全 文 ：农 药
AGROCHEMICALS
第51卷第2期
2012年2月
Vol. 51, No. 2
Feb. 2012
山蒟(Piper hancei Maxim)杀虫活性初步研究
董存柱1，徐汉虹2
(1.海南大学 环境与植物保护学院，海口 570228； 2.华南农业大学 资源环境学院，广州 510642)
摘要：[目的]研究山蒟的杀虫活性，以丰富植物源农药的来源。 [方法]采用胃毒法测定山蒟对家蝇的胃毒活性，
浸渍法测定山蒟对致倦库蚊和白纹伊蚊的活性。 [结果]结果显示：山蒟的石油醚萃取物表现较强的杀虫活性，
石油醚提取物1 g/L处理家蝇12、24 h后，校正死亡率分别为86.66%、90%，处理家蝇12、24、36 h后的LC50值分别
为1.400 0、0.500 0、0.200 0 g/L，接近于处理36 h后鱼藤酮的LC50值( 0.08 g/L)。 石油醚提取物处理致倦库蚊和
白纹伊蚊12 h后的LC50值分别为2.412 7、10.516 3 mg/L，活性分别高于对照药物鱼藤酮的3.172 7、21.510 0 mg/L。
[结论]山蒟具有较好杀虫活性，经检索未见相关文献曾报道山蒟的杀虫活性。
关键词：山蒟；杀虫活性；家蝇；白纹伊蚊；致倦库蚊
中图分类号：S482.3 文献标志码：A 文章编号：1006-0413(2012)02-0141-03
Preliminary Study on Insecticidal Activity of Piper hancei Maxim
DONG Cun-zhu1, XU Han-hong2
(1.College of Envionment and Plant Protection, Hainan University, Haikou 570228, China; 2.College of Natural Resources and
Environment, South China Agriculture University, Guangzhou 510642, China)
Abstract: [Aims] To enrich the resource of plant pesticides, the insecticidal activity of Piper hancei was studied in this
paper. [Methods] The activity of P. hancei extraction was detected against Musca domestica by the stomach poisoning,
against Culex quinquefasciatus and Aedes albopictus by impregnation. [Results] The results showed that the petroleum
ether layer extract displayed an excellent insecticidal activity, after an exposure of 12 and 24 h at a concertration
1 g/L, the corrected mortality were 86.66 and 90% respectively, the LC50 values against M. domestica adult were 1.400 0,
0.500 0, 0.200 0 g/L respectively after 12, 24, 36 h, closing to that of rotenone after 36 h after treatment (0.08 g/L).
After treatment for 12 h, the LC50 values of Culex quinquefasciatus and Aedes albopictus separately are 2.4127,
10.516 3 mg/L, higher than those of the control rotenone(3.1727, 21.5100 mg/L respectively). [Conclusions] The P.
hancei showed good insecticidal activity, there were no relevant papers that had reported P. hanceis insecticidal activity.
Key words: Piper hancei Maxim; insecticidal activity; Musca domestica; Aedes albopictus; Culex quinquefasciatus
山蒟(Piper hancei Maxim)为胡椒科(Piperaceae)胡椒
属(Piper)植物，主要分布在我国长江中下游地区及华南各
省。 民间将其作为中药海风藤的代用品，具有抗炎止痛、舒
筋活络之功效，用于治疗风湿痛、关节痛、气喘等[1]。 目前
对山蒟的研究主要集中在种类的鉴别分类[2-4]、化合物的分
离和结构鉴定[5-13]、医学医药上的应用[14-19]，据掌握的现有
资料，没有研究报道过山蒟的杀虫活性。 自2000年以来，越
来越多高毒性、高残留、持久性化学农药被限制或禁止生
产和使用，这就需要一些能保证农业丰收和保障人类健康
的化学农药替代品。 植物源农药是生物农药的重要组成
部分，具有低残留、对环境无污染，选择性高、对非靶标
生物相对安全，开发成本低廉、易和其他农药相混配等优
点[20-22]，越来越受到科研工作者的重视。 研究和开发植物
源农药并广泛应用于农业生产实践是解决传统化学农药
所产生的环境污染等问题的重要出路之一。
1 材料与方法
1.1 供试材料
供试植物材料山蒟全株于2007年10月采集自福建省
武夷山(光泽，猴子山)等地。
家蝇(Musca domestica Linaeus)、白纹伊蚊(Aedes
albopictus Skuse)、致倦库蚊(Culex quinquefasciatus)试虫均
引自广东省卫生防疫站。 家蝇幼虫饲料配方：麦麸250.0 g、
面粉12.5 g、奶粉8.0 g、酵母粉2.5 g和水500 mL；成虫饲料
为蔗糖、奶粉、水。 面粉、麦麸、奶粉以及酵母均为市售。 幼
虫饲料加入直径10 cm的培养皿中，放入家蝇成虫饲养笼
中，每天定时取出，卵1~2 d孵化，幼虫发育成老熟幼虫化
蛹需要6~8 d，化蛹后，把蛹转移至养虫笼中，3~5 d后即可
羽化，取羽化后3 d的成虫供试。 养虫室的相对湿度75%，
温度(25±1) ℃，光周期14 L∶10 D。
白纹伊蚊卵放入水中(水需提前静置至少24 h脱氯)，
收稿日期：2011-09-02
基金项目：海南大学科研启动基金项目(kyqd1026)；海南省自然科学基金(210015)；海南大学青年基金(qnjj1012)
作者简介：董存柱(1978—)，男，河南郾城人，讲师，博士研究生，主要从事天然源农药研究。 Tel：0898-23306617，E-mail：cunzhudong@yahoo.cn。
通讯作者：徐汉虹(1961—)，男，教授，博士研究生，博士生导师，主要从事天然源农药、昆虫毒理学研究。 Tel：020-85285127，E-mail：hhxu@scau.edu.cn。
·应用技术·
142 第51卷农 药 AGROCHEMICALS
幼虫饲以酵母片，化蛹后蛹收集转移至脱氯自来水中，羽
化后成虫饲以5%葡萄糖水，羽化后5 d在纱笼内挂一小白
鼠供成虫吸血，白纹伊蚊产卵于纱笼中烧杯所盛水中(具
体做法：把烧杯装满水，其中放入1个漏斗，漏斗中有滤
纸)。 每天定时取出滤纸，卵在水中一般约24 h后即可孵化
为幼虫，白蚊伊蚊的卵在滤纸上晾干后可在冰箱中5 ℃保
存1~2个月，待需要时放入水中即可孵化。 幼虫期8~10 d，
在6 d约为4龄，取出4龄幼虫供试。
致倦库蚊的饲养方法和白纹伊蚊基本一致，只是卵收
集后不能储藏，所收集的卵只能连续接代饲养。
1.2 植物材料的提取
采用冷浸提法，将采集的山蒟阴干，烘箱中65 ℃烘3 h，
粉碎，粉碎后干粉称取300 g，置于2 000 mL试剂瓶中，然后
加入干粉质量5倍分析纯甲醇于避光处浸泡，以一天早、
中、晚3次对浸泡液进行上下翻动。 3 d后抽滤，残渣再加
入甲醇继续浸泡，反复3次，滤液在60 ℃减压蒸馏浓缩，
即得到甲醇初提取浸膏，合并3次浸提膏，置于4 ℃冰箱
内保存备用。
把上述浸膏进行萃取分离，山蒟经萃取分为石油醚
层、氯仿层、乙酸乙酯层、正丁醇层、水层。
1.3 生物测定
1.3.1 山蒟不同萃取层对家蝇成虫的胃毒毒杀活性测定
萃取层药液的配制：每个萃取层称取0.10 g，放入
100 mL容量瓶中，加丙酮定容至100 mL，萃取物质量浓度
为1 g/L，超声波处理10 min，增加其溶解度。
毒杀活性的测定：称取1.00 g白砂糖于直径2.5 cm、高
7.5 cm的平地试管中，取1 mL配制好的药液均匀注入平底
试管中，药液刚好漫过试管底部白砂糖，置于风扇下吹12 h，
使丙酮挥发。 抓取家蝇羽化后3 d成虫，乙醚麻醉之，视家蝇
倒下，迅速计数接入大试管中，每处理3个重复，每重复15头
家蝇，丙酮处理蔗糖作空白对照。 口部用纱布蒙上，并且
在纱布外加一吸水海绵条供家蝇成虫取水。 于处理后12、
24 h统计结果。
1.3.2 山蒟石油醚层对家蝇成虫不同处理时间段LC50值
的测定
采用梯度稀释的方法配制石油醚萃取物质量浓度分
别为10、5、2.5、1.25、0.625 g/L，分别处理12、24、36 h。 采
用梯度稀释的方法配制鱼藤酮质量浓度分别为0.40、0.20、
0.10、0.050、0.0250 g/L，活性测定方法参照1.3.1。
1.3.3 对白纹伊蚊和致倦库蚊4龄幼虫的LC50值测定
山蒟甲醇浓缩提取浸膏的药液配制。 致倦库蚊：取
0.15 g提取物溶于3 mL丙酮，以丙酮定容至10 mL即为母液，
超声波处理10 min增加其溶解度。 母液对半稀释配成5个
质量浓度梯度，各取1 mL母液加水定容至1 000 mL，药液
质量浓度分别为15.00、7.50、3.75、1.875、0.937 5 mg/L；对照
为1 mL丙酮以水定溶至1000 mL。 白纹伊蚊：取0.25 g提取
物，方法同致倦库蚊配制，最终得到25.00、12.50、6.25、3.125、
1.562 5 mg/L五个质量浓度。
山蒟提取物毒杀活性测定：20 mL药液转移入50 mL
烧杯，每个处理重复3次，每个烧杯放入发育一致的4龄幼
虫，每重复30头幼虫，于处理后12 h统计结果，计算平均校
正死亡率。
对白纹伊蚊鱼藤酮药液的配制：取鱼藤酮0.5 g溶于
10 mL丙酮中，梯队对半稀释5个质量浓度，各取1 mL母
液加水定容至1 000 mL，药液质量浓度分别为50.00、25.00、
12.50、6.25、3.125 mg/L。
对致倦库蚊鱼藤酮药液的配制：取鱼藤酮0.15 g溶于
10 mL丙酮中，梯队对半稀释5个质量浓度，取1 mL母液加
水定容至1 000 mL，药液质量浓度分别为15.00、7.50、3.75、
1.875、0.975 mg/L。
活性测定方法同山蒟萃取物。
1.3.4 数据处理
死亡率(%) = 死亡虫数×100 (1)
总虫数
校正死亡率(%) = 处理死亡率-对照死亡率×100 (2)
1-对照死亡率
3DPS v7.05版软件统计分析不同处理间的差异显著
性(Duncans新复极差测定法)[23]。 毒力测定分析采用张志
祥等[24]毒力回归分析方法。
2 结果与分析
2.1 山蒟不同萃取层对家蝇的活性测定
在处理12 h后，从表1可以看出石油醚提取物毒杀活
性明显，活性达到86.66%，其次是乙酸乙酯提取物活性
13.33%，其他溶剂萃取提取物活性不明显；处理24 h后，石
油醚提取物活性为90.00%，其他的依次为乙酸乙酯层
26.66%、正丁醇层23.33%、水层20.00%、氯仿层10.00%，从以
上数据可以看出：24 h的活性顺序是石油醚＞乙酸乙酯＞正
丁醇＞水＞氯仿，山蒟的活性化合物主要分布在石油醚萃
取提取层。
表1 山蒟萃取物对家蝇的毒杀活性
萃取物 12 h校正死亡率/% 24 h校正死亡率/%
石油醚层 86.66±6.66a1) 90.00±5.77a
氯仿层 3.33±3.33b 10.00±5.77b
乙酸乙酯层 13.33±3.33b 26.66±8.81b
正丁醇层 3.33±3.33b 23.33±8.81b
水层 3.33±3.33b 20.00±5.77b
注：1)表中同列数据后小写字母相同者表示在5%水平上差异不显著
(DMRT)法，表中数据为平均值±SE。
第2期 143
2.2 石油醚层萃取物在不同时间段处理家蝇成虫的
LC50值
由表2可以看出：石油醚萃取提取物梯度处理家蝇成
虫12 h后，测得LC50值为1.400 0 g/L，处理24 h后的LC50值为
0.500 0 g/L，处理36 h后的LC50值为0.200 0 g/L，可见随着
时间的增加有效致死中浓度下降，山蒟对家蝇的作用有
一定的持效性。 从12 h就有很好的活性看：山蒟有快速击
倒的活性，与经典植物源农药鱼藤酮相比，在处理36 h后，
山蒟的LC50值是鱼藤酮的2.5倍，活性稍弱于鱼藤酮。
表2 石油醚层萃取物在不同时间段对家蝇成虫的毒力
时间/h 毒力回归方程 相关 LC50值/ 95%置信
(y=) 系数 (g·L-1) 区间
12 14.0272+3.1542x 0.9967 1.4000 0.0011~0.0017
24 16.1546+3.4178x 0.9688 0.5000 0.0002~0.0008
36 12.5535+2.0489x 0.9489 0.2000 0.0000~0.0005
鱼藤酮 7.6699+2.4478x 0.9827 0.0800 0.0600~0.1100
2.3 石油醚层萃取物对白纹伊蚊和致倦库蚊4龄幼虫的
LC50值
从表3数据可以看出：山蒟粗提物对致倦库蚊的LC50值
为2.412 7 mg/L，与鱼藤酮对致倦库蚊的3.172 7 mg/L相比，
山蒟对致倦库蚊的活性甚至略高于鱼藤酮活性。 山蒟对
白纹伊蚊的LC50值为10.516 3 mg/L，鱼藤酮对白纹伊蚊的
LC50值为21.510 0 mg/L，对白纹伊蚊活性山蒟约相当于鱼
藤酮的2倍，比鱼藤酮的活性还要好。 总之山蒟无论对白
纹伊蚊或致倦库蚊都有良好的毒杀活性。
表3 石油醚层萃取物处理致倦库蚊、白纹伊蚊12 h的LC50值
防治对象 毒力回归方程 相关 LC50值/ 95%置信
(y=) 系数 (mg·L-1) 区间
致倦库蚊 3.7353+3.3064x 0.9384 2.4127 1.8316~2.9624
白纹伊蚊 1.4470+3.4770x 0.9405 10.5163 6.748~30.8064
鱼藤酮(致倦库蚊) 3.3612+3.2700x 0.9656 3.1727 2.6212~3.9856
鱼藤酮(白纹伊蚊) 2.9437+1.5431x 0.9835 21.5100 14.70~31.46
3 讨论
在对比山蒟石油醚层和标准药剂鱼藤酮关于家蝇、致
倦库蚊、白纹伊蚊LC50值时，山蒟对家蝇的活性稍低于鱼
藤酮的活性，山蒟对致倦库蚊、白纹伊蚊的活性稍大于鱼
藤酮的活性，但山蒟粗提物的石油醚萃取层，里面是很多
杂质和活性化合物的混合物，鱼藤酮是纯的化合物，山蒟的
综合杀虫活性应该高于鱼藤酮的活性，这有待活性跟踪分
离，对比活性试验验证。
对山蒟的杀虫活性进行了活性筛选和萃取层的活性
测定，报道了山蒟的杀虫活性，但研究仅限于石油醚层萃
取物这些混合物的研究，笔者建议进行山蒟的活性跟踪分
离研究，研究农药的先导化合物。
山蒟的杀虫活性高，全株都可以利用，原来是一种中
药海风藤的替代品，植物源农药在环境中都有自己比较顺
畅的讲解途径，推测应该对人类、环境安全，但其具体对人
类、环境的影响还需进一步研究。
山蒟杀虫活性研究的供试虫源主要是卫生害虫，对其
他作物害虫的杀虫效果还需要进一步研究，以测定山蒟的
杀虫谱。
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(下转第147页)
董存柱，等：山蒟(Piper hancei Maxim)杀虫活性初步研究
第2期 147
到什么程度才能获得理想的杀螨有效成分一直是综合开
发利用的一个瓶颈问题。 本研究的结果可以为以黄花蒿
或者青蒿残渣为原料提取杀螨活性物质提供重要的参考
依据。 当然，由于在研究不同纯度东莨菪内酯的生物效应
过程中，主要的原料是黄花蒿提取完青蒿素后的残渣，这
可能和直接利用黄花蒿丙酮提取物来进行不同纯度东莨
菪内酯的生物活性研究会有一定的差异，但本研究的结果
可以作为重要的参考，而且对于产业化的生产更具有实际
意义。
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责任编辑：赵平
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秦培元，等：东莨菪内酯的纯度与其杀螨活性的相关性
中国化工学会农药专业委员会第十五届年会
论文征集通知
由中国化工学会农药专业委员会主办、全国农药信息总站承办的中国化工学会农药专业委员会第十五届年会
拟定于2012年5月召开，热忱欢迎全国从事农药研究、开发和生产的专家、学者，此次会议将为与会代表提供一次学术
交流和展示各自研究成果的极好机会，对我国农药行业的发展产生积极促进作用。
学会年会的主题： 技术进步 企业发展 环境和谐
现开始向学会理事、团体会员单位及从事农药科研、生产、应用、环境毒理学研究等相关领域工作的学者征集
本次年会的会议论文。 论文的主要内容为：关于我国农药研究的新思维、新品种、新方法等；合成技术研究、生产
工艺改进、三废治理及分析方法等绿色化研究；农药加工工艺、助剂应用及剂型研究；生物技术在农药研究中的
应用；农药应用技术研究；安全评价性研究；农药生产用新设备、新器械研究等；农药在环境中的代谢与残留等。
所有来稿均请专家评审，论文录用后作者到会参加交流，会议期间将组织专家评选优秀论文，颁发优秀论文证书。
具体要求： 1)论文要主题明确，观点新颖，结构严谨，数据准确，文责自负； 2)提交的论文在国内外刊物上未公开发表；
3)提交的论文请按《农药》杂志要求格式书写； 4)论文请用电子文件形式发到学会秘书处； 5)论文不退，请作者自留底稿。
本次论文征集截止日期为2012年4月10日。 敬请附上详细联系地址、邮政编码、电话(单位及手机)、传真以及E-mail地址。
凡参加会议的代表提供的论文均编入大会论文集。
电话(传真)：024-85869187。
联系人： 张敏恒 13898166268；李新18704096827，lixin1@sinochem.com；赵平 13898152073，zhaoping1@sinochem.com。
中国化工学会农药专业委员会