免费文献传递   相关文献

黑樱桃番茄的离体培养及再生技术研究



全 文 :The Study on the Protection of the Old Landscape Trees
DU Bin
(Taiyuan University, Taiyuan 030012, China)
Abstract: The old landscape trees, which are very important to the city,the country and even human beings, is a
kind of non renewable resources. This paper analyzes the main reasons for old landscape trees to decay in the garden,
including genetic reason and the external environment of the plant growth, the human activities. Finally the essay puts
forward the scientific, effective, reasonable protection measures on the old garden trees.
Key Words: landscape plants; decaying trees; protection measures
总之, 园林古树的保护是一项系统的工程, 法
律、 意识、 方法、 技术、 措施等各个方面都必须长
期贯彻和实施, 园林古树才能得到充分的保护。
参考文献:
[1]太原市第十三届人民代表大会常务委员会.太原市古树名木保护
条例[S].
[2]陈有民.园林树木学[M]. 北京:中国林业出版社,1990.
[3]侯天侦,李保明,滕光辉,等.植物声频控制技术在设施蔬菜生产中
的应用[J].农业工程学报,2009,(2): 156-160.
[4]石红旗,谢兴刚,方建忠.太原城区古树名木现状分析与后续资源保
护研究[J].中国园林,2014,(3):111-114.
黑樱桃番茄的离体培养及再生技术研究
王培军
(太原学院, 山西 太原 030012)
摘 要:文章以黑樱桃番茄的子叶、 茎段、 下胚轴为外植体材料, 在MS中附加不同浓度激素
的培养基上进行离体培养, 对不定芽分化、 芽的增殖培养基及不定芽生根培养基进行研究, 结果表
明: 子叶、 茎段和下胚轴均可诱导形成不定芽, 但以子叶为培养材料效果最佳, 最适合芽分化的
培养基为MS+6-BA2.0mg/L+2, 4-D0.3mg/L; 芽的增殖培养基最优组合为MS+6-BA2.5mg/L+2, 4-
D0.2mg/L; 不定芽伸长后在 1/2MS 培养基上生根效果最好。
关键词:樱桃番茄; 离体培养; 植株再生
中图分类号:S662 文献标识码:A 文章编号:2096-191X(2016)04-0061-03
DOI:10.14152 / j.cnki.2096-191X.2016.04.019
樱桃番茄(Lycopersicon.Esculuntum var.Cerasiforme)原
产于以色列,我国主要经台湾引进,为茄科番茄属的
一种草本植物 ,从樱桃番茄野生种培育成栽培种。
黑樱桃番茄作为园林观赏植物, 它是具有极高观赏
价值的色泽奇异观果植物。 作为果菜类植物, 果实
口感适中, 含有比普通番茄高数倍的茄红素和维生
素, 番茄红素可抵御紫外线对人体伤害, 同时也可
降低尼古丁和机动车尾气对人体的侵害, 特别是其
中含有丰富的花青素, 对人体健康非常有益 [1]。 因
此, 被联合国粮农组织列为优先推广的 “四大水
收稿日期:2016 ̄10 ̄13
基金项目:山西省星火计划项目“黑色樱桃番茄工厂化育苗技术开发”
作者简介:王培军(1979-),男,山西盂县人,太原学院高级工程师,硕士,研究方向:植物组织培养及园林植物栽培研究。
第 34 卷 第 4 期
2016 年 12 月 太 原 学 院 学 报
Vol. 34 No. 4
Dec. 2016
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
61- -
2016 年 第 4 期
果” 之一, 是近年来发展较快的重要特种蔬菜之
一, 深受广大消费者和种植者的喜爱。
番茄是茄果类蔬菜中消费量大且具有重要营养
价值的作物,其离体培养和试管苗的研究已经取得
许多重要的研究成果 [2-3],但关于黑樱桃番茄离体培
养和植株再生体系建立的相关研究报道很少。 现在
所使用的黑樱桃番茄优良品种大多数是从国外进口
的杂种一代, 很大程度上增加了栽培的成本。 因
此, 我们需要对黑樱桃番茄的植株再生体系通过全
方位的研究,希望由离体繁殖方式获得脱毒培养瓶
苗、 保持杂种优势和工厂化高效育苗的目的。
1 材料和方法
1.1 试验材料
本试验选用樱桃番茄 “黑宝石” 为供试材料。
1.2 试验方法
1.2.1 培养供试的无菌苗
取健康无病菌和虫害的黑樱桃番茄种子, 先经
自来水冲洗 30min, 后浸泡 2~3h,75%酒精处理
1min, 10%的 NaClO 全面浸泡 30min, 用高压灭菌
锅处理后的蒸馏水冲洗 3~5 遍, 经过 0.05%HgCl2
灭菌 10min, 然后再用高温灭菌蒸馏水冲洗 5 遍后,
使用灭菌后的滤纸强力吸完水分后在 1/2MS (绵白
糖 35g/L、 卡拉胶 7g/L、 PH5.6) 固体培养基上接
种。 放置在温度 21~24℃, 光强 2800lx, 在光暗条
件为黑暗/光照(12h/12h)下进行健壮幼苗的培养。
1.2.2 诱导愈伤组织、 分化不定芽
在无菌条件下, 选取生长良好的无菌苗 ,切取
茎段、子叶(切成 0.5cm× 0.5cm的小块)、下胚轴(切成
0.5cm 长段)接种于 MS 添加不同激素配比的诱导培
养基上,每皿 3-5 个外植体,3 次重复,在三角瓶中
经过 30d的培养观察后,开始不定芽分化率的统计。
外植体分化率= (已分化外植体数/接种外植体
数) × 100
1.2.3 增殖不定芽培养
在所列培养基中 (表 3) 接入下胚轴产生的
芽、 子叶和茎段,三周后在不定芽的基部有新的丛
芽产生,观察和统计后发现培养基不同其不定芽增
殖状况也完全不相同。
1.2.4 试管苗的生根培养和移植
从瓶苗的基部用手术刀将不带有愈伤组织的不
定芽 (2.5㎝左右) 切后插入生根培养基 :1/2MS,观
察试管苗的生根情况。 二周后在试管苗长至 8~
10cm 时, 试管苗可以揭开瓶盖或牛皮纸炼苗, 两
天后栽植在配置的基质中。 在基质水分充足的情况
下 7~10d后移栽进入智能温室的栽培床或大田, 随
后的栽培管理方式同实生苗相同。
2 结果与分析
2.1 外植体类别对黑樱桃番茄不定芽分化率的影响
表 1结果显示, 尽管在多数培养基上茎段、 子
叶、 下胚轴均能分化,但在分化率上差异非常显著。
黑樱桃番茄由下胚轴分化的不定芽分化率最低, 仅
为 23.3%, 而黑樱桃番茄由子叶分化的不定芽分化
率最高,为 63.3%。
外植体类型 接种外植体数 分化外植体数 分化率 (%)
茎段 120 51 42.5
子叶 120 76 63.3
下胚轴 120 28 23.3
表 1 外植体类别对黑樱桃番茄不定芽分化率的影响
通过上表可以得出, 采用不同的黑樱桃番茄外
植体诱导分化生成不定芽,当培养材料为子叶时培
养效果最好。
2.2 植物生长调节剂组合对黑樱桃番茄不定芽分化
率的影响
由表 2 可知,植物生长调节剂配比不同培养基
上不定芽的诱导率有着显著的差异。 当培养基中
6-BA的浓度为 2~ 3mg/L 时, 对接种外植体不定芽
的形成非常有利。 培养基中 6-BA浓度是 2mg/L 时,
不定芽的诱导率此时最高为 100%。 培养基中 6-
BA 浓度是 1mg/L 时,在全部激素组合中仅有个别组
合存在少量已分化不定芽。 培养基中 6-BA 浓度最
高为 3mg/L时,不定芽诱导率会随着 6-BA浓度的升
高而有下降的趋势。 在对不定芽的诱导过程中, 植
物生长调节剂组合中的 2, 4-D 也存在一定的影响,
当 2, 4-D 的试验浓度为 0. 3~0.5mg/L 时, 不定芽
的诱导率会达到最高。 对于黑樱桃番茄离体培养来
说 ,诱导不定芽分化的理想配方是 6-BA 浓度为
2mg/L和2, 4-D浓度为 0.3mg/L。
调节因子 接种外植体数 外植体分化数 分化率 (%)
6-BA
(mg/l)
2,4-D
(mg/l) 茎段 子叶
下胚
轴 茎段 子叶
下胚
轴 茎段 子叶
下胚

1 0.1 20 20 20 0 2 0 0 10 0
2 0.1 20 20 20 0 5 0 0 25 0
3 0.1 20 20 20 12 15 4 60 75 20
表 2 调节因子对黑樱桃番茄不定芽分化率的影响
王培军: 黑樱桃番茄的离体培养及再生技术研究
62- -
第 34 卷 太原学院学报 总第 121 期
The Study of Vitro Culture and Regeneration System of Cherry Tomato
WANG Pei-jun
(Taiyuan University, Taiyuan 030012, China)
Abstract: Callus induction and plant regeneration of cherry tomato were studied in this paper. The cotyledon, stem
segments and hypocotyls of cherry tomato as the explants were cultured in tubes. The explants were cultured in MS media
composing of different concentration of different plant hormones to be induced optimum shoot, proliferation of shoots and
induced root. The results show that compared with stem segments and hypocotyls, cotyledon were much easier to induce
shoot. The most suitable culture medium for bud differentiation was MS + 6 -BA 2.0mg/L + 2,4 -D 0.3mg/L, the
proliferation medium for shoots was MS +6-BA2.5mg/L + 2,4-D 0.2mg/L ,and for shoot growth was 1/2MS .
Key Words: Cherry tomato; vitro culture; plant regeneration
1 0.3 20 20 20 7 7 0 35 35 0
2 0.3 20 20 20 16 20 7 80 100 35
3 0.3 20 20 20 18 16 11 90 80 55
1 0.5 20 20 20 0 2 0 0 10 0
2 0.5 20 20 20 16 20 5 80 100 25
3 0.5 20 20 20 15 7 3 75 35 15
2.3 不定芽的继代增殖
由表 3 可以看出当 6-BA 浓度为 2.5mg/L, 2,4-D
浓度为 0.2mg/L, 丛芽增殖率可以达到 4.5 倍; 随
着 6-BA 浓度不断降低到 1.0mg/L, 而 2,4-D 质量浓
度始终维持在 0.5mg/L时, 不定芽芽增值率最低为 1。
组合
激素配比 (mg/l) 新增值芽
平均数/个 生长状况6-BA 2, 4-D
1 3.0 0.4 2 较弱
2 2.5 0.2 4.5 壮
3 2 0.2 3.0 壮
4 1.5 0.2 2.0 较壮
5 1 0.5 1 较壮
表 3 调节因子对芽增殖的影响
2.4 不定芽的生根与再生苗的移栽
黑樱桃番茄的组培苗在常规培养基中能够较好
生根。 将增殖培养基上诱导出的丛芽转入生根培养
基中, 其中在 1/2MS固体培养基 (无任何植物生长
调节剂) 上能够正常诱导生根, 根系生长健康, 不
定根的诱导率为 100%, 待根长至 2cm左右,植株长
至 8~10cm 左右时, 即可移栽至基质, 覆塑料薄膜
或滴管保湿, 常规管理, 长势良好。
3 讨论
采用黑樱桃番茄的子叶作为外植体, 诱导形成
愈伤组织的几率最高。 采用茎段和下胚轴作为外植
体, 只有在适当的植物生长调节剂配比下才能形成
少量的愈伤组织。 张春芬等[4]曾研究了以辣椒真叶、
子叶、 下胚轴为外植体类型对影响辣椒再生的多个
因素进行探讨,结果发现培养材料为子叶时诱导效
果最理想。 本试验通过对黑樱桃番茄茎段、 子叶和
下胚轴愈伤组织和不定芽诱导再生能力的比较 ,取
得了和上述辣椒培养同样的效果, 即证明了黑樱桃
番茄子叶作为外植体的诱导效率最高, 这可能与外
植体自身内源激素的含量有关。 本研究旨在创建黑
樱桃番茄的最佳离体培养体系,重点分析了不同质
量浓度配比的 6-BA 和 2, 4-D 诱导不同类别外植
体, 产生不定芽及不定芽增殖的效果。
本研究全方位对黑樱桃番茄开展了最佳外植体
选择、 不定芽的分化及增殖、 根系诱导培养以及炼
苗移栽。 研究表明, 外植体采用子叶时对黑樱桃番
茄的离体培养最适宜;在愈伤组织诱导和产生不定
芽过程中, 采用植物生长调节剂配方 6-BA 2mg/L+
2, 4-D0.3mg/L为最适培养基,不定芽诱导率可以达
到 100% ;芽的增殖培养基最优组合为 MS +6 -
BA2.5mg/L+2, 4-D0.2mg/L;不定芽伸长后在 1/2MS
培养基上生根效果最好,移栽至营养土中采用避光
措施两周后移入大田或温室,再生苗移栽成活率达
100%。 在研究中还发现黑樱桃番茄离体培养中不
定芽分化进程 2, 4-D 与 6-BA 有相互促进诱导的
效应,但在接下来的研究工作中对黑樱桃番茄愈伤
组织与不定芽诱导及增殖过程中 2, 4-D 与 6-BA
的精准浓度及二者的最适配比还需深入研究。
参考文献:
[1]肖日新.辣椒、茄子和番茄栽培技术[M].海口:海南出版社,1998.
[2]佟新苹.番茄幼叶愈伤组织诱导与植株再生[J].植物生理学通讯,1993,
29(3):190-192.
[3]陈火英,张建华,庄天明.番茄下胚轴离体诱导成株的激素调控[J].上海
农业学报,1999,15(2):26-29.
[4]张春芬,孟玉平,等.辣椒的离体培养及再生体系研究[J].山西农业科学,
2008,36(11):34-37.
63- -