全 文 ：·生物技术· 北方园艺２０１７（０４）：９８～１０１
第一作者简介：符运柳（１９７８－），女，硕士，助理研究员，现主要
从事植物种质资源保存等研究工作。Ｅ－ｍａｉｌ：ｆｙｌｊ＿２００７＠１２６．
ｃｏｍ．　
责任作者：李志英（１９７１－），女，博士，研究员，研究方向为植物
种质资源保存与利用。Ｅ－ｍａｉｌ：ｘｌｉｚｈｉｙｉｎｇ＠ｖｉｐ．１６３．ｃｏｍ．
基金项目：农业部引进国际先进技术资助项目（２０１５－Ｚ２２）；农
业部物种资源保护专项资助项目（１６ＲＺＺＹ－１０１）。
收稿日期：２０１６－１０－０８
ＤＯＩ：１０．１１９３７／ｂｆｙｙ．２０１７０４０２２
走马胎离体培养及植株再生
符 运 柳１，２，徐 　 立１，２，李 志 英１，２，黄 碧 兰１，２，李 克 烈１，２
（１．中国热带农业科学院 热带作物品种资源研究所，海南 儋州５７１７３７；２．农业部华南作物基因资源与种质创制重点实验室，
海南省热带作物种质资源遗传改良与创新重点实验室，海南 儋州５７１７３７）
　　摘　要：以走马胎幼嫩叶片为外植体，研究不同培养基对走马胎叶片愈伤组织诱导、不定芽
分化、增殖及生根培养的影响。结果表明：叶片在ＭＳ＋６－ＢＡ　１．０ｍｇ·Ｌ－１＋ＮＡＡ　１．０ｍｇ·Ｌ－１
培养基上诱导产生的愈伤组织最适合用于进行分化和增殖；愈伤组织分化不定芽的最适培养基
为ＭＳ＋６－ＢＡ　２．０ｍｇ·Ｌ－１＋ＮＡＡ　０．１ｍｇ·Ｌ－１，分化率高达８８．９％；壮苗培养基为 ＭＳ＋６－ＢＡ
０．５ｍｇ·Ｌ－１＋ＮＡＡ　０．１ｍｇ·Ｌ－１＋１０％椰子水（ＣＷ）；最适的生根培养基为 ＭＳ＋ＮＡＡ
０．１ｍｇ·Ｌ－１＋ＩＢＡ　１．０ｍｇ·Ｌ－１，生根率达１００％，根系发达，植株生长健壮。经生根培养及练
苗，走马胎的假植成活率达８５％。
关键词：走马胎；叶片；离体培养；植株再生
中图分类号：Ｓ　７９３．９　文献标识码：Ａ　文章编号：１００１－０００９（２０１７）０４－００９８－０４
　　走马胎（Ａｒｄｉｓｉａ　ｇｉｇａｎｔｉｆｏｌｉａ　Ｓｔａｐｆ．）属紫金牛
科（Ｍｙｒｓｉｎａｃｅａｅ）紫金牛属（Ａｒｄｉｓｉａ）常绿直立灌木，
又名大叶紫金牛，分布于我国云南、江西、福建、广
东、广西等省（区）。多生于海拔１　３００ｍ以下的山
谷、溪旁的疏、密林下潮湿处［１］。走马胎的根茎及全
株具有祛风湿壮筋骨、活血化瘀、消肿止痛、止血生
肌等功效［２－３］；可治疗类风湿关节炎［４］、筋骨疼痛、跌
打损伤、产后瘀血、半生不遂等病症。作为一种民间
常用中草药，随着近年来对走马胎需求量的与日俱
增，其野生资源已日趋枯竭，甚至在有些分布点已经
很难见到。因此，为满足市场需求，人工种植势在
必行。
在自然条件下，走马胎通常采用种子繁殖，也可
采用扦插繁殖方法［５］。扦插繁殖耗费植物材料较
多，繁殖效率较低，且长期的无性繁殖会带来品种退
化、病虫危害等问题；在种子繁殖方面，据科研人员
多年研究发现，走马胎开花坐果率不到５％，且野生
资源分散，成熟时间不一致，造成了种子采集困难等
问题。另外，种子萌芽需要的时间较长，不利于种苗
快速繁育。所以，扦插和播种都不能作为走马胎种
苗批量繁殖的方法。
植物组织培养具有原材料需求量少、不受时间
和地点限制、繁殖系数高、可保持母本优良性状等特
点，在植物种苗繁育上广泛应用。关于紫金牛属植
物的组培技术已有一些报道，如朱砂根［６］、虎舌
红［７］、九节龙、紫金牛［８］、堇叶紫金牛［９］等，但走马胎
的组织培养和快繁技术的研究尚鲜见报道。该研究
以走马胎叶片为外植体，研究影响其植株再生的因
素，旨在为走马胎的工厂化育苗提供技术支持，为有
效保护和可持续利用走马胎的野生资源，满足走马
胎人工栽培对种苗的需求提供保证。
１　材料与方法
１．１　试验材料
供试的马胎植株幼嫩叶片取自中国热带农业科
学院热带作物品种资源研究所快繁中心大棚。
１．２　试验方法
１．２．１　叶片消毒　选取健壮无病虫害的走马胎幼
嫩叶片，在流水下冲洗干净，然后在超净工作台上用
吸水纸吸干材料表面水分，再用７５％酒精消毒３０ｓ～
１ｍｉｎ，无菌水冲洗２次，接着用０．１％ＨｇＣｌ２ 溶液消
８９
北方园艺２０１７（０４）：９８～１０１ ·生物技术·
毒８ｍｉｎ，无菌水冲洗５次，最后用无菌滤纸吸干材
料表面的水分待用。
１．２．２　愈伤组织的诱导　将消毒好的叶片切掉叶
缘，然后沿与叶脉垂直方向切成约０．５ｃｍ×１．０ｃｍ的
小块接种于不同培养基：１）ＭＳ＋６－ＢＡ　１．０ｍｇ·Ｌ－１；
２）ＭＳ＋６－ＢＡ　１．０ｍｇ·Ｌ－１＋ＮＡＡ　１．０ｍｇ·Ｌ－１；
３）ＭＳ＋ＮＡＡ　１．０ｍｇ·Ｌ－１上诱导愈伤组织。每处
理接种１０个外植体，３次重复，３０ｄ后统计结果。愈
伤组织诱导率（％）＝产生愈伤组织的外植体／接种
外植体×１００。
１．２．３　诱导愈伤组织分化不定芽　将愈伤组织切
割成小块接种于以下几种不定芽诱导（分化）培养
基上：１）ＭＳ＋６－ＢＡ　１．０ｍｇ·Ｌ－１；２）ＭＳ＋６－ＢＡ
１．０ｍｇ·Ｌ－１＋ＮＡＡ　０．１ｍｇ·Ｌ－１；３）ＭＳ＋６－ＢＡ
２．０ｍｇ·Ｌ－１；４）ＭＳ＋６－ＢＡ　２．０ｍｇ·Ｌ－１＋ＮＡＡ
０．１ｍｇ·Ｌ－１；５）ＭＳ＋６－ＢＡ　３．０ｍｇ·Ｌ－１；６）ＭＳ＋
６－ＢＡ　３．０ｍｇ·Ｌ－１＋ＮＡＡ　０．１ｍｇ·Ｌ－１上，筛选出
适宜的不定芽诱导培养基配方。每处理接种３０个外
植体，３次重复，４０ｄ后统计不定芽诱导情况。不定芽
诱导率（％）＝分化不定芽外植体／接种外植体×１００。
１．２．４　继代增殖　将从愈伤组织分化的不定芽切割
成小块转入继代增殖培养基中，形成丛芽，再将丛芽切
割成小丛后接种到相同的培养基上继代增殖培养。
１．２．５　壮苗及生根培养　生根前将丛芽切割成小
块，转到 ＭＳ（改良）＋６－ＢＡ　０．５ｍｇ·Ｌ－１＋ＮＡＡ
０．１ｍｇ·Ｌ－１＋１０％椰子水（ＣＷ）的培养基上进行壮
苗培养。待不定芽长到２～３ｃｍ时，切取单芽，接种
于生根诱导培养基上进行生根培养。再生苗生根率
（％）＝生根苗株数／接种总株数×１００。
１．２．６　培养条件　试验所用培养基除壮苗培养基
为ＭＳ改良培养基外，基本培养基均为ＭＳ。蔗糖用
量为３０ｇ·Ｌ－１、卡拉胶６．５ｇ·Ｌ－１、ｐＨ　５．８；光照时
间１２ｈ·ｄ－１，光照强度３０～４０μｍｏｌ·ｍ
－２·ｓ－１，培
养温度（２６±２）℃。
１．３　数据分析
采用邓肯氏新复极差法对试验数据进行多重
比较。
２　结果与分析
２．１　不同培养基配方对走马胎叶片愈伤诱导的影响
由表１可知，单独添加细胞分裂素６－ＢＡ，叶片
不能诱导产生愈伤。６－ＢＡ与ＮＡＡ结合使用或单独
添加ＮＡＡ，外植体均能诱导产生愈伤组织，但配方
不同，诱导产生的愈伤组织质地、颜色也不一样。单
独添加１．０ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ的外植体产生的愈伤组织
黄白色，质地软绵（图１－Ａ），不易分化；而１．０ｍｇ·Ｌ－１
６－ＢＡ与１．０ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ结合使用时，外植体先
是在切口处产生黑色愈伤，继而形成质地较硬的翠
绿色愈伤组织（图１－Ｂ），将此种愈伤组织切割成小块
接于分化培养基上可分化不定芽（图１－Ｃ）。
　　表１ 不同植物生长物质对走马胎叶片愈伤诱导的影响
　　Ｔａｂｌｅ　１ Ｅｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｐｌａｎｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ　ｏｎ　ｃａｌｕｓ　ｉｎｄｕｃｉｎｇ　ｆｒｏｍＡ．ｇｉｇａｎｔｉｆｏｌｉａＳｔａｐｆ．ｌｅａｆ
基本培养基
Ｍｅｄｉｕｍ
植物生长物质浓度
Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｌａｎｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ／（ｍｇ·Ｌ－１）
６－ＢＡ　 ＮＡＡ
愈伤组织诱导率
Ｃａｌｕｓ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ／％
愈伤组织质地和生长状态
Ｓｔａｔｕｓ　ａｎｄ　ｑｕａｌｉｔｙ　ｏｆ　ｃａｌｕｓ
１．０　 ０．０　 ０ 叶边缘变褐，叶片变黄，无愈伤产生
ＭＳ　 １．０　 １．０　 １００ 叶边缘或叶脉处产生黑色或翠绿色愈伤，质地较硬
０．０　 １．０　 １００ 黄白色愈伤，质地软绵
２．２　不同植物生长物质对走马胎不定芽诱导的
影响
将翠绿色愈伤组织切成小块，接种于附加６－ＢＡ、
ＮＡＡ配比的培养基上诱导分化不定芽。由表２可
知，在相同的６－ＢＡ浓度下，单独添加６－ＢＡ，分
化不定芽诱导率显著低于６－ＢＡ与ＮＡＡ配合使
用；而在相同浓度的 ＮＡＡ与不同浓度的６－ＢＡ
进行配比时，６－ＢＡ浓度越高，产生的不定芽数
越多，增殖系数越高，但芽较细弱，且不易长高
（图１－Ｃ）。因此，ＭＳ＋６－ＢＡ　２．０ｍｇ·Ｌ－１＋ＮＡＡ
０．１ｍｇ·Ｌ－１配方为较适宜的不定芽诱导及继代增
殖培养基。
表２　植物生长物质对走马胎不定芽诱导的影响
　　Ｔａｂｌｅ　２　Ｅｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｐｌａｎｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ　ｏｎ　ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ
ｓｈｏｏｔ　ｉｎｄｕｃｉｎｇ　ｏｆ　Ａ．ｇｉｇａｎｔｉｆｏｌｉａＳｔａｐｆ．
植物生长物质及浓度
Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｌａｎｔ　ｇｒｏｗｔｈ
ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ／（ｍｇ·Ｌ－１）
６－ＢＡ　 ＮＡＡ
不定芽分化率
Ｓｈｏｏｔ　ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ
ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ／％
不定芽生长状态
Ｓｔａｔｕｓ　ｏｆ　ｓｈｏｏｔｓ
１．０　 ０．０　 ７０．０ｃ 外植体分化不定芽数较少，粗壮
１．０　 ０．１　 ７８．９ｂ 外植体分化不定芽数较少，粗壮
２．０　 ０．０　 ７８．９ｂ 外植体分化不定芽数较多，较壮
２．０　 ０．１　 ８８．９ａ 外植体分化不定芽数较多，较壮
３．０　 ０．０　 ６２．２ｄ 外植体分化不定芽数较多，较细
３．０　 ０．１　 ６６．７ｃ 外植体分化不定芽数较多，较细
　　注：邓肯氏新复极差法显著性测验，不同字母表示２个处理之间存在显著
差异（Ｐ＝０．０５）。
Ｎｏｔｅ：Ｄｕｎｃａｎ′ｓ　ｎｅｗ　ｍｕｌｔｉｐｌｅ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｔｅｓｔ　ｏｆ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ．Ｄｉｆｅｒｅｎｔ　ｌｅｔｔｅｒｓ　ｍｅａｎ
ｔｈｅｒｅ　ｉｓ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｅｒｅｎｃｅ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｔｗｏ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ（Ｐ＝０．０５）．
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·生物技术· 北方园艺２０１７（０４）：９８～１０１
　　注：Ａ．ＭＳ＋ＮＡＡ　１．０ｍｇ·Ｌ－１诱导产生愈伤组织；Ｂ．ＭＳ＋６－ＢＡ　１．０ｍｇ·Ｌ－１＋ＮＡＡ　１．０ｍｇ·Ｌ－１诱导产生的愈伤组织；Ｃ．愈伤组织
诱导分化不定芽；Ｄ．壮苗培养；Ｅ．２～５号生根培养基不定芽生根情况；Ｆ．６～９号生根培养基不定芽的生根情况；Ｇ．移栽６周后走马胎生根
苗生长情况。
Ｎｏｔｅ：Ａ．Ｃａｌｕｓ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｏｎ　ｍｅｄｉｕｍ　ＭＳ＋ＮＡＡ　１．０ｍｇ·Ｌ－１；Ｂ．Ｃａｌｕｓ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｏｎ　ｍｅｄｉｕｍ　ＭＳ＋６－ＢＡ　１．０ｍｇ·Ｌ－１＋ＮＡＡ　１．０ｍｇ·Ｌ－１；
Ｃ．Ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ　ｂｕｄｓ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｆｒｏｍ　ｃａｌｕｓ；Ｄ．Ｓｔｒｏｎｇ　ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ；Ｅ．Ｒｏｏｔｉｎｇ　ｏｆ　ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ　ｂｕｄｓ　ｏｎ　ｍｅｄｉｕｍ　２－５；Ｆ．Ｒｏｏｔｉｎｇ　ｏｆ　ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ　ｂｕｄｓ　ｏｎ
ｍｅｄｉｕｍ　６－９；Ｇ．Ｇｒｏｗｔｈ　ｏｆ　Ａ．ｇｉｇａｎｔｉｆｏｌｉａＳｔａｐｆ．ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ　６ｗｅｅｋｓ　ａｆｔｅｒ　ｔｒａｎｓｐｌａｎｔｉｎｇ．
图１　走马胎叶片离体培养及植株再生
Ｆｉｇ．１　Ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ａｎｄ　ｐｌａｎｔ　ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ　ｆｒｏｍＡ．ｇｉｇａｎｔｉｆｏｌｉａＳｔａｐｆ．ｌｅａｆ
２．３　壮苗及生根培养
不定芽在继代培养基上继代增殖形成丛芽后，
芽苗不易长高，要切取单芽生根比较困难，因此，把
丛芽切割成小丛转接到壮苗培养基ＭＳ（改良）＋６－ＢＡ
０．５ｍｇ·Ｌ－１＋ＮＡＡ　０．１ｍｇ·Ｌ－１＋１０％椰子水
（ＣＷ）上进行壮苗培养（图１－Ｄ），待不定芽长到２～
３ｃｍ高时，单株切取，接种于生根培养基上培养形成
完整植株。
不定芽单株切取接种于生根培养基１０ｄ后，开
始从切口处产生不定根，１个月后形成良好根系。从
表３可以看出，不定芽在不添加任何激素的 ＭＳ培
养基上没有不定根产生；在添加 ＮＡＡ、ＩＢＡ 或
ＮＡＡ与ＩＢＡ配合使用的培养基中均能１００％生
根。其中，接种于单独添加ＮＡＡ或较高浓度ＮＡＡ
与０．１ｍｇ·Ｌ－１ＩＢＡ配合使用的生根培养基上的不
定芽所产生的根较为粗壮，根系发达，试管苗生长健
壮（图１－Ｅ）；而接种于单独添加ＩＢＡ或较高浓度ＩＢＡ
与０．１ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ配合使用的生根培养基上不定
芽所产生的根较细长，根数较少，试管苗长势较弱
（图１－Ｆ）。根据苗的长势及根的生长情况，该试验
选用的不定芽生根的较适宜培养基为 ＭＳ＋ＮＡＡ
０．１ｍｇ·Ｌ－１＋ＩＢＡ　１．０ｍｇ·Ｌ－１。
２．４　生根苗移栽及管理
将３～５ｃｍ高的生根苗连培养瓶放置在控温大
　　表３　植物生长物质对不定芽生根的影响
　　Ｔａｂｌｅ　３　Ｅｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｐｌａｎｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ　ｏｎ　ｒｏｏｔｉｎｇ　ｏｆ
ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ　ｓｈｏｏｔ　ｏｆ　Ａ．ｇｉｇａｎｔｉｆｏｌｉａＳｔａｐｆ．
植物生长物质及浓度
Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｌａｎｔ　ｇｒｏｗｔｈ
ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ／（ｍｇ·Ｌ－１）
ＮＡＡ　 ＩＢＡ
生苗的生根率
Ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ　ｏｆ　ｒｏｏｔｉｎｇ
／％
根生长状态
Ｓｔａｔｕｓ　ｏｆ
ｒｏｏｔ
０．０ ０．０ － －
０．５　 ０．０　 １００ 细长，根系不发达
０．５　 ０．１　 １００ 细长，根系不发达
１．０　 ０．１　 １００ 细长，根系不发达
２．０　 ０．１　 １００ 细长，根系不发达
０．０　 ０．５　 １００ 粗壮，根系发达
０．１　 ０．５　 １００ 粗壮，根系发达
０．１　 １．０　 １００ 粗壮，根系发达
０．１　 ２．０　 １００ 粗壮，根系发达
　　注：‘－’表示没有产生不定根。
Ｎｏｔｅ：‘－’ｍｅａｎｓ　ｎｏ　ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ　ｒｏｏｔｓ．
棚内练苗，１周后将苗移出培养瓶外，洗净小苗根部
的培养基，放入６００倍液的多菌灵溶液中浸泡３０ｓ
至１ｍｉｎ，移栽于经多菌灵溶液消毒的混合基质中，
４０ｄ后，成活率达８５％以上（图１－Ｇ）。
基质配比及移栽前处理：草炭土∶椰糠∶河沙
体积比为３∶２∶１，移栽前将基质混匀后，用多菌灵
溶液淋透，盖上薄膜捂３～５ｄ后揭开，用清水淋透后
种苗，种苗后淋足定根水。
移栽后７～１０ｄ，覆盖薄膜保湿，基质湿度保持
００１
北方园艺２０１７（０４）：９８～１０１ ·生物技术·
８５％左右，然后逐渐降低到７０％；空气湿度９０％以
上，然后逐渐降低到６０％～７０％；遮阴６０％～７０％，
然后逐渐减少到３０％左右；１５～２０ｄ后幼苗生新根，
晴天上午采用０．２％～０．３％尿素溶液喷雾后，并用
清水淋洗，每７ｄ施肥１次。
病虫害防治：利用５００倍多菌灵、５００倍百菌清、
８００倍甲霜灵复合防病，利用菊酯类杀虫剂除虫。
３　讨论
走马胎作为一种民间常用野生中草药，其生存
状况不容乐观，市场供应日益紧张。为了缓解市场
压力，保护野生资源，该试验以走马胎幼嫩叶片为外
植体，研究了走马胎离体培养及植株再生技术。该
研究表明，单独添加６－ＢＡ不能诱导叶片产生愈伤
或分化芽苗；单独添加１．０ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ 或
１．０ｍｇ·Ｌ－１　６－ＢＡ与１．０ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ配合使用，
均能诱导产生愈伤组织，但所产生的愈伤因植物生长
调节剂的不同，愈伤组织的质地和进一步的分化再生
能力也有较大差别。该研究筛选出附加１．０ｍｇ·Ｌ－１
６－ＢＡ与１．０ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ配合使用诱导产生的愈
伤组织作为诱导不定芽分化的起始材料。将愈伤组
织切割成小块，接种于添加不同浓度６－ＢＡ与ＮＡＡ
的诱导培养基上，最后筛选出适宜诱导不定芽分化、
增殖的培养基为 ＭＳ＋６－ＢＡ　２．０ｍｇ·Ｌ－１＋ＮＡＡ
０．１ｍｇ·Ｌ－１，该培养基诱导率高、增殖系数高，但分
化的不定芽不易长高，对下一步切取单株生根不利
操作。因此，该研究在壮苗阶段对 ＭＳ培养基进行
了改良，将丛芽切割成小块转接入ＭＳ（改良）＋６－ＢＡ
０．５ｍｇ·Ｌ－１＋ＮＡＡ　０．１ｍｇ·Ｌ－１＋椰子水（ＣＷ）
１０％培养基中诱导不定芽伸长生长，但仍不能高频
诱导不定芽增高。因此，下一步再结合现有的研究
基础，优化增殖及壮苗培养基，提高能生根的有效苗
数，为工厂化育苗提供良好的技术基础。
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Ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　Ｃｕｌｔｕｒｅ　ａｎｄ　Ｐｌａｎｔ　Ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＡｒｄｉｓｉａｇｉｇａｎｔｉｆｏｌｉａＳｔａｐｆ．
ＦＵ　Ｙｕｎｌｉｕ１，２，ＸＵ　Ｌｉ　１，２，ＬＩ　Ｚｈｉｙｉｎｇ１，２，ＨＵＡＮＧ　Ｂｉｌａｎ１，２，ＬＩ　Ｋｅｌｉｅ１，２
（１．Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｔｒｏｐｉｃａｌ　Ｃｒｏｐ　Ｇｅｎｅｔｉｃ　Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ，Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　Ｔｒｏｐｉｃａｌ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｄａｎｚｈｏｕ，Ｈａｉｎａｎ　５７１７３７；
２．Ｍｉｎｉｓｔｒｙ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ　Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆ　Ｃｒｏｐ　Ｇｅｎｅ　Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ　ａｎｄ　Ｇｅｒｍｐｌａｓｍ　Ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ　ｉｎ　Ｓｏｕｔｈｅｒｎ　Ｃｈｉｎａ／Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ
ｏｆ　Ｔｒｏｐｉｃａｌ　Ｃｒｏｐｓ　Ｇｅｒｍｐｌａｓｍ　Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ　Ｇｅｎｅｔｉｃ　Ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ　ａｎｄ　Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎ，Ｄａｎｚｈｏｕ，Ｈａｉｎａｎ　５７１７３７）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａ．ｇｉｇａｎｔｉｆｏｌｉａ　Ｓｔａｐｆ．ｌｅａｖｅｓ　ｗｅｒｅ　ｕｓｅｄ　ａｓ　ｅｘｐｌａｎｔｓ，ｔｈｅ　ｅｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｅｒｅｎｔ　ｍｅｄｉｕｍｓ　ｏｎ　ｌｅａｆ　ｃａｌｕｓ
ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ，ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ　ｂｕｄ　ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ，ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｒｏｏｔｉｎｇ　ｗｅｒｅ　ｓｔｕｄｉｅｄ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ
ｃａｌｕｓ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｆｒｏｍ　ｌｅａｆ　ｅｘｐｌａｎｔｓ　ｏｎ　ｍｅｄｉｕｍ　ＭＳ＋６－ＢＡ　１．０ｍｇ·Ｌ－１＋ＮＡＡ　１．０ｍｇ·Ｌ－１　ｗｅｒｅ　ｅａｓｙ　ｔｏ　ｐｒｏｄｕｃｅ
ａｕｘｉｌｉａｒｙ　ｓｈｏｏｔｓ．Ｔｈｅ　ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　８８．９％．Ｔｈｅ　ｓｕｉｔａｂｌｅ　ｍｅｄｉｕｍ　ｆｏｒ　ｂｕｄ　ｓｕｂｃｕｌｔｕｒｅ　ａｎｄ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ
ｗａｓ　ＭＳ＋６－ＢＡ　２．０ｍｇ·Ｌ－１＋ＮＡＡ　０．１ｍｇ·Ｌ－１．Ｔｈｅ　ｅｌｏｎｇａｔｉｏｎ　ｍｅｄｉｕｍ　ｗａｓ　ＭＳ＋６－ＢＡ　０．５ｍｇ·Ｌ－１＋
ＮＡＡ　０．１ｍｇ·Ｌ－１＋１０％ｃｏｃｏｎｕｔ　ｗａｔｅｒ．Ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍａｌ　ｒｏｏｔｉｎｇ　ｍｅｄｉｕｍ　ｗａｓ　ＭＳ＋ＮＡＡ　０．１ｍｇ·Ｌ－１＋ＩＢＡ
１．０ｍｇ·Ｌ－１　ｗｉｔｈ　ｒｏｏｔｉｎｇ　ｒａｔｅ　ａｓ　ｈｉｇｈ　ａｓ　１００％．Ｔｈｅ　ｒｏｏｔｓ　ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ　ｗｅｌ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｐｌａｎｔｌｅｔｓ　ｇｒｅｗ　ｖｉｇｏｒｏｕｓｌｙ．Ｔｈｅ
ｐｌａｎｔｌｅｔｓ　ｗｉｔｈ　ｗｅｌ－ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ　ｒｏｏｔｓ　ｗｅｒｅ　ｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｙ　ａｃｃｌｉｍａｔｉｚｅｄ　ａｎｄ　ｐｌａｎｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ａ　ｓｕｒｖｉｖａｌ　ｒａｔｅ　ｏｆ　８５％．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ａｒｄｉｓｉａ　ｇｉｇａｎｔｉｆｏｌｉａ　Ｓｔａｐｆ．；ｌｅａｆ；ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｃｕｌｔｕｒｅ；ｒｅｇｅｎｅｒａｔｅｄ　ｐｌａｎｔｌｅｔ
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