全 文 ：书 ［收稿日期］ ２０１３－０７－０２；２０１３－０９－１１修回
［基金项目］ 湖北省重点实验室开放基金“大别山罗田中药资源调查及开发利用技术研究”（２００１１ＢＬＫＦ２４８）；重庆市卫生局科技项目“中药
饮片质量及炮制规范研究”（２０１２－２－１４４）
［作者简介］ 何先元（１９６３－），男，副教授，从事药用植物资源开发利用及ＧＡＰ研究。Ｅ－ｍａｉｌ：ｈｘｙ９４１８＠１２６．ｃｏｍ
［文章编号］１００１－３６０１（２０１４）０１－００４６－０１８５－０３
小叶女贞中石蒜碱超声提取的工艺优化
何先元１，２，陈 畅２，项 俊１，严广言２
（１．经济林木种质改良与资源综合利用湖北省重点实验室，黄冈师范学院，湖北 黄冈
４３８０００；２．重庆医科大学 中医药学院 重庆 ４０１３３１）
［摘 要］为探索小叶女贞石蒜碱的最佳提取工艺条件，以小叶女贞石蒜碱的提取率为考察指标，以乙
醇为提取剂，采用单因素和正交试验考察乙醇浓度、料液比、超声提取时间、提取温度等因素对小叶女贞石蒜
碱提取率的影响。结果表明：小叶女贞石蒜碱的最适宜提取工艺条件是乙醇浓度６０％，料液比１∶１８，超声
提取时间３５ｍｉｎ，超声提取温度４５℃，该条件下小叶女贞石蒜碱提取率为０．１８２％。
［关键词］小叶女贞；石蒜碱；超声提取；提取工艺
［中图分类号］Ｓ３２６ ［文献标识码］Ａ
Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ ｏｎ Ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ Ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｆ Ｌｙｃｏｒｉｎｅ
ｆｒｏｍ Ｌｉｇｕｓｔｒｕｍ ｑｕｉｈｏｕｉ
ＨＥ Ｘｉａｎｙｕａｎ１，２，ＣＨＥＮ Ｃｈａｎｇ２，ＸＩＡＮＧ Ｊｕｎ１，ＹＡＮ Ｇｕａｎｇｙａｎ２
（１．Ｈｕｂｅｉ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｅｃｏｎｏｍｉｃ Ｆｏｒｅｓｔ Ｇｅｒｍｐｌａｓｍ Ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ ａｎｄ Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ Ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ，
Ｈｕａｎｇｇａｎｇ Ｎｏｒｍａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈｕａｎｇｇａｎｇ，Ｈｕｂｅｉ ４３８０００；２．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃａｌ，
Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ４０１３３１，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｏｆ ｌｙｃｏｒｉｎｅ ｆｒｏｍ Ｌ．ｑｕｉｈｏｕｉ，ｔｈｅ ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ
ｆａｃｔｏｒｓ ｏｎ Ｌ．ｑｕｉｈｏｕｉ ｌｙｃｏｒｉｎｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｙｉｅｌｄ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｅｔｈａｎｏｌ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ，ｓｏｌｉｄ－ｌｉｑｕｉｄ ｒａｔｉｏ，
ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ ａｎｄ ｌｅａｃｈｉｎｇ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ，ｗｅｒｅ ｒｅｓｅａｒｃｈｅｄ ｂｙ ａｄｏｐｔｉｎｇ ｔｈｅ ｓｉｎｇｌｅ ｆａｃｔｏｒ ａｎｄ
ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｔｅｓｔ ｄｅｓｉｇｎ ｗｉｔｈ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ ａｓ ａｎ ｉｎｄｅｘ ａｎｄ ｅｔｈａｎｏｌ ａｓ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｓｏｌｖｅｎｔ．Ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ
ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｏｆ ｌｙｃｏｒｉｎｅ ｆｒｏｍ Ｌ．ｑｕｉｈｏｕｉ ｉｎｃｌｕｄｅｄ ｅｔｈａｎｏｌ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ６０％，ｓｏｌｉｄ－ｌｉｑｕｉｄ ｒａｔｉｏ
１∶１８，ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ ３５ ｍｉｎ ａｎｄ ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ４５℃．Ｕｎｄｅｒ ｔｈｅｓｅ
ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｌｙｃｏｒｉｎｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｃｏｕｌｄ ｒｅａｃｈ ０．１８２％．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｌｉｇｕｓｔｒｕｍ ｑｕｉｈｏｕｉ；ｌｙｃｏｒｉｎｅ；ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｐｒｏｃｅｓｓ
小叶女贞（Ｌｉｇｕｓｔｒｕｍ ｑｕｉｈｏｕｉ Ｃａｒｒ．）是木犀科
女贞属的小灌木，有清热解毒的功效，可治疗烫伤、
外伤。小叶女贞的有效成分包括多花水仙碱、漳州
水仙碱、石蒜碱等生物碱，近年来，石蒜碱及其衍生
物的药理活性及作用机制研究有了很大进展，有研究
表明石蒜碱在体内外可明显抑制人体早粒细胞白血
病ＨＬ－６０细胞的增殖，并诱导 ＨＬ－６０细胞和多发性
骨髓瘤细胞凋亡［１］。石蒜碱对小鼠纤维肉瘤 Ｍｅｔｈ－Ａ
有很强的抑制作用，对小鼠皮下植入Ｌｅｖｉｓ的肺癌抑
制率为８０．５％。体外试验表明，石蒜碱对人体乳腺癌
细胞、人结肠癌细胞、人离体鼻咽癌细胞等有明显的
抑制作用［１－４］，其作用机制可能是抑制蛋白质和ＤＮＡ
的合成。目前，国内外还没有对小叶女贞石蒜碱的提
取分离进行相关研究，试验以石蒜碱的含量为控制指
标［５］，通过考察不同因素水平对石蒜碱提取率的影
响，对小叶女贞中石蒜碱提取工艺进行优化，以期为
小叶女贞的综合开发利用提供参考。
１ 材料与方法
１．１ 材料
１．１．１ 试验样品与试剂 小叶女贞叶于２０１３年４
月２８日采自重庆医科大学校园。盐酸石蒜碱（含量
≥９８％，批号２０１１１１２１，上海原叶生物科技有限公
司），盐酸、乙醇、甲醇、无水乙醇等试剂（重庆川东化
工有限公司），乙酸乙酯、氢氧化钠、石油醚（成都市
科龙化工试剂厂）。
１．１．２ 仪器 电热恒温鼓风干燥箱 ＤＧＧ－９２４０Ｂ
型（上海森信实验仪器有限公司），ＳＢ－３２００ＤＴＮ超
声波清洗机（宁波新艺生物科技股份有限公司），
ＨＨ－４数显恒温水浴锅（江苏省金坛市荣华仪器制
造有限公司），粉碎机（浙江省温岭市大鹏机械有限
公司），ＵＶ－１２００型紫外分光光度计（上海美谱达仪
器有限公司），ＳＨ２－Ｄ（Ⅲ）循环式真空泵（巩义市予
华仪器有限责任公司）。
１．２ 方法
１．２．１ 材料处理 将小叶女贞叶在烘箱中以４５℃
（低温烘干，防止温度过高破坏有效成分）烘３ｈ，然
后用粉碎机粉碎过１号筛，再将其粉末过３号筛除
去极细的粉末。
１．２．２ 提取流程 准确称取２．００ｇ干燥的小叶女
贞粉末，放入三口烧瓶中，并向该三口烧瓶中加入适
量乙醇，于超声中加热回流一定时间，过滤，将滤液
贵州农业科学 ２０１４，４２（１）：１８５～１８７
Ｇｕｉｚｈｏｕ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ
放在水浴锅中蒸干，用５％的盐酸１５ｍＬ使溶解，然
后用乙酸乙酯－石油醚（７∶３）３０ｍＬ萃取３次，取酸
水层。将酸水层用１０％的氢氧化钠调ｐＨ值１１左
右，用乙酸乙酯－石油醚（７∶３）４０ｍＬ萃取３次，取
乙酸乙酯－石油醚层得到较纯的亲脂性生物碱。将
萃取液减压蒸馏，再用２～３ｍＬ甲醇多次超声溶
解，再加甲醇定容１０ｍＬ，即为石蒜碱的提取液，测
定溶液吸光值。
１．２．３ 标准溶液的制备 精密称取干燥至恒重的
盐酸石蒜碱标准品４．５０ｍｇ置于５０ｍＬ容量瓶中，
加甲醇１０ｍＬ适当震荡使其溶解，用甲醇稀释到刻
度，摇匀得浓度为０．０８８ ２ｍｇ／ｍＬ的标准品储备
液，保存备用。
１．２．４ 标准曲线绘制 精密吸取盐酸石蒜碱标准
品溶液０．６０ｍＬ、１．２０ｍＬ、１．８０ｍＬ、２．４０ｍＬ、
３．００ｍＬ、３．６０ｍＬ和４．００ｍＬ于１～７号容量瓶
中，用甲醇定容至１０ｍＬ，摇匀、静置，以甲醇为空
白，于波长２９２ｎｍ处测吸光度（Ａ），以石蒜碱的浓
度（ｍｇ／ｍＬ）为横坐标，吸光度为纵坐标做线性图。
测得线性回归方程Ａ＝１３．１７３ ７２ ｘ＋０．００８ １４５，相
关系数ｒ＝０．９９９ ８４。线性范围为：０．００ ５４～
０．０３７ ８ｍｇ／ｍＬ。
１．２．５ 不同影响因素的试验设计
１）乙醇浓度。料液比为１∶１０，温度为５０℃，
提取时间为３０ｍｉｎ，提取１次，考察提取乙醇浓度
５０％、６０％、７０％和８０％对提取率的影响。
２）料 液 比。提 取 温 度 为 ３０℃，超 声 提 取
３０ｍｉｎ，用 ８０％ 的乙醇提取 １ 次，考察料液比
１∶１０、１∶１５、１∶２０和１∶２５对提取率的影响。
３）提取时间。料液比为１∶１０，温度为４０℃，
用８０％的乙醇提取１次，考察提取时间２０ｍｉｎ、
３０ｍｉｎ、４０ｍｉｎ和５０ｍｉｎ对提取率的影响。
４）提取温度。料液比为１∶１０，超声提取
３０ｍｉｎ，用８０％的乙醇提取，提取１次，考察提取温
度３０℃、４０℃、５０℃和６０℃对提取率的影响。
１．２．６ 最佳提取工艺的选择 根据单因素试验结
果，选取乙醇浓度（Ａ）、料液比（Ｂ）、提取时间（Ｃ）、
提取温度（Ｄ）为４个考察因素，每个因素选３个水
平（表１）进行Ｌ９（３４）正交试验设计，筛选最佳提取
条件。
表１ 小叶女贞石蒜碱的提取因素及水平
Ｔａｂｌｅ １ Ｆａｃｔｏｒｓ ａｎｄ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｄｅｓｉｇｎ ｆｏｒ
ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｌｙｃｏｒｉｎｅ ｆｒｏｍＬ．ｑｕｉｈｏｕｉ
水平
Ｌｅｖｅｌ
乙醇浓度／％
Ｅｔｈａｎｏｌ
ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ
料液比
Ｓｏｌｉｄ－ｌｉｑｕｉｄ
ｒａｔｉｏ
提取时间／ｍｉｎ
Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
ｔｉｍｅ
温度／℃
Ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ
１ ６０ １∶１５ ３０ ４０
２ ６５ １∶１８ ３５ ４５
３ ７０ １∶２０ ４０ ５０
１．２．７ 计算方法 石蒜碱得率＝［Ｃ×Ｖ／（Ｍ×
１０３）］×１００％，其中Ｃ为根据标准曲线求得的样品
中生物碱浓度（ｍｇ／ｍＬ），Ｖ 为加入甲醇的量（ｍＬ），
Ｍ 为小叶女贞干粉的量（ｇ）。
１．２．８ 稳定性考察 在优选的最优条件下提取小
叶女贞石蒜碱，将得到的供试品溶液放在室温、不避
光条件下分别于０ｈ、０．５ｈ、１ｈ、１．５ｈ、２ｈ、２．５ｈ和
３ｈ测定吸光度。
２ 结果与分析
２．１ 不同因素对小叶女贞石蒜碱提取率的影响
２．１．１ 乙醇浓度 由图示ａ可见，随着乙醇浓度
的增加，小叶女贞中石蒜碱提取率也逐渐增加。但
c%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%d
吸
光
度
Ab
so
rb
an
ce
0
0.5
1
2
3
1.5
2.5
50%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%60%%%%%%%%%%%%%%%%%%70%%%%%%%%%%%%%%%%%%%80
乙醇浓度 /%
Ethanol%concentration
吸
光
度
Ab
so
rb
an
ce
0
0.5
1
2
1.5
2.5
1∶10%%%%%%%%%%%%%%1∶15%%%%%%%%%%%%%%%1∶20%%%%%%%%%%%%1∶25
料液比
Solid-liquid%ratio
吸
光
度
Ab
so
rb
an
ce
0
0.5
1
2
1.5
2.5
温度℃
Temperature
30%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%40%%%%%%%%%%%%%%%%%%%50%%%%%%%%%%%%%%%%%%%60
吸
光
度
Ab
so
rb
an
ce
0
0.5
1
2
1.5
2.5
时间 /h
Time
20%%%%%%%%%%%%%%%%%%30%%%%%%%%%%%%%%%%%%%40%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%50
a%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%b
图示 不同乙醇浓度、料液比、提取时间、温度下小叶女贞的石蒜碱得率
Ｆｉｇ． Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ｌｙｃｏｒｉｎｅ ｆｒｏｍＬ．ｑｕｉｈｏｕｉ ｕｎｄｅｒ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｅｔｈａｎｏｌ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ，ｓｏｌｉｄ－ｌｉｑｕｉｄ ｒａｔｉｏ，
ｔｉｍｅ ａｎｄ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ
·６８１·
贵 州 农 业 科 学
Ｇｕｉｚｈｏｕ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ
是当乙醇浓度达到７０％时，小叶女贞中石蒜碱的得
率较大。这是因为乙醇对石蒜碱的溶解性比水大，
乙醇对细胞的破坏作用比水强，在超声的作用下这
种差异表现更明显。但乙醇浓度越大，一些醇溶性
杂质、色素、亲脂性强的成分溶出量增加，并与石蒜
碱类化合物竞争或与乙醇结合，从而导致石蒜碱提
取率降低，并且杂质成分越多给后续分离带来困难。
综合考虑乙醇浓度为６０％～７０％。
２．１．２ 料液比 由图示ｂ可知，随着料液比的增
大，小叶女贞石蒜碱提取率也逐渐增加，当料液比为
１∶２０时最大，因为石蒜碱得率的高低与石蒜碱向
溶剂的扩散难易程度有关，固液比太低，溶剂相对太
少，导致两相界面之间的浓度差较小，不利于石蒜碱
的扩散溶出。当料液比高于１∶２０时，石蒜碱得率
反而降低，可能是浸出的石蒜碱对未浸出的石蒜碱
的协同浸提作用影响，因此石蒜碱得率反而降低。
且增大料液比，不仅浪费溶剂而且给浓缩带来了困
难，反而延长操作时间。综合考虑最适宜料液比为
１∶１５～１∶２０。
２．１．３ 提取时间 由图示ｃ可见，超声提取具有
空化效应、热效应、机械搅拌、强化扩散等，能在较短
的时间内使小叶女贞中石蒜碱的提取率达到较大，
同时超声的振动作用加强了细胞内物质的释放、扩
散及溶解，加速植物中有效成分进入溶剂。随着提
取时间的增加，石蒜碱的提取率也逐渐增加。但是
当提取时间达３０ｍｉｎ，石蒜碱提取率最高，随着时
间增加提取率反而下降。因长时间超声使植物组织
中大量细胞破裂，导致细胞内大量不容物及较多粘
液质等混入提取液中，使溶液中杂质增多，粘度增
大，从而增大了传质阻力影响了有效成分的溶出，并
且给后续的分离萃取带来难度，并且时间过长也浪
费资源。最适宜的提取时间为３０ｍｉｎ左右。
２．１．４ 提取温度 由图示ｄ可知，随着温度的升
高，加速细胞的破坏，增强了细胞的通透性，分子运
动快，从热动力学方面增加了石蒜碱的溶出量，从而
提取含量呈上升趋势。当温度升高到５０℃时，随着
温度增加石蒜碱提取率反而减少。这可能是由于石
蒜碱被氧化或提取温度过高导致石蒜碱被破坏。说
明温度过高，不利于小叶女贞石蒜碱的提取。综合
考虑最佳温度为３０～４０℃。
２．２ 最佳提取工艺
从表２直观分析可知，各因素对小叶女贞石蒜
碱提取率影响因素的主次顺序为Ｂ＞Ａ＞Ｄ＞Ｃ，即
料液比＞乙醇浓度＞提取温度＞提取时间。在所选
因素水平下４种因素的最优组合为Ａ１Ｂ２Ｃ２Ｄ２。
２．３ 验证及稳定性试验
取小叶女贞粉末３份，每份２ｇ，根据正交试验
筛选得到的最佳提取工艺 Ａ１Ｂ２Ｃ２Ｄ２，进行验证试
验，得到石蒜碱平均得率为０．１８０％、０．１８１％和
０．１８２％。说明所得的最佳工艺条件基本稳定，具有
较好的重复性。经测定，在０ｈ、０．５ｈ、１ｈ、１．５ｈ、
２ｈ、２．５ｈ、３ｈ的 吸 光 度 为１．３ ２ ４、１．３ ２ ０、
表２ 小叶女贞石蒜碱提取的正交试验结果
Ｔａｂｌｅ ２ Ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ｆｏｒ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ
ｌｙｃｏｒｉｎｅ ｆｒｏｍＬ．ｑｕｉｈｏｕｉ
处理
Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ
Ａ Ｂ Ｃ Ｄ 石蒜碱
含量／ｍｇ
Ｌｙｃｏｒｉｎｅ
ｃｏｎｔｅｎｔ
提取率／％
Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
ｒａｔｅ
１ １ １ １ １ １．８０３ ０．０９０
２ １ ２ ２ ２ ３．６４０ ０．１８２
３ １ ３ ３ ３ ２．９４０ ０．１４７
４ ２ １ ２ ３ １．７５９ ０．０８８
５ ２ ２ ３ １ ３．０６９ ０．１５３
６ ２ ３ １ ２ ２．９３１ ０．１４７
７ ３ １ ３ ２ １．３７６ ０．０６９
８ ３ ２ １ ３ ２．１９９ ０．１１０
９ ３ ３ ２ １ ２．５４７ ０．１２７
Ｋ１ ２．７９４ １．６４６ ２．３１１ ２．４７３
Ｋ２ ２．５８６ ２．９６９ ２．６４９ ２．６４９
Ｋ３ ２．０４１ ２．８０６ ２．４６２ ２．２９９
Ｒ ０．７５３ １．３２３ ０．３３８ ０．３５０
表３ 小叶女贞石蒜碱提取的验证性试验结果
Ｔａｂｌｅ ３ Ｃｏｎｆｉｒｍａｔｏｒｙ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｒｅｓｕｌｔｓ ｆｏｒ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ
ｌｙｃｏｒｉｎｅ ｆｒｏｍＬ．ｑｕｉｈｏｕｉ
小叶女贞
重量／ｇ
Ｌ．ｑｕｉｈｏｕｉ
ｗｅｉｇｈｔ
测得石蒜
碱含量／ｍｇ
Ｍｅａｓｕｒｅｄ
ｌｙｃｏｒｉｎｅ
ｃｏｎｔｅｎｔ
石蒜碱提
取率／％
Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
ｒａｔｅ
平均提取率／％
Ａｖｅｒａｇｅ
ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ
２．００ ３．６０ ０．１８０ ０．１８１
２．００ ３．６２ ０．１８１
２．００ ３．６４ ０．１８２
１．３１３、１．３０６、１．２９６、１．２９６、１．２９４，石蒜碱吸光度
ＲＳＤ＝０．９４０％，说明小叶女贞的石蒜碱在常温下３
ｈ内较稳定。
３ 结论
小叶女贞生长迅速，资源丰富，所含的生物碱大
多以游离形式存在，主要为石蒜碱、秋水仙生物碱
等，试验直接测定小叶女贞粗粉中石蒜碱的含量并
用乙醇为提取溶剂，利用超声辅助法提取小叶女贞
中的石蒜碱。通过Ｌ９（３４）正交试验确定了提取的
最佳工艺条件，超声辅助法提取小叶女贞中石蒜碱
的最佳条件为乙醇６０％，超声提取３５ｍｉｎ，料液比
１∶１８，提取温度４５℃。该工艺具有操作简单，生产
成本低等特点。石蒜碱是该植物主要的活性成分之
一，研究该植物石蒜碱的提取工艺，为该植物的进一
步综合开发提供重要参考。
［参 考 文 献］
［１］ Ｍａｔｎｅｅｎｋｏ Ｍ，Ｋｏｋａｓ Ｏ Ｊ，Ｂａｎｗｅｌ Ｍ Ｇ，ｅｔ ａｌ．Ｃｈｅ－
ｍｏｅｎｚｙｍａｔｉｃ ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ ｔｏ ｌｙｃｏｒｉｎｅ－ｔｙｐｅ ａｍａｒｙｌｉ－
ｄａｃｅａｅ ａｌｋａｌｏｉｄｓ：ｔｏｔａｌ ｓｙｎｔｈｅｓｅｓ ｏｆ ｅｎｔ－ｌｙｃｏｒｉｃｉｄｉｎｅ，３－
ｅｐｉ－ｌｙｃｏｒｉｃｉｄｉｎｅ，ａｎｄ ４－ｄｅｏｘｙ－３－ｅｐｉ－ｌｙｃｏｆｉｃｉｄｉｎｅ［Ｊ］．
Ｏｒｇ Ｌｅｔｔ，２００７，９（１８）：３６８３－３６８５．
［２］ Ｌｉｕ Ｊ，Ｈｕ ＷＸ，Ｈｅ ＬＦ，ｅｔ ａｌ．Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｌｙｃｏｒｉｎｅ ｏｎ
ＨＬ－６０ｃｅｌｓ ｖｉａ ａｒｒｅｓｔｉｎｇ ｃｅｌ ｃｙｃｌｅ ａｎｄ ｉｎｄｕｃｉｎｇ
ｑｐｏｐｔｏｓｉｓ［Ｊ］．ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ，２００４，５８７（３）：２４５－２５０．
·７８１·
何先元 等 小叶女贞中石蒜碱超声提取的工艺优化
ＨＥ Ｘｉａｎｙｕａｎ ｅｔ ａｌ Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ ｏｎ Ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ Ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｆ Ｌｙｃｏｒｉｎｅ ｆｒｏｍＬｉｇｕｓｔｒｕｍ ｑｕｉｈｏｕｉ
书［文章编号］１００１－３６０１（２０１４）０１－００４７－０１８８－０３
梵净山野生藤茶多酚提取工艺的优化
王 岚，王 霞，吴定军，高健强
（铜仁学院 生物科学与化学系，梵净山野生动植物资源保护与利用研究中心，
梵净山特色动植物资源重点实验室，贵州 铜仁５５４３００）
［摘 要］为探索梵净山野生藤茶多酚的最佳提取工艺，采用水浴浸提法提取梵净山野生藤茶多酚。根
据单因素试验和正交试验结果表明，梵净山野生藤茶多酚提取的最佳工艺为：８０％乙醇为提取溶剂，７０℃恒
温水浴浸提４５ｍｉｎ，浸提３次。在该工艺下藤茶多酚含量为２３．６４ｍｇ／ｇ。
［关键词］梵净山；野生藤茶；多酚；工艺优化
［中图分类号］Ｓ３８ ［文献标识码］Ａ
Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ Ｐｒｏｃｅｓｓ Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ ｉｎ Ｗｉｌｄ Ｖｉｎｅ
Ｔｅａ ｆｒｏｍ Ｆａｎｊｉｎｇ Ｍｏｕｎｔａｉｎ
ＷＡＮＧ Ｌａｎ，ＷＡＮＧ Ｘｉａ，ＷＵ Ｄｉｎｇｊｕｎ，ＧＡＯ Ｊｉａｎｑｉａｎｇ
（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｔｏｎｇｒｅｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｔｈｅ Ｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｅｒ ｏｆ Ｔｈｅ Ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｏｎ ａｎｄ
Ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｗｉｌｄｌｉｆｅ Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ ｉｎ Ｆａｎｊｉｎｇ Ｍｏｕｎｔａｉｎ，Ｔｏｎｇｒｅｎ，Ｇｕｉｚｈｏｕ５５４３００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｆ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ ｆｒｏｍ Ｆａｎｊｉｎｇ Ｍｏｕｎｔａｉｎ ｗｉｌｄ ｖｉｎｅ
ｔｅａ，ｔｈｅ ｗａｔｅｒ ｂａｔｈ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ａｄｏｐｔｅｄ ｔｏ ｅｘｔｒａｃｔ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ ｆｒｏｍ Ｆａｎｊｉｎｇ Ｍｏｕｎｔａｉｎ ｗｉｌｄ ｖｉｎｅ
ｔｅａ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｓｉｎｇｌｅ ｆａｃｔｏｒ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ａｎｄ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｔｅｓｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ
ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｉｎｃｌｕｄｅｄ ８０％ｅｔｈａｎｏｌ ａｓ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｓｏｌｖｅｎｔ ａｎｄ ｃｏｎｔｉｎｕｕｍ ｔｈｒｅｅ ｔｉｍｅｓ ｆｏｒ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ，ｅａｃｈ ｔｉｍｅ
ｆｏｒ ４５ｍｉｎ ｕｎｄｅｒ ７０℃ ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｆａｎｊｉｎｇ Ｍｏｕｎｔａｉｎ；ｗｉｌｄ ｖｉｎｅ ｔｅａ；ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ；ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ
梵净山是国家级重点自然保护区。１９８６年加
入联合国教科文组织世界生物圈保护区网络，以保
护森林生态系统和珍贵动植物物种及其独特的景观
资源为主［１］。其保护区内生长有大量的野生藤茶，
当地人们称之为茅岩莓茶、端午茶、藤婆茶等。藤茶
为葡萄科蛇葡萄属显齿蛇葡萄科的嫩茎叶［２－３］，主要
分布于湖南、湖北、云南、贵州和广西等。藤茶内含
有多种有益于人体健康的成分，主要有茶多酚、茶多
糖、咖啡碱等。研究报道表明，茶多酚是一种天然食
品抗氧化剂。此外，它还具有抗癌、抗衰老、抗辐射、
清除人体自由基、降低血糖血脂等一系列重要药理
功能［４－５］。还可应用于日用化工、食品加工等领
域［６－９］。目前，有关藤茶的研究主要集中在主要活性
成分分析和总多酚抗氧化活性［１０－１１］，未见其茶多酚
提取的相关报道。试验首次对梵净山野生藤茶多酚
提取工艺进行了研究，旨在为铜仁野生藤茶资源的
综合开发和利用提供依据。
１ 材料与方法
１．１ 材料与试剂
１．１．１ 材料 野生藤茶，由铜仁野生藤茶专卖店
提供。
１．１．２ 试剂 没食子酸、无水乙醇、硫酸亚铁、酒
石酸钾钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾。
１．１．３ 仪器设备 Ｔ６新世纪紫外可见分光光度
计，ＡＬ２０４型电子天平，ＤＨＧ－９１４０Ａ型电热恒温鼓
风干燥箱。
１．２ 藤茶多酚提取工艺
藤茶→筛选除杂除梗→粉碎成末→水浴浸提→
离心→检测。采用的固液比为１∶２０。
１．３ 试验方法
１．３．１ 不同因素对茶多酚提取影响的考察
１）浸提试剂。精确称取干燥后的野生藤茶
０．５００ ０ｇ，分别用５０％、６０％、７０％、８０％和９０％乙
［收稿日期］ ２０１３－０５－１５；２０１３－０８－３０修回
［基金项目］ 贵州省高等学校重点支持学科项目“野生动植物保护与利用”［黔教合重点支持学科字（２０１１）２３２］；贵州省教育厅特色实验室
建设项目“梵净山特色动植物资源重点实验室”［黔教合ＫＹ（２０１１）２３２］
［作者简介］ 王 岚（１９８３－），女，讲师，从事植物生理生态教学和科研工作。Ｅ－ｍａｉｌ：４０７６０２０７７＠ｑｑ
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．ｃｏｍ
［３］ Ｌｕｉ Ｊ，Ｌｉ Ｙ，Ｔａｎｇ Ｉ Ｊ，ｅｔ ａｌ．Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｌｙｃｏｒｉｎｅ ｏｎ
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［４］ Ｌｉｎ Ｌ Ｚ，Ｈｕ Ｓ Ｆ，Ｃｈａｉ Ｈ Ｂ，ｅｔ ａｌ．Ｌｙｃｏｒｉｎｅ ａｌｋａｌｏｉｄｓ
ｆｒｏｎ Ｈｙｍｅｎｏｃａｕｉｓ ｌｉｔｔｏｒａｌｉｓ［Ｊ］．Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｙ，１９９５，
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（责任编辑：孙小岚）
贵州农业科学 ２０１４，４２（１）：１８８～１９０
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