全 文 ：第 9卷 第 忍期
18 5 9年 9月
热 带 作 物 学 报
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应用组织培养技术快速繁殖香荚兰 *
崔元方 刘 荣维 麦小燕 梅庆超
( 深圳农业科学 中心组培 室 )
邱进祥 陈幸华
( 华南热 带作物科学研究院热作研究所 )
摘 要
比较系统地研究了香英兰的组织培养技术 。 通过 “ 丛生芽的诱导” 和 “ 微型扦插 ” 年增殖可
达千倍以上。 比较了不同细胞分裂素对香芙兰增殖率的影响 。 以培养 50 天的增殖率计 , 6一节氨 基
p票吟 ( 名 一B A ) 的效果最佳 ( 2 7 9 . 5% ) , 玉米素 ( Z e a ) 次之 ( 2 0 6 . 8 % ) , 激 动素 ( K T ) 效
果最差 ( 140 % ) 。 以 2 毫克 / 升浓度的 B A增殖率最高 。 香荚兰容易生根 , 几种生长素对香艾兰
都有促根作用 。 以喇噪丁酸 ( 巧 A ) 的效果最佳 , 培养 17 天生根率达 10 % , 叫口朵乙酸 ( IA A )
次之 ( 肠 . 7% ) , N A A更次之 ( 71 . 4% ) 。 对照不加生长素最差 ( 57 . 1 % ) 。 BI A 以 0 . 5毫克 / 升
浓度的处理效果最好。
关健词 : 香荚兰 ; 繁殖 , 组织培养
引 言
香荚兰 ( V a in l la f r a g ar sn ) 原产中美洲 , 是一种重要的食用香料 , 经济效益甚高 。 近
年海南岛华南热带作物研究院兴隆试验站试种成功 , 引起各方面的重视 。
香荚兰的常规繁殖主要通过插条 , 年增长率 5一 10 倍 , 目前种苗缺乏成了扩大试种的限制
因子 。 通过组织培养可以大大加快繁殖速度。 国内外都有人研究过香 荚兰的组织培养技术 ,
通过 “ 微型扦插 ” 或 “ 丛生芽的诱导 ” 或经愈伤组织再诱导小芽的 3 种途径都已 取 得 了 成
功 〔卜幻 。 为适应当前生产上对香荚兰苗的需要 , 从加强开发利用的角度出发 , 我们从试管苗的
诱导 、 增殖 、 生根和移植等环节对香荚兰组织培养技术进行 了较系统的研究 。
一 、 无菌苗的诱导
外植体取材于华南热作研究院植物园 , 从新抽生的香英兰蔓上剪取一段 , 用 自来水冲洗
千净 , 用沾有洗涤剂的毛笔刷去表面的污迹 。 并用自来水冲洗半小时 。 再用 75 %酒精浸 l 一
2 秒钟 , 在 10 %次氯酸钠溶液中振荡 10分钟 , 无菌水冲洗 4 次 , 切取带顶芽或腋芽的切段 , 接
种在 M s 固体培养基上 ( 含 6 一 B A I 毫克 / 升 , 蔗糖 3 % p H S . 8 ) 。 培养室温度 26 ~ 28 ℃ ,
本文于 1 9 87年 7 月 27 日收到 。
. 参加本研究工作的还有 : 华南热作研究院热作所都杏娣 。
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光照强度 1 5 0 0勒克司 , 每天照光 12 小时 。 经过一个月的培养 , 腋芽萌动并逐渐形 成 丛 生 芽
( 3 ~ 4 月后 ) 。 腋芽荫动的诱发在华南热作研究院热作所由邱进祥 、 崔元方等进行 。 以后
的工作在深圳农科中心组培室进行 。
二 、 芽的增殖
香英兰组织培养快速繁殖主要通过两种途径 : ( 1 ) 先诱导愈伤组织 , 再由愈伤组织分
化芽 , 这种方法增殖率高 , 但容易发生变异 , 难以保持种质的一致性 。 ( 2 ) 诱导丛生芽 ,
由丛生芽的分株进行增殖 , 为了保证试管苗的质量 , 我们取后一种方法即诱导丛生芽 。
进行丛生芽的增殖时 , 基本培养基为 M S , 光照强度 1 5 0 0~ 2 0 0 0勒克司 , 光照时 间 10 小
时 , 培养温度 2 6一 3 1 “ C 。
着重研究了细胞分裂素的种类 、 浓度和细胞分裂素与生长素搭配使用对香荚兰增殖率的
影响 。
1
. 几种细胞分裂素对香荚兰增殖率的影响 比较了 B A 、 K T 、 Z ae 三种细胞分 裂素 , 浓
度均为 0 . 5毫克 / 升 。 实验结果如图 1所示 , 三者对香荚兰的增殖都有促进作用 , 其中以 B A 的
效果最佳 , 培养 50 天增殖率为 2 79 . 5 % , Z e a次之 2 0 6 . 8% , K T最低 140 % ( 每处理 45 个芽 )
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图 1 几种细胞分裂紊对香英兰增殖的影响 图 2 不同浓度 B A对香英兰增殖的影响
2
.不同浓度的 B A对香荚兰增殖率的影响 通过上述实验确定 B A对增殖最有效 。 在 这 基
础上进行了不同浓度的比较试验 , 实验结果如图 2 所示 , 随着 B A浓度的提高 , 芽增 殖 率 增
加 。 以 2 毫克 / 升 B A 的作用最 明显 , 浓度高达 4 毫克 / 升 A B时 , 增殖率反而下降 , 并容易
出现黄化的新芽 。
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.生长素对香英兰增殖的影响 以添加 B A o . 5毫升的M S为基本培养基 , 比较了N A A ,
2期 崔元方等 : 应用组织培养技术快速繁殖香荚兰
I A A, I B A和 2 , 4一 D四种生长素对香
荚兰增殖的作用 , 试验结果如图 3 所
示 , 在生长素和 B A同时加入的四个处
理增殖率都低放 B A的处理 , 以 2 , 4一 D
最甚 , N A A次之 , I B A 和 I A A 下 降 较
少 。
4
. 酪肮水解物和维生素 B :对香英
兰增殖的影响 研究了酪肮水解物和
维生素 B , 对香荚兰增殖的影响 。 结 果
如图 4 所示 , 加入酪肮水解物作用不
明显 , 同时加入 ` 毫克 /升 酪 阮水者物和 1 毫克 /升维生 素 B ,的 处 理 , 增
殖率反而下降 。
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图 3 生长寮对香英兰增班的影晌
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~ 犷六尸会一穷性厂言气扩气广玄写 `天 ’图 4 睑阮水解物和维生寮 B l对香英兰增殖的影响
三 、 根的诱导
香英兰是一种较易生根的作物 , 在不加任何生根激素的培养基中 , 在培养较长时间后 ,
常在苗达到 3 个节以上时 , 香荚兰增殖芽会自然生根 。 但加入 激 素 N A A或 I BA 会 促 进 生
根 , 且发根整齐划一 。 因此是否加入生根激素可根据情况决定。 我们进行了几种生长素对香
英兰发根的影响 , 在此基础上选出 I BA , 并研究了不同浓度下香荚兰生根的情况 。
1
. 几种生长素对香英兰生根的影响 比较了 BI A 、 I A A 和 N A A的作用 。 生根试验用的
基本培养基为M S ( 大量元素为 1 / 2 , 铁盐 、 生长物质和微量元素不变 , 蔗 糖 2 % , p H 调
2 6热 带 作 物 学 报 9卷
至 5. 8, 琼脂 0 . 8% ) 每处理 15 管 , 每管一个芽共 15 个芽 。 `
实验结果如表 1所列 , I BA 、 I A A 和 N A A的浓度都是。 。 5毫克 /升 。 诱导生根 17 天 , 以
飞B A的效果最 明显 , I A A 次之 , N A A最差 。
表 1 各 种 生 长 素 对 香 英 兰 生 根 的 影 响
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。 不同浓度 BI A对香英兰生根的影响 在上述实验基础上研究了不同浓度 BI A的作用 。
基本培养基和上述实验一样 , 仅改变 1B A 的浓度 ( 分别为 0 , 0 . 1 , 0 . 5 , 1 , 2 毫克 /升 ) ,
实验结果表明。 . 5毫克 /升的处理效果最好 。 结果列于表 2 。
表 2 不 同 浓 度 的 I B A 对 香 英 兰 生 根 的 影 响
IB A的浓度
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。 . 5毫克 /升BI A处理的香荚兰不但生根率高 , 而且数量多而壮 。
四 、 试管苗的移栽
香荚兰移植并不很困难 , 值得注意的事项有 :
( l ) 培育壮苗。 小苗弱苗移出试管后 即使能存活 , 生长也极缓慢 。 出管 苗 至 少要有
1 0 c m长 、 4 个节以上 。
( 2 ) 培养基质要透气 , 我们用椰糠或木炭两种基质都可以 。
( 3 ) 注意控制水分 , 太湿会烂苗 。
( 4 ) 用 0 . 2%多菌灵浸苗 10 分钟 , 然后移植有利于防止烂苗 。
五 、 结论
通过实验 , 我们得到的主要结果可归纳成如下几点 :
( 1 ) 在芽增殖实验中 , 试用的细胞分裂素中以 B A最有效 , 最 适浓 度 为 2 毫 克 /升。
但实际应用时须依情况加以 调节 , 在一般情况下 , 为了得到健壮的苗 , 宜适当降低 B A 的浓
度 ( 。 . 5一 1毫克 /升 ) , . ·
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2期 崔元方等 : 应用组织培养技术快速繁殖香荚兰
( 2 )生长素的加入对增殖不利 , 在芽增殖阶段不宜加入 , 其它的添加物如酪阮水解物
和 B :等无显著影响 , 因此在大规模生产中可略去。
( 3 ) 我们在大量繁殖中为降低成本用食糖代替化学试剂蔗糖 , 用自来水代替蒸馏水 ,
效果无 明显不同 。
( 4 ) 香荚兰是一种 比较容 易生根的植物 , 只要增殖芽长到 3 ~ 4 个节以上 , 慢慢就会
长出根来 , 但加入生长素可促进这一过程 。 以 BI A 效果最好 。
( 5 ) 试管苗的移植要注意基质的通气性 , 防止水分太多引起烂苗 。
移植成活后如何促进小苗的生长还有待研究 , 移植初期生长较缓慢 。
参 考 文 献
〔 1 〕 潘维雄 、 吴 金珠 : 香子兰外 植体 的组织培养 , 《 拉 衡生理 通讯 》 , 1 9 8 3 ( 2 ) , 3。一 39
〔 2 〕 C . K . G o o r g e : V a n i l la p l a n if o l ia A u d r e u s . I n d ; 几 C o e o a , A r e e a n u t & s p i e e s . l g s l ,
〔 3 〕 R a o . A . N . I n : A p p l i e d a n d F u n d a m e n t a l A s p e e t : o f p l a n t e e l l T i s s u e a n d o r g a n
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〔 4 〕 壬Ia l i n a K o n o n o w i e z a n d j u l e s j a n ie k : I n v王t r o p r o p a g a t i o n o f v a o i l la p l a n i f o l i a .
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