全 文 ：冠盖藤不同提取部位对小鼠镇痛作用的研究
潘星星，郭建生* ，郭倩瑶，李 鑫，聂 晶
(湖南中医药大学·湖南省教育厅中药现代化研究重点实验室 ·
国家中药管理局药性与药效研究三级实验室，湖南 长沙 410208)
摘要:目的 观察冠盖藤不同提取部位的镇痛作用。方法 通过小鼠压痛法和醋酸扭体法筛选镇痛有效部位。结果 在压
痛实验中，冠盖藤乙酸乙酯提取物高剂量和低剂量组，冠盖藤石油醚提取物高剂量组和低剂量组，均能显著延长小鼠的
痛阈，显示出一定的镇痛作用，与对照组比较差异有显著性(P ＜ 0． 05 或 P ＜ 0． 01) ;在扭体反应中，冠盖藤乙酸乙酯提取
物高剂量和低剂量组，冠盖藤石油醚提取物高剂量组，冠盖藤水层高剂量组均能显著减少小鼠扭体反应次数，与对照组
比较差异有显著性(P ＜ 0． 05 或 P ＜ 0． 01)。结论 冠盖藤对实验小鼠有明显的镇痛作用;初步筛选了冠盖藤镇痛作用有
效部位的研究方法。
关键词:冠盖藤; 提取部分 ; 镇痛; 有效部位
DOI标识:doi:10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2012． 08． 031
中图分类号:R962;R29 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2012)08-1920-01
冠盖藤又名青棉花，苗医称之为“巴骨肉痛”(音译) ，是虎耳
草科冠盖藤。虎耳草科植物大都是草本植物，但唯独冠盖藤属的
植物例外，它不是草本，而是木质藤本，一般生长在海拔 1 560 m
以上的山坡林缘或溪边［1］。通过检索没有发现有关冠盖藤的药
理作用报道。因此本课题选择冠盖藤为研究对象，根据该药材的
临床功效，拟对其在镇痛药理作用方面进行初步的实验性研究，
以期为进一步筛选其镇痛作用的活性部位及其活性成分提供依
据，为冠盖藤的临床开发应用，质量控制提供科学依据。
1 材料与仪器
1． 1 动物 动物 SPF级昆明(KM)种小鼠，质量(20 ± 2)g，雌雄
各半，合格证号:HNCSLKJ20110359，许可证号:SCXK(湘)2009 －
0004。此动物由湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供。
1． 2 药物 冠盖藤水层提取物、冠盖藤石油醚提取物、冠盖藤乙
酸乙酯提取物、冠盖藤正丁醇提取物(由湖南中医药大学中药现
代化重点实验室自制) ;罗通定片(批号:110401，国药准字:
H51021228 四川康福来药业有限公司)。
1． 3 试剂 石油醚 (批号:20080816)、乙酸乙酯 (批号:
20080829)、正丁醇(批号:20070515) ，冰醋酸(批号:20070727)
均为湖南汇虹试剂有限公司，许可证编号:XK13 － 201 － 00450，
分析纯。
1． 4 仪器 电子称 MP51001(上海横平科学仪器有限公司) ;YLS
－电子压痛仪(山东省医学科学院设备站) ;秒表。
2 方法
2． 1 冠盖藤对小鼠压痛法致痛的镇痛作用 取质量(20 ± 2)g的
KM种小鼠 120 只，雌雄各半，按质量随机分成 10 组，①②③④⑤
⑥⑦⑧为造模组，其中①②为水层组，分别给予高剂量和低剂量
的冠盖藤水层提取物;③④乙酸乙酯组，分别给予高剂量和低剂
量的冠盖藤乙酸乙酯提取物;⑤⑥石油醚组，分别给予高剂量和
低剂量的冠盖藤石油醚提取物;⑦⑧正丁醇组，分别给予高剂量
和低剂量的冠盖藤正丁醇提取物;⑨罗通定组，给予罗通定阳性
对照药;⑩为空白组。测正常痛阈值 2 次后，灌胃给药，给药剂量
均根据 60kg体质量的体表面积换算，每只小鼠给药 0． 4 ml，给药
15，30，60 min后测痛阈值，以小鼠剧烈挣扎时间作为痛阈［2，3］。
2． 2 冠盖藤对小鼠醋酸致痛的镇痛作用 取质量(20 ± 2)g 的
KM种小鼠 120 只，雌雄各半，按质量随机分成 10 组(分组和给
药剂量同“2． 1”项)。灌胃给药 15min后，腹腔注射 0． 6%冰醋酸
0． 2 ml，记录注射冰醋酸 30 min内，每只小鼠的扭体次数［4，5］。
2． 3 统计学分析 计量资料采用 珋x ± s 表示，统计分析采用
SPSS16． 0 统计软件进行统计处理。所有统计检验均采用双侧检
验，符合正态性和方差齐性的资料，采用单因素方差分析;不符合
正态性和方差齐性的资料，采用秩和检验;P ＜ 0． 05 为有差异;P
＜ 0． 01 为有显著性差异。
3 结果
3． 1 冠盖藤对小鼠压痛法致痛的镇痛作用 造模前，各组动物质
量无明显差异。实验结果表明，冠盖藤乙酸乙酯提取物高剂量和
低剂量组，冠盖藤石油醚提取物高剂量组和低剂量组及阳性组小
鼠在给药 15 min及 45 min后与空白组比较能显著延长小鼠的痛
阈(P ＜ 0． 05 或 P ＜ 0． 01)。结果见表 1。
3． 2 冠盖藤对小鼠醋酸致痛的镇痛作用 实验结果表明，冠盖藤
乙酸乙酯提取物高剂量和低剂量组，冠盖藤石油醚提取物高剂量
组，冠盖藤水层高剂量组与空白组比较后，对醋酸引起的小鼠扭
体次数都具有明显的减少(P ＜ 0． 05) ，具有统计学意义。见表 2。
收稿日期:2012-01-05; 修订日期:2012-05-17
基金项目:湖南省中医药管理局中医药科研计划项目(No． 2010030)
作者简介:潘星星(1988-) ，女(汉族) ，湖南常德人，现为湖南中医药大学硕士研究生，硕士学位，主要从事中药新药研究与开发研究工作．
* 通讯作者简介:郭建生(1953-) ，男(汉族) ，山西太谷人，现任湖南中医药大学药学院教授，博士研究生导师，硕士学位，主要从事中药药性理论与中
药新药研究工作．
表 1 冠盖藤对小鼠压痛法致痛的镇痛作用(珋x ± s)
组别
剂量
C / g·kg －1
痛阈值 t / s
初始值 15min 30min 60min
空白 － 291． 0 ± 15． 6 290． 5 ± 11． 5 293． 3 ± 6． 4 291． 2 ± 15． 3
阳性 4． 72 × 10 －2 290． 7 ± 20． 4 315． 6 ± 13． 6▲ 327． 1 ± 18． 3▲▲ 339． 6 ± 16． 7▲▲
水提高剂量 9． 67 × 10 －2 292 ± 16． 5 301． 6 ± 32． 2 302． 6 ± 27． 9 272． 5 ± 37． 4
水提低剂量 2． 41 × 10 －2 305． 9 ± 15． 8 306． 8 ± 18． 8 310． 5 ± 12． 3 295． 4 ± 27． 0
·0291·
时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 8 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012 VOL． 23 NO． 8
续表 1
组别 剂量 C / g·kg －1
痛阈值 t / s
初始值 15 min 30 min 60 min
乙酸乙酯高剂量 2． 89 × 10 －2 283． 8 ± 19． 4 314． 2 ± 23． 8▲ 316． 55 ± 20． 1▲ 282． 96 ± 27． 2
乙酸乙酯低剂量 7． 23 × 10 －3 298． 6 ± 27． 9 314． 3 ± 16． 9▲ 325． 8 ± 14． 7▲ 291． 6 ± 20． 0
石油醚高剂量 9． 43 × 10 －3 293． 4 ± 27． 4 315． 7 ± 23． 5▲ 327． 3 ± 42． 6▲▲ 292． 0 ± 25． 9
石油醚低剂量 2． 35 × 10 －3 286． 4 ± 29． 5 312． 2 ± 29． 5▲ 315． 0 ± 20． 2▲ 302． 1 ± 33． 5
正丁醇高剂量 3． 19 × 10 －2 294． 9 ± 16． 5 306． 0 ± 33． 8 307． 1 ± 23． 3 304． 7 ± 21． 8
正丁醇低剂量 7． 98 × 10 －3 293． 9 ± 21． 8 310． 6 ± 35． 7 311． 2 ± 31． 9 292． 4 ± 23． 1
与空白组比较，▲P ＜ 0． 05，▲▲P ＜ 0． 01
表 2 冠盖藤对小鼠醋酸致痛的镇痛作用(珋x ± s)
组别 剂量 C /g·kg － 1 潜伏期 t / s 30 min内扭体次数
空白 175 ± 16． 76 43 ± 8． 82
阳性 4． 72 × 10 － 2 223 ± 17． 8▲▲ 24 ± 10． 34▲▲
水提高剂量 9． 67 × 10 － 2 206 ± 16． 78▲▲ 31 ± 11． 1▲
水提低剂量 2． 41 × 10 － 2 184 ± 20． 27 33 ± 17． 37
乙酸乙酯高剂量 2． 89 × 10 － 2 203 ± 21． 95▲ 31 ± 11． 4▲
乙酸乙酯低剂量 7． 23 × 10 － 3 190 ± 19． 48▲ 32 ± 17． 30▲
石油醚高剂量 9． 43 × 10 － 3 203 ± 20． 96▲ 26 ± 10． 80▲▲
石油醚低剂量 2． 35 × 10 － 3 188 ± 19． 43 36 ± 8． 58
正丁醇高剂量 3． 19 × 10 － 2 189 ± 18． 06 34 ± 11． 24
正丁醇低剂量 7． 98 × 10 － 3 181 ± 23． 17 33 ± 8． 60
与空白组比较，▲P ＜0． 05，▲▲P ＜0． 01
4 讨论
冠盖藤在《全国中草药汇编》下册和《中药大辞典》上册均有
收载，其具有补肾接骨，活血化瘀，解毒消肿止痛;有祛风除湿，散
瘀止痛，接骨之功效，主治腰腿酸痛，风湿麻木，外用跌打损伤，骨
折和外伤出血;《中药大辞典》收载其叶可治多年溃烂疮毒，根可
治腰腿酸痛;临床上主治接骨和关节损伤，苗医主治各种癌症。
为了确认临床疗效，促进该药物的开发研究，我们设计本实
验，研究采用小鼠压痛法和小鼠扭体法观察了冠盖藤不同提取物
的镇痛实验，结果显示冠盖藤的乙酸乙酯提取物和石油醚提取物
对小鼠有镇痛作用，综上所述，冠盖藤有显著的镇痛作用，其镇痛
作用的活性成分在于冠盖藤的乙酸乙酯和石油醚的提取物部分，
这为进一步提取分离冠盖藤的镇痛活性部位或成分提供了实验
依据，其镇痛作用活性成分正在进一步研究中。
参考文献:
［1］ 黎 明．冠盖藤化学成分预实验［J］．中医药导报，2011，17(7) :90．
［2］ 赵应红，林艳芳，赵 远．傣药樯藤子仁及樯藤子总皂苷的镇痛作
用研究［J］．中国民族医药杂志，2011，17(2) :53．
［3］ 翟华强，王双艳，张硕峰，等．黄连、丁香外用药理作用研究［J］． 中
国实验方剂学杂志，2011，17(11) :192．
［4］ 武刚毅，刘 峙，李小纪，等．清脑镇痛液镇痛作用的实验研究［J］．
中国医药导报，2011，8(20) :33．
［5］ 袁普卫，殷继超，朱 超，等． 骨复生对小鼠镇痛作用的实验研究
［J］．时珍国医国药，2011，22(1) :158．
收稿日期:2012-01-13; 修订日期:2012-05-05
基金项目:黑龙江省教育厅科学技术研究项目(No． 12511514)
作者简介:关 枫(1971-) ，女(汉族) ，黑龙江哈尔滨人，现任黑龙江中医
药大学药学院教授，硕士研究生导师，博士学位，主要从事中药及民族药
活性成分及新药研究工作．
复方山荷降压颗粒中芦丁和绿原酸的同时定量研究
关 枫1，付起凤2，葛正华1，王艳宏1，崔明宇1，张衍秀3
(1．黑龙江中医药大学药学院，黑龙江 哈尔滨 150040;
2．黑龙江中医药大学实验中心，黑龙江 哈尔滨 150040;
3．黑龙江中医药大学 2009 级硕士研究生，黑龙江 哈尔滨 150040)
摘要:目的 建立反相高效液相色谱法同时测定复方山荷降压颗粒剂中芦丁和绿原酸含量的方法。方法 采用 Diamonsil
C18(4． 6 mm × 250 mm，5 μm)色谱柱，以乙腈 － 0． 4%磷酸水溶液为流动相梯度洗脱，流速 1． 0 ml·min
－1，柱温 35℃，检
测波长 327 nm。结果 芦丁和绿原酸浓度分别在 50 ～ 250 μg·ml －1(r = 0． 999 8)和 20 ～ 100μg·ml －1(r = 0． 999 9)范围
内与峰面积线性关系良好;芦丁和绿原酸平均回收率(n = 5)分别为 99． 81%(RSD = 0． 38%)和 100． 51% (RSD =
0． 76%)。3 批制剂测定结果显示，芦丁含量为 1． 926mg·g －1(RSD = 0． 45%) ，绿原酸含量为 3． 177 mg·g －1(RSD =
0． 43%)。结论 该法操作简便，结果准确，可用于该制剂质量控制。
关键词:复方山荷降压颗粒; 芦丁; 绿原酸; 高效液相色谱法
DOI标识:doi:10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2012． 08． 032
中图分类号:R284． 2 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2012)08-1921-02
复方山荷降压颗粒(无糖型)处方来源于临床经验方，全方
由山楂、菊花、枸杞、桑叶等药味组成，具有清利头目、活血降脂、
平肝降压的功效，主要用于高血压病初期的治疗，虽配伍简约，但
临床疗效确切、稳定。该制剂中主要活性成分为黄酮类化合物，
故选取其中所含高血压辅助治疗成分芦丁及另一主要有效成分
绿原酸为指标成分，建立了同时测定这两种成分含量的 RP －
HPLC检测方法，并进行了方法学验证，研究成果可以有效地控
制该制剂质量。
1 仪器与试药
高效液相色谱仪(日本岛津 Shimadzu LC － 2010 型，CLASS －
VP数据处理系统) ;电子天平(梅特勒 －托利多仪器上海有限公
司 AL204 型) ;超声波清洗机(天津自动化科学仪器有限公司
AS3120A型)。
复方山荷降压颗粒(无糖型，三批，自制) ，芦丁对照品(批号
100080 － 200803)、绿原酸对照品(批号 110753 － 200509)均购自
中国药品生物制品检定所，乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯。
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012 VOL． 23 NO． 8 时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 8 期