全 文 ：2013 年 12 月第 20 卷第 12 期 中国中医药信息杂志 ·59·

HPLC 测定药用芦荟中芦荟苷和芦荟大黄素含量
彭贵龙,周光明,秦红英
西南大学化学化工学院,发光与实时分析教育部重点实验室,重庆 400715
摘要：目的 以离子液体 1-丁基-3-甲基咪唑溴化盐([BMIM]Br)为萃取剂超声辅助萃取,高效液相色谱法同时分
离测定芦荟中的芦荟苷和芦荟大黄素。方法 采用 Phenomenex C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 µm)；流动相：甲醇-0.3%
冰醋酸水溶液(65∶35)；流速：0.80 mL/min；紫外检测波长：360 nm；柱温：35 ℃。结果 芦荟苷和芦荟大黄素
分别在 0.000 336～1.68 µg(r＝0.999 96)、0.000 608～3.04 µg(r＝0.999 76)范围内线性关系良好,检出限分别
为 0.050 6、0.262 ng/mL,平均加样回收率分别为 95.99%、95.80%。结论 本法操作简单快速、定量准确、灵敏度
高、成本低,且对环境友好,是检测及分离芦荟中蒽醌类化合物的有效方法。
关键词：离子液体；超声辅助；高效液相色谱法；芦荟；芦荟苷；芦荟大黄素
DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2013.12.022
中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304(2013)12-0059-03
HPLC Determination of Aloin and Aloeemodin in Barbodos Aloe PENG Gui-long, ZHOU Guang-ming,
QIN Hong-ying (College of Chemistry and Chemical Engineering, Southwest University；Key Laboratory on Luminescence
and Real-Time Analysis, Ministry of Education, Chongqing 400715, China)
Abstract：Objective To isolate and determine Aloin and Aloeemodin in Barbodos Aloe by ionic
liquid-based ultrasonic-assisted extraction coupled with high performance liquid chromatography, with
1-butyl-3-methylimidazolium chloride ([BMIM]Br) solution as the extraction solvent. Methods The
separation was performed on Phenomenex C18 column (250 mm×4.6 mm, 5 μm) with detection
wavelength of 360 nm. The mobile phase was consisted of methanol-0.3% acetic acid solution (65∶35)
with the flow rate of 0.80 mL/min, and the column temperature at 35 ℃. Results The calibration curves for
Aloin and Aloeemodin were liner within 0.000 336-1.68 µg (r＝0.999 96) and 0.000 608-3.04 µg (r＝
0.999 76), respectively. The limit of detection (LOD) was 0.05 06 ng/mL and 0.262 ng/mL, respectively.
The average recovery was 95.99% and 95.80%, respectively. Conclusion The method is simple, rapid,
accurate, sensitive, low cost and environment-friendly, thus it provides an effective means for assaying
anthraquinones in Barbodos Aloe.
Key words：ionic liquid；ultrasonic-assisted；HPLC；Barbodos Aloe；Aloin；Aloeemodin
芦荟系百合科芦荟属多年生肉质草本植物,具有清肝热、
通便的作用,用于便秘、小儿疳积、惊风,外治湿癣。现代研究
发现,芦荟除具有抗炎、抗辐射等功效外,还具有抗氧化、抗衰
老、抗肿瘤、调节血糖等多种药理作用。芦荟的主要药用成分
是以芦荟苷、芦荟大黄素为主的蒽醌类衍物,因此,对这 2种有
效成分的测定具有极其重要的意义。目前虽已有芦荟中芦荟苷
和芦荟大黄素相关的测定研究报道,但其前处理多采用以甲醇
和乙醇为主的有机溶剂回流提取法[1-5],不仅消耗时间长,且易
污染环境。本试验以离子液体 1-丁基-3-甲基咪唑溴化盐
([BMIM]Br)溶液为萃取剂,利用超声辅助萃取,为芦荟资源的
综合开发利用提供质控依据。
1 仪器与试药
LC-20AT 液相色谱输液泵,SPD-20A 紫外检测器,CTO-
10AS 柱温箱,LC-Solution 色谱数据处理系统(日本岛津公
司)；KH-3200B 型超声波清洗器(昆山禾创超声仪器有限公司)；

基金项目：国家自然科学基金(21277110)
通讯作者：周光明,E-mail：gmzhou@swu.edu.cn
TGL-16 g 高速离心机(上海安亭科学仪器厂)；SZ-2 自动双重
纯化水蒸馏器(上海泸西分析仪器)；FA2004A 型分析天平。
芦荟苷、芦荟大黄素、对照品(纯度均≥98.5%,上海晶纯
实业有限公司),1-丁基-3-甲基咪唑溴化盐(纯度≥99%,中科
院兰州化学物理研究所),甲醇(分析纯,重庆川东化工有限公
司化学试剂厂),乙醇(分析纯,重庆川东化工有限公司化学试
剂厂),冰醋酸(分析纯,重庆川东化工有限公司化学试剂厂),
二次蒸馏水(实验室自制)。芦荟原材料(产地广东,批号
20120313)购于当地药房,经西南大学黄承志教授鉴定为百合
科植物芦荟叶的汁液干燥浓缩物。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱：Phenomenex C18(250 mm ×4.6 mm,5 µm)。流动
相：甲醇-0.3%醋酸(65∶35)；流速：0.8 mL/min；进样量：
20 µL；检测波长：360 nm；柱温：35 ℃。色谱图见图 1。
2.2 对照品溶液的制备
分别精密称取对照品芦荟苷、芦荟大黄素适量,甲醇溶解,
配制成芦荟苷 420 µg/mL、芦荟大黄素 760 µg/mL 的溶液,作
·60· Chinese Journal of Information on TCM Dec.2013 Vol.20 No.12

为储备液,避光保存,待用。分别准确吸取 2种对照品储备液适
量,用流动相配制成一系列不同浓度的混合对照品溶液,置于
冰箱(4 ℃)内避光保存备用。






A B
注：A.对照品；B.供试品；1.芦荟苷；2.芦荟大黄素
图 1 芦荟中芦荟苷和芦荟大黄素高效液相色谱图
2.3 供试品溶液的制备
将芦荟原材料于 70 ℃干燥至恒重后粉碎,过 60 目筛
(0.5～1.2 mm),干燥条件下保存备用。准确称取 0.1 g 芦荟粉
末,加入 5 mL 1.2 mol/L 离子液体溶液,浸泡 4 h,超声(150 W,
40 kHz)萃取 30 min,过滤取滤液,3500 r/min 离心 10 min,取
上清液,经 0.45 µm 有机滤膜过滤,进样分析。
2.4 线性关系考察
分别精密量取“2.2”项下混合对照品溶液,用甲醇稀释至
不同浓度。其中芦荟苷浓度分别为 0.016 8、0.168、1.68、8.40、
42.00、84.00 µg/mL,芦荟大黄素浓度分别为 0.030 4、0.304、
3.04、15.20、76.00、152.00 µg/mL。从低浓度到高浓度,依
次进样,每个浓度进样 3次,每次 20 µL,按“2.1”项下色谱条
件进行高效液相色谱分析,以峰面积为纵坐标,对照品浓度为
横坐标,进行线性回归,得回归方程：芦荟苷 Y＝19 964.74＋
56 219.89X ,r＝0.999 96,其线性范围为0.000 336～1.68 µg,
检出限为0.050 6 ng/mL；芦荟大黄素Y＝12 222.17＋11 735.99X ,
r ＝0.999 76,其线性范围为 0.000 608～3.04 µg,检出限为
0.262 0 ng/mL。
2.5 精密度试验
精密吸取芦荟苷、芦荟大黄素浓度分别为 42、76 µg/mL
的对照品混合液 20 µL,按“2.1”项下色谱条件进样分析,重
复进样6次,测定各对照品的峰面积,结果芦荟苷峰面积RSD＝
1.03%,芦荟大黄素峰面积 RSD＝3.21%,表明仪器精密度良好。
2.6 稳定性试验
精密吸取“2.3”项下供试品溶液 20 µL,在避光条件下,
于 0、4、8、12、16、20、24、48 h 分别进样,测定芦荟苷的
峰面积 RSD＝2.21%,芦荟大黄素峰面积 RSD＝0.68%,表明该方
法稳定性良好。
2.7 重复性试验
精密称取同一批芦荟样品 6 份,按“2.3”项下方法制备,
“2.1”项下色谱条件测定。结果芦荟苷峰面积 RSD＝4.62%,
芦荟大黄素峰面积 RSD＝3.82%,表明该方法重复性良好。
2.8 加样回收率试验
精密称取已知含量的同一批芦荟样品 0.1 g 6 份,分成 3
组,每组按照低、中、高 3 个标准准确加入对照品混合液,按
“2.3”项下方法制备,“2.1”项下色谱条件测定。芦荟苷、
芦荟大黄素的回收率测定结果见表 1。
表 1 芦荟苷及芦荟大黄素加样回收率试验结果
成分
取样量
(g)
样品中
含量(µg)
加入量
(µg)
测得量
(µg)
回收率
(%)
平均回收
率(%)
RSD
(%)
芦荟苷 0.102 1 11.262 7 12.000 0 22.821 3 96.32
0.101 2 11.212 5 12.000 0 23.121 5 99.24
0.104 3 11.462 3 13.600 0 24.869 8 98.58
0.100 3 11.131 2 13.600 0 24.162 6 95.82
95.99 2.84
0.101 8 11.236 1 16.800 0 27.012 3 93.91
0.102 6 11.363 0 16.800 0 26.829 1 92.06
芦荟 0.102 1 0.398 2 0.380 0 0.762 6 95.90
大黄素 0.101 2 0.388 1 0.380 0 0.758 2 97.39
0.104 3 0.431 6 0.610 0 1.021 0 96.62
0.100 3 0.381 1 0.610 0 0.988 7 99.61
95.80 2.89
0.101 8 0.392 3 0.760 0 1.093 4 92.25
0.102 6 0.416 8 0.760 0 1.123 6 93.00
2.9 样品含量测定
取同一批次芦荟样品 6份,每份 0.1 g,按“2.3”项下方
法制备,“2.1”项下色谱条件测定,其样品含量测定结果见
表 2。
表 2 样品含量测定结果(mg/0.1 g,n＝3)
编号 芦荟苷 芦荟大黄素
1 11.08 0.39
2 11.62 0.41
3 12.25 0.49
4 12.88 0.50
5 11.28 0.43
6 11.88 0.46
平均值 11.83 0.46
3 讨论
本试验比较了 CH3OH-H2O、CH3OH-CH3COOH 体系对 2 种目标
分析物的分离效果。当流动相为 CH3OH-H2O 体系时,调节流动相
比例组分峰可以分离,但峰形较宽。当流动相为 CH3OH-CH3COOH
时,不断调节其比例时,发现甲醇比例 65%时,2 组分能在合适
时间内出峰。在色谱柱允许的 pH 范围内,考察了醋酸比例对峰
形的影响,当醋酸比例为 0.3%(V/V)时,峰形最佳,故最终选择
CH3OH-0.3%CH3COOH 体系为流动相。
本试验分别采用甲醇、乙醇和[BMIM]Br 以及 TritonX-100
溶液为提取剂,比较了它们对目标分析物的提取效果,结果表
明,当以离子液体[BMIM]Br 溶液作为提取剂时,芦荟苷和芦荟
大黄素的提取率明显提高。本试验还比较了不同浓度的离子液
体对提取率的影响,结果表明,当用 1.2 mol/L 离子液体时,提
取率最高,当离子液体浓度过高时离子液体的黏度很大,对色
谱柱子的影响较大。故最终选择离子液体的浓度为 1.2 mol/L。
为了得到最佳的提取效果,本试验还考察了不同的固液比对萃
取率的影响。当固液比分别为 1∶20、1∶30、1∶50、1∶80、
1∶100 g/mL 时,2 种目标分析物的提取率刚开始时显著增加,
但当固液比增至 1∶100 g/mL 时,提取率没有明显增加,因此,
本试验以 1∶80 g/mL 为最佳固液比。
t/min
1
2
0 5 10 15 20
1
2
0 5 10 15 20
2013 年 12 月第 20 卷第 12 期 中国中医药信息杂志 ·61·

救必应中总苷类物质提取技术研究
王淳,巢志茂,吴晓毅,孙文
中国中医科学院中药研究所,北京 100700
摘要：目的 制定中药救必应中总苷类物质的提取工艺。方法 以高效液相色谱法测定的长梗冬青苷、紫丁香
苷提取得率为指标,以 L9(3)4 正交设计进行提取工艺中多项参数的优化,采用优化的参数进行实验室提取,通过对提
取物成分分析判断该工艺的可行性。结果 救必应中总苷类物质最佳提取工艺为：每次用 12 倍量的 50%乙醇为溶剂,
加热回流 90 min,提取 3次。总苷类提取物的得率为 19.5%,其中含长梗冬青苷(292 mg/g)、紫丁香苷(59.5 mg/g)、
芥子醛葡萄糖苷、丁香树脂醇 4’-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、丁香树脂醇 4’,4’’-二-O-β-D-吡喃葡萄糖苷等苷类化合物。
结论 采用优化的实验室工艺进行提取,提取物中含有多个苷类物质。对提取物的分析表明该提取工艺切实可行。
关键词：救必应；苷类物质；提取工艺；长梗冬青苷；紫丁香苷
DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2013.12.023
中图分类号：R283.5 文献标识码：A 文章编号：1005-5304(2013)12-0061-03
Extracting Technology of Total Glycosides from Barks of Ilex rotunda WANG Chun, CHAO Zhi-mao,
WU Xiao-yi, SUN Wen (Institute of Chinese Materia Medica, China Academy of Chinese Medical Sciences, Beijing 100700,
China)
Abstract：Objective To investigate an optimum extracting technology for total glycosides from dried
barks of Ilex rotunda Thunb. Methods The yields of pedunculoside and syringin by high performance liquid
chromatography (HPLC) determination were taken as the indexes. Some parameters of the extraction
technology were evaluated with an L9(3)4 orthogonal design. The optimum extraction parameters were used
to extract total glycosides in laboratory. The feasibility was checked by determining the chemical
constituents by means of HPLC method. Results The optimum extracting conditions were 12 times volumes
of 50% ethanol as the solvent and refluxing 90 min each time for 3 times. An extract yield of total
glycosides was 19.5% from barks of Ilex rotunda. Pedunculoside (292 mg/g), syringin (59.5 mg/g),
sinapaldehyde glucoside, syringaresinol 4-O-β-D-glucopyranoside, and syringaresinol 4,4-di-O-β-D-
glucopyranoside were detected in the extract. Conclusion Some glycosides were found in the extract with
the optimum extraction technology in laboratory. The extraction technology is practicable and valid.
Key words：Ilex rotunda；glycosides；extracting technology；pedunculoside；syringin

基金项目：国家质量监督检验检疫总局行业科研专项(201210209)
通讯作者：巢志茂,E-mail：chaozhimao@icmm.ac.cn
中药救必应为冬青科常绿乔木植物铁冬青 Ilex rotunda
Thunb.的干燥树皮,具清热解毒、利湿止痛之功效,可用于暑湿
发热、咽喉肿痛、湿热泻痢、脘腹胀痛、风湿痹痛、湿疹、疮

样品含量测定结果表明,芦荟中芦荟苷含量极高,而芦荟
大黄素含量相对较少,因此,对该药的正确定量使用具有一定
的参考价值。本试验采用离子液体提取芦荟中芦荟苷和芦荟大
黄素,得到了较好的提取效果。离子液体,又称室温离子液体,
一般由结构不对称的有机阳离子和无机阴离子组成,是在室温
或接近室温下呈液态的有机盐[6],具有不挥发、液程宽、溶解
强和可设计调节等特性[7-8]。使用离子液体作为提取剂,该方法
操作简单、快捷、绿色环保,定量结果可靠,回收率较高,适合
用于芦荟中芦荟苷和芦荟大黄素的检测,从而为芦荟中芦荟苷
和芦荟大黄素的检测提供了一种新的方法。
参考文献：
[1] 陈伟,林新华,黄丽英,等.芦荟甙和芦荟大黄素的提取和同时测定[J].
福建分析测试,2002,11(1)：1512-1514.
[2] 王书杰,肖金鱼,王秀花.不同品种芦荟中芦荟苷的含量测定[J].药物
研究,2011,20(16)：24-25.
[3] 刘玉魁,郭迎霞,赵作连,等.药用芦荟中芦荟苷的提取分离及含量测
定[J].医药导报,2007,26(4)：413-414.
[4] 高钧,毕开顺,王玺,等.高效液相色谱法测定芦荟中芦荟苷的含量[J].
药物分析杂志,2001,21(6)：387-389.
[5] 付银龙,钱和.芦荟苷的提取与检测[J].江苏食品与发酵,2002,9(2)：
24-27.
[6] 李汝雄.绿色溶剂——离子液体的合成与应用[M].北京：化学工业出
版社,2004：10-20.
[7] 张锁江,吕兴梅.离子液体——从基础研究到工业应用[M].北京：科学
出版社,2006：265.
[8] 邱洪灯,胡云雁,刘霞,等.离子液体在色谱中的应用[J].色谱,2007,
25(3)：293-297.
(收稿日期：2013-05-21,编辑：陈静)