 染色法对花粉生活力的判断标准
是花粉染色后颜色及花粉形状 。 培养基发芽法是用
培养基模仿柱头成分 、 相对湿度 、 温度来诱发花粉萌
发花粉管 ,从而确定花粉活力 ,这样测试结果 比较精
确 ,但培养基的成分 、 相对湿度 、 温度难以掌握 ,会造
成发芽率不准确 。 培养基发芽法精确但繁琐 , 不同
的花粉要求培养基的成分也不同 , C a Z二 、 硼会对花
粉萌发产生影响 ,花粉萌发常采用含 C a Z一 、 硼 的蔗
糖培养基 , 但对 菊花花粉 的萌发率近于 O , 毛洪玉
等巨, `〕用 改 良 M o n n i o r 培 养 基 M E 3 添加 适 量 的
P E G 4 0 0 O
, 可以促进地被菊花粉萌发 。 本实验仅用
蔗糖培养基 ,地锦和五叶地锦花粉的萌发率也较高 ,
在相同贮藏天数下地锦花粉萌发率较五叶地锦花粉
萌发率高 。
〔 4 ]
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