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生物技术通报
BIOTECHNOLOGY BULLETIN 2016, 32(4):110-115
谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathione peroxidases，
GPXs）是维持细胞内 H2O2 稳态的关键酶
［1］，它通
过催化还原型谷胱甘肽（Glutathione，GSH）与 H2O2
反应生成氧化型谷胱甘肽（GSSG）及水，从而阻止
羟基自由基（·OH）的产生，避免由其引发的质膜
过氧化，进而保护细胞膜结构和功能的完整性［2］。
由多个成员组成的 GPXs 广泛存在于动物和植物中，
目前已发现植物体 GPXs 为诱导型表达，在不同胁
迫条件下，编码 GPXs 基因的 mRNA 呈现不同水平
的表达，GPXs 在植物抗氧化过程中可能具有重要作
用［3，4］，因此关于植物中 GPXs 的相关研究备受关
注，包括 GPXs 家族成员的获得、结构特征的阐释，
收稿日期 ：2015-07-09
基金项目 ：国家自然科学基金项目（31370356，31070361），中央民族大学一流大学一流学科项目（YLDX01013，2015MDTD08C），中央民
族大学研究生科研创新项目（2015）
作者简介 ：王宁，女，硕士，研究方向 ：植物分子生物学，E-mail ：wzpn123@163.com ；陈静为本文并列第一作者
通讯作者 ：周宜君，女，博士，教授，研究方向 ：植物分子生物学 ；E-mail ：queenzhou@263.net
盐芥 TsGPX3 基因的克隆、亚细胞定位与原核表达
王宁1  陈静1，2  高飞1  李华云1  隋欣1  周宜君1
（1. 中央民族大学 生命与环境科学学院，北京 100081 ；2. 公安部物证鉴定中心，北京 100741）
摘 要 ： 以盐芥（Thellungiella salsuginea）为材料，获得 TsGPX3 的 cDNA 全长序列，其开放阅读框（ORF）序列长 591 bp，
编码 196 个氨基酸，具有 GPXs 家族的 3 个保守的特征结构域。系统进化分析显示，TsGPX3 与同属于十字花科的萝卜 RsGPX3、
油菜 BnGPX3 和花椰菜 BoGPX3 等具有较高的同源性。构建植物表达载体 pRTL2-TsGPX3-GFP，利用 PEG 转化拟南芥原生质体
细胞进行瞬时表达，发现 TsGPX3 蛋白主要定位在细胞膜上。构建原核表达载体 pET-TsGPX3，采用不同浓度 IPTG 对转入 E.coli
BL21（DE3）的 pET-TsGPX3 进行诱导表达，获得了分子量约为 27 kD 的蛋白，该蛋白在 37℃、诱导培养 5 h 时可获得较高的表达量。
关键词 ： TsGPX3 ；盐芥 ；亚细胞定位 ；原核表达
DOI ：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.04.014
Cloning，Subcellular Localization and Prokaryotic Expression of Gene
TsGPX3 from Thellungiella salsuginea
WANG Ning1 CHEN Jing1，2 GAO Fei1 LI Hua-yun1 SUI Xin1 ZHOU Yi-jun1
（1. College of Life and Environmental Sciences，Minzu University of China，Beijing 100081 ；2. Institute of Forensic Science，
Ministry of Public Security of P. R. China，Beijing 100741）
Abstract: A cDNA of TsGPX3（Thellungiella salsuginea GPX3）was isolated from T. salsuginea，and it contained a complete ORF with
591 bp encoding 196 amino acid residues. The three conservative domains of TsGPX3 protein in GPXs family was predicted by bioinformatics
analysis. Phylogenetic analysis discovered that TsGPX3 was in high homology with RsGPX3 of Raphanus sativus，BnGPX3 of Brassica napus，
and BoGPX3 of B. oleracea etc.，all belonging to Brassicaceae. The plant-expressed vector pRTL2-TsGPX3-GFP was transiently expressed by
transforming the protoplasts of Arabidopsis thaliana via PEG method，and it was discovered that the TsGPX3 protein was mainly located in
the plasma membrane. The constructed prokaryotic vector pET-TsGPX3 was transferred into Escherichia coli strain BL21（DE3）for induced
expression under different concentration of IPTG，and a 27 kD recombinant protein was highly expressed after induced for 5 h at 37℃.
Key words: TsGPX3 ；Thellungiella salsuginea ；subcellular localization ；prokaryotic expression
2016,32(4) 111王宁等：盐芥 TsGPX3基因的克隆、亚细胞定位与原核表达
以及应答胁迫的表达模式和亚细胞定位等［5-7］。
盐芥（Thellungiella salsuginea）是模式植物拟南
芥的近缘物种，与拟南芥具有相似的生物学特征［8］，
且二者的 cDNA 序列同源性高达 90%-95%［9，10］，但
属于盐生植物的盐芥却能够在含有 500 mmol/L NaCl
的高盐环境或 -15℃的低温条件下生存［11］，具有强
耐逆性。此外由于盐芥具有模式植物的生物学特性，
因此被作为耐盐性研究的模式植物［12，13］。研究表明，
拟 南 芥 中 AtGPXs 由 8 个 成 员 组 成， 其 中 AtGPX3
不仅可以作为氧化信号传感器，还能在干旱胁迫下
清除植物体内多余的脱落酸（Abscisic acid，ABA），
响应 ABA 和干旱胁迫，这种双重机制在其他植物中
也具有相似性［14］。本实验室前期对盐芥 TsGPXs 家
族的 8 个成员进行了研究，皆具有 3 个典型的 GPXs
特征结构域，同时在应答不同胁迫时表达模式不同。
在 8 个 TsGPXs 成员中，只有 TsGPX3 具有跨膜结构
域，属于分泌蛋白，亚细胞定位预测分析显示可能
定位在内质网或质膜上［7］。本研究通过构建植物表
达载体、利用 PEG 介导拟南芥原生质体的瞬时表达
进行 TsGPX3 亚细胞定位研究 ；构建原核表达载体，
对蛋白表达条件进行初步研究，旨在为进一步研究
TsGPX3 与盐芥抗逆性关系及植物 GPXs 的功能研究
提供依据。
1 材料与方法
1.1 材料
盐芥山东生态型种子为本实验室保存。Trizol 试
剂购自 Invitrogen 公司，反转录酶 M-MLV、pGEM-T
载 体、pET28a、 限 制 性 内 切 酶 Nde I 和 Sal I 购 自
Promega 公司，大肠杆菌（Escherchia coli）DH5α 和
BL21（DE3）购自北京博迈德科技发展有限公司，
pRTL2 表达载体由北京师范大学惠赠，限制性内切
酶 Xho I 和 Xba I 购 自 Fermentase 公 司，ECL 试 剂
盒购自天根生化科技（北京）有限公司，考马斯亮
蓝 R-250 购自北京百泰克生物技术有限公司，PVDF
膜购自 Millipore 公司，辣根过氧化酶（horseradish
peroxidase，HRP）标记的山羊抗小鼠 IgG 购自北京
中杉金桥生物技术有限公司，根据盐芥 TsGPXs 蛋
白序列设计的盐芥 TsGPX 特异抗体（TsGPX-A）由
北京华大蛋白质研发中心制备。
1.2 方法
1.2.1 材料准备 室内培养盐芥实生苗，培养基质
为营养土∶蛭石 = 3∶1 的混合土，培养条件为光
周期 16 h/d，光照强度 93 μmol/（m2·s），相对湿度
60%/80%（ 昼 / 夜 ）， 温 度 为 23℃/18℃（ 昼 / 夜 ），
用 Hoagland 营养液浇灌。生长 8 周后，以 Hoagland
营养液配制 300 mmol/L NaCl 溶液，采用根灌法处
理盐芥幼苗 12 h 后取样，迅速冻于液氮中，保存
于 -80℃，用于总 RNA 的提取。
1.2.2 盐芥总 RNA 的提取与盐芥 TsGPX3 基因全长
的获得 采用 Trizol 法提取盐芥总 RNA。以盐芥总
RNA 为模板，用 M-MLV 反转录酶合成 cDNA，操作
步骤按说明书进行。
根据本实验室前期获得的 TsGPX3 基因序列设
计引物，引物序列为 F1 ：5-TGTCGATGCCTAAAT-
CAAGC-3/ R1 ：5-GAAAATGAGATTCACACTGGTA-
CTC-3。以反转录得到的 cDNA 为模板进行 PCR 扩
增，扩增条件为 ：95℃预变性 3 min ；95℃变性 30 s，
54℃退火 50 s，72℃延伸 50 s，共 30 个循环 ；72℃
延伸 7 min。PCR 扩增产物经 1% 琼脂糖凝胶电泳检
测后回收目的条带，回收产物与 pGEM-T 载体连接，
转化 E.coli DH5α 感受态细胞，并送至北京华大基因
公司进行测序。
1.2.3 盐芥 TsGPX3 系统进化分析 在 NCBI 搜索与
TsGPX3 同源性较高的 16 种植物 GPX3 序列，采用
MEGA 5.0 进行系统进化分析。
1.2.4 盐芥 TsGPX3 的亚细胞定位 对 TsGPX3 基
因 序 列 和 含 有 绿 色 荧 光 蛋 白（Green fluorescence
protein，GFP）的植物表达载体 pRTL2-GFP 进行酶
切图谱分析，设计含酶切位点的引物 F2 ：5-CCGCT
CGAGCGATGCCTAAATCAAGCACTTGG-3（ 下 划 线
部分为 Xho I 的酶切位点）/ R2 ：5-GCTCTAGATCA
AGCAGATGCCAATAGCTTC-3（ 下 划 线 部 分 为 Xba
I 的酶切位点）。利用限制性内切酶 Xho I 和 Xba I 将
TsGPX3 构建入 pRTL2 的 C 端 GFP 载体中，获得重
组质粒 pRTL2-TsGPX3-GFP，转化至 E.coli DH5α 中，
菌液 PCR 鉴定与测序验证。
制备拟南芥叶片细胞的原生质体，将鉴定正确
的重组质粒 pRTL2-TsGPX3-GFP 和空载体 pRTL-GFP
生物技术通报 Biotechnology Bulletin 2016,Vol.32,No.4112
分别以 PEG 介导转化拟南芥原生质体，用激光共聚
焦显微镜观察 GFP 标签的表达。
1.2.5 盐芥 TsGPX3 的原核表达 设计含有酶切位
点 的 引 物 F3 ：5-GGGAATTCCATATGCGATGCCTA-
AATCAAGCACTTGG-3（下划线部分为 Nde I 酶切位
点）/ R3 ：5-ACGCGTCGACTCAAGCAGATGCCAAT-
AGCTTC-3（下划线部分为 Sal I 的酶切位点）。利
用 限 制 性 内 切 酶 Nde I 和 Sal I 将 TsGPX3 构 建 入
pET28a 载体中，获得重组质粒 pET-TsGPX3。将重
组质粒 pET-TsGPX3 和 pET28a 空载体分别转化至
E.coli BL21（DE3）中，筛选阳性克隆进行酶切与测
序验证。
分 别 将 含 有 重 组 质 粒 pET-TsGPX3 和 空 载 体
pET28a 的 E.coli BL21（DE3） 接 种 于 含 氨 苄 青 霉
素（Ampicillin，Amp）的 10 mL LB 液体培养基，于
37℃条件下振荡培养。在菌液到达对数期（OD600 为
0.8 左右）时加入终浓度为 1 mmol/L 异丙基硫代半
乳糖苷（IPTG）进行诱导。分别取 1 mL 菌液，在
37℃下分别培养 1、2、3、4 和 5 h，以确定最佳表
达时间。分别取 1 mL 菌液，在 16℃、28℃和 37℃
分别培养 5 h 时，以确定最佳表达温度。分别收集
上述条件下所得菌体。每个样品取 5 μL 进行 SDS-
PAGE 电泳，考马斯亮蓝 R-250 染色，检测融合蛋
白的表达情况。
1.2.6 诱 导 表 达 融 合 蛋 白 的 Western blotting 检
测 SDS-PAGE 电泳后，将未进行染色的凝胶转硝
酸 纤 维 素 膜（ 转 膜 15 V，30 min）， 加 入 5% 脱 脂
奶封闭液，于 100 r/min 的摇床上室温封闭 30 min。
加入一抗（TsGPX-A 抗体），于 100 r/min 的摇床上
37℃孵育 1 h，用 TBST 洗 3 遍，5 min/ 次。加入二
抗（HRP 标记的山羊抗小鼠 IgG），于 100 r/min 的
摇床上 37℃孵育 1 h，用 TBST 洗 3 遍，5 min/ 次。
用 ECL 试剂盒进行显色，将试剂盒 A、B 液 1∶1 混
合配成 2 mL 溶液，室温孵育 PVDF 膜 1 min，用凝
胶成像系统观察。
2 结果
2.1 盐芥TsGPX3基因的扩增与系统进化分析
以引物序列 F1/R1 扩增 TsGPX3 的全长 cDNA
序列，大小为 776 bp，其中 6-596 bp 为开放阅读框
（ORF），编码 196 个氨基酸（图 1）。TsGPX3 蛋白
的理论相对分子量为 23.258 kD，理论等电点为 7.33。
TsGPX3 具有植物 GPX 蛋白活性中心的 3 个保守 Cys
（C）残基以及 3 个保守特征结构域（催化结构域
NVASKCG、 标 志 性 基 序 ILAFPCNQF 和 PHGPX 的
特征基序 KWNFAKFL），且 3 个保守结构域中各含
有 1 个催化氨基酸残基，即 C、Q 和 W（图 2）。
500
800
bp ⴞⲴสഐM 11200
M ：DNA marker ；1 ：PCR 扩增产物
图 1 盐芥 TsGPX3 基因全长 cDNA 的 PCR 扩增产物7*7&*$7*&&7$$$7&$$*&$&77***7&7&7$7777&77&77*&&7&7$*&&77&*7&703.667:96,))/3/$)97&7$&&7&7$&$**7$&&&77$77&7&&$*&&$7&*7**$$&$77&$7&&$*&7&&$7&7)</<5<3<63$,9(+6666,$&*$&$7&7&&*77$$**$&$7&*$$***$$7*$7*7*$*777*$*&&$*77&$&&**$$<,69.,(*196/64)7*$$*7*&77&77$77*7*$$7*7**&&7&7$$*7*7**7&7$$&$&$7**$$$&7$&$$$*.9//,919$6.&*/7+*1<.$*77*$$&$7777*7$7*&&$$*7$&$$$*&7$$****777*$*$7&77$*&*777&&&7(/1,/<$.<.$.*)(,/$)3*&$$&&$$777**&$*7&$$*$$&&7**7$*&$$&*$**$*$77$$*$$$$&7*777*&$&14)*64(3*61((,..79&&$$7*77&$$$*&&*$$77&&&&*7&777*$&$$*$77*$$*7*$$7****$*$$7*&7*70).$()39).,(91*(1$&7&&&&777$&$$*77&77$$$$*$$&$$$$$**&**$77$777****$77&7$7&$$*7$3/<.)/.(4.**/)*6,.**$$7777*&$$$*777&7**7$*$&$$$&$$**$$$7*77*7**$7&*$7$7*&7&&$$:1)$.)/9.4*1995<$3&$$&$7&$&&7&77*$$$7$*$*$$$*$&$7$*$*$$*&7$77**&$7&7*&77*$$&$77763/(,(.,(.//$6$ $$$$777*$$**$&$**$*$*&$*$$*&$7&*$$&$7*7&&*$*$77*$*$$7*$*7*&&$&7777777$&&7*7*7*777$7&7$$$&&&$7&$77&$7*&*7**$$$$*$$$$$$$*&77*7&7*$$77&7*7*$$7*7*$7777$77$*$*7$&&$*7*7*$$7&7&$7777&
方框为 TsGPX3 的 3 个保守结构域，其中带下划线的氨基酸代表保守结构域
中构成催化三联体的 3 个氨基酸残基，黑色三角形标注的为 3 个保守的 Cys
残基，加粗表示起始密码子（ATG）和终止密码子（TGA），波浪线的序列
表示扩增全长引物所在位置
图 2 TsGPX3 的核苷酸及推测的氨基酸序列
2016,32(4) 113王宁等：盐芥 TsGPX3基因的克隆、亚细胞定位与原核表达
为了研究 TsGPX3 的进化关系，采用 MEGA 5.0
对 TsGPX3 及 与 TsGPX3 同 源 性 较 高 的 16 种 植 物
GPX3 序列进行系统进化树分析，结果（图 3）显示，
盐芥 TsGPX3 与同属于十字花科的萝卜（Raphanus
sativus）RsGPX3、 油 菜（Brassica napus）BnGPX3、
花椰菜（Brassica oleracea）BoGPX3、拟南芥（Arab-
idopsis lyrata）AlyGPX3 和 拟 南 芥（A. thaliana）At-
GPX3 同源性较高，聚为一类。与非十字花科的高粱
（Sorghum bicolor）SbGPX3、玉米（Zea mays）ZmG-
PX3、水稻（Oryza sativa）OsGPX3、大麦（Hordeum
vulgare）HvGPX3、蓝桉树（Eucalyptus globulus）Eg-
lGPX3、巨桉（Eucalyptus grandis）EgrGPX3 以及小
麦（Triticum aestivum）TaGPX3-1A、TaGPX3-1B、Ta-
GPX3-1D 的同源性较低。另外，研究发现，上述物
种 与 莱 茵 衣 藻（Chlamydomonas reinhardtii）CreGP-
X3 和小立碗藓（Physcomitrella patens）PpaGPX3 的
同源关系均较远。
2.2 TsGPX3基因的亚细胞定位
将 pRTL2 空载体和经过鉴定的 pRTL2-TsGPX3-
GFP 载体以 PEG 介导分别转化拟南芥原生质体，
结 果 见 图 4。pRTL2 空 载 体 亚 细 胞 定 位 结 果（ 图
4-A） 显 示，GFP 荧 光 蛋 白 在 细 胞 的 各 个 部 位 都
有表达，显示清晰的 GFP 绿色荧光信号。pRTL2-
TsGPX3-GFP 载体亚细胞定位结果（图 4-B）显示，
TsGPX3∷GFP 融合蛋白仅在细胞膜位置产生荧光，
由此推测 TsGPX3 基因所编码的蛋白主要定位在细
胞膜上，与生物信息学预测结果基本一致。
2.3 盐芥TsGPX3蛋白的诱导表达
以未被 IPTG 诱导的 pET28a 空载体为对照，将
经过鉴定的含有重组质粒 pET-TsGPX3 的 E.coli BL21
（DE3） 在 IPTG 诱 导 下 表 达 1、2、3、4 和 5 h 后
进行 SDS-PAGE 电泳，结果（图 5-A）显示，含有
pET-TsGPX3 表达载体的 E.coli BL21（DE3）在不同
诱导条件下、在 27 kD 附近都出现 1 条新的特异条带，
与 TsGPX3 预测大小基本一致，pET28a 空载体没有
特异蛋白表达。在 5 个诱导时间（1、2、3、4 和 5 h）
处理中，TsGPX3 融合蛋白的表达呈逐渐上升趋势，
在 5 h 达到最高 ；在 3 个处理温度（16℃、28℃和
37℃）下表达 5 h，TsGPX3 融合蛋白的表达量逐渐
增加，在 37℃时达到最高。采用 Western blotting 对
诱导表达的融合蛋白进行验证，诱导表达的融合蛋
白能够与抗体发生特异反应，证明表达产物为目的
蛋白（图 5-B）。
3 讨论
作为生物体抗氧化酶防御体系的关键酶之一，
谷胱甘肽过氧化物酶（GPXs）通过多种信号途径在
植物响应逆境中发挥重要作用［15］。本研究获得的盐
芥 TsGPX3 基因所编码的蛋白含有植物 GPXs 蛋白
活性中心的 3 个保守 Cys（C）残基以及植物 GPXs
的 3 个保守特征结构域，且在 3 个保守结构域中均
具有 3 个 GPXs 催化残基 Cys70（C）、Gln101（Q）和
Trp159（W），说明本研究获得的 TsGPX3 属于植物
GPXs 家族。与其他植物 GPX3 进行系统进化分析结
果显示，TsGPX3 与同属于十字花科物种的 GPX3 亲
缘关系最近，而与非十字花科物种的 GPX3 亲缘关
系较远，说明在进化过程中，不同科属植物物种的
SbGPX3
ZmGPX3
OsGPX3
HvGPX3
TaGPX3-1A
TaGPX3-1B
TaGPX3-1D
EglGPX3
EgrGPX3
AlyGPX3
AtGPX3
TsGPX3
RsGPX3
BnGPX3
BoGPX3
CreGPX3
PpaGPX3
100
100
95
98
73
100
98
69
99
100 94
85
57
65
0.05
SbGPX3 ：高粱 ；ZmGPX3 ：玉米 ；OsGPX3 ：水稻 ；HvGPX3 ：大麦 ；TaGP-
X3-1A，TaGPX3-1B，TaGPX3-1D：小麦；EglGPX3：蓝桉树；EgrGPX3：巨桉；
AlyGPX3，AtGPX3 ：拟南芥 ；RsGPX3 ：萝卜 ；BnGPX3 ：油菜 ；BoGPX3 ：
花椰菜 ；CreGPX3 ：莱茵衣藻 ；PpaGPX3 ：小立碗藓 ；方框内表示本研究的
TsGPX3
图 3 盐芥 TsGPX3 及其他植物 GPX3 序列的系统进化
分析
生物技术通报 Biotechnology Bulletin 2016,Vol.32,No.4114
GPX3 序列发生了一定的变化。
植物 GPXs 家族有多个成员，不同成员的亚细
胞定位与其行使的生物学功能相关。采用 PSORT 在
线分析软件进行盐芥 TsGPXs 8 个成员的亚细胞定位
分析结果显示，TsGPX1 和 TsGPX7 定位在叶绿体中，
TsGPX2、TsGPX4、TsGPX5 和 TsGPX8 定位在细胞
质溶质中，TsGPX6 定位在线粒体中，而 TsGPX3 定
位在细胞膜和内质网膜上，且具有信号肽［7］。构
建亚细胞定位载体进行亚细胞定位研究表明，盐芥
TsGPX6 主要定位在线粒体和内体中［16］。本研究通
过亚细胞定位研究显示 TsGPX3 定位于细胞膜上，
与预测基本相符。由于膜上分布众多的载体蛋白、
与细胞活动相关的离子泵、通道蛋白和蛋白受体等，
因此推测 TsGPX3 对细胞质膜的稳定或控制蛋白转
运具有一定的作用［17］。已有研究显示拟南芥［14］、
杨树［5］和百脉根［6］GPX3 定位在细胞质中，而盐芥
TsGPX3 与其不同，主要定位在细胞膜上，其不同
物种的 GPX3 亚细胞定位差异可能与抗逆功能有关，
有待进一步探究。
大肠杆菌表达系统是目前应用最为广泛的原核
表达系统［18］，但融合蛋白在该系统中的表达结果
可受多种因素影响，如诱导温度、诱导剂的浓度、
诱导时间等。已有研究显示 TsGPX8 的原核表达融
合蛋白大小约为 23 kD，最佳表达条件为 37℃，诱
导培养 5 h［19］。本研究构建了 TsGPX3 的原核表达
载体并进行了原核表达蛋白的分析。前期预测的
TsGPX3 的分子量约为 23 kD，将 TsGPX8 与 His-tag
融合后分子量大约为 27 kD，与原核表达电泳图显
示的结果一致。采用 Western blotting 验证诱导表达
的融合蛋白，证明表达产物为目的蛋白。与 TsGPX8
原核表达体系的表达条件相似，从本研究实验结果
可知，TsGPX3 原核表达体系在 37℃，诱导培养 5 h
A B
a b
c d
a b
c d
a ：暗场视野 ；b ：明场视野 ；c ：暗场视野叶绿体自发荧光 ；d ：a、b、c 三种明场暗场叠加效果（目镜 10×，物镜 100×）
图 4 空载体（A）及盐芥 TsGPX3（B）亚细胞定位结果
M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 ⴞⲴ㳻ⲭ30kD
A
B 1 2 3 4 5 6 7 8 9 ⴞⲴ㳻ⲭ
M ：蛋白 Marker ；1-5 ：IPTG 诱导 pET-TsGPX3 表达 1、2、3、4 和 5 h ；6-8 ：
IPTG 在 16℃，28℃，37℃下诱导 pET-TsGPX3 表达 5 h ；9 ：pET28a 空载体
图 5 pET-TsGPX3 在 E.coli BL21（DE3）中表达的 SDS-
PAGE 检测（A）和 Western blotting 鉴定（B）
2016,32(4) 115王宁等：盐芥 TsGPX3基因的克隆、亚细胞定位与原核表达
具有较高的蛋白表达量。
4 结论
盐 芥 TsGPX3 基 因 的 全 长 cDNA 序 列 大 小 为
776 bp，编码一个包含 196 个氨基酸的蛋白，具有
植物 GPXs 的特征结构域。系统进化分析表明，盐
芥 TsGPX3 与同属于十字花科的萝卜 RsGPX3、油菜
BnGPX3 和花椰菜 BoGPX3 等同源性较高。亚细胞定
位研究显示 TsGPX3 主要定位于细胞膜上。TsGPX3
原核表达体系在 37℃，诱导培养 5 h 具有较高的蛋
白表达量。
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（责任编辑 马鑫）