全 文 ：广西农业科学 2009年第 40卷第 8期
收稿日期：2009－05－22
基金项目：广西科技攻关项目（桂科攻0424002－3）；广西农业重点科技计划项目（NK200829）
作者简介：王明召（1977－），男，陕西眉县人，农艺师，主要从事柑桔脱毒及病毒鉴定工作。
迟熟蕉柑（暂定名）是近年选育的一种特迟熟
柑橘优良单株，具有晚熟、高产稳产、品质优良的特
性。 该品种树冠圆头形，果圆球形，皮橙黄色，易剥
离；单果重102～146g；果实可溶性固形物含量9％～
12％，种子2～10粒；在适栽区果肉柔软多汁，化渣，
味甜；在桂林果实着色期为12月下旬，成熟期为3月
上旬～4月下旬，可留树挂果至5月，果实耐贮运。 但
在适栽区，由于柑橘黄龙病较为严重，碎叶病、衰退
迟熟蕉柑茎尖嫁接砧木对比试验
及病毒类病害鉴定
王明召，区善汉，娄兵海，刘升球，梅正敏，麦适秋，陈宜超，陈贵峰，莫健生
（广西柑桔研究所， 广西桂林 541004）
摘要：分别以枳和阿尔及利亚夏橙作为砧木，以迟熟蕉柑芽作为接穗进行茎尖嫁接，结果枳砧嫁接成活率为9．1％，
阿尔及利亚夏橙砧嫁接成活率为54．5％，将两种砧木嫁接苗再嫁接在枳砧上，其3年生幼树均生长正常，表明阿尔及利
亚夏橙是茎尖嫁接迟熟蕉柑的优良砧木。应用指示植物鉴定方法和PCR检测技术鉴定7株茎尖嫁接苗的柑橘碎叶病、
衰退病、裂皮病和黄龙病，结果1、3、4、5、6号迟熟蕉柑单株不带碎叶病、衰退病、裂皮病和黄龙病，可作为繁殖无病苗
木的备选材料；2、7号迟熟蕉柑单株不带碎叶病、裂皮病和黄龙病，但带有衰退病，推测衰退病毒源可能来自取芽的田
间植株。
关键词：枳；阿尔及利亚夏橙；迟熟蕉柑；茎尖嫁接；病毒鉴定
中图分类号：S436.669 文献标识码：A 文章编号：1002－8161（2009）08－1010－04
Comparative trials of rootstocks obtained from shoot－tip grafted
late－ripening Jiaogan mandarins and identification of virus
diseases
WANG Ming－zhao，OU Shan－han，LOU Bing－hai，LIU Sheng－qiu，MEI Zheng－min，
MAI Shi－qiu，CHEN Yi－chao，CHEN Gui－feng，MO Jian－sheng
（Guangxi Citrus Research Institute， Guilin， Guangxi 541004， China）
Abstract： In the present study， trifoliate orange and Algers Valencia orange were used as stocks and the buds of
late－ripening Jiaogan mandarins were used as scion for shoot－tip grafting． The results showed that the survival rates of
grafted seedlings using trifoliate orange rootstocks and Algers Valencia orange as stocks was 9．1％ and 54．5％ ， respectively．
The grafted seedlings from these two stocks were grafted on stock of trifoliate orange again and the 3－year－old trees grew
normally， which revealed that Algers Valencia orange was the better stock for shoot－tip grafting of late－ripening Jiaogan
mandarins． Moreover， citrus tatter leaf virus（CTLV）， citrus tristeza virus（CTV）， citrus exocortis viroid（CEV） and Huan-
glongbing （HLB） in seven shoot－tip grafted seedlings were identified by indicator plants and PCR technique． The results
showed that the seedlings from 1st， 3rd， 4th， 5th and 6th late－ripening Jiaogan mandarins did not have pathogens of CTLV，
CTV， CEV and HLB， which could be used to develop virus－free seedlings， while the seedlings from 2nd and 7th late－
ripening Jiaogan mandarins had no CTLV， CEV and HLB， but had the pathogen of CTV that might have been come from
the buds of late－ripening Jiaogan mandarins in field．
Key words： Trifoliate orange （TO）； Algers Valencia orange （AVO）； late－ripening Jiaogan mandarins； shoot－tip
grafting； identification of virus
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王明召等：迟熟蕉柑茎尖嫁接砧木对比试验及病毒类病害鉴定
病、裂皮病也时有发生，严重制约了迟熟蕉柑的发
展。 茎尖嫁接是柑橘脱毒的有效方法 ［1］，但迟熟蕉
柑芽较柔弱，用作茎尖嫁接接穗，嫁接成活率较低。
为了提高迟熟蕉柑茎尖脱毒效果，笔者从改善茎尖
嫁接砧木入手进行了迟熟蕉柑茎尖嫁接砧木对比
试验；同时，应用指示植物鉴定方法和PCR检测技
术，对成活茎尖嫁接苗的柑橘碎叶病、衰退病、裂皮
病和黄龙病进行鉴定，以期获得无病毒迟熟蕉柑材
料，结果报道如下。
1 材料与方法
1． 1 茎尖嫁接
1． 1． 1 嫁接砧木准备 于嫁接前15d选用枳和阿
尔及利亚夏橙（以下简称“阿夏”）种子经热处理，剥
去种皮，再经消毒处理后，在无菌条件下播入灭菌
的试管固体培养基中，播后置于27℃恒温黑暗条件
下培养。 固体培养基为MS培养基加0．8％琼脂和3．0％
白糖。
1． 1． 2 嫁接 分别于2006年6月1日、6月22日和8
月24日进行嫁接，每次应用相近数量的两种砧木嫁
接。 嫁接前采田间迟熟蕉柑植株上1～3cm长的嫩梢
备用。 在无菌条件下从试管中取出砧木，截顶留2～
3cm长茎段，切去根尖留3～5cm，在放大15倍的双筒
解剖镜下操作，在砧木中上部削“△”形切口。 另取
准备好的迟熟蕉柑嫩梢用解剖刀将下部叶剥除，切
下生长点连带2个叶原基的茎尖， 垂直放入砧木切
口。 将茎尖嫁接苗放入已灭菌的液体培养基中，并
置于27℃培养室内培养， 白天开日光灯增加光照。
再嫁接前统计茎尖嫁接成活率。 液体培养基为MS
培养基加3．0％白糖。
1． 1． 3 再嫁接 待嫁接苗长出2片叶后，将茎尖嫁
接苗切去根部，留砧木茎，削去芽背面一侧的皮层，
再嫁接到盆栽无病的枳（地上2cm处茎径0．5cm左
右）砧木上。 2009年2月调查成活单株的生长情况。
1． 2 柑橘病毒病和类似病毒病害的鉴定
采用指示植物鉴定方法鉴定柑橘碎叶病、衰退
病和裂皮病， 应用的指示植物分别是腊斯克枳橙、
墨西哥来檬和伊特洛格香橼亚利桑那861－S－1选系
（简称香橼861－S－1）。 采用双重芽接法接种［2］，即在
无病枳砧木上同时嫁接待鉴定植株的皮和指示植
物的芽。 2007年10月接种，在枳砧木上腹接指示植
物的芽于中间位置，上下距离指示植物芽2cm处各
嫁接1片待鉴定植株的皮，每种病接种10株。 另外，
每种病各设正负对照6株， 嫁接接种已知毒源的指
示植物作为正对照， 单独嫁接指示植物作为负对
照。 2008年4～9月，在适宜发病条件下，每隔15～45d
鉴定1次，连续鉴定7次，最后根据指示植物的症状
表现确定鉴定结果。
采用PCR检测技术鉴定柑橘黄龙病，用改进的
CTAB法提取DNA。根据李韬等［3］设计的基于黄龙病
16S rDNA上的巢式PCR引物，对黄龙病病原DNA进
行扩增，1．5％琼脂糖凝胶电泳观察结果。
2 结果与分析
2． 1 不同砧木茎尖嫁接结果
由表1可知， 采用不同砧木茎尖嫁接迟熟蕉柑
的成活率相差较大，采用阿夏砧茎尖嫁接迟熟蕉柑
成活率相对较高，为54．5％；而采用枳砧茎尖嫁接迟
熟蕉柑成活率只有9．1％。说明采用阿夏砧木可以提
高迟熟蕉柑的茎尖嫁接成活率。
表 1 不同砧木茎尖嫁接迟熟蕉柑成活情况
Table 1 Survival situation of late－ripening Jiaogan mandarins
grafted with different stocks shoot－tip
砧木品种
Stock variety
嫁接株数
Grafting plants
成活株数
Survival plants
成活率（％）
Survival rates
枳砧
Trifoliate orange 11 1 9．1
阿夏砧
Algers valencia orange 11 6 54．5
由表2可知，再嫁接砧木为枳时，茎尖嫁接砧木
为阿夏的2～7号单株，各项生长指标正常，生长情况
接近1号单株。 另据观察，各单株叶色浓绿，嫁接部
位正常。 由此初步认为，阿尔及利亚夏橙与迟熟蕉
柑及枳之间具有良好的亲和力，再嫁接后迟熟蕉柑
能正常生长。
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广西农业科学 2009年第 40卷第 8期
2． 2 柑橘病毒病和类似病毒病害鉴定结果
经鉴定观察，碎叶病、衰退病、裂皮病正对照的
指示植物分别表现出各自特征性症状：碎叶病在腊
斯克枳橙上表现叶片缺刻、叶面凹凸不平、出现黄
斑；衰退病在墨西哥来檬上表现叶片脉明；裂皮病
在香橼861－S－1上表现叶片反卷。 各病负对照的指
示植物表现正常。 用来鉴定1、3、4、5、6号单株的腊
斯克枳橙、墨西哥来檬和香橼861－S－1表现正常，未
表现出正对照症状，用以鉴定2号和7号单株的腊斯
克枳橙和香橼861－S－1表现正常， 墨西哥来檬出现
脉明症状（表3）。
由电泳结果可见（图1），迟熟蕉柑7个单株均未
检测到柑橘黄龙病病原。
表 3 迟熟蕉柑茎尖嫁接苗各单株病毒病和类似病毒病害指
示植物鉴定结果
Table 3 Identification of virus disease，virus－like diseases of
indicators for shoot－tip grafting seedlings of late－ripening Jiao－
gan mandarins
编号
No.
砧木品种
Rootstocks
variety
指示植物 Indicator plant
腊斯克枳橙
Rusk citrange
墨西哥来檬
Mexican lime
香橼 861-S-1
Medicinal
citron 861-S-1
1 枳 － － －
2 阿夏 － ＋ －
3 阿夏 － － －
4 阿夏 － － －
5 阿夏 － － －
6 阿夏 － － －
7 阿夏 － ＋ －
正对照Positive control ＋ ＋ ＋
负对照Negative control － － －
注：“－”表示阴性；“＋”表示阳性。
Note：“－”indicates negative；“＋”indicates positive．
3 小结与讨论
3． 1 试验结果表明，和常用茎尖嫁接砧木枳相比，
阿尔及利亚夏橙砧木能明显提高迟熟蕉柑的嫁接
成活率。 茎尖嫁接试验过程中发现，阿尔及利亚夏
橙砧木生长更健壮、嫁接切口水分更充足，这可能
是阿尔及利亚夏橙砧木能提高迟熟蕉柑茎尖嫁接
成活率的原因。 另外，阿尔及利亚夏橙和迟熟蕉柑
的嫁接亲和力更好等因素也可能是其茎尖嫁接成
活率高的原因。 试验中观察发现，1号单株生长正
常，嫁接部位未出现异常，而再嫁接时，嫁接砧木为
同一品种（枳），亲和力更好，所以再嫁接后苗木生
长应该具有一定优势。但茎尖嫁接砧木为阿尔及利
亚夏橙的2～7号迟熟蕉柑再嫁接砧木为枳时幼树的
表 2 再嫁接迟熟蕉柑苗生长情况
Table 2 Seedlings growth of late－ripening Jiaogan mandarins for shoot－tip grafting of different stocks
注：砧木粗度、树粗、梢粗分别指地上、嫁接口或基部上 2cm处粗度。
Note：Diameter of re－grafted stocks，plant and shoot was the diameter of 2cm distance above surface，grafting position and shoot end，respectively．
编号
No．
砧木品种
Rootstocks
variety
再嫁接砧木
Re－grafting rootstocks
嫁接苗冠幅
Crown width of grafting seedlings 树高（cm）
Plant
height
树粗（cm）
Plant
diameter
末级梢数
Last
shoots
末级梢长（cm）
Length of last
shoot
末级梢粗（cm）
Diameter of last
shoot品种
Variety
粗度（cm）
Diameter
东西（cm）
West－East
南北（cm）
North-South
1 枳 枳 2.23 95 80 92 1.47 34 11.4 0.20
2 阿夏 枳 2.05 70 55 69 1.54 36 9.7 0.15
3 阿夏 枳 1.85 45 65 80 1.09 22 14.8 0.24
4 阿夏 枳 1.90 60 65 72 1.16 23 13.4 0.18
5 阿夏 枳 1.80 60 60 64 1.27 22 14.2 0.24
6 阿夏 枳 2.14 80 80 92 1.32 29 13.8 0.24
7 阿夏 枳 2.19 70 50 82 0.94 19 10.9 0.22
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生长情况并不逊于1号单株， 进一步说明阿尔及利
亚夏橙分别与迟熟蕉柑和枳之间具有良好的亲和
力，因此，阿尔及利亚夏橙可以用作迟熟蕉柑优良
的茎尖嫁接砧木。
3． 2 指示植物鉴定和PCR检测结果表明， 本试验
1、3、4、5、6号迟熟蕉柑单株不带碎叶病、衰退病、裂
皮病和黄龙病， 可作为繁殖无病苗木的备选材料。
2、7号迟熟蕉柑单株不带碎叶病、裂皮病和黄龙病，
但带有衰退病。 2、7号迟熟蕉柑的茎尖嫁接砧木为
阿尔及利亚夏橙， 而茎尖嫁接砧木为枳砧的1号单
株并没有带病。阿尔及利亚夏橙播种幼苗携带衰退
病的研究未曾见报道；另据周常勇等 ［4］报道，衰退
病需经热处理才能脱除， 推测2、7号迟熟蕉柑衰退
病毒源可能来自取芽的田间植株。
3． 3 Navarro等［5，6］报道，茎尖嫁接成活率与砧木苗
龄、砧木品种、接穗品种、茎尖大小、嫁接速度等因
素有关。实际操作中，气候环境、污染程度等因素也
会对茎尖嫁接的成活率造成影响。 因此，如何提高
柑橘茎尖嫁接成活率是一项综合的研究工作。本试
验尽量在其他因素一致的条件下研究砧木品种对
嫁接成活率的影响，希望得到客观准确的结果。
参考文献：
［1］ 孙华阳． 柑桔生产大全［M］． 北京：农业出版社，1993：
251－255．
［2］ 王国平，洪霓． 果树的脱毒与组织培养［M］． 北京：化学
工业出版社，2005：107．
［3］ 李韬，柯冲． 应用 Nested－PCR检测柑橘木虱及其寄主
九里香的柑橘黄龙病带菌率［J］． 植物保护学报，2002，
29（1）：31－35．
［4］ 周常勇，蒋元晖，赵学源，唐科志，杨方云，李太盛，肖启
明，李隆华，白先进． 柑橘苗木脱毒技术规范［M］． 北京：
中国农业出版社，2006：3．
［5］ Navarro L，Roistacher N C，Murshige T． Improvement of
shoot－tip grafting in vitro for virus－free citrus［J］． Amer
Soc Hort Sci，1975，100（5）：471－479．
［6］ Navarro L． Citrus shoot－tip grafting in vitro（STG）and its
application：A review［J］． Proc Int Soc Citriculture，1981：
452－456．
（责任编辑 麻小燕）
王明召等：迟熟蕉柑茎尖嫁接砧木对比试验及病毒类病害鉴定 1013· ·