全 文 ：第 21 期
第 50 卷第 21期
2011年 11月
湖北农业科学
Hubei Agricultural Sciences
Vol． 50 No.21
Nov．，2011
收稿日期：2011－02－21
作者简介：吴龙火（1980－），男，福建漳州人，讲师，博士，主要从事天然产物活性成分研究，（电话）0797－8169775（电子信箱）longhw＠126．com。
九里香［Murraya exotica（L．）］又称千里香、满山
香、过山香、千只眼等，为芸香科九里香属植物，以
根和叶入药，性辛、苦、微寒。 具有行气止痛、活血化
瘀、祛风除湿、麻醉镇惊等功效。 早期曾有报道，九
里香在临床上可用于局部麻醉、抗生育作用［1］、治疗
流行性乙型脑炎、破伤风、急、慢性肾炎等。 现代药
理学研究表明， 九里香具有抗生育和终止妊娠、抗
菌、抗甲状腺肿大、降血糖、麻醉镇静及增强免疫功
能等作用，但未见有对九里香的抗炎镇痛等生物学
活性的研究报道。 本试验采用小鼠扭体试验、热板
法、二甲苯致耳朵肿胀法和角叉菜胶致足肿胀法研
究了九里香叶的镇痛抗炎作用，为中药九里香的二
次开发提供了有益的科学依据。
1 材料
1．1 药材
九里香采自福建省漳州市，经华侨大学分子药
物学研究所张景红教授鉴定为九里香， 自然阴干，
机械粉碎过 40 目筛。 石油醚、乙醚、乙酸乙酯、氯
仿、乙醇及二甲苯等均为分析纯。
1．2 试验动物
昆明小鼠，雌雄兼用，体重为（20±2）g。 均由福
建医科大学实验动物中心提供，合格证号：SCX（闽）
2004－002。
1．3 主要仪器
WK－200B 高速药物粉碎机，HH－4 电热恒温水
浴锅，FA2004精密电子天平。
2 试验方法
2．1 提取溶剂的确定
取干燥九里香叶粉末 50 g，用石油醚、乙醚、乙
酸乙酯、 氯仿、70％乙醇及沸水各 500 mL 分别进行
回流提取 3次，每次 2 h。 合并提取液并蒸去溶剂得
到粗浸膏。 以小鼠扭体镇痛试验为筛选依据（具体
九里香叶的抗炎镇痛作用研究
吴龙火 1，2，刘昭文 1，许瑞安 2
（1．赣南医学院药学院，江西 赣州 341000；2．华侨大学分子药物学研究所，福建 泉州 362021）
摘要：采用小鼠扭体试验、热板法、二甲苯致耳朵肿胀法和角叉菜胶致足肿胀法研究了九里香［Murraya
exotica（L．）］叶的镇痛抗炎作用。 结果表明，九里香叶醇提物可有效抑制醋酸致小鼠的扭体反应，延长小
鼠的痛阈值，显著抑制二甲苯及角叉菜胶诱导的肿胀。 表明中药九里香叶醇提物具有显著的抗炎、镇痛
药理学作用，为中药九里香的二次开发提供了有益的科学依据。
关键词：九里香［Murraya exotica（L．）］；抗炎；镇痛
中图分类号：S853．74 文献标识码：A 文章编号：0439－8114（2011）21－4435-03
Study on the Anti－inflammatory and Analgesic Activities of Murraya exotica L．
WU Long－huo1，2，LIU Zhao－wen1，XU Rui－an2
（1．Pharmacy College in Gannan Medical University， Ganzhou 341000，Jiangxi，China；
2．Institute of Molecular Medicine in Huaqiao University， Quanzhou 362021，Fujian，China）
Abstract： The study of anti－inflammatory and analgesic activities of Murraya exotica（L．） was performed with the mouse body－
torsion test， hot－plate test， xylene－induced ear edema test， and carrageenan－induced paw swelling test． The results showed
that the ethanol extract of the M． exotica leaves could effectively inhibit the writhing reaction induced by acetic acid， prolong
the threshold time of pain， and significantly inhibit the edema induced by xylene and carrageenan． It indicated that the
ethanol extract of the M． exotica leaves possesed the anti－inflammatory and analgesic activities． The study provided useful in-
formation for the “second” exploitation of M． exotica．
Key words： Murraya exotica（L．）；anti－inflammatory； analgesic
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2011.21.017
湖 北 农 业 科 学 2011 年
操作如下）。
2．2 小鼠扭体镇痛试验
按照 Nakamura 等 ［2］的方法。 取健康、体重为
（20±2）g 的小鼠，随机分为 5 组（分别为试验组 3 个
组，药物对照和空白对照各 1 组，下同），每组 6 只，
试验组分别灌胃给予提取物 50、100 及 200 mg ／ kg。
药物对照组灌胃吲哚美辛 10 mg ／ kg，空白对照组给
予等体积的 0．8％的 CMC－Na（羧甲基纤维素钠）。连
续给药7 d，末次给药后 1 h，于腹腔注射 0．6％醋酸
0．2 mL ／只，同时用秒表计时，记录在注射醋酸溶液
后 15 min 内小鼠的扭体次数 （包括腹部收缩内凹、
伸展后肢、臀部抬高、蠕行等阳性行为）。 计算药物
的疼痛抑制率。
疼痛抑制率＝
空白对照组扭体次数-给药组扭体次数
空白对照组扭体次数
×100%
2．3 小鼠热板法镇痛试验
按照 Eddy等［3］的方法。取健康、体重为（20±2）g
的雌性小鼠，放入（55±0．5）℃热板水浴中，以舔后足
作为疼痛反应指标，预测小鼠的疼痛阈值。以 5 s＜阈
值＜30 s视为合格小鼠。 将疼痛阈值合格的 30 只小
鼠随机分为 5 组，每组 6 只，试验组分别灌胃给予
提取物 50、100及 200 mg ／ kg。 药物对照组灌胃右旋
酮洛芬10 mg ／ kg， 空白对照组给予等体积的 0．8％
的 CMC－Na。 连续给药 7 d， 末次给药后 30、60 及
90 min分别测定疼痛阈值。
2．4 小鼠二甲苯致耳朵肿胀试验
按照 Chen等［4］的方法。 取健康、体重为（20±2）
g 的小鼠，随机分 5 组，每组 6 只，试验组分别灌胃
给予提取物 50、100及 200 mg ／ kg。 药物对照组灌胃
地塞米松 0．5 mg ／ kg， 空白对照组给予等体积的
0．8％的 CMC－Na。 连续给药 7 d，末次给药后 1 h，于
小鼠右耳正反面均匀涂抹二甲苯 30 μL ／只，左耳为
参照。 1 h 后脱颈处死，用 8 mm 的打孔器在左右耳
相同部位打下耳孔片，用万分之一天平称重，计算
肿胀度及肿胀度抑制率。
肿胀度＝右耳耳孔片重－左耳耳孔片重
肿胀抑制率＝
空白对照组肿胀度-给药组肿胀度
空白对照组肿胀度
×100%
2．5 小鼠角叉菜胶致足肿胀试验
按照 Winter 等 ［5］的方法。 取健康、体重为（20±
2）g 小鼠，随机分 5 组，每组 6 只，试验组分别灌胃
给予提取物 50、100及 200 mg ／ kg。 药物对照组灌胃
地塞米松 0．5 mg ／ kg， 空白对照组给予等体积的
0．8％的 CMC－Na。 连续给药 7 d，末次给药后 1 h，于
每只小鼠右后足跖部皮下注射 1％的角叉菜胶 20
μL，左足为参照。并于注射后的 1、2、3、4 h分别用毛
细管放大装置测量小鼠的足体积。 计算小鼠的足肿
胀度及肿胀度抑制率。
肿胀度＝右足体积－左足体积
肿胀抑制率＝
空白对照组肿胀度-给药组肿胀度
空白对照组肿胀度
×100%
3 结果与分析
3．1 提取溶剂的确定
提取物不同溶剂的镇痛效果见图 1。 由图 1 可
见，中药九里香用不同溶剂提取所得的浸膏均显示
有一定的镇痛作用。空白对照组在腹腔注射 0．6％醋
酸溶液（0．2 mL ／只）后 15 min 内小鼠的扭体次数为
（58.0±2．3）次。 在所有的不同溶剂提取物中，70％的
乙醇提取物的镇痛效果最好， 小鼠的扭体次数为
（22.0±4．2）次，疼痛抑制率为 62．1％，与对照相比呈
显著性差异（P＜0．05）。 其余溶剂提取物的镇痛效果
为氯仿＞乙酸乙酯＞沸水＞乙醚＞石油醚，其扭体次数
分别为 （27．3±2．4）、（29．0±3．1）、（30．5±3．2）、（32．5±
4．8）、（33．3±3．5）次，与对照相比均呈显著性差异。
3．2 小鼠扭体镇痛试验结果
小鼠扭体镇痛试验结果见图 2。 由图 2 可见，
70％乙醇提取物的镇痛效果比吲哚美辛组要弱，且
呈剂量依赖性。 在剂量为 200、100 及 50 mg ／ kg 时，
小鼠的扭体次数分别为 （11．8±1．9）、（15．4±1．2）、
（25．6±2．7）次，与空白对照组相比均呈显著性差异
（P＜0．05）。 而吲哚美辛可使小鼠的扭体次数减少至
（8．3±0．7） 次， 与空白对照组相比呈极显著性差异
（P＜0．01）。
3．3 小鼠热板法镇痛试验结果
小鼠热板法镇痛试验结果与“3．2”类似（图 3）。
70％乙醇提取物对小鼠热板潜伏期的影响呈剂量依
赖性关系，弱于右旋酮洛芬，与空白对照组相比均
呈显著性差异（P＜0．05），镇痛高峰期均出现在药后
70
60
50
40
30
20
10
0
扭
体
次
数
//次
图 1 不同溶剂提取物对小鼠醋酸致痛的影响
（n＝6，* 为P＜0．05，** 为 P＜0．01，下同）
空白对照组
石油醚组
乙醚组
乙酸乙酯组
氯仿组
70%乙醇组
沸水
* * ** * *
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第 21 期
空白对照组
50 mg/kg 剂量组
100 mg/kg 剂量组
200 mg/kg 剂量组
吲哚美辛组
图 2 70％乙醇提取物对醋酸致痛的小鼠扭体的影响
70
60
50
40
30
20
10
0
扭
体
次
数
//次
***
*
*
60 min 左右。 在剂量为 200、100 及 50 mg ／ kg 时，小
鼠的耐热潜伏期分别为 （26.0±3．8）s、（32．4±3．5）s、
（30.0±4．2）s，（21．4±3．9）s、（29．4±4．2）s、（26．8±2．6）s
及（16．6±2．2）s、（24．2±4．1）s、（23．0±4．7）s。 而右旋酮
洛芬在药后 60 min时，其耐热潜伏期为（39．6±2．2）s。
3．4 小鼠二甲苯致耳朵肿胀试验结果
小鼠二甲苯致耳朵肿胀试验结果见图 4。 由图
4 可见，70％乙醇提取物对二甲苯所致的小鼠耳朵
肿胀具有一定的消肿作用，且呈剂量依赖性，但其
作用效果远弱于地塞米松（0．5 mg ／ kg）。 地塞米松对
二甲苯所致的小鼠耳朵肿胀抑制率达（58．8±6．2）％，
与空白对照组相比呈极显著性差异 （P＜0．01）。 而
70％乙醇提取物在剂量为 200 mg ／ kg 时， 其抑制率
只有（41．4±4．3）％，但不同剂量组与空白对照组相比
均呈显著性差异（P＜0．05）。
3．5 小鼠角叉菜胶致足肿胀试验结果
小鼠角叉菜胶致足肿胀试验结果与“3．4”类似
（图 5）。 70％乙醇提取物对角叉菜胶所致小鼠足肿
胀的影响是呈剂量依赖性关系且与空白对照组相
比呈显著性差异（P＜0．05），但其效果远弱于地塞米
松，作用高峰期均出现在 3 h左右。在 3 h时，70％乙
醇提取物剂量为 200、100 及 50 mg ／ kg 时，对足肿胀
抑制率分别为 （39．5±4．1）％、（31．6±8．8）％、（17．2±
4．3）％。 而地塞米松（0．5 mg ／ kg）在 1～4 h 内均保持
较强的抑制肿胀能力， 其在 3 h 时的足肿胀抑制率
为（56．5±5．8）％，与空白对照组相比呈极显著性差异
（P＜0．01）。
4 讨论
九里香作为一种传统中药材，具有广泛的药理
学作用。 本试验研究镇痛的动物模型采用了醋酸致
痛小鼠扭体试验及热板试验。 扭体试验是常用来筛
选非甾体类抗炎药镇痛作用的一种敏感而简便的
方法，与外周神经镇痛有很大的关系。 热板试验是
常用于筛选中枢镇痛药的一种动物模型，中枢镇痛
药可相对延长对热板刺激的反应时间，而外周镇痛
药则不能。 热板试验的疼痛反应机理目前还不是很
清楚。 但 Abbott 等［6］认为可能与 μ 阿片受体有关。
九里香在这两个模型中均表现出一定的镇痛作用，
说明其具有一定的外周镇痛及中枢镇痛作用，可能
与抑制一些内源性炎症介质有关，而是否与 μ 阿片
受体有关还有待进一步研究。
炎症初期以毛细血管通透性增高、渗出、水肿
为主。 足肿胀法及耳肿胀法均为在此基础上的动物
模型。 角叉菜胶诱导的急性炎症与内源性化学因子
有很大的关系。 其机理为：角叉菜胶注入局部后被
肥大细胞吞噬而使得肥大细胞脱颗粒， 释放 PG、组
胺、5－羟色胺等炎症介质；被中性粒细胞吞噬，造成
粒细胞受损，释放磷脂酶 A2，触发花生四烯酸代谢
途径，生成 PGs、白三烯等，最终导致局部充血、肿
胀、疼痛等炎症症状。 二甲苯所诱导释放的炎症介
质与角叉菜胶的基本相似，包括 5－羟色胺、组胺、缓
激肽及 PGs等。本试验研究发现，70％乙醇提取物可
图 4 70％乙醇提取物对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响
50 mg/kg 剂量组
100 mg/kg 剂量组
200 mg/kg 剂量组
地塞米松组
空白对照组
70
60
50
40
30
20
10
0
耳
肿
胀
抑
制
率
//%
*
*
*
**
图 3 70％乙醇提取物对小鼠热板潜伏期的影响
50
45
40
35
30
25
20
15
10
5
0
潜
伏
期
//s
0 20 40 60 80 100
时间//min
*
* *
*
*
*
*
*
***
空白对照组
50 mg/kg 剂量组
100 mg/kg 剂量组
200 mg/kg 剂量组
右旋酮洛芬组
图 5 70％乙醇提取物对角叉菜胶致小鼠足肿胀的影响
70
60
50
40
30
20
10
0
足
肿
胀
抑
制
率
//%
1 2 3 4
时间//h
**
**
****
*
*
*
*
*
*
*
*
*
*
**
空白对照组
50 mg/kg 剂量组
100 mg/kg 剂量组
200 mg/kg 剂量组
地塞米松组
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（责任编辑 曾德芳）
有效地抑制角叉菜胶所致足肿胀及二甲苯所致耳
肿胀，说明九里香对炎症早期的渗出、水肿具有一
定的抑制作用。
因此，中药九里香叶乙醇提物具有显著的抗炎
镇痛的生物学活性。 本试验为中药九里香的二次开
发提供了有益的科学依据。
参考文献：
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及其机理 ［J］． 中国药科大学学报，1989，20（5）：283－286．
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［6］ ABBOTT F V， FRANKLIN K B． Noncompetitive antagonism of
morphine analgesia by diazepam in the formalin test ［J］．
Pharmacol Biochem Behav，1986，24（2）：319－321．
第 50 卷第 21期
2011年 11月
湖北农业科学
Hubei Agricultural Sciences
Vol． 50 No.21
Nov．，2011
收稿日期：2011－08－08
基金项目：国家转基因重大专项（2008ZX08006-002，2008ZX08 006-003）；转基因生物新品种培育重大专项（2009ZX08009-148B）；湖北省国际
科技合作项目（2009BFA012）；动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室开放课题（2011ZD120～129）
作者简介：肖红卫（1979－），男，江苏大丰人，助理研究员，主要从事转基因动物研究；通讯作者，郑新民，研究员，主要从事动物生物技术研究，
（电话）027－87380647（电子信箱）anbit20＠163．com。
采用真空泵法快速获取猪卵母细胞
肖红卫，郑新民，刘西梅，乔宪凤，李 莉，张立苹，华文君，毕延震，华再东，周荆荣
（湖北省农业科学院畜牧兽医研究所 ／动物胚胎工程与分子育种湖北省重点实验室，武汉 430064）
摘要：试验比较了真空泵法与传统的手动抽吸法对猪卵母细胞成熟效果的影响，结果表明，真空泵法在
平均使用时间、卵母细胞的收集效率及 A、B 级卵母细胞所占的比例方面均优于手动抽吸法，在卵母细胞
的成熟率方面稍低于手动抽吸法。 表明真空泵法是一种有效的猪卵母细胞采集方法。
关键词：猪卵母细胞；体外成熟；真空泵法；手动抽吸法
中图分类号：Q813．7；S828．3 文献标识码：A 文章编号：0439－8114（2011）21－4438-03
Rapid Collecttion of Swine Oocytes by Vacuum Pump
XIAO Hong－wei，ZHENG Xin－min，LIU Xi－mei，QIAO Xian－feng，LI Li，ZHANG Li－ping，HUA Wen－jun，
BI Yan－zhen，HUA Zai－dong，ZHOU Jing－rong
（Institute of Animal husbandry and Veterinary， Hubei Academy of Agricultural Sciences ／ Hubei Key Laboratory of Animal Embryo
Engineering and Molecular Breeding，Wuhan 430064， China）
Abstract： This experiment was aimed to set up a new swine oocytes collection method with vacuum pump to substitute for
the old manual aspiration and raise the efficiency of the swine oocytes collection． The results showed that collection with
vacuum pump was superior to manual aspiration at average usage time， the efficiency of the oocytes collection and the rate
of A，B quality oocytes， but inferior at the maturation rate of culture． It indicated that collection of oocyte with vacuum pump
was a new and efficiency method．
Key words： swine oocytes； in vitro maturation； collection method with vaccum pump； manual aspiration method