全 文 ：收稿日期:2011 － 10 － 12;修回日期:2011 － 12 － 15
基金项目:国家自然科学基金项目(30800092)
作者简介:金海龙(1978 －) ，男，贵州安顺人，硕士研究生。研究方向:新药研制与开发。
通讯作者:穆淑珍。E － mail:muzi0558@ 126. com
交让木中生物碱成分及其生物活性研究*
金海龙1，2，穆淑珍2* ，郝小江2
(1. 贵州大学 生命科学学院，贵州 贵阳 550002;
2. 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室，贵州 贵阳 550002)
摘 要:从虎皮楠属植物交让木(Daphniphyllum macropodum)乙醇提取物的氯仿萃取部分分离得到 5 个生物碱，采
用核磁共振(1H － NMR 、13 C － NMR、DEPT)和 ESI － MS波谱解析技术对其结构进行鉴定，最终分别确定为 Daph-
nilactone (1)、Paxdaphnine B (2)、Methyl homosecodaphniphyllate (3)、Paxdaphnine A (4)和 Daphnigraciline (5)。
并检测了上述生物碱的杀卤虫活性，发现化合物 2 具有微弱的活性。
关键词:虎皮楠科;虎皮楠属;交让木;生物碱;杀卤虫活性
中图分类号:R914. 4 文献标识码:A 文章编号:1008 － 0457(2012)01 － 0040 － 04
虎皮楠科(Daphniphyllaceae)虎皮楠属(Daph-
niphyllum)植物约有 30 个种，主要分布在东南亚，
有 10 个种生长在我国南部。其中，牛耳枫(Daph-
niphyllum calycinum)、交让木(D. macropodum)和
虎皮楠(D. oldhami)被作为药用植物，用来治疗哮
喘、咳嗽、风湿、炎症、发热和毒蛇咬伤。虎皮楠属
植物中的生物碱成分俗称“虎皮楠生物碱”，是虎
皮楠属植物所特有的一类化学成分，具有复杂的多
环结构［1 － 2］。有关该类成分的化学结构、仿生合
成、生物合成以及化学全合成是具有挑战性的研究
领域［3 － 4］。迄今为此，已报道的新结构虎皮楠生物
碱已有 110 余个，并有若干全合成、仿生合成的报
道［5］。本研究对采自湖北省利川市星斗山的交让
木(D. macropodum)果实进行化学成分研究，并采
用多种分离纯化方法，通过核磁共振和质谱等波谱
解析手段并结合文献，从中分离鉴定了 5 个虎皮楠
生物碱:Daphnilactone (1)、Paxdaphnine B (2)、
Methyl homosecodaphniphyllate (3)、Paxdaphnine A
(4)和 Daphnigraciline (5) ，并通过杀卤虫活性筛
选，初步发现化合物 2 具有微弱的杀卤虫活性。
1 材料与方法
1. 1 材料
1. 1. 1 供试材料 交让木果实于 2010 年 9 月底
采于湖北省利川市星斗山，经中国科学院昆明植物
研究所龚洵研究员鉴定为虎皮楠科虎皮楠属植物
交让木(D. macropodum)的干燥成熟果实。
1. 1. 2 仪器与试剂 核磁共振仪(1H，13C － NMR，
DEPT)均在 INOVA － 400 核磁共振仪上测定(TMS
为内标) ，质谱(ESI － MS)由安捷伦– 1100MSD 进
样，在 70eV下测定，检索用 NIST 数据库。柱层析
用硅胶和薄层层析用硅胶均为青岛海洋化工生产;
Sephedex LH– 20(50 ～ 100 μm)、反相材料 RP –
18(40 ～ 80 μm)和 RP– 18(20 ～ 45 μm)均为默克
公司产品(Merck，Darmstadt，Germabny) ;溶剂均
为工业纯重蒸后使用，显色剂为碘化铋钾溶液。
1. 2 提取与分离
交让木干燥果实(13 kg)粉碎后，用 95%的乙
醇回流提取 3 次，过滤残渣后，减压蒸馏回收乙醇，
将浓缩物稀释并用 3%的酒石酸将其 pH值调制为
2 ～ 3 后，用乙酸乙酯萃取 4 次，浓缩后保存。然
后，再将水层的 pH值用饱和碳酸钠溶调至 9 ～ 10，
再用氯仿萃取 5 次，浓缩后得总碱(72 g)。将总碱
用正相硅胶柱层析经氯仿(甲醇混合溶剂 50 ∶ 1 ～
1∶ 1)和甲醇进行梯度洗脱，通过 TLC 检测合并类
似的组分得到 5 段粗分段产物(Fr. 1 ～ Fr. 5)。本
文对各段进行分离纯化，通过经典的植物化学研究
方法，使用各种正相硅胶层析、反响硅胶层析、凝胶
Sephadex LH– 20 柱层析和制备薄层层析，再经反
复的重结晶得到化合物 1 ～ 5，而且 5 个化合物均
为虎皮楠生物碱，其结构见图 1。
山 地农业生物学报 31(1) :040 ～ 043，2012
Journal of Mountain Agriculture and Biology
图 1 化合物 1 ～ 5 的结构
Fig. 1 The Structures of compounds 1 ～ 5
2 结果与分析
2. 1 化合物 1
白色固体(甲醇) ，分子式 C22 H31 NO2，ESI －
MSm/z342. 2［M + H］+，1H － NMR (400 MHz，
CDCl3)δ(ppm) :3. 75(1H，d，J = 9. 0 Hz，H － 1) ，
2. 45(1H，m，H － 2) ，2. 80(2H，m，H － 3) ，1. 57
(1H，m，H － 4α) ，2. 66(1H，m，H － 4β) ，2. 21(1H，
m，H －6) ，3. 70(1H，m，H － 7α) ，3. 41(1H，m，H －
7β) ，3. 15(1H，brs. 3. 15) ，1. 74(1H，m，H － 11α) ，
2. 25(1H，m，H － 11β) ，1. 55(1H，m，H － 12α) ，
1. 68(1H，m，H － 12β) ，2. 70(2H，m，H － 13) ，2. 81
(1H，m，H － 14) ，6. 10(1H，s，H － 15) ，2. 25(1H，
m，H － 16α) ，2. 44(1H，m，H － 16β) ，1. 74(2H，m，
H －17) ，2. 32(1H，m，H － 18) ，2. 57(1H，m，H －
19α) ，4. 39(1H，m，H － 19β) ，1. 15(3H，d，J = 6. 8
Hz，Me － 20) ，5. 03(1H，d，J = 1. 30，6. 5 Hz，H －
21α) ，3. 80(1H，d，J = 10. 0 Hz，H － 21β). 13 C －
NMR(400 Hz，CDCl3)δ(ppm) :72. 5(d，C － 1) ，
37. 1(d，C － 2) ，20. 1(t，C － 3) ，33. 5(t，C － 4) ，
37. 3(s，C － 5) ，41. 0(d，C － 6) ，57. 7(t，C － 7) ，
41. 5(s，C － 8) ，147. 5(s，C － 9) ，49. 1(s，C － 10) ，
34. 5(t，C －11) ，31. 2(t，C － 12) ，29. 9(t，C － 13) ，
31. 6(t，C － 14) ，134. 5(d，C － 15) ，29. 8(t，C －
16) ，31. 9(t，C －17) ，35. 5(d，C － 18) ，65. 2(t，C －
19) ，13. 3(q，OMe － 20) ，72. 5(t，C － 21) ，174. 4
(s，C －22)。化合物 1 与文献［6］报道的波谱数据
一致，故可鉴定为 Daphnilactone。
2. 2 化合物 2
白色固体(甲醇) ，分子式 C22H31NO3，ESI － MS
m/z 346. 1［M + H］+，1H － NMR(400 MHz，CDCl3)
δ(ppm) :1. 68(2H，m，H －3) ，1. 69(2H，m，H －4) ，
1. 95(1H，m，H － 6) ，2. 89(2H，d，H － 7) ，2. 44
(2H，m，H － 11α) ，2. 17(2H，m，H － 11β) ，1. 52
(2H，m，H － 12α) ，2. 18(2H，m，H － 12β) ，2. 01
(2H，d，H － 13) ，2. 90(1H，m，H － 14) ，3. 40(1H，
m，H －15) ，1. 85(2H，d，H － 16α) ，1. 24(2H，m，H
－16β) ，2. 69(2H，m，H2 － 17α) ，2. 3(2H，m，H －
17β) ，1. 05(2H，m，H － 18) ，0. 87(3H，t，H － 20) ，
3. 84(2H，d，H － 21α) ，3. 86(2H，d，H2 － 21β) ，
3. 67(3H，s，OMe). 13 C － NMR(400 Hz，CDCl3)δ
(ppm) :69. 6(s，C － 2) ，35. 3(t，C － 3) ，35. 3(t，C
－4) ，51. 5(s，C － 5) ，43. 0(d，C － 6) ，44. 8(s，C －
7) ，58. 5(s，C － 8) ，144. 6(s，C － 9) ，136. 7(s，C －
10) ，26. 2(t，C －11) ，26. 9(t，C －12) ，43. 1(t，C －
13) ，44. 8(d，C － 14) ，58. 5(d，C － 15) ，29. 4(t，C
－16) ，43. 1(t，C － 17) ，29. 1(t，C － 18) ，9. 1(q，C
－20) ，68. 7(t，C － 21) ，177. 6(s，C － 22) ，51. 5(q，
OMe)。化合物 2 与文献［7］报道的波谱数据一致，
故可鉴定为 Paxdaphnine B。
2. 3 化合物 3
白色固体(甲醇)，分子式 C23 H37 NO2，ESI － MS
m/z 360. 2［M + H］+，1H － NMR(400 MHz，CDCl3)δ
14第 1 期 金海龙，等:交让木中生物碱成分及其生物活性研究
(ppm):3. 88(1H，brs，H － 1)，3. 67(3H，s，OMe)，0. 91
(6H，m，J = 3. 2 Hz，H － 19，20)，13C －NMR(400 Hz，
CDCl3)δ(ppm):53. 2(d，C － 1)，42. 8(d，C － 2)，20. 6
(t，C －3)，38. 9(t，C －4)，36. 2(s，C －5)，47. 4(d，C －
6)，59. 7(d，C －7)，36. 8(s，C －8)，48. 5(d，C －9)，50. 5
(s，C － 10)，39. 8(t，C － 11)，26. 7(t，C － 12)，27. 8(t，
C －13)，30. 1(t，C －14)，29. 5(t，C － 15)，27. 9(t，C －
16)，36. 2(t，C －17)，28. 7(d，C －18)，20. 9(q，C －19)，
21. 0(q，C －21)，174. 8(s，C －22)，51. 6(q，OMe)。化
合物 3与文献［8 －9］报道的波谱数据一致，故可鉴定
为Methyl homosecodaphniphyllate。
2. 4 化合物 4
白色固体(甲醇) ，分子式 C22H31NO3，ESI － MS
m/z 358. 2［M + H］+，1H － NMR(400 MHz，CDCl3)δ
(ppm) :3. 20(1H，d，H － 1) ，2. 40(2H，dt，H － 3α) ，
1. 24(2H，m，H －3β) ，1. 59(2H，m，H －4) ，1. 71(1H，
d，H －6) ，2. 56(2H，t，H － 7) ，2. 16(2H，t，H － 11) ，
1. 31(2H，m，H － 12α) ，2. 20(2H，m，H － 12β) ，1. 58
(2H，H － 13) ，3. 21(1H，m，H － 14) ，2. 60(1H，m，
H －15) ，1. 58(2H，m，H － 16α) ，1. 48(2H，m，H －
16β) ，1. 52(2H，m，H － 17α) ，1. 66(2H，m，H －
17β) ，1. 34(2H，m，H －18) ，3. 64(3H，s，OMe) ，0. 99
(3H，t，H －20) ，4. 02(2H，d，H － 21α) ，4. 14(2H，d，
H －21β). 13C － NMR(400 Hz，CDCl3)δ(ppm) :67. 1
(t，C －1) ，78. 0(s，C － 2) ，30. 5(t，C － 3) ，36. 6(t，C
－4) ，50. 0(s，C －5) ，42. 7(d，C －6) ，57. 2(t，C －7) ，
63. 7(s，C －8) ，65. 1(s，C －9) ，85. 7(s，C －10) ，30. 5
(t，C － 11) ，29. 7(t，C － 12) ，28. 8(t，C － 13) ，46. 7
(d，C － 14) ，54. 8(d，C － 15) ，28. 8(t，C － 16) ，42. 2
(t，C － 17) ，30. 0(d，C － 18) ，51. 4(q，OMe) ，9. 6(q，
C －20) ，69. 2(t，C － 21) ，174. 1(s，C － 22)。化合物
4与文献［10］报道的波谱数据一致，故可鉴定为
Paxdaphnine A。
2. 5 化合物 5
白色固体(甲醇) ，分子式 C24H37NO4，ESI － MS
m/z 390. 2［M + H］+，1H － NMR(400 MHz，CDCl3)δ
(ppm) :2. 75(2H，m，H －1α) ，2. 93(2H，m，H －1β) ，
2. 11(2H，m，H － 3α) ，1. 62(2H，m，H － 3β) ，2. 11
(2H，m，H －4α) ，1. 66(2H，m，H －4β) ，2. 56(1H，m，
H －6) ，3. 34(2H，s，H － 7) ，1. 83(2H，m，H － 11α) ，
2. 46(2H，m，H － 11β) ，2. 28(2H，m，H － 12α) ，2. 39
(2H，m，H －12β) ，1. 65(2H，m，H －13α) ，2. 63(2H，
m，H －13β) ，2. 59(1H，m，H － 14) ，3. 56(1H，s，H －
15) ，1. 32(2H，m，H － 16α) ，1. 98(2H，m，H － 16β) ，
2. 25(2H，m，H － 17α) ，2. 59(2H，m，H － 17β) ，1. 66
(2H，m，H －18) ，0. 79(3H，t，H － 19) ，0. 72(3H，t，H
－20) ，3. 87(1H，d，H －21α) ，3. 91(1H，d，H －21β) ，
3. 56(3H，s，OMe)． 13 C － NMR(400 Hz，CDCl3)
δ(ppm) :62. 5(t，C －1) ，98. 7(s，C － 2) ，27. 1(t，C －
3) ，27. 5(t，C － 4) ，36. 1(s，C － 5) ，32. 7(d，C － 6) ，
55. 9(t，C － 7) ，42. 3(s，C － 8) ，145. 8(s，C － 9) ，
132. 8(s，C － 10) ，27. 8(t，C － 11) ，27. 7(t，C － 12) ，
39. 5(t，C － 13) ，42. 3(d，C － 14) ，54. 1(d，C － 15) ，
36. 1(t，C － 16) ，42. 3(t，C － 17) ，22. 1(d，C － 18) ，
7. 7(q，C － 19) ，62. 5(t，C － 21) ，175. 1(s，C － 22) ，
50. 8(q，OMe) ，46. 5(q，OMe)。化合物 5 与文献
［11］报道的波谱数据一致，故可鉴定为 Daphnigraci-
line。
3 杀卤虫活性的初步筛选
对上述分离鉴定的 5 个虎皮楠生物碱(化合物
1 ～ 5)进行了杀卤虫活性的初步筛选，筛选模型为
卤虫杀虫活性模型;活性用校正死亡率表示:校正
死亡率 = (处理组死亡率 － 对照组死亡率)/
(1 －对照组死亡率)× 100%;筛选结果显示，所有
样品在 50 和 10 ppm浓度下对卤虫没有致死作用。
100 ppm浓度下可以观察到样品对卤虫的致死率，
初步发现化合物 2 具有微弱的杀卤虫活性，数据如
表 1。
表 1 化合物 1 ～ 5 在 100 ppm浓度下对卤虫的致死率
Tab． 1 Thedeath rate of compounds 1 ～ 5 at
the concentration of 100 ppm against
编 号 致死率(%)
化合物 1 3. 13
化合物 2 21. 33
化合物 3 4. 23
化合物 4 3. 58
化合物 5 9. 10
4 讨论
通过对虎皮楠属植物交让木果实中生物碱成
分的分离鉴定，确认了 5 个生物碱的结构，分别是
Daphnilacton (1)、Paxdaphnine B (2)、Methyl ho-
mosecodaphniphyllate (3)、Paxdaphnine A (4)和
Daphnigraciline (5)。上述研究结果与其他产地的
24 山地农业生物学报 2012 年
该种植物中生物碱结构类型比较，发现 Daphnilac-
tone B － type、Yuzurine － type、Secodaphniphylline －
type和 Paxdaphnine A － type 等骨架类型仍然为交
让木植物中虎皮楠生物碱的主要类型，该植物随着
地理环境的变迁，其所含的生物碱骨架变化较小。
参 考 文 献:
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Alkaloids from Daphniphyllum macropodum Miq． and their bioactivities
JIN Hai-long1，2，MU Shu-zhen2* ，HAO Xiao-jiang2(1． College of Life Sciences，Guizhou University，Guiyang
Guizhou 550025，China;2． Key laboratory of Chemistry for Natural Products of Guizhou Province and Chinese
Academy of Science，Guiyang Guizhou 550002，China)
Abstract:Five alkaloids were isolated from the chloroform part of ethanol extracts of Daphniphyllum macropo-
dum Miq． using classic phytochemistry techniques in the present work． They were identified as Daphnilactone
(1) ，Paxdaphnine B (2) ，Methyl homosecodaphniphyllate (3) ，Paxdaphnine A (4)and Daphnigraciline
(5)by spectroscopic analysis methods including 1H － NMR，13C － NMR，DEPT，and ESI － MS． The activi-
ties against Artemia Salina were evaluated，and compound 2 showed weak effect．
Key words:Daphniphyllaceae;Daphniphyllum;Daphniphyllum macropodum Miq．;alkaloids;The activities
against Artemia Salina
34第 1 期 金海龙，等:交让木中生物碱成分及其生物活性研究