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芳香新塔花茶对小鼠镇静催眠、生长发育及免疫器官指数的影响研究



全 文 :第 35 卷第 3 期 中南民族大学学报(自然科学版) Vol. 35 No. 3
2016 年 9 月 Journal of South-Central University for Nationalities(Nat. Sci. Edition) Sep. 2016
收稿日期 2016-06-11
作者简介 沙爱龙(1981-),男,副教授,博士,研究方向:免疫药理学,E-mail:lyshaailong@ 163. com
基金项目 国家自然科学基金资助项目(31360635);西南医科大学人才引进科研启动金(2014YJRC04) ;新疆生产建设兵
团青年科技创新资金专项(2012CB028)
芳香新塔花茶对小鼠镇静催眠、
生长发育及免疫器官指数的影响研究
沙爱龙1,孟庆艳2,郝海燕3
(1 西南医科大学 生理学教研室,泸州 646000;2 塔里木盆地生物资源保护利用兵团重点实验室,阿拉尔 843300;
3 西南医科大学 药物与功能性食品研究中心,泸州 646000)
摘 要 目的:研究芳香新塔花茶对小鼠的镇静催眠、生长发育及免疫器官指数的影响. 方法:用不同剂量的芳香
新塔花茶灌胃,用自发活动记录法记录 60 min内小鼠自发活动次数,利用阈剂量戊巴比妥钠睡眠实验法和阈下剂
量戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠实验,观察芳香新塔花茶镇静催眠作用. 用称重法,观察法及计量法研究芳香新塔花茶
对小鼠生长发育及免疫器官指数的影响. 结果:芳香新塔花茶低、中、高剂量组对小鼠走动次数、举双前肢数、入睡
时间、体重,免疫器官指数作用差异显著(p < 0. 05)或差异极显著(p < 0. 01),且呈剂量依赖效应;给药组小鼠的生
长发育状况更加良好. 结论:芳香新塔花茶具有显著的镇静催眠、促进生长发育及免疫增强作用.
关键词 芳香新塔花茶;镇静催眠;免疫器官指数;生长发育
中图分类号 R285. 5;R967 文献标识码 A 文章编号 1672-4321(2016)03-0057-05
Effects of the Ziziphora clinopodioides Lam Tea on Sedative-hypnotic,
Immune Organ Index,Growth and Development of Mice
Sha Ailong1,Meng Qingyan2,Hao Haiyan3
(1 Department of Physiology,Southwest Medical University,Luzhou,646000,China;2 Key Laboratory of Biological
Resource Protection and Utilization of Tarim Basin,Xinjiang Production & Construction Group,Alar,843300,China;3
Drug Discovery Research Center,Southwest Medical University,Luzhou,646000,China)
Abstract Objective:To study the effects of different doses of the tea from Ziziphora clinopodioides Lam on sedative-
hypnotic,immune function,growth and development of mice. Methods:Compared with the physiological saline groups,the
effects of the Ziziphora clinopodioides Lam tea on spontaneous activity of mice,dormancy-number and dormancy-time of mice
induced by pentobarbital sodium were observed,and the spleen index,thymus index,liver index,growth and development
with three doses of Ziziphora clinopodioides Lam tea were determined. Results:Compared with the physiological saline
groups,the three doses of the Ziziphora clinopodioides Lam tea could inhibit the spontaneous activity,increase dormancy-
number and dormancy-time of mice induced by pentobarbital sodium,and it could also obviously increase the spleen index,
thymus index,liver index and strengthen the growth and development of mice. Conclusions:The Ziziphora clinopodioides
Lam tea has obviously sedative and hypnotic effects in mice and there is a synergistic effect between them and pentobarbital
sodium,and the tea could also obviously strengthen the immune function,growth and development of mice.
Keywords Ziziphora clinopodioides Lam tea;sedative-hypnotic;immune organ index;growth and development
当今社会中,失眠、免疫力低下的患者呈上升趋
势,普通的药物治疗往往因为口感等原因,治疗体验
效果不佳. 开发一种具有镇静催眠、增强免疫力作
用的保健茶是一个不错的思路.
新疆特色药用植物芳香新塔花(Ziziphora
clinopodioides Lam.),是维吾尔族和哈萨克族常用药
材,又名小叶薄荷或唇香草,属唇形科(Labiatate)新
塔花属,一般分布于我国新疆天山、阿尔泰山、准噶
尔西部山地、帕米尔高原和昆仑山的山地草原及砾
石质坡地 ,中亚、蒙古、前苏联、伊朗及西亚至巴尔
干半岛也有分布[1]. 在新疆维吾尔医药中称为续则
或苏则,具有疏散风热、清利头目、宁心安神、利水清
热、壮骨强身、清胃消食之功效,主治感冒发热、目赤
肿痛、头痛咽痛、心悸失眠等症[2]. 维吾尔族民间用
其全草煎汤内服或煎茶饮,可缓解胸闷、头晕等症
状,临床用于治疗冠心病、高血压及调节心血管系统
功能等疾病[3]. 近年来国内外已有关于芳香新塔花
药理学方面的研究报道[4,5]. 笔者发现芳香新塔花
具有明显的抗炎镇痛作用且无明显毒副作用,其对
小鼠离体十二指肠平滑肌收缩具有抑制作用[6,7].
目前,关于芳香新塔花镇静催眠作用、免疫作用的研
究尚未见报道,本实验拟将芳香新塔花制备成口感
好、茶香味纯正的保健茶,观察对小鼠镇静催眠作
用、免疫器官指数及生长发育的影响,为进一步拓展
芳香新塔花临床新用途奠定基础.
1 材料和方法
1. 1 材料
1. 1. 1 实验动物
96 只昆明种小鼠,雌雄各半,体重 26 ~ 29 g,许
可证号 SCXK(新)2003-0001,由塔里木大学动物科
学学院动物实验站提供.
1. 1. 2 药品与仪器
芳香新塔花(Ziziphora clinopodioides Lam.)叶,
2012 年 7 月采于新疆伊犁州巩留野核桃沟,经鉴定
为唇形科新塔花属植物的干燥叶片. 红茶为市售红
茶,蜂蜜为市售枣花蜂蜜. 戊巴比妥钠(佛山市化工
实验厂),地西泮(北京益民药业有限公司),蔗糖、
柠檬酸为国产分析纯. 精密电子天平(上海精科天
平),电子天平(上海民桥精密科学仪器有限公司).
1. 2 实验方法
1. 2. 1 芳香新塔花茶的制备
芳香新塔花叶片在 70℃条件下烘干,然后研磨
成粉,过 80 目筛,低温干燥储存备用. 称取叶片粉
末,在 100℃下,按照液料比(液为蒸馏水)85∶ 1,浸
提 27. 5 min,获得浸提液(浓度为 0. 86 ~ 1. 28 g 生
药 /100 mL). 然后按照浸提液 6. 5 g /L、蔗糖
74 g /L、柠檬酸 0. 65 g /L、魔芋精粉 0. 66 g /L 和蜂
蜜 4. 4 g /L 比例制成芳香新塔花茶. 将保健茶浓缩
至含芳香新塔花浓度为 2 g /kg 高剂量芳香新塔花
茶(含生药0. 1 g /mL). 后稀释两次,各稀释一倍,
得 1 g /kg 中剂量(含生药 0. 05 g /mL)和 0. 5 g /kg
低剂量(含生药 0. 025 g /mL)芳香新塔花茶,装入磨
口瓶中,均放入冰箱中冷藏备用.
1. 2. 2 芳香新塔花茶对小鼠自发活动率的影响
将小鼠随机分为正常对照组、阳性对照组(地
西泮,5 mg /kg)、低剂量组(0. 5 g /kg)、中剂量组(1
g /kg)、高剂量组(2 g /kg),共 5 组,每组 12 只. 给
药前称量小鼠体重并观察小鼠在 5 min 内的走动次
数及举双前肢次数. 各组小鼠连续灌胃(0. 20 mL /
10 g)15 d,1 次 /d,其中正常对照组给等体积生理盐
水,阳性对照组给予地西泮. 于末次给药前 8 h 禁
食不禁水. 准确记录末次给药后 15,30,45,60 min
时的 5 min内小鼠走动次数和举双前肢次数.
1. 2. 3 芳香新塔花茶对阈下剂量戊巴比妥钠致小
鼠入睡的影响
分组、灌胃同 1. 2. 2. 末次给药 30 min 后,小鼠
腹腔注射戊巴比妥钠 30 mg /kg(按每 10 g体重注射
0. 3%戊巴比妥钠 0. 10 mL. 戊巴比妥钠阈下催眠
量,即 90%小鼠不入睡的戊巴比妥钠最大剂量,由
预试验确定,观察并记录入睡动物数(注射后 15
min内小鼠翻正反射消失达 1 min 以上者记为入
睡),计算各组入睡率.
1. 2. 4 芳香新塔花茶对阈剂量戊巴比妥钠致小鼠
入睡时间和睡眠时间的影响
分组、灌胃同 1. 2. 2. 末次给药 30 min 后,小鼠
腹腔注射戊巴比妥钠阈剂量 45 mg /kg(按每 10 g体
重注射 0. 3%戊巴比妥钠 0. 15 mL),记录睡眠出现
(翻正反射消失)和消失的时间,计算睡眠潜伏期
(睡眠出现时间 - 记录开始时间),睡眠持续时间
(睡眠消失时间 -睡眠出现时间).
1. 2. 5 芳香新塔花茶对小鼠生长发育与体重的
影响
分组、灌胃同 1. 2. 2. 比较观察各组小鼠毛色光
泽,手握小鼠背部感受肌肉张力. 于末次给药后称
量小鼠体重.
1. 2. 6 芳香新塔花茶对小鼠免疫器官指数的影响
各组末次给药后,第 2 日处死小鼠. 取脾脏、胸
腺、肝脏,剔除黏附组织并用滤纸吸干脏器血污后称
量,计算脾脏指数、胸腺指数、肝脏指数.
脾脏指数(mg /g)=脾脏重量(mg)/体重(g),
胸腺指数(mg /g)=胸腺重量(mg)/体重(g),
85 中南民族大学学报(自然科学版) 第 35 卷
肝脏指数(mg /g)=肝脏重量(mg)/体重(g).
1. 2. 7 数据统计分析
所有实验结果的数据以均数 ±标准差(x ± s)表
示,所有数据分析在 SPSS 13. 0 软件上进行.
2 结果
2. 1 芳香新塔花茶对小鼠走动次数作用的影响
对照组和实验组小鼠走动次数见表 1. 与正常
对照组比较,芳香新塔花茶低、中、高剂量组和地西
泮组对小鼠走动次数均有抑制作用,且随剂量的增
高小鼠走动次数减少,表明不同剂量的芳香新塔花
茶均能减少小鼠走动次数,随着剂量的升高,芳香新
塔花茶抑制作用显著(p < 0. 01).
表 1 芳香新塔花茶对小鼠走动次数作用的影响
Tab. 1 Effects of the Ziziphora clinopodioides Lam tea on spontaneous action times of mice
组别 剂量 / g. kg - 1 给药前
末次给药
15 min 30 min 45 min 60 min
生理盐水 - 10. 00 ± 1. 41 9. 75 ± 0. 96 10. 25 ± 1. 26 9. 75 ± 0. 96 10. 00 ± 1. 83
地西泮 0. 005 9. 83 ± 1. 04 4. 89 ± 0. 71** 4. 61 ± 0. 83** 3. 80 ± 0. 64** 3. 25 ± 0. 56**
低剂量组 0. 5 11. 25 ± 2. 22 9. 00 ± 2. 00 8. 00 ± 2. 65 8. 67 ± 0. 58 8. 33 ± 1. 53
中剂量组 1 9. 50 ± 2. 38 7. 50 ± 1. 29* 6. 75 ± 1. 89* 6. 75 ± 0. 96* 6. 50 ± 1. 29*
高剂量组 2 9. 75 ± 0. 96 5. 00 ± 2. 00* 4. 67 ± 0. 58** 3. 67 ± 0. 58** 3. 33 ± 0. 58**
注:n = 12,珋x ± s;与对照组比较,**p < 0. 01,* p < 0. 05. 表 2-6 同
2. 2 芳香新塔花茶对小鼠举双前肢的影响
对照组和药物组小鼠举双前肢次数见表 2. 与
正常对照组比较,地西泮组和芳香新塔花茶低、中、
高剂量组对小鼠举双前肢数均有抑制作用,且随剂
量的增高小鼠举双前肢次数减少,表明不同剂量的
芳香新塔花茶均能减少小鼠举双前肢数,随着剂量
的升高,芳香新塔花茶有极显著的抑制作用(p <
0. 01).
表 2 芳香新塔花茶对小鼠举双前肢次数作用的影响
Tab. 2 Effects of the Ziziphora clinopodioides Lam tea on times of lifting double forelimb of mice
组别 剂量 / g. kg - 1 给药前
末次给药
15 min 30 min 45 min 60 min
生理盐水 - 2. 50 ± 0. 24 2. 75 ± 0. 36 2. 25 ± 0. 31 2. 50 ± 0. 58 2. 30 ± 0. 15
地西泮 0. 005 2. 53 ± 0. 74 1. 69 ± 0. 87 0. 83 ± 0. 46** 0. 71 ± 0. 43** 0. 59 ± 0. 20**
低剂量组 0. 5 2. 35 ± 2. 31 2. 37 ± 0. 46 2. 23 ± 2. 31 2. 31 ± 2. 08 2. 33 ± 0. 58
中剂量组 1 2. 55 ± 1. 29 2. 25 ± 0. 89 1. 75 ± 0. 96 1. 25 ± 0. 96* 0. 50 ± 1. 00**
高剂量组 2 2. 60 ± 0. 82 1. 00 ± 0. 23** 0. 33 ± 0. 08** 0. 41 ± 0. 15** 0. 67 ± 0. 58**
2. 3 对阈下剂量戊巴比妥钠致小鼠入睡率的影响
对照组和药物组对阈下剂量戊巴比妥钠致小鼠
入睡率的影响见表 3. 与正常对照组比较,给药组能
增加小鼠入睡只数,且随剂量升高入睡只数明显
增加.
表 3 芳香新塔花茶对阈下剂量戊巴比妥钠致小鼠入睡率的影响
Tab. 3 Effects of the Ziziphora clinopodioides Lam tea on the sleep of mice with pentobarbital sodium
组别 剂量 / g. kg - 1 鼠数 /只 入睡鼠数 /只 入睡率 /%
生理盐水 - 12 2 16. 7
地西泮 0. 005 12 11 91. 7
低剂量组 0. 5 12 5 41. 7
中剂量组 1 12 7 58. 3
高剂量组 2 12 9 75. 0
95第 3 期 沙爱龙,等:芳香新塔花茶对小鼠镇静催眠、生长发育及免疫器官指数的影响研究
2. 4 对阈剂量戊巴比妥钠致小鼠睡眠潜伏时间、持
续时间的影响
对照组和药物组对阈剂量戊巴比妥钠致小鼠睡
眠潜伏时间、持续时间作用的影响见表 4. 与正常对
照组比较,芳香新塔花茶低、中、高剂量组和地西泮
组小鼠睡眠潜伏时间缩短、睡眠持续时间延长;随芳
香新塔花茶剂量的增大睡眠潜伏期显著减少(p <
0. 05 或 p < 0. 01),且显著延长小鼠睡眠持续时间(p
< 0. 05 或 p < 0. 01).
表 4 芳香新塔花茶对阈剂量戊巴比妥钠致小鼠睡眠潜伏时间、持续时间作用的影响
Tab. 4 Effects of the Ziziphora clinopodioides Lam tea on hypnosis time of mice with pentobarbital sodium
组别 剂量 / g. kg - 1 潜伏期 /min 持续时间 /min
生理盐水 - 5. 92 ± 0. 75 9. 47 ± 0. 68
地西泮 0. 005 2. 98 ± 0. 46** 28. 36 ± 3. 15**
低剂量组 0. 5 6. 40 ± 1. 18 13. 45 ± 1. 23*
中剂量组 1 4. 67 ± 1. 52* 12. 08 ± 3. 17*
高剂量组 2 3. 06 ± 0. 55** 15. 04 ± 1. 07**
2. 5 芳香新塔花茶对小鼠体重、外观及毛色作用的
影响
对照组和药物组对小鼠体重的影响见表 5. 与
正常对照组比较,芳香新塔花茶低、中、高剂量组对
小鼠均有增重作用,且呈剂量依赖效应,中、高剂量
组差异显著(p < 0. 05,p < 0. 01),给药组小鼠的生
长发育状况更加良好,肌肉收缩更有力,外观毛色较
对照组更有光泽.
表 5 芳香新塔花茶对小鼠体重的影响
Tab. 5 Effects of the Ziziphora clinopodioides Lam tea on weight gain of mice
组别 剂量 / g. kg - 1 给药前 / g 给药后 / g 增重 / g
生理盐水 - 27. 60 ± 1. 76 29. 13 ± 2. 29 2. 03 ± 1. 71
低剂量组 0. 5 28. 88 ± 8. 75 31. 50 ± 2. 63 2. 63 ± 1. 74
中剂量组 1 26. 95 ± 8. 22 30. 38 ± 2. 76 4. 43 ± 0. 77*
高剂量组 2 27. 55 ± 8. 04 32. 73 ± 3. 35 5. 25 ± 0. 31**
2. 6 芳香新塔花茶对小鼠免疫器官指数的影响
对照组和药物组对小鼠免疫器官指数的影响见
表 6. 与正常对照组比较,芳香新塔花茶低、中、高剂
量组免疫器官指数均增大(p < 0. 05 或 p < 0. 01),且
具剂量依赖效应,说明芳香新塔花茶能增强小鼠的
免疫器官指数.
表 6 芳香新塔花茶对小鼠免疫器官指数的影响
Tab. 6 Effects of the Ziziphora clinopodioides Lam tea on Immune function of mice
组别 肝指数 /mg /g 脾指数 /mg /g 胸腺指数 /mg /g
生理盐水 49. 73 ± 1. 29 5. 95 ± 1. 48 2. 74 ± 0. 34
低剂量组 54. 70 ± 11. 30 6. 78 ± 1. 43 2. 82 ± 0. 85
中剂量组 64. 36 ± 4. 09** 7. 89 ± 0. 53* 7. 35 ± 3. 78*
高剂量组 70. 27 ± 5. 31** 11. 04 ± 1. 48** 9. 74 ± 1. 89**
3 讨论
常用西药类镇静催眠药物在治疗失眠的同时会
产生一定的依赖性[8],而一些中药镇静催眠药物有
效且不产生依赖性. 自发活动实验是评价中枢神经
系统兴奋状态的一项重要指标,动物的自发活动情
况反映其中枢神经系统的功能状态,兴奋时活动次
数增加,抑制时活动次数减少. 本实验结果表明,芳
香新塔花茶高、中剂量组小鼠自发活动次数明显低
于正常对照组(p < 0. 05 或 0. 01);同时,与对照组
比较,高剂量的芳香新塔花茶可使小鼠走动次数、举
双前肢数明显减少(p < 0. 05 或 0. 01),表明芳香新
塔花茶对小鼠自发活动有抑制作用. 戊巴比妥类药
物是典型的中枢性抑制药,凡是对中枢神经有抑制
作用的药物,一般都能增强其中枢抑制作用. 本实
06 中南民族大学学报(自然科学版) 第 35 卷
验研究表明,与正常对照组比较,高低剂量芳香新塔
花茶与阈下剂量戊巴比妥钠合用分别可以使小鼠睡
眠潜伏时期缩短(p < 0. 05 或 0. 01)和睡眠持续时
间(p < 0. 05 或 0. 01)延长且增加小鼠入睡只数,从
而认为芳香新塔花茶有明显的镇静催眠作用.
胸腺和脾脏是动物体内主要的免疫器官,肝脏
是动物机体重要的代谢器官,同时也是动物的免疫
器官之一. 胸腺、脾脏、肝脏等免疫器官的重量变
化,是反映动物体免疫功能的重要指标[5]. 本实验
结果表明,给予不同浓度的芳香新塔花茶,小鼠的体
重、免疫器官指数有明显的变化,且随着浓度的升高
体重有明显的增加(p < 0. 05 或 0. 01),免疫器官指
数也明显增大(p < 0. 05 或 0. 01).
结果预示芳香新塔花茶具有明显的镇静催眠、
增强免疫力的作用,经常饮用具有很好的保健作用,
其镇静催眠作用、免疫增强作用机理有待于进一步
研究.
参 考 文 献
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29-30.
(上接第 61 页)
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