全 文 ：江西农业学报　2008, 20(8):63ActaAgriculturaeJiangxi
海漆不同提取方法提取物对 3种植物病菌的抑制作用
袁宏球1 ,刘业平 2 ,孙丹 2
　 　收稿日期:2008-04-14
作者简介:袁宏球(1963-),男 ,副研究员 ,从事农药残留分析和海洋生物农药研究。
(1.中国热带农业科学院 分析测试中心 ,海南海口 571101;2.海南大学 环植学院 ,海南 儋州 573717)
摘　要:以红树植物海漆不同提取方法的提取物对香蕉炭疽病 、芒果炭疽病 、香蕉枯萎病进行了室内抑菌活性试验。结
果表明:4种提取方法的提取物对供试的病原菌有不同的抑制作用, 其中溶剂浸渍法最好 ,索氏提取法和超临界 CO
2
萃取法效
果较差。
关键词:海漆;提取方法;抑菌活性
中图分类号:Q949.753.5　文献标识码:A　文章编号:1001-8581(2008)08-0063-01
AntifungalActivitiesofExtractsfromExcoecariaagallochaagainst3
PathogenswithDifferentExtractionMethods
YUANHong-qiu1 , LIUYe-ping2 , SUNDan2
(1.AnalyticalandTestingCenter, ChineseAcademyofTropicalAgriculturalScience, Haikou571101, China;
2.ColegeofEnvironmentandPlantProtection, HainanUniversity, Danzhou571737, China)
Abstract:TheantifungalactivitiesoftheextractsfromExcoecariaagalochaagainstColetotrichummusae, Coletotrichumgloeos-
porioidesPenzandFusariumoxysporumf.sp.Cubencewithdifferentextractionmethodsweretested.Theresultsshowedthatalex-
tractswithfourextractionmethodshaddiferentefectsonthepathogens;theantifungalactivitiesoftheextractsmadebysolventdip-
pingwerethebest, themethodsofsoxhletextractionandsupercriticalcarbondioxideextractionwerenotverygood.
Keywords:Excoecariaagalocha;Extractionmethods;Antifungalactivity
　　红树植物海漆 (Excoecariaagalocha)属于大戟科
(Euphorbiaceae),又名土沉香 、水贱仔 ,生长在受周期性
潮水浸淹的潮滩湿地的木本植物类群 ,是一种有毒植物 ,
分泌乳状汁液 ,有刺激性 ,可使皮肤肿胀 ,误入眼睛可使
人失明 [ 1 , 2] ,广泛分布于我国海南 、广东、台湾 、广西、香
港以及菲律宾 、澳大利亚等地区[ 3] ,不仅具有重要的生态
保护价值 ,而且有重要的经济价值和药用价值 ,一直被沿
岸地区的居民作为抗菌、消炎、治疗腹泻、溃疡以及杀鱼
和杀虫的药[ 4～ 6] 。本文以海漆的不同提取方法的提取
物 ,对 3种植物病原菌进行抑菌活性测定比较 ,为抗菌植
物新资源的寻找和发现提供理论依据 ,促进热带植物资
源的合理开发和利用。
1　材料与方法
1.1　材料、菌种和仪器　海漆于 2005年 11月采自海南
东寨港 。香蕉炭疽菌(Coletotrichummusae)、芒果炭疽菌
(ColetotrichumgloeosporioidesPenz)、香蕉枯萎菌(Fusari-
umoxysporumf.sp.Cubence)由海南大学环植学院病理
实验室从各自寄主上分离并用马铃薯培养基 (马铃薯
200 g/L、葡萄糖 19 g/L、琼脂 19 g/L)培养 , 4 ℃保存备
用 。超临界流体萃取系统 SFE-T(美国超临界萃取
公司生产);旋转蒸发器(上海申生科技有限公司生产);
超声波清洗器 JL120(上海杰理科技有限公司生产)。
1.2　试验方法
1.2.1　海漆活性物质的提取　采集后的红树植物将茎
叶分开 ,取其茎在空气中风干 ,粉碎过 40目筛 , 40 ℃干
燥备用。分别采用乙醇溶剂浸渍法 、索氏提取法 、超声波
萃取法以及超临界 CO2萃取法提取 ,各方法提取条件见
表 1,各方法提取的滤液在 45 ℃减压浓缩得粗浸膏物 ,
以丙酮为溶剂 ,配成 0.1 g/mL的活性物质提取物 。
表 1　海漆的 4种提取方法
提取方法 海漆用量
(g)
溶剂 提取条件
　
溶剂浸渍法 20 乙醇 常温浸泡 3次,每次 48h
索氏提取法 20 乙醇 90℃水浴锅提取 48h
超声波萃取法 20 乙醇 超声波功率 40kHz,
30℃提取 45min
超临界CO2萃取法 20 超临界CO2 10mL甲醇夹带剂 ,
40℃, 35MPa
1.2.2　红树植物粗提物对菌丝生长的影响　采用生长
速率法。在无菌条件下将 0.1 g/mL浓度的供试药剂与培
养基按照 1∶40的比例加入 50℃左右的培养基中 ,制成浓
度为 2.5mg/mL的带毒培养基 。供试菌种在 PDA培养基
上培养。接种时 ,用直径 5mm的打孔器从菌丝边缘打取
菌饼 ,用接种针把带菌丝的一面接种到培养基中央 ,以丙
酮为对照 ,重复 3次 , 28 ℃下黑暗培养 5 d,用十字交叉
法测量菌落直径 ,扣除菌饼的直径 ,计算抑制率(%)。
　菌落直径 =测量菌落直径平均值 -5
　抑菌率 =(对照菌落直径 -5)-(处理菌落直径 -5)对照菌落直径 -5 ×100
(下转第 66页)
监测与治理的基础 。
性诱剂在田间的诱捕效率受气象条件 、诱捕器类型
及排列方式、防治药剂等多种因素的影响 ,完善性诱剂应
用配套技术将有助于提高其诱捕效率 ,达到有效控制害
虫危害的目的 [ 14～ 17] 。通过本研究明确了斜纹夜蛾 、甜菜
夜蛾性诱剂在棉花田中最适悬挂高度为 100 cm左右 ,这
与笔者在甘蓝 、茄子等不同类型田进行同类试验时取得
的结果相吻合(另文报道)。
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(上接第 63页)
2　结果与分析
海漆 4种不同提取方法的提取物对 3种病原菌的抑
菌活性见表 2,从中可以看出不同提取方法的提取物对 3
种供试菌种的抑制作用不同 。其中溶剂浸渍法效果最
好 ,其次是超声波萃取法 ,而索氏提取法和超临界 CO2
萃取法效果较差;溶剂浸渍法对香蕉炭疽病、芒果炭疽
病以及香蕉枯萎病 3种供试病菌的抑制率都达到了
50%以上 ,对香蕉炭疽病的抑制率达到 66.50%;超声波
萃取法对 2种病菌的抑制率达到 50%以上 ,其他 2种提
取方法对病菌抑制率都不高;在病菌之间 ,各种提取方
法的提取物对香蕉炭疽病和香蕉枯萎病的抑制率均高
于对芒果炭疽病的抑制作用 ,如索氏提取法提取物对香
蕉炭疽病、香蕉枯萎病以及芒果炭疽病 3种供试病菌的
抑制率分别为 29.06%、25.29%和 6.59%。
表 2　4种不同提取方法对 3种病原菌
　　　　　　　　　菌丝生长的抑制率 %
提取方法 香蕉炭疽菌 芒果炭疽菌 香蕉枯萎菌
溶剂浸渍法 66.50 53.53 58.12
索氏提取法 29.06 6.59 25.29
超声波萃取法 61.08 38.32 58.24
超临界 CO
2
萃取法 18.18 2.73 12.84
3　小结与讨论
海漆 4种不同提取方法对 3种病原菌提取物均有一
定程度的抑制作用。其中溶剂浸渍法效果最好 ,其次是
超声波萃取法 ,而索氏提取法和超临界 CO2萃取法效果
较差;这可能与索氏提取法和超临界 CO2萃取法提取原
理和条件有关 ,索氏提取法温度较高 ,可能影响提取物
活性 ,而超临界 CO2萃取法对提取非极性物质的效果较
好 ,所以海漆的抑菌活性成分可能偏于中极性或极性。
在病菌之间 ,海漆提取物对香蕉炭疽病和香蕉枯萎病的
抑制率均高于对芒果炭疽病的抑制作用 ,建议以后海漆
抑菌活性物质的分离 、纯化中采用溶剂浸渍法或超声波
萃取法 ,供试菌种可为香蕉炭疽病和香蕉枯萎病。
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66 江　西　农　业　学　报　　　　　　　　　　　　 　　　　　　20卷