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野生与栽培川西獐牙菜和椭圆叶花锚药效学的比较研究
何卫华
(解放军第四医院 药械科，青海 西宁 810007)
收稿日期:2013-10-10
基金项目:教育部“春晖计划”合作科研项目 (Z2010078) ;青海省高原作物种质资源创新与利用国家重点实验室培育基地开放课题
资助项目 (2013-01)
作者简介:何卫华 (1977—) ，男，学士，主管药师，主要从事药剂学方面的研究。Tel:18697105279，E-mail:HeweihuaS10 @
sohu． com
摘要:目的 研究野生和栽培川西獐牙菜和椭圆叶花锚的乙醇提取物对 CCl4 致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法
采用一次性腹腔注射四氯化碳花生油 (0. 12%)方法制造染毒小鼠模型，分别给其注射不同剂量的野生和不同剂量、
不同地点的栽培川西獐牙菜和椭圆叶花锚对模型动物进行干预性保护，然后测定不同实验组小鼠的 ALT和 AST活性。
结果 不同剂量的野生和不同剂量、不同地点的栽培川西獐牙菜和椭圆叶花锚均能降低四氯化碳导致的小鼠血清 ALT
和 AST活性升高。结论 栽培川西獐牙菜和椭圆叶花锚完全可以代替野生种，同样对小鼠实验性肝损伤具有一定的
保护作用。
关键词:川西獐牙菜;椭圆叶花锚;四氯化碳;肝损伤
中图分类号:Ｒ285. 5 文献标志码:B 文章编号:1001-1528(2015)01-0204-03
doi:10. 3969 / j． issn． 1001-1528. 2015. 01. 045
川西獐牙菜 Swertia mussotii和椭圆叶花锚 Halenia ellip-
tica为龙胆科 Gentianaceae两种二年生多分枝草本植物，广
泛分布于青海省玉树州及其他牧区的高山草甸、沼泽、灌
丛、草地以及田埂中，主要生长于海拔 2 400 m 以上的青
藏高原地区。其性寒、味苦，有清肝利胆、清热解毒、祛
湿、消炎愈疮的功效［1］。目前，对龙胆科植物药理和化学
性质的研究已有较多报道［2］，已从獐牙菜属和花锚属的多
种植物中分离出 100 多种不同类型的化合物，包括黄酮、
苷类、萜类、内酯、生物碱、有机酸等［3-7］，并对两种植物
的生物活性进行了研究［8-11］。迄今为止，关于野生与栽培
川西獐牙菜和椭叶花锚药效学的比较研究国内外未见报道，
本实验采用两种藏药的乙醇提取物对 CCl4 致小鼠急性肝损
伤模型的作用，阐述了野生与栽培川西獐牙菜和椭圆叶花
锚的药效学，旨在为栽培藏药川西獐牙菜和椭圆叶花锚能
否代替野生藏药的研究提供科学依据。
1 材料与方法
1. 1 材料
1. 1. 1 实验动物 昆明种纯系健康小白鼠，体质量 18 ～ 20
g，由兰州生物制品厂提供，合格证号 SCXK (兰)
2010-0008。
1. 1. 2 药品与试剂 四氯化碳分析纯 (广东西陇化工厂，
用花生油配成 0. 12%);食用鲁花花生油;吐温 80 (莱阳
市双双化工有限公司) ;谷丙转氨酶试剂盒 (南京建成生
物工程研究所);谷草转氨酶试剂盒 (南京建成生物工程
研究所)。
1. 1. 3 仪器与设备 721 分光光度计 (北京瑞利分析仪器
公司);高速台式离心机、高速冷冻离心机 (上海安亭仪
器厂) ;电子分析天平;电热鼓风干燥箱 (重庆实验设备
厂);电热恒温水浴锅 (北京科学仪器厂) ;匀浆机 (宁波
新芝生物科技股份有限公司) ;低温冰箱;微量加样器 100
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第 37 卷 第 1 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
January 2015
Vol． 37 No． 1
UI、250 UI、500 UI、1 000 UI (上海求精生化试剂仪器有
限公司)。
1. 2 方法
1. 2. 1 乙醇提取物 将药材进行粉碎，测定含水量后取 1
kg干品，用 90%乙醇以 1 ∶ 8热提 2 h，提后滤去上清液，滤
出物以上述条件继续提取，共提取 4次，合并提取液，在 60
℃下用旋转蒸发仪将乙醇挥发干净 (每 1 g川西獐牙菜和椭
圆叶花锚分别相当生药材 22. 98 g和 19. 69 g)，待用。
1. 2. 2 小鼠处理 将 308 只雌雄各半小白鼠，随机分组，
口服给药。各样品药物分 4 个剂量，分别为 0、0. 075、
0. 210、0. 640 g /kg的乙醇提取物。
1. 2. 3 血清和肝组织样品的制备 动物断头采血，以
3 500 r /min 离心 10 ～ 20 min，取上清液低温保存，待用;
取 0. 1 g肝组织，加 1 mL生理盐水匀浆，以 3 500 r /min离
心 10 ～ 20 min，取上清液低温保存，待用。
1. 2. 4 ALT活性测定 参照改良赖氏法测定［12］。首先用
丙酮酸标准液作标准曲线，然后测定样品的吸光度，根据
标准曲线，计算 ALT的活性。
1. 2. 5 AST 活性测定 参照改良赖氏法测定［12］。首先用
丙酮酸标准液作标准曲线，然后测定样品的吸光度，根据
标准曲线，计算 AST的活性。
1. 3 数据处理 采用 t检验。
2 结果
2. 1 川西獐牙菜对 CCl4 致小鼠急性肝损伤的作用 与未
处理组相比，CCl4 肝损伤组小鼠血清 ALT和 AST的活性均
明显升高，说明造模成功;不同剂量的野生与栽培川西獐
牙菜的乙醇提取物均可使升高的血清 ALT和 AST活性显著
降低，只是降低程度有所不同 (表 1)。
表 1 川西獐牙菜对 CCl4 致小鼠急性肝损伤的作用 (x ± s)
组别 剂量 鼠数 /只 ALT活性 /(U·L －1) AST活性 /(U·L －1)
未处理 — 14 113. 86 ± 27. 48 108. 93 ± 38. 68
CCl4 — 14 676. 98 ± 326. 52 412. 64 ± 153. 00
川西獐牙菜(西宁) 高 14 188. 76 ± 54. 22＊＊＊ 240. 01 ± 57. 35＊＊＊
川西獐牙菜(西宁) 中 14 206. 61 ± 55. 67＊＊＊ 230. 54 ± 34. 93＊＊＊
川西獐牙菜(西宁) 低 14 291. 14 ± 63. 99＊＊＊ 233. 16 ± 43. 89＊＊＊
川西獐牙菜(玉树) 高 14 176. 72 ± 72. 28＊＊＊ 266. 38 ± 82. 15＊＊＊
川西獐牙菜(玉树) 中 14 214. 77 ± 65. 22＊＊＊ 274. 59 ± 42. 70＊＊＊
川西獐牙菜(玉树) 低 14 382. 84 ± 92. 56＊＊ 309. 32 ± 72. 47＊＊
川西獐牙菜(野生) (西宁) 高 14 150. 25 ± 47. 29＊＊＊ 208. 75 ± 42. 48＊＊＊
川西獐牙菜(野生) (西宁) 中 14 305. 06 ± 108. 75＊＊＊ 283. 25 ± 97. 16＊＊
川西獐牙菜(野生) (西宁) 低 14 495. 84 ± 292. 13* 346. 50 ± 152. 70*
川西獐牙菜(野生) (玉树) 高 14 158. 64 ± 67. 83＊＊＊ 296. 45 ± 72. 89＊＊＊
川西獐牙菜(野生) (玉树) 中 14 298. 46 ± 78. 02＊＊＊ 314. 29 ± 45. 67＊＊＊
川西獐牙菜(野生) (玉树) 低 14 432. 18 ± 89. 65＊＊ 389. 64 ± 78. 65＊＊
注:与 CCl4 处理组对照比较，* 表示存在差异，＊＊表示存在显著差异，＊＊＊表示存在极显著差异
2. 2 椭圆叶花锚对 CCl4 致小鼠急性肝损伤的作用 与未
处理组相比，CCl4 肝损伤组小鼠血清 ALT和 AST的活性均
明显升高，说明造模成功;不同剂量的野生与栽培椭圆叶
花锚的乙醇提取物均可使升高的血清 ALT和 AST活性显著
降低，同川西獐牙菜类似，也是降低幅度有所不同
(表 2)。
表 2 椭圆叶花锚对 CCl4 致小鼠急性肝损伤的作用 (x ± s)
组别 剂量 鼠数 /只 ALT活性 /(U·L －1) AST活性 /(U·L －1)
未处理 — 14 113. 86 ± 27. 48 108. 93 ± 38. 68
CCl4 — 14 676. 98 ± 326. 52 412. 64 ± 153. 00
椭圆叶花锚(西宁) 高 14 154. 68 ± 61. 35＊＊＊ 180. 37 ± 58. 48＊＊＊
椭圆叶花锚(西宁) 中 14 172. 70 ± 75. 56＊＊＊ 169. 76 ± 35. 09＊＊＊
椭圆叶花锚(西宁) 低 14 192. 86 ± 48. 84＊＊＊ 253. 94 ± 54. 31＊＊＊
椭圆叶花锚(玉树) 高 14 147. 40 ± 44. 23＊＊＊ 178. 37 ± 44. 27＊＊＊
椭圆叶花锚(玉树) 中 14 160. 74 ± 33. 25＊＊＊ 193. 70 ± 39. 99＊＊＊
椭圆叶花锚(玉树) 低 14 164. 44 ± 45. 00＊＊ 229. 12 ± 61. 42＊＊
椭圆叶花锚(野生) (西宁) 高 14 151. 76 ± 44. 26＊＊＊ 187. 03 ± 52. 33＊＊＊
椭圆叶花锚(野生) (西宁) 中 14 198. 74 ± 56. 12＊＊＊ 227. 85 ± 62. 61＊＊＊
椭圆叶花锚(野生) (西宁) 低 14 206. 78 ± 55. 67＊＊＊ 287. 03 ± 51. 89＊＊＊
椭圆叶花锚(野生) (玉树) 高 14 133. 87 ± 38. 96＊＊＊ 189. 65 ± 48. 31＊＊＊
椭圆叶花锚(野生) (玉树) 中 14 189. 65 ± 43. 18＊＊＊ 298. 82 ± 44. 59＊＊＊
椭圆叶花锚(野生) (玉树) 低 14 175. 66 ± 56. 13＊＊ 307. 08 ± 59. 24＊＊
注:与 CCl4 处理组对照比较，＊＊表示存在显著差异，＊＊＊表示存在极显著差异
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Vol． 37 No． 1
3 讨论
川西獐牙菜和椭圆叶花锚是两种较典型的高山植物，
齐墩果酸、龙胆苦苷、芒果苷、当药黄素和酮类为其重要
有效成分，尤其酮类化合物应是其含有量较高的有效成分。
目前，已从川西獐牙菜中得到 8 种酮，藏茵陈酮是新近发
现的一种成分。丁莉等［8］和罗桂花等［13］的研究分别表明，
玉树獐牙菜和川西獐牙菜的醇提物均可以明显降低 CCl4 引
起的小鼠血清 ALT和 AST活性增高，并且具有一定的量效
关系，认为其有效成分在一定程度上具有保护肝细胞膜结
构的功能，我们的研究结果与其基本一致，从而进一步验
证了前人的研究。本研究发现，CCl4 处理后，小鼠血清中
ALT和 AST活性明显高于空白对照组的，说明 CCl4 对小鼠
肝组织具有损伤作用。CCl4 是一种典型的肝脏毒物，经肝
脏微粒体细胞色素 P-450 激活后，发生均裂产生自由基
(CCl3·)。这样，一方面 CCl3·可攻击细胞膜上的磷脂分
子，引起脂质过氧化，并与膜蛋白结合，破坏膜的结构和功
能;另一方面 CCl4 还可抑制内质网上的钙离子泵，使钙离
子升高，从而激活肝细胞膜上的磷酸化酶，引起脂质过氧
化，导致肝细胞膜损伤［14］。当肝细胞受损时，由于肝细胞
内转氨酶的浓度比血清中的高，胞浆内的 ALT和 AST因浓
度差释放入血，造成高血清 ALT 和 AST，故血清中的 ALT
和 AST的活性是反映肝受损的敏感指标，也能反映肝细胞
损伤的程度。CCl4 可引起化学性肝损伤，导致肝细胞变
性、坏死、间质细胞浸润，也能引起肝纤维化，其中成纤
维细胞在肝纤维化中起着主要作用［14］。不同剂量和不同地
点野生和栽培川西獐牙菜和椭圆叶花锚的醇提物均能明显
降低 CCl4 引起的大鼠血清 ALT 和 AST 活性增高，这不仅
表明川西獐牙菜和椭圆叶花锚有效成分在一定程度保护肝
细胞膜结构，减少自由基的攻击而减轻肝细胞的损伤，从
而对急性肝损伤具有较好的降酶、保护肝细胞和治疗作用;
而且，还说明栽培和野生川西獐牙菜和椭圆叶花锚对小鼠
急性肝损伤均有保护作用，只是略有不同，因此本研究结
果初步可以说明栽培川西獐牙菜和椭圆叶花锚可代替野生
川西獐牙菜和椭圆叶花锚，从而进一步表明采用人工栽培
可以解决野生川西獐牙菜和椭圆叶花锚的资源供给问题，
满足生产需要，同时有利于保护珍稀野生川西獐牙菜和椭
圆叶花锚植物资源，为野生川西獐牙菜和椭圆叶花锚的保
护和合理开发利用提供科学依据。
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