全 文 ：HPLC 法测定内蒙古地产蒙药材
扁蕾(哈日-特木日-地格达)中龙胆苦苷的含量
内蒙古医学院附属人民医院(010020)　刘玉丽
内蒙古自治区药品检验所(010020)　　白　炜
关键词:扁蕾;龙胆苦苷;高效液相色谱法
中图分类号:R291.2　文献标识码:A　文章编号:1006-6810(2007)05-0043-02
　　扁蕾(哈日-特木日-地格达)为龙胆科植物扁蕾 Gen-
tianopsis barbata(Froel.)Ma的干燥全草。 收载于《中华人民
共和国卫生部药品标准》蒙药分册〔1〕。性味苦 、寒 、钝 、糙 、
轻 、燥 ,具有平息“协日” , 清热 , 愈伤之功效 , 蒙医多用于治
疗“协日”引起的头痛 , “协日”热 , 中暑 , 黄疸 , 肝热 , 伤热等
症。据文献报道〔2〕 , 其主要活性化学成分为龙胆苦苷。本
文对其进行含量测定的试验摸索。试验所用的样品采自阿
拉善盟和伊克昭盟 , 经内蒙古自治区药品检验所蒙药室康
双龙主任药师鉴定为蒙医常用药材。参照有关文献〔3〕 , 建
立高效液相色谱法测定本品中龙胆苦苷含量的方法 , 具有
分离效果好 、灵敏 、准确等优点。
1　仪器与试药
1.1　仪器:美国 Alltech 高效液相色谱仪 , Alltech HPLC Pump
Model1626泵 , UVITS-201 型检测器 , SCL-10AVP 色谱工作
站;UV-250 紫外-可见分光光度仪 , KQ-3200DB 型数控
超声清洗器。
1.2　试剂:甲醇 、乙腈为色谱纯 , 水为重蒸馏水。
1.3　对照品:龙胆苦苷为中国药品生物制品检定所提供
(批号:0770-200106 供含量测定用)。
2　色谱条件
2.1　色谱柱:美国 Alltech RP-C18 色谱柱(规格:250mm×
4.6mm , 5μm), ODS 预柱。
2.2　检测波长的选择:取龙胆苦苷对照溶液 , 在 200 ～
400nm 波长范围内进行光谱扫描 ,龙胆苦苷在 254nm 处有最
大吸收 ,故确定检测波长为 254nm。
2.3　流动相的选择:参照《中国药典》 2000 年版一部〔3〕“秦
艽”[含量测定] 项下方法 ,以甲醇-水(20:80)为流动相 , 供
试品主成分在与龙胆苦苷对照品峰相应的保留时间太长 ,
约为 34分钟 , 且峰形拖尾。经反复试验 , 将流动相中的有
机相甲醇改为乙腈 , 结果确证以乙腈-水(20:80)为流动
相 ,峰形理想 , 保留时间恰当 ,理论板数高于 5000 ,分离度大
于药典规定的 1.5 ,故选择流动相为乙腈-水(20:80)。
2.4　流速:0.8ml/ min;柱温 30℃。
2.5　对照品溶液的制备:精密称取龙胆苦苷对照品适量 ,
加甲醇制成每 1ml含 30μg 的溶液 ,摇匀 , 即得。
2.6　供试品溶液的制备:取样品 , 粉碎成细粉 , 取 0.5g , 精
密称定 ,置具塞锥形瓶中 , 加甲醇 70ml , 超声处理 20 分钟
(功率 120W , 频率 40KHz), 滤过 , 滤液置 100ml量瓶中 , 用甲
醇分次洗涤残渣和容器 ,洗液并入滤液中 , 加甲醇至刻度 ,
滤过 , 取续滤液 ,即得。
在选定的条件下 ,龙胆苦苷和供试品中其他组分色谱
峰可基线分离 ,龙胆苦苷与其相邻色谱峰的分离度大于 1.
5;按龙胆苦苷峰计算 , 理论塔板数(N)为 5000 以上。同时
取溶剂进样 ,结果表明 ,溶剂在与龙胆苦苷色谱峰相同的保
留时间处无对应峰干扰。对照品 、供试品与溶剂的 HPLC 图
谱见附图。
3　方法学考查
3.1　线性范围的考察:精密称取龙胆苦苷对照品 5.12mg ,
置 50ml量瓶中 ,加甲醇使溶解 , 并稀释至刻度 , 摇匀。精密
吸取 1、2 、3、4、5、6ml , 置 10ml量瓶中 ,加甲醇稀释至刻度 , 摇
432007年 5 月第 5 期　　　　　　　　　　　　　中国民族医药杂志　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　
DOI :10.16041/j.cnki.cn15-1175.2007.05.036
匀 ,分别精密吸取 10μl进样 ,按上述色谱条件测定。 以峰面
积积分值对进样量进行回归分析 , 结果龙胆苦苷在 0.01024
～ 0.06144μg范围内呈良好的线性关系 , 回归方程为 Y=
70129X+3657.7 , r=0.9998(Y为峰面积值 , X为进样量)。
3.2　精密度试验:精密吸取供试品溶液 10μl , 重复进样 6
次 ,测定供试品中龙胆苦苷峰面积积分值 , RSD=0.32%。
试验表明 ,精密度良好。
3.3　稳定性试验:取供试品溶液 ,分别于 0、2、4、6、8、12 小
时分别进样 10μl , 测得供试品中龙胆苦苷峰面积积分值 ,
RSD=0.50%。试验结果表明 , 供试品在 12 小时内稳定性
良好。
表 1　回收率试验结果
序号 取样量(g)
含量
(mg)
对照品
加入量
(mg)
测得
总量
(mg)
回收率
(%)
平均
回收率
(%)
RSD
(%)
1 0.3125 1.85 1.82 3.66 99.45
2 0.3056 1.80 1.82 3.60 98.90
3 0.3119 1.84 1.78 3.57 97.19 97.37 1.87
4 0.3012 1.78 1.59 3.31 96.23
5 0.3131 1.85 1.83 3.59 95.08
3.4　重复性试验:按拟定的含量测定方法 , 对同一批样品
分别制备供试品溶液 5 份 ,测得峰面积积分值并计算含量。
结果平均含量 5.92mg/g , RSD=0.74%。
3.5　回收率试验:取已知龙胆苦苷含量的样品(5.92mg/ g)5
份 ,每份0.30g , 精密称定 ,分别精密加入龙胆苦苷对照品适
量 ,按拟定的含量测定方法制备供试品溶液 ,测定每份的含
量。
　　试验结果表明 , 回收率在 95.08%～ 99.45%之间 , RSD
<2%, 加样回收良好。
3.6　样品含量测定:取本品 0.5g , 精密称定 , 按拟定的含量
测定方法制备供试品溶液 , 分别精密吸取对照品溶液(32.
5μg/ml)与供试品溶液各 10μl , 注入液相色谱仪 ,测定并计算
含量。阿拉善盟样品(n=3)平均含量为 5.80mg/g;伊克昭
盟样品(n=3)平均含量为 5.93mg/g 。
参考文献
〔1〕卫生部药典委员会.中华人民共和国卫生部药品标准.
蒙药分册〔S〕.36.
〔2〕四川医学院.中草药学〔M〕.人民卫生出版社 , 304.
〔3〕国家药典委员会.中国药典〔M〕.2005 年版第一部.化学
工业出版社 , 190.
2006 年 9月 19 日收稿
RP-HPLC 法测定祖卡木颗粒中吗啡的含量
内蒙古自治区医院(010017)　　　　赵生生慧
内蒙古药品检验所(010020)　　　　齐曼丽
内蒙古大唐药业有限公司(010018)　刘德旺
摘　要:目的:提高药品质量标准。方法:采用反相高效液相色谱法测定该药中罂粟壳所含成分吗啡的含量。结果:吗啡在
0.02128 ～ 0.127681μg范围内呈良好的线性关系 , 回归方程为 Y=3E+06X-3408.3 , r=0.9998。结论:该方法操作简便 ,快捷 ,
结果准确 ,可靠。
关键词:反相高效液相色谱法;罂粟壳;吗啡;含量测定
中图分类号:R29　文献标识码:B　文章编号:1006-6810(2007)05-0044-02
　　祖卡木颗粒系传统维药 , 收载于《卫生部药品标准》维
吾尔分册〔1〕。由 10 味药组方 , 具调节异常气质 , 清热 , 发
汗 ,通窍之功效 , 临床上用于治疗感冒咳嗽 ,发热无汗 , 咽喉
肿痛 ,鼻塞流涕。因方中罂粟壳为毒性药材 , 吗啡为罂粟壳
的特征性有效成分且在本方中具有镇痛作用 , 为确保人民
用药安全有效 , 故建立吗啡含量限度测定方法。参照有关
文献〔2 , 3〕 , 采用高效液相色谱法测定其含量 , 具有分离效果
好 、灵敏 、准确等优点。
1　仪器 、试剂及药品
1.1　仪器:日本岛津高效液相色谱仪 , LC-10ATVP泵 , SPD
-10AVP 检测器 , SCL-10AVP 色谱工作站;UV-2401 紫外
-可见分光光度仪。
1.2　色谱条件:色谱柱:Kromasil C18 , 200mm×4.6mm , ODS
预柱;检测波长 220nm;流动相:乙腈-0.01mol/磷酸氢二钾
溶液-0.005mol/L 庚烷黄酸钠水溶液(20:40:40);流速:1.
0ml/min;柱温:30℃。
1.3　试剂:乙腈为色谱纯试剂 , 水为重蒸馏水 ,其他试剂均
为分析纯;对照品:吗啡为中国药品生物制品检定所所提供
(批号:171201-200318 供含量测定用)。样品来源:由内蒙
古大唐药业有限公司提供。
44　　　　　　　　　　　　　　　　　中国民族医药杂志　　　　　　　　　　　　　2007 年 5月第 5 期