全 文 ： ·1020· Chin J Mod Appl Pharm, 2016 August, Vol.33 No.8 中国现代应用药学 2016 年 8 月第 33 卷第 8 期
的研究和表征难度很大。中药指纹图谱能够较为
全面地反映中药化学成分的种类与含量。以中药
指纹图谱为基础，以药效学为主要内容，应用生
物信息学方法，建立中药指纹图谱与其药效的关
系，是揭示中药药效物质基础及评价中药质量的
有效手段之一。MIR 指纹图谱能够更为全面地反
映中药所有组分的整体信息，是中药无损定性鉴
别、定性定量分析、质量控制及中药优化等研究
的快速和有效手段[12-15]。本研究所建立的模型可
为红芪的鉴别提供参考依据。
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收稿日期：2015-12-16




荔枝草的质量标准建立与探讨

栾洁，魏晓舒，丁晴(江苏省无锡药品检验所，江苏 无锡 214028)

摘要：目的 完善中药材荔枝草的质量标准。方法 采用显微鉴别、薄层鉴别、水分、总灰分、浸出物、含量测定等项
目对荔枝草的质量进行考察。结果 荔枝草显微鉴别特征明显；薄层鉴别斑点清晰，易于识别；质量标准为：水分≤12.0%，
总灰分≤10.0%，醇溶性浸出物≥20.0%；含量测定原儿茶酸在 1.068~106.8 μg·mL1 内呈良好的线性关系(r=0.999 7)，其
含量≥70 μg·g1。结论 荔枝草药材的显微鉴别、薄层鉴别、水分、总灰分、浸出物、含量测定研究可为该药材质量标
准的修订、提高提供参考依据。
关键词：荔枝草；质量标准；显微鉴别；薄层鉴别；高效液相色谱法
中图分类号：R284.1 文献标志码：B 文章编号：1007-7693(2016)08-1020-05
DOI: 10.13748/j.cnki.issn1007-7693.2016.08.014


作者简介：栾洁，女，主管中药师 Tel: 13656186608 E-mail: llmj1981@sina.com
中国现代应用药学 2016 年 8 月第 33 卷第 8 期 Chin J Mod Appl Pharm, 2016 August, Vol.33 No.8 ·1021·
Establishment and Study on the Quality Standard of Salvia Plebeia

LUAN Jie, WEI Xiaoshu, DING Qing(Jiangsu Province Wuxi Institute For Drug Control, Wuxi 214028, China)

ABSTRACT: OBJECTIVE To improve the quality standard of Salvia plebeia. METHODS By microscopic identification,
TLC, moisture, total ash, content determination and so on to examine the Salvia plebeia. RESULTS Microscopic identification
features were obvious; TLC were clear and easy to recognize; the moisture of Salvia plebeia was ≤12.0%, the total ash was≤
10.0%, the dilute ethanol extract was ≥20.0%; protocatechuic acid showed a good linearity at 1.068106.8 µg·mL1, its content
shall ≥70 μg·g1. CONCLUSION The results might be used as important indicators for the quality standard of Salvia plebeia.
KEY WORDS: Salvia plebeia; quality standard; microscopic identification; TLC; HPLC

荔枝草为唇形科植物荔枝草 Salvia plebeia R.
Br.的干燥全草，又名雪见草、蛤蟆草等，主产于
我国江苏、浙江、安徽等地[1]，临床应用广泛[2]。
荔枝草始载于《本草纲目》草部杂草类，谓其性
凉，味苦、辛，具有清热解毒、凉血利尿之功效，
主要用于咽喉肿痛、支气管炎、肾炎水肿等症。
在江苏省内，民间常将此药泡水饮用，以治疗扁
桃体炎和支气管炎等症，疗效显著。经调查，江
苏省内销售使用的荔枝草药材主要产自于江苏、
安徽、浙江省，其中江苏产的药材占市场销售的
大部分，其在江苏省的现行质量标准为《江苏省
中药材标准》(1989 年版)，项目设置仅有性状、鉴
别(显微鉴别和化学反应)。鉴于近几年来江苏省内
荔枝草药材的使用频率日趋增加，其现行质量标
准检查项目设置过于简单，检验手段过于单调，
导致其质量标准不适应当下的检验需求，故本实
验以荔枝草药材作为研究对象，对江苏省内销售
的 3 个产地(江苏、安徽、浙江)共 10 批药材进行
了检测方法探讨，增加了水分、总灰分、浸出物
项目；根据文献资料，探讨了荔枝草药材中咖啡
酸[3]的薄层色谱鉴别、原儿茶酸的含量测定，以期
进一步完善该品种的标准，更好的控制荔枝草药
材的质量。
1 仪器与材料
1.1 药材
荔枝草药材从产地直接收集，经江苏省食品
药品监督检验研究院中药室胡浩彬主任鉴定为唇
形科植物荔枝草 Salvia plebeia R. Br.的干燥全草。
各样品编号和产地、批号见表 1。
1.2 仪器与试剂
Waters 2695 高效液相色谱仪(美国 Waters 公
司，包括 1525 四元泵、自动进样器、2998 二极管
阵列检测器、Empower 工作站)；XS 205 电子天
平(瑞士 Mettler Toledo 公司)；BX 51 系统显微镜
(日本 OLYMPUS 公司)；DP 72 显微成像系统(日本
OLYMPUS 公司)；CAMAG 薄层色谱系统(包括
ATS-4 全自动点样仪、TLC 成像系统，瑞士
CAMAG 公司)。
表 1 荔枝草样品来源
Tab.1 Sample source
样品
编号 产地 批号
样品
编号 产地 批号
1 江苏 20130301 6 安徽 20140102
2 江苏 20130606 7 安徽 20140105
3 江苏 201309063 8 浙江 20130212
4 江苏 20140321 9 浙江 20130709
5 安徽 20130319 10 浙江 20140117
咖啡酸对照品(中国食品药品检定研究院，批
号：110885-200102，纯度：100%)；原儿茶酸对
照品(中国食品药品检定研究院；批号：110809-
201205，纯度：99.9%)；甲醇(色谱纯，德国 Merk
公司)，水为超纯水，其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 鉴别
2.1.1 显微鉴别 茎横切面：表皮细胞 1 列，外
壁具乳头状突起，被角质层。非腺毛 1~4 细胞，
具疣状突起。腺毛头部单细胞，柄单细胞；腺鳞
头部 4 细胞，柄单细胞。茎的四棱处表皮内侧有
厚壁细胞组成的厚角组织。皮层较窄，内皮层不
明显。中柱鞘纤维成束或散在，壁微木化，断续
排列成环。韧皮部较窄，形成层不明显。木质部
在四棱处发达。髓部常中空，由大型薄壁细胞组
成，有的具纹孔。结果见图 1。
观察本品粉末：粉末棕褐色；非腺毛众多，
2~5 细胞，长 32~282 µm，基部细胞较大，有的有
疣状突起；腺毛头部单细胞，椭圆形或圆形，柄
大多为单细胞，偶见多细胞；腺鳞众多，类圆形，
淡棕黄色或无色，4 个细胞，直径 23~230 μm。叶
上表皮细胞不规则多角形，垂周壁近平直，连珠
状增厚较明显；气孔直轴式；具非腺毛和小腺毛
及腺鳞。下表皮细胞垂周壁波状弯曲，气孔及腺
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鳞较多；表皮细胞垂周壁波状弯曲；导管易见，
大小不一；草酸钙方晶成片存在，直径 4~7 µm。
花粉粒少见，具 6 个萌发孔。结果见图 2。

图 1 荔枝草茎横切面图
1非腺毛；2表皮；3厚壁细胞；4皮层；5中柱鞘纤维；6韧皮部；
7形成层；8木质部；9髓部。
Fig. 1 Transverse section of the stem of Salvia plebeia
Herea
1non glandular hairs; 2epidermis; 3thick walled cell; 4the cortex
5middle column sheath fiber; 6phloem; 7cambium; 8xylem; 9pith.
2.1.2 薄层色谱鉴别 取本品粉末 2 g，加水
20 mL，水浴回流 30 min，滤过，滤液用乙酸乙酯
提取 2 次，每次 10 mL，合并提取液，蒸干，残渣
加甲醇 1 mL 使溶解，作为供试品溶液。取咖啡酸[5]
对照品，加甲醇制成每 1 mL 含 0.3 mg 的溶液，作
为对照品溶液(临用新配)。按薄层色谱法(中国药
典 2015 年版四部通则 502)试验，吸取上述 2 种溶
液各 5 µL，分别点于同一硅胶 G 薄层板上，以二
氯甲烷-甲醇-甲酸(9∶1∶0.5)为展开剂，预饱和
15 min，展开，取出，晾干，立即置紫外光灯(365 nm)
下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的
位置上，显相同颜色的荧光斑点，见图 3。
2.2 检查及浸出物
按中国药典 2015 年版四部通则对 10 批样品
进行水分、总灰分、浸出物及农药残留量测定，
结果见表 2~3。

图 2 荔枝草粉末显微特征
A腺毛和非腺毛；B腺鳞；C导管；D花粉粒；E叶上表皮细胞；F叶下表皮细胞；G草酸钙方晶；H草酸钙方晶(偏光)。
Fig. 2 Microscopic characteristic of the power of Salvia plebeia
Aglandular and non glandular hairs; Bgland scale; Ccatheter; Dpollen grain; Ecells of upper epidermis; Fcells of leaf epidermis; Gprisms of
calciumoxalate; Hprisms of calciumoxalate(polarized light).

图 3 荔枝草薄层色谱图
1咖啡酸对照品；2供试品(批号：20130301)；3供试品(批号：
20140321)；4供试品(批号：20130319)；5供试品(批号：20140117)。
Fig. 3 Thin layer chromatogram of Salvia plebeia
1caffeic acid; 2sample solution(batch number: 20130301); 3sample
solution(batch number: 20140321); 4sample solution(batch number:
20130319); 5sample solution(batch number: 20140117).
表 2 水分、总灰分、浸出物测定结果
Tab. 2 The determination results of moisture, total ash,
extract
样品
编号
水分/
%
总灰分/
%
浸出物/
%
样品
编号
水分/
%
总灰分/
%
浸出物/
%
1 11.10 8.40 23.91 6 10.85 7.93 24.87
2 10.05 7.23 25.63 7 10.02 8.56 23.73
3 10.79 8.21 26.31 8 9.46 8.37 26.49
4 10.80 8.11 24.28 9 10.70 7.83 25.41
5 10.12 8.35 25.64 10 9.54 7.91 22.63
2.3 原儿茶酸的含量测定
2.3.1 色谱条件 色谱柱：Lichrospher C18(250 mm×
4.6 mm，5 µm)；柱温：30 ℃；流动相：甲醇-0.1%
冰醋酸 (10：90)；检测波长：258 nm；流速：
1.0 mL·min1；进样量：10 µL。
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表 3 有机氯农药残留量测定结果
Tab. 3 The determination results of organochlorine pesticide residues ng·g1
样品编号
六六六(BHC) DDT
五氯硝基苯 α-BHC β-BHC γ-BHC δ-BHC PP-DDE PP-DDD OP-DDT PP-DDT
1 － 3.12 － － － － － － －
2 － － － － － － － 4.55 －
3 － 3.23 － － － － － － －
4 － － － 2.12 － － － － －
5 － － － － － 3.28 － － －
6 － － － － － － － － －
7 － － － － － － 4.33 － －
8 － 2.72 － － － － － － －
9 － － － － － － － 3.21 －
10 － － － － 4.25 － － － －

2.3.2 溶液的制备 ①对照品溶液的制备：精密
称取原儿茶酸对照品 10.68 mg，置 50 mL 量瓶中，
加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备
液。②供试品溶液的制备：取样品粉末(过三号筛)
约 4 g，精密称定，置 250 mL 锥形瓶中，精密加
水 100 mL，密塞，称定重量，加热回流 1 h，放冷
后，再称定重量，用水补足减失的重量，摇匀，
滤过，精密量取续滤液 25 mL，置分液漏斗中，用
稀盐酸调节 pH 值至 2，用乙酸乙酯提取 4 次，每
次 20 mL，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇使
溶解，置 10 mL 量瓶中，并用甲醇稀释至刻度，
作为供试品溶液。
2.3.3 专属性试验 在上述色谱条件下，原儿茶
酸峰形良好，供试品色谱中呈现与对照品保留时
间一致的色谱峰，样品中杂质不干扰样品测定，
见图 4。

图 4 高效液相色谱图
A对照品溶液；B供试品溶液；1原儿茶酸。
Fig. 4 HPLC chromatograms
Astandard solution; Bsample solution; 1protocatechuic acid.
2.3.4 线性关系考察 精密量取“2.3.2”项下对
照品储备液，用甲醇经适当比例稀释，分别配成
1.068，5.340，10.68，21.36，53.4，106.8 µg·mL1
的对照品溶液，按“2.3.1”项下色谱条件进行测
定，以原儿茶酸浓度(X，µg·mL1)为横坐标，峰面
积(Y)为纵坐标，进行线性回归。结果表明，原儿
茶酸浓度在 1.068~106.8 µg·mL1 内呈良好线性关
系，回归方程为 Y=3.643×103X+2.222×103 ，
r=0.999 7。
2.3.5 仪器精密度试验 精密量取对照品溶液(浓
度为 10.68 µg·mL1)10 μL，按“2.3.1”项下色谱
条件重复进样 6 次，测得原儿茶酸的 RSD 为 0.6%，
表明本方法仪器精密度良好。
2.3.6 重复性试验 取同一批样品(批号：20140321)
6 份，精密称定，按“2.3.2”项下方法制备供试品
溶液和“2.3.1”项下色谱条件进行测定，结果含
量分别为 90.9，89.7，89.1，88.9，89.4，91.2 µg·g1，
RSD 为 1.1%，结果表明本方法重复性良好。
2.3.7 检测限和定量限 将对照品储备液用甲醇
进行多次稀释，测定并计算。信噪比为 10 时，定
量限为 0.106 8 µg·mL1，信噪比为 3 时，检测限
为 0.032 0 µg·mL1。
2.3.8 稳定性试验 取供试品溶液 (批号：
20140321)，按“2.3.1”项下色谱条件分别在溶液
制备后的 0，2，4，8，12，24 h 进行测定，以峰
面积计算，原儿茶酸的 RSD 为 0.8%，结果表明供
试品溶液在 24 h 内稳定。
2.3.9 加样回收率试验 精密称取已知含量的同
一批号样品(批号：20140321)9 份，每份约 2.0 g，
置 250 mL 锥形瓶中，分别以低、中、高浓度加入
原儿茶酸对照品储备液适量，按“2.3.2”项下方
·1024· Chin J Mod Appl Pharm, 2016 August, Vol.33 No.8 中国现代应用药学 2016 年 8 月第 33 卷第 8 期
法操作，制备供试品溶液，按“2.3.1”项下色谱
条件分别进样 10 μL，计算回收率，结果见表 4。
表 4 回收率试验结果(n=9)
Tab. 4 Results of recovery tests(n=9)
取样量/
g
样品
含量/mg
加入量/
mg
测得量/
mg
回收率/
%
平均回
收率/%
RSD/
%
2.001 0 0.179 9 0.128 2 0.305 4 97.89
98.1 1.0
2.012 4 0.180 9 0.128 2 0.308 3 99.38
2.004 1 0.180 2 0.128 2 0.306 1 98.21
2.002 4 0.180 0 0.170 9 0.346 7 97.54
2.017 6 0.181 4 0.170 9 0.351 2 99.36
2.007 8 0.180 5 0.170 9 0.350 1 99.24
2.009 5 0.180 7 0.213 6 0.389 7 97.85
2.012 0 0.180 9 0.213 6 0.388 2 97.05
2.000 4 0.179 8 0.213 6 0.386 6 96.82
2.3.10 样品含量的测定 取表 1 中 10 批荔枝草样
品各 3 份，按“2.3.2”项下方法制备供试品溶液，
注入高效液相色谱仪进行含量测定，结果见表 5。
表 5 样品含量测定结果(n=3)
Tab. 5 Results of content determination of samples(n=3)
样品
编号 批号
含量/
µg·g1
样品
编号 批号
含量/
µg·g1
1 20130301 87.4 6 20140102 91.3
2 20130606 84.2 7 20140105 85.7
3 201309063 86.6 8 20130212 84.9
4 20140321 89.9 9 20130709 92.9
5 20130319 88.9 10 20140117 89.1
3 讨论
在薄层色谱中，样品的提取过程曾对不同溶
剂(5%甲酸的甲醇、甲醇、水)、不同提取方式(水
浴加热回流 30 min、水浴加热回流 60 min)、不同
取样量(1，2 g)、不同点样量(2，5，10 µL)以及供
试品溶液稳定性(0，2，4，6 h)进行考察，实验表
明采用水为溶剂水浴回流，乙酸乙酯萃取所得的
薄层斑点清晰、一致。对不同展开系统[乙酸丁酯-
甲酸-水(15∶5∶5)的上层溶液、三氯甲烷-甲醇
(9∶1)、乙酸乙酯-甲酸(9∶1)、二氯甲烷-甲醇-甲
酸(9∶1∶0.5)]、不同薄层板(默克产硅胶 G 预制薄
层板、青岛海洋厂产硅胶 G 预制薄层板、自制硅
胶 G 薄层板)也进行了考察，实验表明本实验建立
的薄层色谱条件重现性好，分离效能高。
浸出物测定分别以水、70%乙醇、稀乙醇作为
浸出溶剂，并分别以冷浸法、热浸法对浸出结果
进行比较，结果表明采用热浸法，以稀乙醇为溶
剂，得到的浸出物量最高。
含量测定中，实验初期曾选择甲醇-0.1%磷酸
溶液(15∶85)[4]、乙腈-0.1%磷酸水溶液(5∶95)[5]、
甲醇-水-冰醋酸(25∶75∶0.2)[6]、甲醇-0.1%冰醋酸
(10∶90)系统，结果表明，当使用甲醇-0.1%冰醋
酸(10∶90)系统时，原儿茶酸峰形良好，供试品主
峰能与杂质峰得到基线分离，故选用甲醇-0.1%冰
醋酸(10:90)系统为流动相。根据原儿茶酸的特性，
对同一批号样品曾选用乙醇作为溶剂提取，但产
物成分较为复杂，HPLC 色谱峰型较乱；之后试过
用甲醇、50%甲醇、乙酸乙酯、水为溶剂加热回流，
酸化用乙酸乙酯、氯仿作为萃取溶剂，结果表明，
用水作为提取溶剂回流样品，酸化用乙酸乙酯分离
提取水溶液，将乙酸乙酯蒸干后用甲醇定容至刻度
所得的样品提取效果最佳，且样品的回收率良好。
采用本研究建立的分析方法，对 10 批样品进
行测定，显微鉴别特征明显，薄层鉴别斑点清晰，
水分测定值为 9.46%~11.10%，均值为 10.3%；总
灰分测定值为 7.23%~8.56%，均值为 8.1%；浸出
物测定值为 22.63%~26.31%，均值为 24.9%；9 种
有机氯农药残留量均低于中国药典 2015 年版(一
部)中相关品种规定的限度值(原儿茶酸含量测定结
果为 84.2~92.9 µg·g1，均值为 88.1 µg·g1)。荔枝草
样品的水分、灰分、浸出物、原儿茶酸含量测定结
果有一定的差异，这与样品的栽种、采收、加工、
贮藏条件有一定的关系；但总体来说 3 个产地 10
批样品质量较稳定，测定数据较集中。故建议荔枝
草水分应≤12.0%，总灰分应≤10.0%，浸出物应≥
20.0%，原儿茶酸含量应≥70 µg·g1。本研究首次
探讨了中药材荔枝草中原儿茶酸的含量测定方法，
为完善荔枝草的质量标准提供了依据。
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收稿日期：2016-01-15