全 文 ：质量更高的要求 。通过 TLC法鉴别乳痛丸中四味
主要中药及 HPLC法测定丹参主成分丹参酮 ⅡA和
芍药苷的含量 ,建立对乳痛丸的质量进行全面控制
指标 ,进而保障了患者用药更加安全和有效。
5.1　薄层鉴别　鉴别乳痛丸中白芍时 ,对提取条件
考察后 ,未使用 2005版 《中国药典 》的提取溶剂乙
醇 [ 1] ,改用正丁醇并进行充分水饱和后提取 ,去除
水溶性杂质效果良好 。
5.2　主要定量成分的选择　丹参为乳痛丸组方中
的君药 ,其所含成分多样 ,可分为水溶性成分系列和
脂溶性成分系列。元四辉等[ 2]采用 HPLC法 、超声
或索氏提取测定水溶性成分丹参素的含量变化 。结
果丹参药材及制剂中丹参素的提取量均随着加热时
间的延长而增加 ,故认为将丹参素作为丹参药材或
含丹参药材制剂的质量控制指标应慎重。潘英妮
等 [ 3]对 30批样品检测丹酚酸 B含量达到规定标准
的约占 82%,而丹参酮 ⅡA含量符合中国药典规定
的仅有 10批 ,占总样品数的 33%。后者较前者更
可为药材饮片准确定量。因此 ,在中国药典规定范
围内 ,确定以丹参酮ⅡA作为乳痛丸定量指标 。
5.3　丹参酮 ⅡA、芍药苷的含量测定　提取丹参酮
ⅡA分别使用流动相或纯甲醇时 ,目标峰与杂质峰
分离效果差 ,考虑丹参酮 ⅡA具有脂溶性 [ 5] ,增大溶
剂的极性 ,选用乙醇与甲醇混合(20∶80)提取时 ,样
品提取充分 ,目标峰与杂质峰分离较好;尝试使用不
同比例流动相(甲醇-水),结果显示比例为 85∶15时
分离效果最佳;芍药苷的测定使用磷酸盐和甲醇配
比 ,可减少由于 pH偏低对色谱柱的损害[ 6] ,并适当
减低流速 ,对测定过程无影响 。
参考文献:
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[ 2] 　元四辉 ,阎海霞 ,杨西晓.丹参素作为制剂质量控制指标的研
究 [ J] .中药材 , 2007, 30(9):1148-1150.
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含量 [ J] .药物分析杂志 , 2003, 23(6):474-475.
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芍药苷和阿魏酸的含量 [ J].医药导报 , 2006, 5(1):60-62.
余甘子喉片质量标准研究
董　林 1 , 　余晓琴 1 , 　王　莉2
(1.四川省食品药品检验所 ,四川 成都 610036;2.成都华神集团股份有限公司制药厂 ,四川 成都 610031)
收稿日期:2008-07-24
作者简介:董　林(1955-),女 ,主任药师 ,从事中药检验工作。 Tel:(028)87570477。
关键词:余甘子喉片;质量标准;没食子酸 、冰片 、薄荷脑;GC、HPLC
摘要:目的:对余甘子喉片建立质量标准。方法:对方中余甘子建立 TLC鉴别法 , 用气相色谱法对方中冰片 、薄荷脑进行
鉴别 , 用高效液相色谱法对余甘子中没食子酸进行含量测定 , 色谱条件为:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-
0.2%磷酸溶液(5∶95)为流动相;检测波长:270 nm。结果:没食子酸在 0.112 7 μg～ 1.014 3 μg范围内呈线性关系 ,平
均加样回收率为 99.65%。结论:本法操作简便 , 结果准确 ,重现性好 , 可以控制余甘子喉片的质量。
中图分类号:R927.2　　　　　文献标识码:A　　　　　文章编号:1001-1528(2009)08-1233-04
　　余甘子喉片由余甘子 、冰片 、薄荷脑制成 ,主要
功能为清热润燥 ,利咽止痛 。用于燥热伤津引起的
咽喉干燥疼痛。全国有多家药厂生产 。但该品种现
行标准较简单 ,原标准中仅收载一项酚类物质的化
学鉴别 ,难以控制内在质量 。为了进一步完善提高
该标准 ,更有效的控制内在质量 ,在 2010版中国药
典起草过程中 ,我们对余甘子喉片质量标准进行了
全面的研究 ,通过实验 ,增加了余甘子中没食子酸的
薄层色谱鉴别 、冰片和薄荷脑的气相色谱鉴别及余
甘子中没食子酸的含量测定 ,制定出了新的质量标
准。
1　仪器与试药
1.1　仪器　Agilent6890N气相色谱仪 ,氢火焰离子
化检测器 (FID), Chemstation色谱工作站。 Wa-
ters2695高效液相色谱仪 , Waters2487紫外检测器 ,
Empower色谱工作站 。
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1.2　试药　甲醇为色谱纯 ,水为超纯水 ,其余所用
试剂均为分析纯;聚酰胺薄膜 ,由浙江省台州市路桥
四甲生化塑料厂提供 。
1.3　对照品 　没食子酸对照品 (批号:110831-
200302)、冰片对照品 (批号:110743-200504)、薄荷
脑对照品(批号:110728-200005)均由中国药品生物
制品检定所提供;缺味阴性对照品 ,由成都华神集团
股份有限公司制药厂提供 。
1.4　余甘子药材　由成都华神集团股份有限公司
制药厂提供 ,经四川省食品药品检验所主任药师黎
跃成同志鉴定为中国药典收载的大戟科植物余甘子
PhylanthusemblicaL.的干燥成熟果实 [ 1] 。
1.5　样品 　余甘子喉片 (060201、060701、060702、
060703等 16批),由成都华神集团股份有限公司制
药厂提供;余甘子喉片(A071010、A071011),由培力
(南宁 )药 业 有 限 公 司 提 供;余 甘 子 喉 片
(20080175),由云南省玉溪市维和制药有限公司提
供;余甘子喉片(071006、071208、080309),由云南省
金泰得三七产业股份有限公司提供;余甘子喉片
(040901),由福建省泉州亚泰制药有限公司提供。
2　鉴别
2.1　余甘子喉片中没食子酸的薄层鉴别　取余甘
子喉片样品 20片 ,研细 ,加甲醇 10 mL,超声处理 30
min,放冷 ,滤过 ,滤液作为供试品溶液;另取没食子
酸对照品 ,加甲醇制成每 1mL含 1mg的溶液 ,作为
对照品溶液;再分别取余甘子药材 0.5 g及缺余甘
子的阴性样品 20片 ,研细 ,加甲醇 10 mL,按供试品
溶液的制备方法分别制成对照药材溶液及阴性对照
品溶液 。照薄层色谱法试验 ,吸取上述 4种溶液各
2 μL,分别点于同一聚酰胺薄膜上 ,以醋酸乙酯 -甲
酸(3∶1)为展开剂 ,展开 ,取出 ,晾干 ,喷以 2%三氯
化铁乙醇溶液。供试品色谱中 ,在与没食子酸对照
品色谱及余甘子对照药材色谱相应的位置上 ,显相
同颜色的斑点;而缺余甘子的阴性对照品色谱中 ,不
显相同颜色的斑点 ,表明该法具有专属性 。见图 1。
2.2　余甘子喉片中冰片 、薄荷脑的气相色谱鉴
别 [ 2, 3]
色谱条件与系统适用性试验:色谱柱 HP-inno-
wax弹性石英毛细管柱 (30 m×0.32 mm×0.5
μm);PEG-20M,涂布浓度为 10%;柱温:120 °C,进
样口温度:230 °C, 检测器温度:250 °C, 检测器:
FID。
取余甘子喉片样品 20片 ,研细 ,加醋酸乙酯 10
mL,超声处理 20 min,放冷 ,滤过 ,滤液作为供试品
溶液;另取缺冰片 、薄荷脑的阴性样品 20片 ,按供试
图 1　余甘子喉片 TLC图谱
1.缺余甘子的阴性对照品　 2.没食子酸　3.余甘子药材　 4.余甘子
喉片 060201　5.余甘子喉片 A071010　 6.余甘子喉片 071006　7.余
甘子喉片 040901
品溶液的制备方法同法制成阴性对照品溶液;再取
冰片 、薄荷脑对照品 ,分别加醋酸乙酯制成每 1 mL
含冰片 60μg、含薄荷脑 5 μg的溶液 ,作为冰片对照
品溶液及薄荷脑对照品溶液 。照气相色谱法试验 ,
以聚乙二醇 (PEG)-20M为固定相 , 涂布浓度为
10%,柱温 120 °C。分别吸取上述 4种溶液各 1
μL,注入气相色谱仪测定。供试品色谱中 ,呈现与
冰片 、薄荷脑对照品保留时间相同的色谱峰;而缺冰
片 、薄荷脑的阴性对照品色谱中 ,无相应的色谱峰出
现 ,表明该法具有专属性 。见图 2。
图 2　余甘子喉片 GC图谱
A.冰片对照品　B.薄荷脑对照品　C.余甘子喉片样品　
D.缺冰片 、薄荷脑的阴性样品
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3　高效液相色谱法测定没食子酸的含量
3.1　色谱条件　色谱柱:PhenomenC18(250 mm×
4.6mm, 5 μm);流动相:甲醇-0.2%磷酸溶液(5∶
95);流速:1.0 mL/min;柱温:30 °C;检测波长:270
nm;理论板数:按没食子酸峰计算应不低于 2 500。
根据文献报道 ,流动相亦有用甲醇-0.1%磷酸
溶液梯度洗脱[ 4]或用甲醇 -0.5%冰醋酸溶液(15∶
85)等度洗脱 [ 5] 。
3.2　测定波长的选择　将没食子酸对照品的甲醇
溶液(浓度为 21.4 μg/mL)进行全波长扫描 ,结果
在 270nm处有最大吸收 ,结合文献资料 ,因此选择
270nm作为测定波长 。
3.3　对照品溶液的制备　取没食子酸对照品适量 ,
精密称定 ,加水制成每 1mL含 56.35μg的溶液 ,即
得 。
3.4　供试品溶液及缺余甘子的阴性对照品溶液的
制备　取余甘子喉片样品 20片 ,精密称定 ,研细 ,取
约 0.2 g,精密称定 ,置 50 mL量瓶中 ,加水 25 mL,
超声处理(功率 250 W,频率 30 kHz)20 min,取出 ,
放冷 ,加水稀释至刻度 , 摇匀 , 用微孔滤膜 (0.45
μm)滤过 ,取续滤液 ,即得;另取缺余甘子的阴性样
品 20片 ,研细 ,取约 0.2 g,精密称定 ,同法制成阴性
对照品溶液 。
按照上述方法 ,将没食子酸对照品溶液 、余甘子
喉片供试品溶液及缺余甘子的阴性对照品溶液注入
液相色谱仪进行测定 ,结果供试品色谱中 ,呈现与没
食子酸对照品保留时间一致的色谱峰;而阴性对照
品在相应的保留时间无色谱峰出现。见图 3。
3.5　稳定性试验　取同一浓度的没食子酸对照品
溶液及余甘子喉片供试品溶液 ,在不同时间进样 10
μL,测定没食子酸峰面积积分值 ,结果没食子酸对
照品溶液及供试品溶液均在 28 h内稳定 , RSD分别
为 0.72%(n=5)和 0.57%(n=5)。
3.6　线性关系考察　配制系列不同浓度的没食子
酸对照品溶液 ,分别精密吸取 10 μL注入液相色谱
仪 ,测定峰面积 ,以峰面积积分值 A为纵坐标 ,对照
品量 C为横坐标 , 作线性回归 ,得回归方程 A=
3 018.0C+22.4, r=0.999 9(n=5)。结果表明:没
食子酸在 0.112 7 μg～ 1.014 3 μg范围内线性关系
良好。
3.7　精密度试验　取同一浓度的没食子酸对照品
溶液 10 μL,在相同色谱条件下重复进样测定 5次 ,
没食子酸峰面积积分值的 RSD=0.24%。
3.8　重复性试验 　取同一批号余甘子喉片
(060201)5份 ,分别按样品测定法测定 ,结果平均含
图 3　余甘子喉片 HPLC图谱
A.没食子酸对照品　B.余甘子喉片样品　C.缺余甘子的阴性样品
量为 16.23 mg/g, RSD=2.23%。
3.9　加样回收试验　精密称取已知含量的余甘子
喉片样品适量(批号 060201),以 50%浓度水平分别
加入一定量的没食子酸对照品 ,按供试品溶液的制
备方法制样 ,依法测定 ,计算加样回收率 ,见表 1。
表 1　 没食子酸加样回收率考察结果(n=6)
取样量
/g
没食子
酸含量
/mg
加入没
食子酸
量 /mg
测得总
量 /mg
回收率
/%
平均回
收率
/%
RSD
/%
0.107 4 1.743 1 1.42 3.110 2 96.27
0.108 5 1.761 0 1.42 3.220 6 102.79
0.100 3 1.627 9 1.42 3.012 4 97.50 99.65 3.37
0.110 7 1.796 7 1.42 3.273 6 104.00
0.102 3 1.660 3 1.42 3.092 6 100.87
0.100 1 1.624 6 1.42 2.994 6 96.48
3.10　样品含量测定　精密吸取供试品溶液和对照
品溶液各 10μL注入液相色谱仪 ,测定峰面积 ,以外
标法计算含量 ,结果见表 2。
4　小结与讨论
4.1　余甘子在本草文献中最早见于七世纪中叶成
书的唐《新修本草 》,以庵摩勒为正名 ,采用波斯文
和梵文音译。此后历代本草均有记载 , 《新修本草 》
与《海药本草 》中明确记录了本品对呼吸道疾患的
疗效 。此项功效 ,一直在我国西南和南方诸省民间
习用 。后于 1983年开发为余甘子喉片 ,为一常用中
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表 2　 样品检测结果
企业名称 批号 余甘子原料
没食子
酸 TLC
冰片
GC
薄荷脑
GC
没食子
酸含量
/(mg/片)
成都华神 060701 干果 检出 检出 检出 14.3
成都华神 060702 干果 检出 检出 检出 14.2
成都华神 060703 干果 检出 检出 检出 14.1
成都华神 060201 干果 检出 检出 检出 11.4
成都华神 051201 干果 检出 检出 检出 8.9
成都华神 050501 干果 检出 检出 检出 6.2
成都华神 050101 干果 检出 检出 检出 6.6
成都华神 040901 干果 检出 检出 检出 9.4
成都华神 040401 干果 检出 检出 检出 7.7
成都华神 040101 干果 检出 检出 检出 6.3
成都华神 030602 干果 检出 检出 检出 8.1
成都华神 030601 干果 检出 检出 检出 8.6
成都华神 030201 干果 检出 检出 检出 9.4
成都华神 020903 干果 检出 检出 检出 9.5
成都华神 020902 干果 检出 检出 检出 9.7
成都华神 020901 干果 检出 检出 检出 9.8
培力(南宁) A071010 干果 检出 未检出 检出 11.1
培力(南宁) A071011 干果 检出 未检出 检出 11.1
玉溪维和 20080175 干果 检出 检出 检出 8.4
金泰得 071006 鲜果 检出 检出 检出 12.5
金泰得 071208 鲜果 检出 检出 检出 14.8
金泰得 080309 鲜果 检出 检出 检出 14.0
泉州亚泰 040901 鲜果 检出 检出 检出 4.7
成药。
4.2　原部颁标准中余甘子的处方量为 1 600 g,但
未注明是鲜果或干果[ 6] 。在实验中 ,收集到了成都
华神集团股份有限公司制药厂 、培力(南宁)药业有
限公司 、云南省玉溪市维和制药有限公司 、云南省金
泰得三七产业股份有限公司及福建省泉州亚泰制药
有限公司的样品 。经调查 ,云南省金泰得三七产业
股份有限公司和福建省泉州亚泰制药有限公司所使
用的余甘子原料是鲜果 ,用鲜果投料生产 ,由于受采
收季节的限制 ,鲜果不易贮存等因素的影响 ,产量较
小;而成都华神集团股份有限公司制药厂 、培力(南
宁)药业有限公司 、云南省玉溪市维和制药有限公
司则使用干果为原料 ,可保证全年生产 。成都华神
制药厂在生产过程中 ,用余甘子干果投料 ,干膏收率
通常为 25%以上 , 100 g干膏折算为药材量约为 400
g,而用余甘子鲜果投料 ,干膏收率通常为 6.5%左
右 , 100g干膏折算为药材量约为 1 600 g。经多次
测定 ,余甘子鲜果的水分在 75%左右 , 1 600 g鲜果
应相当于干果 400g。由此可见 ,处方中应分别明确
规定余甘子鲜果与干果的不同剂量。
4.3　从表 2可见 , 23批余甘子喉片中 ,均能检出没
食子酸的斑点及薄荷脑的色谱峰 ,其中 21批样品检
出了冰片的色谱峰 ,但有 2批未能检出冰片 ,这说明
在标准中增加现代化的检测手段 ,以控制药品内在
质量 ,是非常必要的 。另外 ,没食子酸的含量测定结
果表明 ,不论用干果投料还是用鲜果投料 ,对样品中
没食子酸的含量均无影响 ,其最低值为 4.7 mg/片 ,
最高值为 14.8 mg/片。
参考文献:
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[ 6] 　卫生部药品标准中药成方制剂第 2册 [ S] .1990:114.
贵州建成第一个中药民族药研发中心
记者从贵州省科技厅了解到 ,贵州省第一个中药民族药研发中心日前建成。
据介绍 ,为加快贵州省中药 、民族药研究开发力度 ,构建开放型现代中药 、民族药技术研究平台 , 2005
年 ,贵阳医学院承担了 “贵州省中药民族药研究开发中心 ”建设项目 。目前 , “贵州省中药民族药研究开发中
心 ”已建立起药物研究开发体系和中药新型制剂工艺 、中药质量规范化研究 、天然药物活性成分研究及中药
药效物质基础与药理效应 、安全性评价 4个技术平台。
据悉 ,这个中心建设期间承担了科技部 、国家自然基金 、贵州省重大专项等 56个项目 , 6个中药新药已
获国家食品药品监督管理局批件或新药证书 , 1项研究成果获发明专利 、9项研究申报发表专利 ,获得国家专
利技术发明二等奖 1项 、贵州省科技进步一等奖 1项 。
(信息由新华社提供)
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