全 文 ：• 424 • 中华中医药杂志(原中国医药学报)2015年2月第30卷第2期 CJTCMP , February 2015, Vol . 30, No. 2
分清肾茶片对细菌致大鼠慢性前列腺炎的治疗
作用及对TNF-α、IFN-γ的影响
杨琦1,2，张建军2，李伟2，王淳2，王丽丽2，李艳霞2，朱映黎2
（1北京市中西医结合医院，北京 100039；2北京中医药大学，北京 100029）
摘要：目的：研究分清肾茶片对慢性前列腺炎的治疗作用及其作用机制。方法：采用大肠杆菌直接注射的
方法制备大鼠慢性前列腺炎模型，以大鼠前列腺组织的病理形态、白细胞数量、卵磷脂小体密度、前列腺组织中
肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和γ干扰素（IFN-γ）的表达为检测指标，观察分清肾茶片对模型大鼠的作用和影
响。结果：分清肾茶片能明显改善细菌刺激所诱发大鼠前列腺病理形态的变化，显著减少大鼠前列腺组织中的白
细胞数量，明显提高卵磷脂小体密度，显著降低大鼠前列腺组织中TNF-α和IFN-γ的阳性表达。结论：分清肾茶
片对细菌刺激引起的大鼠慢性前列腺炎有明显的治疗作用，其机制可能与分清肾茶片降低前列腺组织中细胞因子
TNF-α、IFN-γ含量，减轻TNF-α、IFN-γ介导的多种炎性因子激活效应，从而抑制炎性反应有关。
关键词：分清肾茶片；慢性前列腺炎；肿瘤坏死因子-α;γ干扰素
Effects of Fenqing Shencha Tablets on the expression of TNF-α, IFN-γ and its therapeutic
effect in chronic prostatitis rats caused by bacterium
YANG Qi1,2, ZHANG Jian-jun2, LI Wei2, WANG Chun2, WANG Li-li2, LI Yan-xia2, ZHU Ying-li2
( 1Beijing Hospital of Traditional Chinese and Western Medicine, Beijing 100039, China; 2Beijing University of
Chinese Medicine, Beijing 100029, China )
Abstract: Objective: To investigate the therapeutic effect of Fenqing Shencha Tablets on chronic prostatitis in rats and
the possible mechanisms of anti-inflammatory. Methods: The chronic prostatitis model was established by injecting escherichia
coli into the prostate of rats. The pathological morphology, blood cells, the density of lecithin corpuscle in prostate tissue, the
expression of TNF-α and IFN-γ were detected as indexes. And the effect and influence of Fenqing Shencha Tablets in prostatitis
were observed. Results: Fenqing Shencha Tablets had significant effects on improving the prostate pathological changes,
decreasing the number of white blood cells, increasing the density of lecithin corpuscle and reducing the expression of TNF-α
and IFN-γ in prostate tissue. Conclusion: Fenqing Shencha Tablets have a significant therapeutic effect on chronic prostatitis in
rats caused by bacterium. The possible mechanism of Fenqing Shencha Tablets may be related to reducing the content of TNF-α
and IFN-γ, which relieves the activation effect of inflammatory mediator to suppress inflammation.
Key words: Fenqing Shencha Tablets; Chronic prostatitis; Tumor necrosis factor-α; Interferon-γ
·论著·
通讯作者：张建军，北京市朝阳区北三环东路11号北京中医药大学，邮编：100029，电话：010-64286993，E-mail：zhangjianjun@mail.bucm.edu.cn
慢性前列腺炎是男科、泌尿外科的常见病、多发
病，病因复杂，病程迁延易反复发作。炎症作为前列
腺炎最重要的病理表现，能够引发下腹及会阴部位
疼痛不适，尿频、尿急、尿痛、尿道滴白等症状，病
情严重者可导致性功能障碍、不育等并发症，该病临
床治疗效果不佳，患者心理负担过重，生活质量严重
下降。目前慢性前列腺炎病因病机尚未完全明确，许
多研究显示可能与前列腺局部细胞因子异常表达有
关。分清肾茶方是在中医学理论指导下，结合临床医
师多年经验组方而成，功善清热解毒利湿，理气活血
化瘀，临床用于治疗湿热下注，气滞血瘀型慢性前列
腺炎，具有显著疗效。分清肾茶是以分清肾茶方为组
方基础，经现代制剂工艺研制而成的中药复方制剂。
本实验研究以细菌直接注射大鼠前列腺致炎的方法，
制备大鼠慢性前列腺炎模型，观察实验大鼠前列腺组
织病变改善情况、前列腺组织中细胞因子肿瘤坏死-α
（TNF-α）和γ干扰素（IFN-γ）表达，验证分清肾茶
片对前列腺炎的治疗效果并探讨其作用机制。
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材料
1. 动物 清洁级健康雄性Wistar大鼠，体质量
180-200g，由北京维通利华有限公司提供，许可证编
号：SCXK（京）2012-0001。
2. 药物 受试药：分清肾茶片，厦门中药厂有限
公司提供，批号：110202-B，含4.55g生药/g，由苦参
3.75g、肾茶2.50g、土茯苓3.75g、川牛膝2.50g、丹参
2.50g、延胡索2.50g组成，苦参、丹参乙醇提取，肾
茶、土茯苓、川牛膝水煎煮提取，加入适宜辅料制成
片剂。对照药：前列泰片（由甘肃河西制药有限公司
生产，批号：110201）。
3. 器械 注射器、手术剪、眼科镊、止血钳、持
针器，1＃手术丝线、缝合针、无菌手套、药用棉、大
鼠灌胃针、棉签、光学显微镜、白细胞计数板、载玻
片、盖玻片等。
4 . 主 要试 剂 标准 质 控 菌株：大 肠埃希菌
ATCC25922（购置于中国普通微生物保藏中心，菌种
编号为：1.2340），用前置37℃培养箱内培养18h，用
无菌0.9%氯化钠溶液采用比浊法配制为1.5×107cfu/
mL浓度菌液待用（由北京中医药大学微生物实验室
配制）；TNF-α免疫组化一抗（北京博奥森生物技术
有限公司提供，货号：bs-2081R）；IFN-γ免疫组化一
抗（北京博奥森生物技术有限公司提供，货号：bs-
0480R）；兔一步超敏（即用型）检测试剂盒（北京西
雅金桥生物技术有限公司提供，货号：PO-7001）。
方法
1. 分组 动物适应性喂养1周后随机分为空白对
照组和模型组，手术造模2周经模型验证成功后，模
型组按体质量重新分为5组，即模型对照组、前列泰
片组、分清肾茶片高、中、低剂量组。
2. 造模 参考文献[1]方法，大鼠驯养1周后，
10%水合氯醛（3.5mL/kg）腹腔注射麻醉，用75%酒
精消毒大鼠腹部皮肤后，在大鼠下腹正中切开1个
0.5-1cm左右的切口，切开腹壁和腹膜，暴露前列腺，
模型对照组于前列腺背叶两侧各注入1.5×107cfu/mL
浓度大肠埃希菌0.1mL，空白对照组大鼠用同种方法
相同部位注射同等剂量0.9%氯化钠溶液，注射后复
位前列腺，逐层缝合腹壁肌肉和皮肤后放回鼠笼，自
由饮食。
3. 模型验证 手术造模2周后，随机抽取空白对
照组3只，模型对照组15只，共18只大鼠，麻醉后剥离
前列腺，用10%甲醛溶液固定后制作病理切片和HE
染色，验证慢性前列腺炎模型是否成功。
4. 给药 2周后模型成功，模型对照组大鼠重新
分组后开始灌胃给药，空白对照组和模型对照组均
灌服溶剂（0.5%CMCNa溶剂），其他各组分别灌服
前列泰片水溶液0.88g/kg（相当于60kg成人临床剂量
的8倍）、分清肾茶片提取物水溶液1.32、0.66、0.33g/
kg，各组均按1mL/100g体质量灌胃，每日1次，连续治
疗4周后，取材。
5. 指标观察
5.1 大鼠前列腺组织病理形态 剪取大鼠部分
前列腺用10%多聚甲醛固定，常规脱水，二甲苯透
明，石蜡包埋，切片，HE染色。光学显微镜下观察大
鼠前列腺腺体管腔形态、腺体分泌物、上皮变性坏
死、前列腺间质炎性细胞浸润和纤维组织增生5项病
理形态变化情况。
病理分级标准：按照前列腺腺体病变情况，各项
形态学变化均分为4级：0级为正常形态，记作0分；Ⅰ
级为轻度病变，记作1分；Ⅱ级为中度病变，记作2分；
Ⅲ级为重度病变，记作3分。其中由于炎细胞浸润是
前列腺炎最为重要的病理表现，因此在分级评分中
给予双倍权重，即0、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级评分分别为0、2、4、
6分。最后将各项病理改变评分之和作为总体评分。
5.2 大鼠前列腺中白细胞数量和卵磷脂小体密
度 参考文献[2-3]方法测定。白细胞数量计数：用
电子天平称取大鼠相同部位的部分前列腺组织，按
4μL/mg加无菌0.9%氯化钠溶液研磨，制成匀浆液。
准确吸取0.02mL匀浆液，加白细胞稀释液0.78mL，充
分混匀后，用微量移液器吸取10μL混合液滴致白细
胞计数池中，静置2-3min后，显微镜下计数四角4个
大方格内的白细胞总数。白细胞数/μL=4个大方格内
白细胞数/4×稀释倍数×10（÷4表示0.1mm3内白细胞
均数，×10表示1mm3内白细胞均数）；各组大鼠前列
腺卵磷脂小体密度观察：取10μL匀浆液涂片，镜下
观察卵磷脂小体密度，并按临床标准分级：4级：卵
磷脂小体满视野；3级：卵磷脂小体3/4视野；2级：卵
磷脂小体1/2视野；1级：卵磷脂小体1/4视野。
5.3 大鼠前列腺组织中TNF-α和IFN-γ表达 采
用免疫组化辣根酶（HRP）标记抗体的的方法检测
各组大鼠前列腺组织中的TNF-α和IFN-γ的阳性表
达。显微成像系统中拍片，每剂量组显色组织切片40
倍物镜，10倍目镜下随机选取8个视野进行拍照存
档，测量时使用Image-Pro Plus进行图像分析，以前列
腺组织阳性呈色区域IOD和Area为有效测量指标计
算平均光密度值，平均光密度值=IOD/Area。
5.4 统计学方法 运用SPSS 16.0进行统计分
析，其中符合正态分布的计量资料运用方差分析检
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验，以x-±s表示；等级资料及不符合正态分布的计量
资料采用非参数检验方法，以Mean Ranks表示。以P
＜0.05为差异有统计学意义。
结果
1. 模型验证结果 病理切片和HE染色后，分
别对空白对照组、模型对照组大鼠进行病理形态观
察，结果如下：空白对照组大鼠前列腺腺腔皱襞发
达，管腔不规则，腺腔内有大量粉红色分泌物，间质
炎细胞少见，偶见少量纤维组织增生。与空白对照组
比较，模型对照组大鼠前列腺病理形态明显改变，
腺腔皱襞平滑甚至消失，有毛细血管出血现象，腺腔
内粉红色分泌物明显减少甚至消失，间质内可见大量
蓝色深染炎细胞浸润，纤维细胞增生明显，部分模型
组大鼠前列腺出现炎细胞团块样聚集现象，甚至出
现腺体实变。实验结果表明，手术造模2周后，细菌
致大鼠慢性前列腺炎模型成功。
2. 分清肾茶片对细菌致慢性前列腺炎大鼠前列
腺病理形态的影响 空白对照组大鼠前列腺腺体松
散分布，腺腔内可见大量粉染分泌物，间质疏松，纤
维量少（见图1A）。模型对照组大鼠腺体扩张挤压明
显，腺腔内大量炎细胞浸润，腺上皮变性、凋亡、脱
落、坏死均可见，间质充血水肿明显，炎细胞浸润，
多量纤维组织增生（见图1B）。各治疗组均能不同程
度改善模型大鼠前列腺病理形态学改变（见图1C-
F），各治疗组大鼠能显著性降低病理形态总体评分
（P<0.01，P<0.05）。结果见表1。
3. 分清肾茶片对细菌致慢性前列腺炎大鼠前列
腺组织中白细胞和卵磷脂小体的影响 见表2。分清
肾茶片高、中剂量能显著降低大鼠前列腺中白细胞
数，与模型对照组比，差异有统计学意义（P<0.05，
P<0.01）；各组间大鼠前列腺中卵磷脂小体密度分级
有明显差异（P＜0.05）。与模型对照组比较，分清肾
茶片高、中、低剂量组均能升高大鼠前列腺中的卵磷
脂小体含量。
表1 分清肾茶片对细菌致慢性前列腺炎大鼠前列腺病理形态的影响（n=10）
组别 剂量（g/kg） 管腔形态 管腔内容物 上皮变性坏死 炎细胞浸润 纤维组织增生 总分（x-±s）
空白对照组 - 0.0 0.0 0.0 0.4 0.0 0.40±0.84
模型对照组 - 1.6 1.6 1.0 4.0 1.3 9.50±1.43**
前列泰片组 0.88 1.4 1.3 0.7 2.8 0.7 6.90±1.45**
分清肾茶片高剂量组 1.32 1.4 1.5 0.7 3.0 0.4 7.00±1.41△△
分清肾茶片中剂量组 0.66 1.5 1.4 0.8 2.2 0.5 6.40±1.78△△
分清肾茶片低剂量组 0.33 1.5 1.5 0.8 3.2 0.6 7.60±7.63△
注：与空白对照组比较，**P<0.01；与模型对照组比较，△P<0.05，△△P<0.01。下表同。
表2 分清肾茶片对细菌致慢性前列腺炎大鼠前列腺组织白细胞和卵磷脂小体的影响（n=10）
组别 剂量（g/kg）
白细胞数目
（x-±s，μL）
卵磷脂小体密度分级
Mean Ranks P值
+ ++ +++ ++++
空白对照组 - 14 570.00±3 321.66 1 0 2 7 39.20 0.041
模型对照组 - 23 480.00±6 730.82** 4 2 3 1 16.95
前列泰片组 0.88 17 570.00±7 967.02△ 1 1 4 4 31.15
分清肾茶片高剂量组 1.32 18 110.00±4 743.99△ 2 0 3 5 32.65
分清肾茶片中剂量组 0.66 16 370.00±3 811.98△△ 0 2 2 6 36.40
分清肾茶片低剂量组 0.33 20 760.00±6 801.01 1 1 6 2 26.25
A B
C D
E F
图1 各组大鼠前列腺病理切片图（HE×100）
注：A.空白对照组；B.模型对照组；C.前列泰片组；D.分清肾茶
片高剂量组；E.分清肾茶片中剂量组；F.分清肾茶片低剂量组。
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4. 分清肾茶片对细菌致慢性前列腺炎大鼠前列
腺组织中TNF-α和IFN-γ的影响 见表3。与模型对
照组比较，分清肾茶片高、中、低剂量组均能极显著
降低大鼠前列腺中TNF-α光密度值（P<0.01）；分清
肾茶片高剂量组能显著降低大鼠前列腺中IFN-γ光
密度值（P<0.01）。与前列泰片组相比，分清肾茶片高
剂量组能够显著降低大鼠前列腺中TNF-α光密度值
（P<0.05）。
表3 分清肾茶片对细菌致慢性前列腺炎大鼠前列腺组织中
TNF-α和IFN-γ的影响（x-±s，n=8）
组别 剂量（g/kg） TNF-α平均光密度 IFN-γ平均光密度
空白对照组 - 0.042±0.010 0.085±0.049
模型对照组 - 0.177±0.035** 0.245±0.048**
前列泰片组 0.88 0.061±0.018△△ 0.199±0.047
分清肾茶片高剂量组 1.32 0.036±0.032△△▲ 0.155±0.065△△
分清肾茶片中剂量组 0.66 0.053±0.020△△ 0.201±0.049
分清肾茶片低剂量组 0.33 0.067±0.024△△ 0.233±0.051
注：与空白对照组比较，**P<0.01；与模型对照组比较，
△△P<0.01；与前列泰片组比较，▲P<0.05。
讨论
大肠杆菌是临床细菌性前列腺炎中最为常见的
致病菌，大肠杆菌作为外源性抗原长期刺激前列腺
组织，激活大鼠前列腺局部免疫系统引发炎性反应，
较大鼠前列腺注射化学性致炎剂角叉菜胶引发急性
炎性反应更符合慢性前列腺炎临床特征。临床诊疗
中，大多数医生常根据前列腺液中白细胞数量和卵
磷脂小体密度分级来判断患者前列腺是否存在炎性
反应以及炎性的严重程度，并通过治疗前后白细胞
计数的减少及卵磷脂小体的增加来评价疗效。在本
研究中，经手术造模后，模型对照组大鼠病理形态
变化与临床前列腺炎病理变化相似，与正常对照组
大鼠相比，前列腺中白细胞数量增多，卵磷脂小体减
少，证明本研究模型制备成功，疗效指标选择合理。
经分清肾茶片治疗后，大鼠前列腺病理形态变化得
到明显改善，大鼠前列腺组织中的白细胞含量显著
性降低，卵磷脂小体密度明显升高，证明分清肾茶片
具有明显的抑制慢性前列腺炎的作用。
现代医学认为，前列腺炎是前列腺受到病原体
感染或非感染因素刺激而产生的炎性反应[4]，随着
分子生物学和免疫学的不断发展，国内外学者日益
认识到炎症与细胞因子的密切关系，并认为细胞因
子在疾病的发生、治疗、转归中具有重要作用。有关
学者研究发现[5-6]慢性前列腺炎患者精浆中TNF-α、
IFN-γ水平显著性高于正常人，证明TNF-α、IFN-γ
确实参与了慢性前列腺炎的疾病过程。TNF-α、
IFN-γ作为重要的促炎性细胞因子，参与炎性反应
病理过程，能在一定程度上反映机体免疫状态。
TNF-α不仅能诱导上皮细胞及淋巴细胞表达多种
黏附分子，诱导趋化因子产生，介导炎细胞向炎症局
部聚集，造成炎性、纤维细胞增生、组织损伤等病理
变化[7]；还能提高中性粒细胞的吞噬能力，增加超氧
阴离子产生，使抗体依赖性细胞毒作用（ADCC）增
强。IFN-γ主要由活化的T淋巴细胞产生，能促进骨
髓释放中性粒细胞，诱导单核巨噬细胞MHC-Ⅱ类抗
原的表达，使其参与抗原提呈和特异性免疫的识别
过程；另外，IFN-γ能够上调内皮细胞ICAM-1表达，
促进单核/巨噬细胞IgG FC受体（FCγR）表达，协同
诱导TNF-α并促进巨噬细胞趋化到炎症局部，在局
部释放溶酶体酶，引起嗜碱性粒细胞和肥大细胞脱
颗粒，释放炎性介质[8]。当前列腺受到病原体或其他
抗原体如外源性免疫原、自身抗原、反流尿液等刺激
时，巨噬细胞被激活，产生TNF、IL-1、IL-8等促炎性
细胞因子，巨噬细胞作为抗原提呈细胞（APC）将抗
原递呈给T细胞并使之激活，产生IFN-γ等因子[9]，
IFN-γ等又能反作用于巨噬细胞并令其激活[10]，使前
列腺局部炎性反应进一步扩大。实验结果显示分清
肾茶片能够明显降低细菌致前列腺炎大鼠前列腺组
织中TNF-α和IFN-γ阳性表达。提示分清肾茶片可
能通过抑制促炎性细胞因子TNF-α、IFN-γ产生，控
制炎性细胞因子级联反应进一步扩大，从而减轻炎
性反应，且与前列泰片相比具有一定优势。
炎性反应是临床许多疾病重要的病理表现，传
统中医理论中并不存在“炎性反应”这一概念，但根
据炎性反应以局部渗出主要表现，红、肿、热、痛主
要临床症状，多将其归类为中医“湿热蕴结”“气滞
血瘀”范畴论治。有关学者认为[11]炎性反应之湿以
湿热为主，若只知清热而不治湿则病不得解，并将理
气活血祛瘀作为炎性反应的基本治法之一。有关慢
性前列腺炎中医证型临床流行病学调查结果显示，
1 322名慢性前列腺炎患者中湿热下注证出现频率为
92.44%，气滞血瘀证出现频率为85.02%，两者的证型
组合出现率高达78.59%，而肾阳虚证和肝肾阴虚证
都较为少见，且多为兼夹证[12]。此项调查结果提示湿
热下注、气滞血瘀两种证型是慢性前列腺炎临床中
最为常见证型，湿热和瘀滞在慢性前列腺炎疾病过
程中具有重要作用。分清肾茶片由苦参、肾茶、土茯
苓、丹参、川牛膝、延胡索组成，方中以苦参、肾茶、
土茯苓清热解毒，除湿利尿药为主，使湿热去，浊毒
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解，淋浊清；辅以丹参、川牛膝活血通经，延胡索活
血行气止痛，使瘀血散，肿痛消，气血行，全方共奏
清热解毒，利湿通淋，活血止痛之功，用治临床中最
为常见的湿热下注，气滞血瘀型慢性前列腺炎。
综上所述，分清肾茶片清热解毒利湿，理气活血
化瘀，对细菌致大鼠慢性前列腺炎治疗作用明显。分
清肾茶片降低前列腺局部细胞因子TNF-α、IFN-γ
含量，抑制炎性细胞因子级联反应进一步扩大，有可
能是该药物治疗慢性前列腺炎的机制之一。
参 考 文 献
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（收稿日期：2013年12月13日）
127例中药注射剂不良反应分析及原因探讨
沈斌，周月红
（嘉兴学院附属第一医院药剂科，浙江嘉兴 314000）
摘要：目的：了解中药注射剂的不良反应发生情况，为临床用药提供参考。方法：对127例中药注射剂
不良反应报告进行回顾性分析。结果：60岁以上患者49例，占38.58%。滴注30min内发生不良反应占总例数的
40.16%。参麦注射液、注射用血栓通引起的药品不良反应占首位，其次为生脉注射液、刺五加注射液等。临床表
现以皮肤及附件损害为主，占32.98%。结论：中药注射剂不良反应的发生与患者、药物以及临床使用不当等因素
有关。应重视并加强中药注射剂的不良反应监测，促进合理用药，保证用药安全。
关键词：中药注射剂；不良反应；分析
Analysis and disscussion of the adverse drug reactions of 127 cases induced by traditional
Chinese medicine injections
SHEN Bin, ZHOU Yue-hong
( Department of Pharmacy, The First Hospital of Jiaxing College, Jiaxing 314000, China )
·论著·
通讯作者：沈斌，浙江省嘉兴市中环南路1882号嘉兴学院附属第一医院，邮编：314000，电话：0573-82519735
E-mail：shenbin_leo@163.com