全 文 ：藏药椭圆叶花锚中齐墩果酸含量的测定
郑敏燕
(青海师范大学化学系 ,青海西宁　810008)
摘要:以无水乙醇回流 、氯仿萃取的方法分离出椭圆叶花锚中的齐墩果酸 ,并采用旋光法对其
含量进行了测定 ,测得椭圆叶花锚中齐墩果酸的平均含量为 0.517%。
关键词:椭圆叶花锚;旋光法;齐墩果酸
中图分类号:S58;R286.02　　文献标识码:A　　文章编号:1006-8996(2003)05-0017-02
Determining the content of oleanolic acid in a kind of
Tibetan Herb Halenia ellipitica D.Don by polarimetry
ZHENG Min-yan
(Chemistry Department of Qinghai Normal University ,Xining 810008 ,China)
Abstract:In this paper , the oleanolic acid in Halenia ellipitica D.Don was isolated by reflux with ethanol
and extraction with cholorform , the content of oleanolic acid was determined by means of polarimetry.The
average content in it was about 0.517%.
Key words:Halenia ellipitica D.Don;polarimetry;oleanolic acid
椭圆叶花锚(Halenia ellipitica D.Don.)为龙胆科花锚属植物 ,是一种常用的藏药 ,主要分布于海拔
2 600 ～ 4 600 m的河滩 、山坡 、草地 、灌丛及林缘 ,在我国西藏 、青海 、四川 、云南等地都有分布 。藏医常
用其治疗消化系统及肝脏疾病 ,现代医学也验证了其对肝炎有疗效[ 1] 。
椭圆叶花锚全草中含有齐墩果酸等成份[ 1] ,但对其含量未见文献报道。齐墩果酸具有清热 、消炎 、
抑菌 、保肝 、护肝 、增加白细胞 、降低转氨酶等作用 ,近年来又发现其具有抗癌活性的功效[ 2] 。齐墩果酸
的测定方法主要有非水碱滴定法[ 3] 、比色法[ 4] 、薄层扫描法[ 5] 、HPLC 法[ 6]等 ,前两种方法操作较为繁琐 ,
灵敏度和准确度也较差 ,而后两种方法所用仪器昂贵 ,不易普及 。根据齐墩果酸具有旋度性的特点 ,有
文献报道采用旋光法可以简便地测定出药品中的齐墩果酸含量[ 7] ,本文采用旋光法测定了椭圆叶花锚
中齐墩果酸的含量 ,取得了良好的实验结果。
1　材料与方法
1.1　供试材料
椭圆叶花锚采自青海省互助县北山林场 ,洗净 、自然阴干后粉碎备用。
1.2　仪器与试剂
仪器:WZZ-1S 自动指示数显旋光仪(上海物理光学仪器厂生产),1dm旋光管;RE52-2型旋转蒸
发仪 。
试剂:齐墩果酸对照品(中国药品生物制品检定所提供),其余试剂均为分析纯。
1.3　测试方法
1.3.1　花锚样品液的配制　由于天然植物的组成复杂 ,常会干扰测定结果 ,因此必须对药材进行齐墩
果酸的分离精制处理 。在综合参考文献和大量试验的基础上 ,筛选出一种较好的分离精制方法(将另文
收稿日期:2003-04-25
作者简介:郑敏燕(1971—),女 ,浙江缙云人 ,讲师 ,硕士。
第 21卷　第 5期
2003年 9月 　　　　　　　　　
青海大学学报(自然科学版)
Journal of Qinghai University
　　　　　　　　　Vol.21 No.5
Sep.2003
DOI :10.13901/j.cnki.qhwxxbzk.2003.05.006
报道):称取花锚样品 100 g ,使用 1 000 mL无水乙醇分三次回流提取 ,每次 1 h;过滤 ,合并滤液;滤液用
旋转蒸发仪浓缩制成浸膏;取 3倍浸膏量的5%NaOH 溶液搅拌煮沸 40 min ,趁热过滤 ,重复三次 ,合并
滤液 ,弃去滤渣;滤液用10%H2SO4 调 pH=1 ,在沸水浴中回流 4 h;冷却后用氯仿萃取 4次 ,合并萃取
液;使用旋转蒸发仪浓缩萃取液 ,回收氯仿后 ,挥干溶剂 ,得精制固体样品;用无水乙醇溶解 ,定容至 100
mL ,用于定量分析。
1.3.2　齐墩果酸对照品标准溶液的制备　准确称取齐墩果酸对照品 1.251 7g ,加适量乙醇溶解 、定容
50 mL ,备用 。
表 1　标准曲线测定实验数据
C(mg/mL) 2.003 4.005 6.008 8.011 10.01
旋光度α 0.141 0.293 0.428 0.585 0.736
1.3.3　薄板色谱鉴别椭圆叶花锚中的齐墩果酸　取样品液及齐墩果酸对照品溶液各 5μL ,分别点于同
一块自制的硅胶 G层析薄板上 ,挥干溶剂 ,以氯仿—甲醇(19:1)为展开剂 ,以 5%磷钼酸乙醇喷雾显色 。
1.3.4　旋光法标准曲线的制备　分别取对照品标准溶液 2 、4 、6 、8 、10 mL ,用乙醇定容于 25 mL 容量瓶
中 ,参照《中国药典》2000版附录中旋光度测定法[ 8] ,用 1 dm 旋
光管分别测定旋光度值 ,测定数据见表 1。通过最小二乘法进
行线性回归 ,回归方程:C =13.50α+0.1123;R=0.9998。结果
表明 ,在 2 ～ 10 mg/mL浓度范围内呈良好的线性关系。
表 2　加样回收率试验结果
编号 加入标样量(mg)
增加量
(%)
测得结果
(mg)
回收率
(%)
1 12.52 24.3 12.33 98.5
2 25.03 48.2 25.50 101.9
3 37.55 72.4 38.32 102.0
4 50.07 96.5 49.80 100.2
5 62.58 120.6 64.31 102.8
2　结果与分析
2.1　薄板层析定性鉴别结果　供试品色谱与齐墩果酸对照品色谱在同一硅胶 G薄板的相同位置处都
显示出蓝黑色斑点 ,说明在椭圆叶花锚中含有齐墩果酸 。
2.2　稳定性试验　取椭圆叶花锚样品溶液 ,每隔 2 h测旋光度 ,结果 8 h内旋光度读数无变化。
取样品溶液分别在 15 、20 、30℃测定其旋光度 ,结果表明 ,
室温附近 ,温度对样品的旋光度影响不大。
2.3　回收率试验　分别取 5份椭圆叶花锚样品溶液(浓度为
5.19 mg/mL),每份 10 mL。吸取 0.5 、1.0 、1.5 、2.0 、2.5 mL 的
齐墩果酸标准溶液 ,分别加入 5 份样品液中 ,用乙醇定容至
25 mL ,测定旋光度 ,结果见表 2。当标样加入量由 25%增加
到120%时 ,加样平均回收率为 101.1%,RSD为 1.53%。
2.4　样品的测定　按1.3.1方法制备花锚样品液 3份 ,按本
法测其旋光度 , 根据回归方程求出浓度 , 计算得出椭圆叶花锚中齐墩果酸的含量分别为 0.552%、
0.480%和 0.519%,平均值 0.517%, RSD为 5.69%。
3　小结
对青海本地野生椭圆叶花锚药材中的齐墩果酸进行分离精制后 ,用旋光法测出椭圆叶花锚中的齐
墩果酸含量为 0.517%。采用旋光法测定齐墩果酸的含量 ,方法简单 、操作方便 、结果准确 ,但要求样品
的纯度必须很高 ,另外试剂的消耗量也较大。
参考文献:
[ 1] 中科院高原生物研究所.藏药志(修订版)[ M] .西宁:青海人民出版社 ,1991.297-298.
[ 2] 王立新 ,韩广轩 ,刘文庸 ,等.齐墩果酸的化学及药理研究[ J] .药学实践杂志 ,2001 , 19(2):104-107.
[ 3] 蔡作忠 ,张晓琼.齐墩果酸片剂含量测定法的改进[ J] .海峡药业 , 2000 , 12(2):43.
[ 4] 项昭保 ,唐春红 ,陈刚 ,等.木瓜中齐墩果酸测定方法的研究[ J] .天然产物研究与开发 , 2001 , 13(4):23-26.
[ 5] 卢文彪.薄层扫描法测定白花蛇草中齐墩果酸含量[ J] .时珍国医国药 ,2001 , 12(11):961-962.
[ 6] 王忠壮 ,宋洪杰 ,檀密艳 ,等.树头菜中齐墩果酸的含量测定[ J] .第二军医大学学报 , 2002 , 23(1):40.
[ 7] 田曙萍 ,黄铭铸.旋光法测定齐墩果酸片的含量[ J] .贵阳医学院学报 ,1995 , 20(9):17.
[ 8] 中华人民共和国药典委员会.中国药典(二部)(2000年版)[ M] .北京:化学工业出版社 ,2000.附录 43.
(责任编辑　张文英)
18　　　　　　　　　　　　　　　　　　青海大学学报　　　　　　　　　　　　　　　　第 21卷