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都山绣球叶片愈伤组织诱导与不定芽分化



全 文 :都山绣球叶片愈伤组织诱导与不定芽分化
黄守印 ’ , 杨福林 ’ , 池景存 “ , 邢路军 4 , 崔海明 5 , 徐景录 “
( 1
.
2
.
3
.
4
.
5
.
6 河北旅游职业学院 河北 承德 0 6 7 0 0 0 )
中图分类号 : 5 31 文献标识码 : B
l 植物名称 都山绣球 ( H y d ar n g e a b r e忱 h n e i
de ir D IP
.
v a r
.
d u hs a n e n s ls F
,
L
,
Y a flg 改 W , H , Sun
v a r n o v )
, 东陵八仙花变种 。
2 材料类别 取河北省宽城县都山自然保护
区都山绣球试管苗叶片切段为外植体 。
3 培养条件 诱导愈伤组织培养基 ( 1) M S + 2 .
4一 D Z . o m g · L 一 l (单位下同 )+ 6一 B A O . 5 ; (2 )M S + 2 .
4一 D I .价 6一BA O . 5 。 (3 )M S + 6一 B2A .价KOT . 5+ N A A O .
5 . (4 )N 6+ 2
.
4一D 2 . 0+ 6一B A O . 丘 (5 )N 6+ 2 . 4一D I . 0+ 6一
B A O
. 凡 (6 )N 6+ 6一 B A 2 . 0 + K T O . 5+ N A A O . 5 。诱导丛
生芽与增殖培养基 ( 7 )M S + 6一 B A 3 . 0+ K T O . 5+ IB A O .
5、 ( 8 ) M S + 6一 B A 2
.
0+ K T O
.
5+ IB A O
.
5; ( 9 ) M S + 6一
文章编号 : 16 74一 2 0 7 9 (20() 8 )0 3一 0 10 8一 02
收稿日期 : 2 0 0 8一 0 5一 1 5
B A I
.
0 + K T O
.
5+ IB A O
.
5 ; ( 10 )N 6+ 6一 B A 3
.
0 + K T O
.
5+ IBA O
.
5 ; ( 1 1)N 6+ 6一B A 2
.
0+ K T O
.
5+ IB A O
.
5 ( 12 )
N 6 + 6一B A I . 0+ K T O . 5+ IB A O . 5 。 以上培养基琼脂含
量为 7 . 5 9 · L 一 1 , 蔗糖含量为 30 9 · L 一 l , P H S .
6一 5 . 8 。 培养温度 2 7 士 l ℃ 。 诱导愈伤组织 , 黑暗
培养 , 不定芽分化与增殖 , 光照度 10 0 0 一 120 0 L x ,
光照时间 14 h . d 一 l 。
4 生长与分化情况
4
.
1 诱导愈伤组织 都山绣球试管苗叶片切
块在无菌条件下分别接种在诱导愈伤组织培养基
( 1)一 (6 )上 , 培养一周 , 开始陆续产生愈伤组织 , 二
周时 , 所试六种培养基均产生了愈伤组织 (图 l) , 从
M S 和 N 6两种基本培养基比较 , N 6 诱愈率为 8 % ,
M S 为 7 1% , 前者比后者好 。 从附加成分比较 , 培
不善 、 病虫害严重 、 生长衰弱的林分病害严重 。
3
. 防治措施
①加强栽培管理 , 增强树势 , 是防治该病的最
根本措施 。 有条件的地块做到适时浇水 , 定期除草
施肥 , 同时做到合理修枝打权 , 以提高林分质量 ,
增强抗病能力 。
②对树干已出现病斑但根部未感病的新栽杨树
采取贴根截干 , 截口涂杀菌剂 (石硫合剂 、 福美砷
等 ) , 同时把截取的枝干带出林地集中烧毁 , 防止
形成再侵染 。 对根部已感病死亡的植株 , 全部拔
除 , 带出林地集中烧毁 。
③对发病较轻 , 病斑少 , 长势较好的大树可进
行刮斑治疗 (方法同治疗苹果树腐烂病 ) 。 刮后涂
以 10 % 的碱水或 843 康复剂 、 或甲基托布津 2 0 0 倍
液 。
④对处理后的林分全面喷 (或涂 ) 杀菌剂 ( 5 0%
福美砷 30 倍液或 0 . 3 一 0 . 5波美度的石硫合剂 ) 杀
菌治疗 , 减少侵染源 。
⑤树干涂白 , 秋末 ( 1 月以后 )或春初 ( 5 月以
前 ) 对树干涂白 , 生石灰 20 份 、 食盐 5份 、 硫磺粉
5 份 , 用水调成糊状 , 涂于 1 . 5 米以下树千上 , 起
到防病 、 防虫 、 防日灼等多种作用 。

养基 ( 6 )附加 6一 B A 、 K T 、 N A A ,诱愈率达 10 0% ,其次
是 ( 3 )达 97% , 而附加 2 . 4 一 D 、 6一 B A的培养基 ( l )、 ( 2 ) 、
(4)

(5) 诱愈率较低 ,分别为 42 % 、 75 % 、 72 % 、 92 % ,且 2 .
4 一 D随含量增高 ,诱愈率降低 。说明 6一 BA 、 K T 、 N A A
配比比2 . 4 一 D 、 6一 B A配比诱导产愈效果好。 由此可
见 , 对于都山绣球叶片离体培养诱导愈伤组织用培
养基 ( 6) 最好 , 诱愈率高 ,且继代培养能正常增殖 , 同
时还能形成巧 一 2 0%的不定芽 , 有利于快速繁殖 ,其
次是培养基 ( 3 ) 。
分化 。 试验表明 , 六种不定芽分化培养基 , 虽有
( 7 )

( 10 )

( 1 1 )

( 12 ) 四种分化出不定芽 , 但分
化率均较低 , 还有待进一步试验研究 。
图 1 叶片产愈
4
.
2 不定芽分化 将上述产生的愈伤组织通
过继代增殖培养达到一定数量和大小后 , 转移到培
养基 ( 7 ) 一 ( 12 ) 上 , 2 0 一 3 0 天 , 分化出不定芽 ,
但不同培养基不同生长调节物质 , 分化结果有明显
差别 , 以 N 6 为基本成分组成的三种培养基中 , 附
加 6一 B A 3 . 0 、 K T O . 5 、 IB A O . 5 的培养基 ( 10 ) 较
好 , 不定芽分化率为 3 1 . 5% , 一块愈伤组织最多能
分化出 30 个不定芽 (图 2 ) , 而培养基 ( 1 1 ) 、 ( 12 )
不定芽分化率只有 1 . 1% 和 1 . 0% , 且多为单生 (图
图 3 不定芽
4
.
3 不定芽继代增殖 将愈伤组织分化出的
不定芽切割成单芽转移到铁盐和肌醇用量调整后的
培养基 ( 8 ) 和 ( 9 ) 上 , 2d0 , 形成高 5一 10C m 、 粗
壮的丛生苗 (图 4 ) , 平均每芽可产生丛生芽 3 一 4
个 , 最多达 15 一 2 0 个 , 经二年的反复试验均取得
相同的增殖效果 。
图 2 丛生芽
3 )
。 以 M S 为基本成分组成的三种培养基 , 只
有 ( 7) 不定芽分化率 2 . 0% , 而 ( 8) 和 ( 9 ) 无芽
图 4 丛生苗
5 意义与进展 都山绣球是生长在河北省宽
城县都山自然保护区内东陵八仙花的一个新变种 。
为多年生灌木 , 伞形花序 , 圆球形 , 直径 16 一 24 厘
米 , 淡绿色 , 5 月下旬至 8 月下旬开花 , 花期 8 0 余
天 , 在园林绿化上有较高的观赏和应用价值 。 因常
规繁殖难以成活 , 我们在取嫩枝芽段离体培养获得
快繁无性系的基础上 , 开展离体叶片培养 , 诱导愈
伤组织 , 分化不定芽 , 继代增殖 , 生根与移栽 。 旨
在保护野生资源 , 扩大快繁途径 , 为早 日在园林上
应用奠定基础 。 同类工作 目前未见报道 。