全 文 ：黑龙江农业科学２０１６（３）：８０～８３
Ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ
过氧乙酸离析法观测蓝靛果忍冬叶片脉序
的方法研究
徐清华１，吴旭飞１，БРЫКСИНД．М．２，张雪霞１，李富恒
（１．东北农业大学 生命科学学院，黑龙江 哈尔滨１５００３０；２．俄罗斯米丘林园艺研究所，坦波夫
州米丘林斯克市３９３７７４）
摘要：过氧乙酸离析法主要用于植物叶片表皮的观测，也可用于叶片脉序的观测，操作简单实用。为获得适
于蓝靛果忍冬叶片脉序观测的最佳组合，以蓝靛果忍冬叶片为材料，采用单因素试验和正交试验对过氧乙酸
浓度、水浴温度、水浴时间的处理条件进行了系统的研究。结果表明：在７０℃水浴中用１２％的过氧乙酸处理
蓝靛果忍冬叶片３．５ｈ或用１４％的过氧乙酸溶液在６０℃水浴中处理３．５ｈ，得到的装片脉序观测效果最佳。
关键词：蓝靛果忍冬；叶片；过氧乙酸离析法；脉序；正交试验
中图分类号：Ｓ６６３．９　文献标识码：Ａ　文章编号：１００２－２７６７（２０１６）０３－００８０－０４　ＤＯＩ：１０．１１９４２／ｊ．ｉｓｓｎ１００２－２７６７．２０１６．０３．００８０
收稿日期：２０１５－１２－１６
基金项目：黑龙江省教育厅资助项目（１２５３１０１３）
第一作者简介：徐清华（１９８９－），女，山东省菏泽市人，在读硕
士，从事植物生理研究。Ｅ－ｍａｉｌ：１２７２６３６４６０＠ｑｑ．ｃｏｍ。
通讯作者：李富恒（１９６２－），男，博士，教授，从事植物生理学
的教学和科研工作。Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｉｆｕｈｅｎｇ１９６３＠１２６．ｃｏｍ。
　　叶脉由贯穿在叶肉内的维管束或维管束及其
外围的机械组织组成，是叶内的输导组织和支持
结构。叶脉在叶片中呈有规律地分布，通过叶柄
与茎内的维管组织相连［１］。脉序是叶片中叶脉分
布的类型，是植物分类的重要依据［２］。脉序观测
方法主要以氢氧化钠离析法［３］、次氯酸钠离析
法［４］为主，过氧化氢－醋酸离析溶液也可用于植物
叶片脉序的制片［５］，离析后获得的叶片材料柔韧
度好且观测效果清晰，既可用于临时观察，又可用
做成永久装片，但此方法在脉序观测方面的应用
研究较少。有关离析法用于叶片脉序观测的研究
多是针对双子叶草本植物的［６－７］，而以双子叶木本
植物蓝靛果忍冬为材料的研究却鲜有报道。每一
种方法随着植物种类的不同处理条件有较大差
异［８－９］。过氧乙酸是一个混合物，含有乙酸及过氧
化氢等物质，能够使叶肉细胞的胞间层溶解，使叶
肉细胞分离，还具有漂白作用，故可用于植物叶片
脉序的观测。本文以蓝靛果忍冬叶片为材料，采
用单因素和正交试验设计对过氧乙酸离析法中的
各种条件进行了系统的研究，以期获得适合蓝靛
果忍冬叶片脉序观测的最佳方法，为科研和教学
工作提供参考。
１　材料与方法
１．１　材料
供试材料为蓝靛果忍冬启明星（Зарница）品
种的成熟叶片，取自中国科学院东北地理与农业
生态研究所试验田。
１．２　方法
１．２．１　单因素试验设计　对可能影响过氧乙酸
离析法观测效果的过氧乙酸浓度、水浴温度及水
浴时间这３个因素先进行单因素试验，以初步筛
选出适宜范围。
各个单因素的水平设计：过氧乙酸浓度（％）：
２、６、１０、１４；水浴温度（℃）：２０、４０、６０、８０；水浴时
间（ｈ）：２．５、３．０、３．５、４．０、４．５、５．０。
在进行处理蓝靛果叶片的某一单因素试验
时，其它各因素的水平取值固定为：过氧乙酸浓度
１２％，水浴温度６０℃，水浴时间３．５ｈ。
１．２．２　正交试验设计　在单因素试验筛选出的
各个因素范围基础上，采用Ｌ９（３４）正交表进行三
因素三水平的正交试验，根据试验结果筛选出最
优组合。
１．２．３　叶片脉序装片的制取　将蓝靛果忍冬叶
片剪切成约１ｃｍ×１ｃｍ的小块。按照单因素和
正交试验设计，将叶片小块放入装有过氧乙酸溶
液的试管中，置于水浴锅中加热处理一定时间。
用镊子将处理好的叶片从试管中取出，放在载玻
片上，蒸馏水冲洗３～５次后，对离析后的叶片染
色３０ｍｉｎ。用蒸馏水冲洗掉叶片上及其周围的
余液，滴加一点蒸馏水，盖上盖玻片，在显微镜下
０８
３期 　　徐清华等：过氧乙酸离析法观测蓝靛果忍冬叶片脉序的方法研究
观察获取的脉序效果并进行显微摄影。
２　结果与分析
２．１　影响过氧乙酸离析法脉序观测效果的单因
素试验结果分析
２．１．１　过氧乙酸浓度　由表１可知，用１０％和
１４％的过氧乙酸溶液处理叶片，叶片柔韧性好，得
到的装片观测效果最好（图１－ａ）；６％的过氧乙酸
浓度处理叶片柔韧性好，有少量叶肉细胞未被清
除干净，观测效果良好；２％的过氧乙酸浓度处理
叶片有大量叶肉细胞残留，严重影响观测效果。
表１　不同过氧乙酸浓度下的脉序观测效果
Ｔａｂｌｅ　１　Ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎｓ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ
ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐｅｒｏｘｙａｃｅｔｉｃ　ａｃｉｄ
浓度／％Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　 ２　 ６　 １０　 １４
观测效果 Ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎｓ　ｅｆｆｅｃｔ　 Ｄ　 Ｂ　 Ａ　 Ａ
　　Ａ：优；Ｂ：良；Ｃ：中；Ｄ：差。下同。
Ａ：Ｅｘｃｅｌｅｎｔ；Ｂ：Ｇｏｏｄ；Ｃ：Ａｖｅｒａｇｅ；Ｄ：Ｐｏｏｒ．Ｔｈｅ　ｓａｍｅ
ｂｅｌｏｗ．
２．１．２　水浴温度　由表２可知，在５０℃和７０℃
水浴温度条件下观测效果最好，叶片柔韧性好，观
测效果优（图１－ｂ）；当水浴温度为９０℃时，观测效
果中等，叶片柔韧性差，容易破碎；水浴温度为
３０℃的处理虽叶片柔韧性好，但叶片中有许多叶
肉细胞残留，在显微镜下不能清晰地观测各级脉
序，观测效果差。
２．１．３　水浴时间　由表３可知，当水浴时间为
３．５～４．５ｈ时，叶片柔韧性较好，得到的装片观
测效果最好（图１－ｃ）；水浴处理叶片５ｈ，在显微镜
下观测效果良好，但叶片柔韧性差，不利于操作；
水浴处理叶片３ｈ，叶片柔韧性好，但有少量叶肉
细胞残留，观测效果中等；水浴处理叶片２．５ｈ，叶
片柔韧性较好，但有大量叶肉细胞残留，观测效
果差。
表２　不同过氧乙酸水浴温度下的脉序观测效果
Ｔａｂｌｅ　２　Ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎｓ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ
ｗａｔｅｒ－ｂａｔｈ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐｅｒｏｘｙａｃｅｔｉｃ　ａｃｉｄ
水浴温度／℃
Ｗａｔｅｒ－ｂａｔｈ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ
３０　 ５０　 ７０　 ９０
观测效果
Ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎｓ　ｅｆｆｅｃｔ
Ｄ　 Ａ　 Ａ　 Ｃ
表３　不同过氧乙酸水浴处理时间下的
脉序观测效果
Ｔａｂｌｅ　３　Ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎｓ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ
ｗａｔｅｒ－ｂａｔｈ　ｔｉｍｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐｅｒｏｘｙａｃｅｔｉｃ　ａｃｉｄ
水浴时间／ｈ
Ｗａｔｅｒ－ｂａｔｈ　ｔｉｍｅ
２．５　 ３．０　 ３．５　 ４．０　 ４．５　 ５．０
观测效果
Ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎｓ　ｅｆｆｅｃｔ
Ｄ　 Ｃ　 Ａ　 Ａ　 Ａ　 Ｂ
　　综合以上单因素试验结果，初步得出各个因
素的适宜取值范围为过氧乙酸浓度１０％～１４％、
水浴温度５０～７０℃、水浴时间３．５～４．５ｈ。
２．２　优化蓝靛果忍冬叶片脉序观测条件的正交
试验
　　在单因素试验结果的基础上，确定各因素的
大致适用范围，采用Ｌ９（３４）正交表进行三因素三
水平的正交试验，进一步优化筛选出最佳的处理
组合，结果见表４。
表４　蓝靛果忍冬叶片观测条件正交试验结果
Ｔａｂｌｅ　４　Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔ　ｆｏｒ　ｏｂｓｅｒｖｉｎｇ　Ｌｏｎｉｃｅｒａ　ｃａｅｒｕｌｅａｌｅａｆｓ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ
处理
Ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ
水浴温度／℃
Ｗａｔｅｒ－ｂａｔｈ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ
过氧乙酸浓度／％
Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐｅｒｏｘｙａｃｅｔｉｃ　ａｃｉｄ
水浴时间／ｈ
Ｗａｔｅｒ－ｂａｔｈ　ｔｉｍｅ
观测效果
Ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎｓ　ｅｆｆｅｃｔ
１　 ５０　 １０　 ３．５ Ｄ
２　 ５０　 １２　 ４．０ Ｂ
３　 ５０　 １４　 ４．５ Ｃ
４　 ６０　 １０　 ４．０ Ｂ
５　 ６０　 １２　 ４．５ Ｃ
６　 ６０　 １４　 ３．５ Ａ
７　 ７０　 １０　 ４．５ Ｂ
８　 ７０　 １２　 ３．５ Ａ
９　 ７０　 １４　 ４．０ Ｃ
　　由表４可知，在正交试验中，处理组合６（图
１－ｄ）和组合８（图１－ｅ）观测效果最好，且柔韧性
好；组合２、４和７观测效果良好但柔韧性稍差；组
合３、５和９观测效果中等，但柔韧性较差，在操作
１８
　　　　　黑　龙　江　农　业　科　学 ３期
中易碎；组合１叶片有微量叶肉细胞残留，观测效 果差。
ａ～ｃ为单因素试验结果图：其中ａ为１０％过氧乙酸溶液处理叶片获取的脉序图；ｂ为５０℃水浴处理叶片获取的脉序图；ｃ为水浴处
理叶片４ｈ后获取的脉序图。ｄ～ｅ为正交试验结果：其中ｄ为处理组合６获取的脉序图；ｅ为处理组合８获取的脉序图。
ａ～ｃ　ａｒｅ　ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔ　ｍａｐ　ｏｆ　ｓｉｎｇｌｅ　ｆａｃｔｏｒ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ：ａ　ｉｓ　ｔｈｅ　ｖｅｎａｔｉｏｎ　ｇｒａｐｈ　ｏｆ　ｌｅａｆ　ｕｎｄｅｒ　ｔｈｅ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｏｆ　１０％ｐｅｒａｃｅｔｉｃ　ａｃｉｄ　ａｅｒｏｓｏｌ；
ｂ　ｉｓ　ｔｈｅ　ｖｅｎａｔｉｏｎ　ｇｒａｐｈ　ｏｆ　ｌｅａｆ　ｉｎ　５℃ ｗａｔｅｒ－ｃｕｒｉｎｇ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ；ｃ　ｉｓ　ｔｈｅ　ｖｅｎａｔｉｏｎ　ｇｒａｐｈ　ｏｆ　ｌｅａｆ　ｉｎ　４ｈｗａｔｅｒ－ｃｕｒｉｎｇ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ．ｄ～ｅ　ａｒｅ
ｔｈｅ　ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｔｅｓｔ　ｒｅｓｕｌｔｓ：ｄ　ｉｓ　ｔｈｅ　ｖｅｎａｔｉｏｎ　ｇｒａｐｈ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｓｉｘｔｈ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ；ｅ　ｉｓ　ｔｈｅ　ｖｅｎａｔｉｏｎ　ｇｒａｐｈ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｉｇｈｔｈ　ｔｒｅａｔ－
ｍｅｎｔ　ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ．
图１　过氧乙酸离析法观测蓝靛果忍冬脉序的效果，１００×
Ｆｉｇ．１　Ｔｈｅ　ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｌｏｎｉｃｅｒａ　ｃａｅｒｕｌｅａ　ｎｅｒｖａｔｉｏｎ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｂｙ　ｐｅｒｏｘｙａｃｅｔｉｃ　ａｃｉｄ　ｍａｃｅｒａｔｉｏｎ
ａ为氢氧化钠离析法处理叶片获取的脉序图；ｂ为次氯酸钠离析法处理叶片获取的脉序图；ｃ为改良后的次氯酸钠离析法处理叶片
获取的脉序图；ｄ为过氧乙酸离析法处理叶片获取的脉序图。
ａ　ｉｓ　ｔｈｅ　ｖｅｎａｔｉｏｎ　ｇｒａｐｈ　ｏｆ　ｌｅａｆ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｓｏｄｉｕｍ　ｈｙｄｒｏｘｉｄｅ　ｓｅｇｒｅｇａｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ；ｂ　ｉｓ　ｔｈｅ　ｖｅｎａｔｉｏｎ　ｇｒａｐｈ　ｏｆ　ｌｅａｆ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ
ｓｏｄｉｕｍ　ｈｙｐｏｃｈｌｏｒｉｔｅ　ｓｅｇｒｅｇａｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ；ｃ　ｉｓ　ｔｈｅ　ｖｅｎａｔｉｏｎ　ｇｒａｐｈ　ｏｆ　ｌｅａｆ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｍｏｄｉｆｉｅｄ　ｓｏｄｉｕｍ　ｈｙｐｏｃｈｌｏｒｉｔｅ　ｓｅｇｒｅｇａｔｉｏｎ
ｍｅｔｈｏｄ；ｄ　ｉｓ　ｔｈｅ　ｖｅｎａｔｉｏｎ　ｇｒａｐｈ　ｏｆ　ｌｅａｆ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｐｅｒａｃｅｔｉｃ　ａｃｉｄ　ｓｅｇｒｅｇａｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ．
图２　蓝靛果忍冬叶片脉序不同制片方法的效果，１００×
Ｆｉｇ．２　Ｔｈｅ　ｍｏｕｎｔｉｎｇ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｎｅｒｖａｔｉｏｎ　ｆｒｏｍＬｏｎｉｃｅｒａ　ｃａｅｒｕｌｅａ　ｂｙ　ｕｓｉｎｇ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｍｅｔｈｏｄｓ
２８
３期 　　徐清华等：过氧乙酸离析法观测蓝靛果忍冬叶片脉序的方法研究
　　由图１可以观察到，蓝靛果忍冬叶片具有网
状脉序，根据叶脉的粗细和发育的先后顺序可把
叶脉分为５级，相应的由各级叶脉形成的脉岛也
可以分为５级，整个叶片是由各级叶脉围成的各
级脉岛构成的。中脉只有一个，它将叶片分为左
右两部分，所以一级脉岛只有两个。二级叶脉的
数量也不多，二级脉岛的数量比二级叶脉的数量
多两个。利用各级脉岛面积的测量数据，可以计
算三、四、五级叶脉和脉岛的数量。前三级叶脉长
和脉岛面积可以直接在新鲜叶片上测量；四、五级
叶脉长和脉岛面积要先把叶片脱色，再在显微镜
下测量。对双子叶植物叶片网状叶脉各级叶脉和
脉岛量化研究有利于揭示双子叶植物网状脉和叶
片形成的机理。
３　结论与讨论
离析类方法主要原理是是利用化学试剂将叶
片叶肉细胞的胞间层溶解，使叶肉细胞分离，达到
表皮与叶肉分离的目的。离析方法有多种，如次
氯酸钠法、过氧化氢－醋酸法、铬酸－硝酸法、碳酸
钠法、氢氧化钠法等，主要用于叶片表皮及气孔的
观测，其中应用较多的是次氯酸钠法［４，１０］，目前观
测脉序应用较多的也是此法，但多需要与其它试
剂配合使用才能获得理想的制片效果。过氧化
氢－醋酸法常用来离析木质材料，在叶片表皮的观
测中仅见少数学者使用［１１－１２］；孙同兴［５］等对此方
法进行了简单探究，发现过氧化氢－醋酸法作用比
较温和，离析时间和温度易于控制，更为重要的是
离析过程不会破坏所要观察的表皮结构；在过去
研究工作的基础上，将此方法用于脉序的观测也
可获得理想的装片。
叶片脉序的制片方法很多，本文对不同制片
方法的效果进行了比较，结果表明，氢氧化钠离析
法（图２－ａ）及次氯酸酸钠离析法（图２－ｂ）制片的
观测效果较差；改良后的次氯酸离析法（氢氧化钠
和次氯酸钠两种试剂同时使用）可获得柔韧性较
好且观测清晰度较高的装片（图２－ｃ），但此法操作
复杂，不同种类植物要求的离析条件不尽相同，影
响因素较多，离析时间和温度不易于控制，工作量
较大；过氧乙酸离析法只需要一种试剂，影响因素
较少，操作简单，其制片效果与改良后的次氯酸钠
离析法效果类似（图２－ｄ），可以用于脉序的定性
和定量观测。
本试验通过单因素和正交试验对过氧乙酸法
观测蓝靛果忍冬叶片脉序的制片条件进行了较深
入的研究，得到了适于脉序观测的最佳处理条件。
这一处理条件对与蓝靛果忍冬叶片差别不大的其
它双子叶木本植物叶片脉序观测有一定的借鉴作
用，而对于与蓝靛果忍冬叶片差别较大的单子叶
草本植物叶片脉序的观测，则需要对离析条件重
新进行摸索和调整。本研究得出过氧乙酸离析法
观测蓝靛果忍冬叶片脉序的最佳处理条件为：用
１２％过氧乙酸溶液在 ７０℃ 水浴中处理叶片
３．５ｈ，或用１４％的过氧乙酸溶液在６０℃水浴中
处理叶片３．５ｈ。
参考文献：
［１］　李乐，曾辉，郭大立．叶脉网络功能性状及其生态学意
义［Ｊ］．植物生态学报，２０１３，３７（７）：６９１－６９８．
［２］　刘剑秋，李和阳．福建防己科植物叶脉序比较研究［Ｊ］．福建
师范大学学报：自然科学版，２０００，１６（２）：８０－８４．
［３］　任毅，胡正海．独叶草叶二叉分枝脉序中网结脉和盲脉的形
态学研究［Ｊ］．植物分类学报，１９９６，３４（６）：５６９－５７６．
［４］　温洁．一种快速叶表皮离析法［Ｊ］．植物学通报，１９９５，
１２（Ａ０１）：７７－７２．
［５］　孙同兴，江幸山．简便有效的叶表皮离析方法－过氧化氢－醋
酸法［Ｊ］．广西植物，２００９，２９（１）：４４－４７．
［６］　周桂玲，魏岩，安争夕．独行菜属植物叶片脉序的比较观
察［Ｊ］．云南植物研究，１９９７，１９（３）：２８０－２８４．
［７］　谭大海，李富恒，裴雪，等．次氯酸钠离析法观测甘蓝叶片脉
序的处理条件优化筛选［Ｊ］．植物学报，２０１０，４５（５）：
５８８－５９３．
［８］　曹丽敏，王志新，曹明，等．中国无患子科植物的叶脉形态及
其系统学意义［Ｊ］．植物分类与资源学报，２０１４，３６（４）：
４１９－４３２．
［９］　曹小燕，曹明淞，邓敏．中国水青冈属（壳斗科）叶结构及分
类学意义［Ｊ］．植物分类与资源学报，２０１４，３６（１）：１－６．
［１０］　洪亚平，陈之端．易卷曲叶表皮制片技术（ＮａＯＣｌ法）的改
进［Ｊ］．植物学通报，２００２，１９（６）：７４６－７４８．
［１１］　Ｖａｎ　Ｓｅｔｔｅｎ　Ａ　Ｋ，Ｋｏｅｋ－Ｎｏｏｒｍａｎ　Ｊ．Ｓｔｕｄｉｅｓ　ｉｎ　Ａｎｎｏｎａｃｅａｅ．
ＶＩ．Ａ　ｌｅａｆ　ａｎａｔｏｍｉｃａｌ　ｓｕｒｖｅｙ　ｏｆ　ｇｅｎｅｒａ　ｏｆ　Ａｎｎｏｎａｃｅａｅｉｎ
ｔｈｅ　Ｎｅｏｔｒｏｐｉｃｓ［Ｊ］．Ｂｏｔ　Ｊａｈｒｂ　Ｓｙｓｔ，１９８６，１０８（１）：１７－５０．
［１２］　马清温，李凤兰，李承森．落羽杉属（杉科）叶表皮结构及气
孔参数［Ｊ］．植物分类学报，２００５，４３（６）：５１７－５２５．
（下转第１０５页）
３８
３期 　　蓝晶晶等：西瓜皮中Ｌ－瓜氨酸含量测定及提取技术研究
１０７８：１９６－２００．
［４］　欧阳平凯，张赣道，祁嘉义，等．生物化工产品［Ｍ］．北京：化
学工业出版社，１９９９：４５－４６．
［５］　卢刚，吴越，黄礼明，等．鸟氨酸－瓜氨酸药用组合物对血清
泌乳素水平的影响［Ｊ］．中国医药科学，２０１１，１（１１）：９０－９１．
［６］　郑锋，詹园凤，党选民，等．不同倍性小型西瓜果实中番茄红
素、瓜氨酸含量比较分析［Ｊ］．热带农业科学，２０１２，３２（２）：
７－１０．
［７］　俞骏棠，唐孝宣．生物工艺学［Ｍ］．上海：华东理工大学出版
社，１９９１：２５３，２５８．
［８］　Ｍａｒｓｈａｋ　Ｄ　Ｒ，Ｋａｄｏｎａｇａ．Ｊ　Ｒ，Ｂｕｒｇｅｓｓ　Ｒ　Ｒ，ｅｔ　ａｌ．Ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ
ｆｏｒＰｒｏｔｅｉｎ　ＰｌＬｒ～ｃａｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉａｔｉｏｎ［Ｍ］．Ｂｅｉｊｎｇ：
Ｓｅｌ　Ｐｕｂ　Ｈｏｕｓｅ，１９９９：２６３－２６４．
［９］　周小华，李端华，李韶利．ＨＤ－８树脂分离天花粉中的Ｌ－瓜
氨酸［Ｊ］．天然产物研究与开发，２００５，１７（６）：７８４－７８９．
Ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｏｆ　Ｌ－ｃｉｔｒｕｌｉｎｅ　Ｃｏｎｔｅｎｔ　Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ
ａｎｄ　Ｅｘｔｒａｃｔｉｖｅ　Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ　ｉｎ　Ｗａｔｅｒｍｅｌｏｎ　Ｒｉｎｄ
ＬＡＮ　Ｊｉｎｇ－ｊｉｎｇ１，ＷＵ　Ｗｅｉ－ｊｉｅ２，ＷＡＮＧ　Ｊｉａｎ－ｚｈｏｎｇ２
（１．Ｇｕａｎｇｘｉ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，ＮａｎＮｉｎｇ，Ｇｕａｎｇｘｉ　５３０００１；２．Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｂｉｏｌｏｇｉ－
ｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ　Ｆｏｒｅｓｔｒｙ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ　１０００８３）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎ　ｏｒｄｅｒ　ｔｏ　ｂｅｔｔｅｒ　ｕｓｅ　ｏｆ　ｗａｔｅｒｍｅｌｏｎ　ｒｅｓｏｕｒｃｅ　ａｎｄ　ｅｘｔｒａｃｔｅ　ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ　ｉｎ　ｗａｔｅｒｍｅｌｏｎ
ｒｉｎｄ，ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ　ｏｆ　Ｌ－ｃｉｔｒｕｌｉｎｅ　ｗａｓ　ｅｘｐｌｏｒｅｄ　ｂｙ　ｃｏｎｔｒｏｌｉｎｇ　ｔｈｅ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ　ａｎｄ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ．
Ｔｈｅ　ｔｙｐｅ　ＨＤ－８ｃａｔｉｏｎ　ｅｘｃｈａｎｇｅ　ｒｅｓｉｎ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｉｓｏｌａｔｅ　Ｌ－ｃｉｔｒｕｌｉｎｅ　ｆｒｏｍ　ｗａｔｅｒｍｅｌｏｎ　ｒｉｎｄ　ａｎｄ　ｔｈｅｎ　ｔｈｅ　ｅｌｕｅｎｔ
ｗａｓ　ｄｅｃｏｌｏｒｉｚｅｄ　ｂｙ　ｔｈｅ　ｔｙｐｅ　ＨＺ－８２０ｒｅｓｉｎ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｔｙｐｅＨＤ－８ｃａｔｉｏｎ　ｅｘｃｈａｎｇｅ　ｒｅｓｉｎ　ｗａｓ
ｈｉｇｈ－ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｌａｒｇｅｓｔ　ｅｘｃｈａｎｇｅ　ｃａｐａｃｉｔｙ　ｏｆ　２３．１２５ｍｇ　Ｌ－ｃｉｔｒｕｌｉｎｅ　ｐｅｒ　ｇｒａｍ　ｒｅｓｉｎ．Ｔｈｅ　ｅｌｕｔｉｏｎ　ｒａｔｅ
ｒｅａｃｈｅｄ　８９．６％ ｗｈｅｎ　ｔｈｅ　ｔｙｐｅＨＤ－８ｒｅｓｉｎ　ｌｏａｄｉｎｇ　Ｌ－ｃｉｔｒｕｌｉｎｅ　ｗａｓ　ｅｌｕｔｅｄ　ｂｙ　０．２５ｍｏｌ·Ｌ－１　ＮＨ４ＯＨ　ｆｏｒ　２０ｍｉｎ
ｗｈｉｃｈ　ｗａｓ　３．５ｔｉｍｅｓ　ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ　ｕｓｉｎｇ　ＮａＯＨ　ａｔ　ｔｈｅ　ｓａｍｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ａｓ　ｅｌｕｅｎｔ．Ｔｙｐｅ　ＨＺ－８２０ａｄｓｏｒｂｅｎｔ　ｒｅｓ－
ｉｎ　ｈａｄ　ｏｐｔｉｍａｌ　ｄｅｃｏｌｏｒｉｚｉｎｇ　ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ　ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｙｐｅ　ＨＺ－８０３ａｎｄ　ｔｙｐｅ　Ｄ３０３．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｗａｔｅｒｍｅｌｏｎ　ｒｉｎｄ；Ｌ－ｃｉｔｒｕｌｉｎｅ；ｃａｔｉｏｎ　ｅｘｃｈａｎｇｅ　ｒｅｓｉｎ
（上接第８３页）
Ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ　ｏｎ　ｔｈｅ　Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ｏｆ　Ｌｏｎｉｃｅｒａ　ｃａｅｒｕｌｅａ
Ｌｅａｆ　ｂｙ　Ｓｅｇｒｅｇａｔｉｏｎ　Ｍｅｔｈｏｄ　ｏｆ　Ｐｅｒｏｘｙａｃｅｔｉｃ　Ａｃｉｄ
ＸＵ　Ｑｉｎｇ－ｈｕａ１，ＷＵ　Ｘｕ－ｆｅｉ　１，БРЫКСИНД．М．２，ＺＨＡＮＧ　Ｘｕｅ－ｘｉａ１，ＬＩ　Ｆｕ－ｈｅｎｇ１
（１．Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｎｏｒｔｈｅａｓｔ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｒｂｉｎ，Ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇ　１５００３０；
２．Ｔｈｅ　Ｉ．Ｖ．Ｍｉｃｈｕｒｉｎ　Ａｌ－Ｒｕｓｓｉａ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｈｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒｅ，Ｍｉｃｈｕｒｉｎｓｋ，Ｔａｍｂｏｖ
３９３７７４）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｓｅｇｒｅｇａｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ　ｏｆ　Ｐｅｒｏｘｙａｃｅｔｉｃ　ａｃｉｄ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｏｂｓｅｒｖｅ　ｔｈｅ　ｅｐｉｄｅｒｍｉｓ　ｏｆ　ｐｌａｎｔ　ｌｅａｖｅｓ　ａｎｄ　ｕｓｅｄ
ｆｏｒ　ｏｂｓｅｒｖｉｎｇ　ｌｅａｆ　ｎｅｒｖａｔｉｏｎ，ｉｔ　ｗａｓ　ａ　ｓｉｍｐｌｅ　ａｎｄ　ｐｒａｃｔｉｃａ　ｍｅｔｈｏｄ．Ｔａｋｉｎｇ　Ｌｏｎｉｃｅｒａ　ｃａｅｒｕｌｅａ　Ｌ．ｖａｒ．ｅｄｕｌｉｓ
Ｔｕｒｃｚ．ｅｘ　Ｈｅｒｄ．ｆ．ｅｄｕｌｉｓ　ａｓ　ｍａｔｅｒｉａｌ，ｓｉｎｇｌｅ　ｆａｃｔｏｒ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ　ａｎｄ　ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ　ｗｅｒｅ　ｄｅｓｉｇｎｅｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ
ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｏｆ　Ｐｅｒａｃｅｔｉｃ　ａｃｉｄ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ，ｗａｔｅｒ－ｂａｔｈ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ａｎｄ　ｗａｔｅｒ－ｂａｔｈ　ｔｉｍｅ．Ｏｂｓｅｒｖｉｎｇ
ｌｅａｆ　ｎｅｒｖａｔｉｏｎ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｉｎ　ｏｒｄｅｒ　ｔｏ　ｏｂｔａｉｎ　ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍａｌ　ｒｅａｃｔｉｏｎ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｔｅｓｔ　ｓｈｏｗｅｄ
ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｂｅｓｔ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ　ｅｆｆｅｃｔ　ｗａｓ　１２％ｐｅｒｏｘｙａｃｅｔｉｃ　ａｃｉｄ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｂｙ　３．５ｈｗａｔｅｒ　ｂａｔｈ（７０℃）ｏｒ
１４％ｐｅｒｏｘｙａｃｅｔｉｃ　ａｃｉｄ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｂｙ　３．５ｈｗａｔｅｒ　ｂａｔｈ（６０℃）ｆｏｒ　ｆｒｅｓｈ　ｌｅａｖｅｓ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｌｏｎｉｃｅｒａ　ｃａｅｒｕｌｅａ；ｌｅａｖｅｓ；ｓｅｇｒｅｇａｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ　ｏｆ　ｐｅｒｏｘｙａｃｅｔｉｃ　ａｃｉｄ；ｖｅｎａｔｉｏｎ；ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｄｅｓｉｇｎ
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