全 文 ：海南医学院学报 2010 , 16(6)
Journal of Hainan Medical University
[ 收稿日期] 2010-04-14 [ 修回日期] 2010-05-15
[ 基金项目] 海南省自然科学基金(No 30716)
[ 作者简介] 魏娜(1980-),女 ,黑龙江齐齐哈尔人 ,讲师 ,硕士 , Tel:13617548066 , Emai l:112552819@qq.com。
黎药-角花胡颓子抗炎镇痛活性部位实验研究
魏 娜 ,谭银丰 ,刘明生 ,张俊清 ,康胜利
(海南医学院药学院 ,海南 海口 571101)
[摘要] 目的:探讨角花胡颓子茎叶水煎液各萃取部位的抗炎镇痛作用 ,为进一步寻找活性成分的研究
奠定基础 。方法:采用二甲苯引起小鼠耳肿胀和毛细血管通透性的方法观察角花胡颓子各萃取部位抗
炎作用 ,采用热板法和醋酸扭体法观察角花胡颓子镇痛作用。结果:角花胡颓子乙酸乙酯萃取层 、齐墩
果酸能明显的抑制小鼠耳肿胀(P<0.05);正丁醇萃取层 、齐墩果酸能抑制醋酸致小鼠毛细管通透性增
加(P<0.05);角花胡颓子各部位对小鼠痛阈与扭体反应无明显影响(P >0.05)。结论:角花胡颓子乙
酸乙酯层 、正丁醇层萃取部位为抗炎有效部位。
[关键词] 角花胡颓子;抗炎;镇痛
[中图分类号] R931.71 [文献标识码] A [文章编号] 1007-1237(2010)06-0677-03
Fractions of Elaeagnus gonyanthes responsible for its anti-inflammatory and analgesia activ-
ities
WEI Na , TAN Yin-feng ,LIU M ing-sheng ,ZHANG Jun-qing ,KANG S heng-li
(S chool o f P harmaceut ical Sciences , Hainan Medical University , Haikou 571101 , China)
[Foundation Project] :Project of Hainan Provincial Natural Science Foundation(No 30716)
[ Author] :WEI N a(1980-), Female , M.M., Heilong j iang , Lecturer o f Hainan Medical Univ ersi-
ty , Tel:13617548066 , Email:weina-0613 @163.com.
Received:2010-04-14 Rev ised:2010-05-15 J HMC , 2010;16(6):677-679
View from specialist:It is creative , and of certain scientific and educational value.
[ ABSTRACT] Objective:To explore the anti-inf lammatory and analgesia activi ties of each parti tioned
fract ion of the decoction ext ract of stems and leaves of Elaeagnus gonyanthes in the pursui t o f it s active
consti tuents.Methods:The anti-inflammato ry effects of each par titio ned fraction w ere studied on ear-
swelling and capi llary pe rmeabili ty models o f mice induced by xylene , analgesia ef fects we re tested on pain
mice models prepared by ho tplate and acetic acid.Results:Bo th ethy l acetate and o leanolic acid ex t ract of
E laeagnus gonyanthes could signif icantly inhibi t the ear-sw elling ef fects(P<0.05), n-butano l ext ract and
o leanolic acid ex t ract could prohibit the increase o f capillary pe rmeabili ty in the studied models(P<0.05).
No fraction of this plant show ed signif icant inf luence on the threshold of pain and w rithing response in the
models(P >0.05).Conclusions:The ethyl acetate and n-butanol ex t racts of E laeagnus gonyanthes are ef-
fective f ractions responsible for i ts anti-inf lammatory and analg esia activities.
[ KEY WORDS] E laeagnus gonyanthes;Anti-inf lammato ry ;Anagesia
角花胡颓子[ 1](E laeagnus gonyanthes Benth.) 为胡颓子科胡颓子属植物 ,别名羊母奶子 、吊中子
677
DOI :10.13210/j.cnki.jhmu.2010.06.001
藤 ,假甜酸 ,主要分布在广东 ,广西 ,湖南 ,云南 ,海南
等地。以根 、叶 、果入药 ,是海南黎族地区常用药之
一 ,也是著名黎药荔花鼻窦炎片的主药。据《海南植
物志》中记载 ,角花胡颓子具有止咳平喘 、祛风通络 、
行气止痛 、消肿解毒等作用 ,主要治疗支气管哮喘 、
慢性支气管炎 、风湿性关节炎 、腰腿痛 、河豚中毒 、跌
打肿痛等。
目前国内外对角花胡颓子的研究甚少 , 未见有
关角花胡颓子药理作用的报道。为了促进该植物资
源的合理利用与开发 , 本研究将角花胡颓子粗粉水
煎煮液 ,利用有机溶剂(氯仿 ,乙酸乙酯 ,正丁醇)进
行萃取分离 ,从乙酸乙酯部位获得大量齐墩果酸 ,同
时对各个萃取部位与分离出来的齐墩果酸进行抗炎
镇痛实验研究 ,以期确定角花胡颓子有效部位。本
实验结果将为进一步深入系统的研究和开发角花胡
颓子提供实验依据 。
1 材料
1.1 动物 、药材
取清洁级昆明种小鼠 , 18 ～ 22 g ,雌雄各半 ,动
物合格证号:SCR(豫)2009-0019 号。角花胡颓子
采自海南省万宁市 ,经中国医学科学院药用植物研
究所海南分所鉴定。阿司匹林(昆明云健制药有限
公司 ,批号:20080884)。
1.2 仪器与试剂
R-205旋转蒸发仪(上海申胜生物技术公司);
SHZ-D(Ⅲ)型旋转蒸发仪(巩义市英山谷予华仪
器厂);电热恒温水浴锅;智能热板仪器;电子天平;
注射器;V650紫外分光光度计(JASCO日本分光公
司)。伊文思蓝 ,石油醚 、氯仿 、乙酸乙酯 、正丁醇 、二
甲苯和醋酸均为分析纯试剂 。
2 方法和结果
2.1 供试药液的制备
取角花胡颓子茎叶粗粉 4.5 kg ,水煎煮3次 ,第
1次煎煮 1.5 h ,第 2和第 3次均煮 1 h ,过滤 ,合并
提取液 ,浓缩至 4.5 L 。依次用石油醚 、氯仿 、乙酸
乙酯和正丁醇萃取浓缩 ,得氯仿萃取层 24.0 g ,乙酸
乙酯萃取层 15.0 g ,正丁醇萃取层 13.5 g 。并对乙
酸乙酯萃取层进行化学成分研究 ,其中分离得到齐
墩果酸 8.52 g 。
2.2 对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响[ 2]
取实验动物 60只 ,每组 10只 ,随机分为 6 组 ,
给药组分别灌胃给予角花胡颓子氯仿层提取物 、乙
酸乙酯层提取物 、正丁醇层提取物 、齐墩果酸。阳性
对照组灌胃给予阿司匹林 0.2 g ·kg -1 ;对照组灌胃
给予等容积自来水 ,连续给药 7 d。末次给药 1 h
后 ,以 20μL 二甲苯涂于小鼠右耳廓两面致炎 ,左耳
廓作为对照 ,20 min后脱颈椎处死小鼠 ,剪下两耳 ,
重叠在一起 ,用直径 4 mm 打孔器取耳片 ,称重 ,以
两耳重量差表示炎症反应的强度 ,实验结果用 F 检
验去掉离群值 , t 检验比较各组差异 。按下式计算
抑制率 ,肿胀抑制率(%)=(给药组两耳片重量差
÷ 空白组两耳片重量差)×100%结果见表 1。
表 1 各萃取部位对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响
组别 n 剂量(g·kg-1)肿胀度(mg)肿胀抑制率(%)
空白 8 等容量自来水 2.1±1.4 —
氯仿层 8 200 1.6±1.1 25.7
乙酸乙酯层 9 200 0.8±0.5＊ 61.5
正丁醇层 8 200 1.1±0.9 48.5
阿司匹林 10 0.20 0.7±0.7＊ 66.4
齐墩果酸 10 0.15 0.9±0.8＊ 57.1
注:与空白组比较:＊ P<0.05。
由表 1可以看出:阿司匹林 、齐墩果酸 、角花胡颓子
乙酸乙酯萃取部位能明显抑制二甲苯所致小鼠耳肿
胀(P<0.05)。
2.3 对醋酸所致小鼠腹腔毛细管通透性亢进的影
响[ 2]
取实验动物 60只 ,随机分为 6组 ,每组 10只 ,给
药组分别灌胃给予角花胡颓子氯仿层提取物 、乙酸乙
酯层提取物 、正丁醇层提取物 、齐墩果酸。阳性对照组
灌胃给予阿司匹林0.2 g ·kg-1 ;对照组灌胃给予等容
积自来水 ,连续给药 7 d ,末次给药 1 h后各鼠均静脉注
射 0.5%伊文思蓝生理盐水溶液10mL·kg-1 ,随后腹
腔注射 0.6%醋酸0.2mL/只 ,20min后脱颈椎处死 ,剪
开腹部皮肤肌肉 ,用 5 mL 生理盐水分次洗涤腹腔 ,吸
管吸出洗涤液 ,3 000 r·min-1离心 10min ,取上清液与
590 nm比色测定吸光度值。结果见表 2。
表 2 各萃取部位对醋酸所致小鼠腹腔毛细管通透
性亢进的影响( x±s , n=10)
组别 剂量/(g· kg -1) 吸光度
空白 等容量自来水 0.38±0.17
氯仿层 200 0.30±0.17
乙酸乙酯层 200 0.42±0.22
正丁醇层 200 0.22±0.08＊
阿司匹林 0.20 0.06±0.04＊＊
齐墩果酸 0.15 0.24±0.10＊
注:与空白组比较:＊P<0.05 ＊＊P<0.01。
由表 2可以看出:阿司匹林 、齐墩果酸 、角花胡
678 海南医学院学报 Vol.16 No.6 Jun.2010
颓子正丁醇萃取部位能明显抑制醋酸致小鼠毛细管
通透性增加(P<0.05)。
2.4 对小鼠痛阈的影响 选用雌性健康小鼠 ,热板
(55±0.5)℃,将小鼠置于热板上 ,观察小鼠出现舔
足的潜伏期 ,作为痛阈指标 。选择痛阈在 5 ～ 20 s
的小鼠 50只 ,随机分为 5组 ,给药组分别灌胃给予
角花胡颓子氯仿层提取物 、乙酸乙酯层提取物 、正丁
醇层提取物 。阳性对照组灌胃给予阿司匹林
0.2 g ·kg-1 ;对照组灌胃给予等容积自来水 ,分别
记录给药前和给药后 60 min出现舔足的潜伏期 ,结
果见表 3。
表 3 各萃取部位对热板法致小鼠痛阈的影响( x±s , n=10)
组别 剂量(g · kg -1) 给药前痛阈(s) 给药后不同时间痛阈(s)
30 min 60 min 90 min
生理盐水 等容量自来水 18.2±3.4 20.1±5.1 23.8±1.9 21.7±3.8
氯仿层 200 23.5±3.9 21.3±4.7 21.7±5.1 21.9±4.7
乙酸乙酯层 200 20.1±3.6 21.8±1.4 18.5±4.6 17.4±7.4
正丁醇层 200 22.6±4.1 20.1±4.1 19.8±5.6 20.4±4.1
阿司匹林 0.20 21.7±4.3 28.4±4.1＊ 30.4±3.9＊ 26.0±4.6
注:与空白组比较:＊P<0.05。
2.5 各萃取部位对醋酸致小鼠扭体反应的影响
取实验动物 50 只 ,随机分为 5 组 ,给药组分别
灌胃给予角花胡颓子氯仿层提取物 、乙酸乙酯层提
取物 、正丁醇层提取物 。阳性对照组灌胃给予阿司
匹林 0.2 g ·kg-1 ;对照组灌胃给予等容积自来水 ,
分别于给药 30 min 后 ,腹腔注射 0.6%醋酸溶液
0.2 mL/只致痛 ,观察 20 min内小鼠扭体反应次数 ,
按下式计算扭体反应抑制率 ,抑制率(%)=(1-给
药组扭体反应次数 ÷空白组扭体反应次数)×100%
结果见表 4。
表 4 各萃取部位对醋酸致小鼠扭体
反应的影响( x±s , n=10)
组别 剂量(g· kg -1) 扭体次数 抑制率(%)
空白 等容量自来水 25.3±6.0 —
氯仿层 200 18.6±13.0 26.5
乙酸乙酯层 200 26.6±12.1 -5.2
正丁醇层 200 16.3±11.7 35.3
阿司匹林 0.2 9.2±11.4＊＊ 63.7
注:与空白组比较:＊＊P<0.01。
3 结论与讨论
急性炎症模型常以致炎剂二甲苯(或巴豆油)诱
发小鼠耳壳肿胀来验证药物的抗炎作用 。实验表
明 ,角花胡颓子乙酸乙酯层能明显的抑制二甲苯致
小鼠耳肿胀(P <0.05),说明角花胡颓子乙酸乙酯
层可能是其治疗急性鼻炎的有效部位。
正丁醇萃取层能显著抑制醋酸致小鼠毛细管通
透性增加(P <0.05),提示其对慢性炎症有显著的
拮抗作用 ,说明角花胡颓子正丁醇层可能是其治疗
慢性鼻炎的有效部位 。
齐墩果酸对于二甲苯致小鼠耳肿胀和醋酸致小
鼠毛细管通透性均有显著抑制作用 ,提示齐墩果酸
可能为角花胡颓子治疗急 、慢性鼻炎的有效成分。
角花胡颓子各萃取部位对小鼠痛域与扭体反应
无显著影响 ,对于麻醉性疼痛和中枢性疼痛均无显
著影响 。研究过程中从角花胡颓子乙酸乙酯萃取层
中分离得到大量齐墩果酸 ,通过高效液相分析确定
其含量约为 2.0 ‰。
以上结果说明 ,角花胡颓子的萃取部位具有显
著的抗炎活性 ,其药效物质基础可能是齐墩果酸。
参考文献
1 刘明生.黎药学概论[ M] .北京:人民卫生出版社 , 2008 ,
88.
2 Chen Q.M ethodo lo gy in pharmacolog ical study on Chi-
nese materia medica[ M] .Beijing:People Medicine Pub-
lishing House , 1994.70-71.
(责任编辑 崔蓉)
679魏娜等.黎药-角花胡颓子抗炎镇痛活性部位实验研究