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从蓖麻子、相思子和洋刀豆中分离抗肿瘤活性的蛋白质



全 文 :样品进行前处理 。
c一 A MP 的测定方法如前已 述 , 测定 结
果 : 葛根汤 , 麦门冬汤 , 小柴胡汤都具有增
加细胞内 c 一 A M P的作用 . 因该方 剂中含 有
大枣 . 而小青龙汤等各方剂则未 见 有 此 作
用 , 因这些方剂中均不含有大枣 。
〔第 12 次和汉药会议论文 , 1 9 7 9 卢长庆译
王德福校 〕

1 2
. 从宜麻子 、 相思子和洋刀豆中分离
抗肿右活性的蛋白质
本文报道了从蓖麻子 ( R i e i n u s e o m m -
u n i s和相思子 ( A b r u s p r a e 。 a t o r i u s )中分
离出低分子量 ( 2 0 0 0 一 2 0 0 0 0 ) 的蛋白质 ; 从洋
刀豆 (C a n a v a l i a e n s i f o r m i s )中得到一种高
分子量蛋白质 。 它们对小鼠 艾氏癌和肉 瘤 -
1 8 0均具有明显抑制作用 . 尤其蓖麻子 中 所
分离的蛋白质 R o 4 13 , 与蓖麻毒蛋 白 ( R ic in )
具有相同的抗肿瘤活性 ,但毒性约低 1 0 0 倍 。
经 园盘 电泳再分离 , 得 9个组份 , 其中第 .4
6和 7组份是抗肿瘤活性部份 。 三种蛋白质分
离方法如下 :
从蓖麻子分离低分子蛋白质 R o 4 13
取 7 10 克脱脂的蓖麻 子 粉 , 用食盐水液
提取 , 提取液加硫酸钱沉淀 , 得 26 克蓖麻毒
蛋 白粗品 。 将两份30 0毫克 上述 粗品 , 分别
溶于 8 0 。毫升蒸馏 水中 , 置于两个 4 0 毫升
人二 ic o n 超滤分离槽中 , 以 3 . 5公斤 /厘米 2压
力的氮气 , 使通过 PM 30 一 D i af lo 超滤膜 , 室
温处理 48 小时 . 滤 液流入 2一 1一 A m i c o n 超滤
槽中 , 经 U M Z D i a f l o 膜 , 按上法浓集 , 冷冻
干燥 , 得 15 0 ~ 180 毫克白色疏松易溶于 水 的
粉末 , 本品由柑种氨基酸组成 ; 谷氨酸 含 量
最高 , 但不含色氨酸 .
R 0 4 13 的制备量园盘 电泳分离
用 14根聚丙烯酞氨园盘电泳凝胶柱 , 每
柱加入 2 0 毫克样品 . 样品胶 ( p H 6 . 7 ) 2厘米
长 , 电流 5毫安 , 隔层胶 ( p H 6 . 9 ) 2厘米长 ,
电流 15 毫安 , 分 离胶 ( p H S . 9 ) 3 . 5 厘米长 .
以 p H S . 3 的 T r i s 一甘氨酸缓冲液为 电极缓冲
液 . 在 p H g . 5时进行电泳分 离 . 共得9个色
带 , 并 以 p H S . 9 T r i s 一 H C I缓冲液洗脱 , 流
速为2 . 5毫升 /分钟 .
在 2 80 毫微米紫外线下检 测 , 合并相同
组份 , 经 5’ C蒸馏水 透 析 , 得 7 75 毫 克 。
其中第4主要组份由14 种氨基酸组 成 , 与 R O
41 3比较 , 不 含 苏 氨 酸 、 脯氨酸 、 一苯丙氨
酸 。
按上述方法 , 从相思子中先分离出相思
豆毒蛋 白 ( A b r i n , 收率 0 . 63 肠 ) , 经超滤膜分
离 , 再经园盘 电泳 , 得 14 个组份 。 其中第 3
和 4两大部份 , 具有抗肿瘤作 用 。 从洋刀豆
中 , 用硫酸按沉出蛋白质 , 经 S e p h a d e x 一 G

50 凝胶过滤 , 分离出高分子量蛋白质 。
分离蛋白质的抗肿瘤实验
以艾 氏癌 、 肉瘤一 1 8 0为模型 ,取各蛋白质
L D
。 。的 l 八。量 ( 0 . 0 2毫升~ 0 . 2毫升 ) 腹腔或
肌注给 20 一 2 克小鼠 , 按一 般 方 法 观察荷
瘤鼠的生命延长时间或肿瘤生长的大小 . 但
所分离蛋白质对义田肉瘤 等 5种 肿瘤模型无
作用 。
〔 R o o s O 等 : A r z o e i rn F o r s e h . 3 0 ( z )
5 : 7 5 9
,
1 9 8 0 (德文 )姚乾元摘 〕
1 1 3
. 人参抗脂质分解成分的制备
作者根据胰岛素能强烈抑制肾上腺素诱
导的离体脂肪细胞的脂质分解作用的实验方
法来研究人参水提物的作用 , 并分得 了一个
具有抗脂质分解活性的多肤 。
离体脂肪细胞的脂质分解 : 按 R o d be n
方法从大鼠附肇组织里分离出脂肪细胞 。 0 . 5
毫升脂肪细胞悬浮液 (大约有 10 万个脂肪细
胞 , 相当于 2 0 毫克脂肪 组织 ) 和。 . 1毫升人
参各纯化阶段的提取物 , l毫克胰蛋白酶抑制
物 , 0 . 5毫升 含 有 5 帕A hi b m in 的 p H 了 . 4的
K r e b s

R in g er 磷酸盐缓冲溶液及 1微克的肾
上腺素混合 , 在 3 7 . C孵化二小时 , 最终体积
为 1 . 3毫升 、 然后加入 5毫升 D ol e 氏萃取混合
物 , 释放出的游离脂肪酸用 D ol e 氏方法进行
测定 。 人参提取物抗肾上腺素诱导的脂肪细
19习1年第 2 卷第 3 期